牛肉因含有丰富的肌氨酸、维生素B6、钾、铁等营养物质而受到消费者的青睐[1-2]。但自2020年起，育肥牛出栏时销售价格与补栏时架子牛价格之间倒挂价差大幅下降[3]。在河北省，大部分中、小型肉牛场由于肉牛多以粗放式养殖模式为主，导致肉牛育肥阶段生长速度缓慢，出栏周期延长，影响牧场收益。在肉牛日粮中添加酵母培养物、枯草芽孢杆菌等微生态制剂，利于瘤胃内乳酸利用菌的繁殖和生长，能够改善肉牛胃肠道内的菌群平衡，提高机体对饲料的转化效率，增加肉牛的平均日增重，改善肉品质，从而提高肉牛的生产性能[4-5]。本试验在肉牛育肥阶段添加酵母培养物和枯草芽孢杆菌按（1∶1），旨在分析复配后的不同添加量微生态制剂对肉牛生产性能的影响，以期为评价酵母培养物、枯草芽孢杆菌在肉牛养过程中应用与推广提供参考。1材料与方法1.1试验地点和时间本试验于承德市某肉牛养殖场进行，预试期5 d，正式试验期60 d。1.2试验材料本试验所用的酵母培养物（YC）由江苏奕农生物股份有限公司提供，枯草芽孢杆菌由秦皇岛拓邦生物科技有限公司提供。酵母菌含量≥1×107 CFU/g，枯草芽孢杆菌含量≥5×107 CFU/g，按1∶1比例混合。1.3试验设计试验选取40头健康状况良好，月龄接近、体重为（390.0±16.2）kg的育肥期西门塔尔杂交肉牛，随机分为4组，每组10个重复，每个重复1头牛。对照组牛饲喂基础日粮，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组牛饲喂分别添加0.1%、0.2%、0.3%的酵母培养物+枯草芽孢杆菌的基础日粮。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.003.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米面36.0消化能/(MJ/kg)16.64豆粕11.0粗蛋白质/%12.98麸皮6.0粗灰分/%4.05棉粕4.0粗纤维/%10.66磷酸氢钙0.5钙/%0.91小苏打1.0磷/%0.59食盐0.5预混料4.0玉米青贮28.0玉米秸秆9.0注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 25 000 IU、VD3 2 000 IU、VE 100 IU、Cu 9 mg、Fe 100 mg、Mn 54 mg、Se 0.2 mg、I 0.33 mg、Se 0.11 mg、Co 0.28 mg、Zn 40 mg、Mg 25 mg。2.营养水平均为实测值。1.4饲养管理试验组和对照组所有牛均按肉牛饲养场管理制度进行饲养，饲喂方式相同。将全天日粮给料量平均分成两份，在5：00~6：00、16：00~17：00投料饲料，干稻秸自由采食，全期为肉牛提供清洁干净的饮水。试验期间试验牛不使用任何抗菌药物和中草药制剂（治疗用药除外）。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能试验开始与结束当日清晨，试验牛空腹称重，统计试验期间耗料量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=全期耗料量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2血清生化指标试验结束前1 d清晨，试验牛空腹采血，3 000 r/min离心10 min，血清-20 ℃保存。血清生化指标包括：总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.5.3肠道菌群参考文献[6]方法，各试验组分别在试验结束前5 d采集直肠内新鲜粪样品200 g，标号分装，-80 ℃保存，使用液氮保存送生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序，并鉴定每个试验组粪便中的乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌的含量。1.5.4经济效益根据育肥牛市场销售价格计算其效益。经济效益中饲料价格、肉牛出栏价格按照试验时该地区市场价格计算。经济效益=育肥牛销售价格-(饲料价格+添加剂价格)(4)1.6数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行统计并计算结果，SPSS 19.0分析软件进行差异显著性分析，LSD法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1酵母培养物与枯草芽孢杆菌对育肥牛生产性能的影响（见表2）由表2可知，各组肉牛初重、末重、平均日采食量、料重比差异均不显著（P0.05）。与对照组相比，试验Ⅱ组、试验Ⅲ组肉牛的全期增重、平均日增重均显著升高（P0.05)）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.003.T002表2酵母培养物与枯草芽孢杆菌对育肥牛生产性能的影响组别初重/kg末重/kg全期增重/(kg/头)平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比对照组393.70±15.76451.05±16.1757.35±8.19b0.96±0.14b8.30±0.348.63±0.34试验Ⅰ组390.75±15.04453.70±15.1762.95±8.12ab1.05±0.14ab8.40±0.127.98±0.54试验Ⅱ组387.15±17.21458.65±19.2471.50±9.14a1.19±0.15a9.30±0.357.81±0.15试验Ⅲ组389.10±16.93455.55±14.9066.45±6.97a1.11±0.12a8.90±0.357.95±0.54注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，各试验组肉牛血清中血清BUN含量和ALT活性均有所降低，ALB、TG含量均有所提高，但差异不显著（P0.05）。与对照组相比，试验Ⅱ组、试验Ⅲ组的肉牛血清AST活性和TC含量显著降低（P0.05），血清TP含量显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.003.T003表3酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)ALT/(U/L)AST/(U/L)BUN/(mmol/L)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)对照组41.25±2.53b17.33±2.129.57±1.24143.25±6.26a0.85±0.355.46±0.21a2.08±0.35试验Ⅰ组45.23±2.35ab18.13±2.129.41±1.74126.45±5.57ab0.84±0.265.17±0.33ab2.03±0.30试验Ⅱ组51.32±2.25a19.31±4.358.98±1.32112.83±5.64b0.73±0.434.79±0.32b2.21±0.49试验Ⅲ组50.41±2.83a20.34±3.338.74±1.54114.42±5.33b0.76±0.544.84±0.26b2.13±0.442.3酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛肠道菌群的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验Ⅱ组、试验Ⅲ组肉牛粪便的乳酸菌、双歧杆菌的含量显著升高（P0.05），大肠杆菌含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.003.T004表4酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛肠道菌群的影响组别乳酸菌/(×108 CFU/g)双歧杆菌/(×108 CFU/g)大肠杆菌/(×106 CFU/g)对照组1.23±0.43b2.43±0.32b3.77±0.34a试验Ⅰ组1.72±0.25ab2.93±0.17ab3.01±0.74ab试验Ⅱ组2.12±0.25a3.28±0.25a2.28±0.31b试验Ⅲ组2.26±0.63a3.32±0.63a2.24±0.34b2.4酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛养殖经济效益的影响（见表5）本试验饲料原料按照牛场采购价格计算，精料成本为3.2元/kg，粗饲料成本为0.58元/kg，添加剂价格为43元/kg；肉牛行情，按照活牛市场价格32.8 元/kg计算。由表5可知，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组肉牛每天、每头饲料添加剂成本较对照组分别增加了0.2、0.5、0.7元；试验Ⅰ组肉牛、对照组肉牛饲料成本均为18.5元/(头·d)，因试验Ⅱ组、试验Ⅲ组牛采食量增多，每天、每头肉牛的饲料成本比对照组分别增加2.7、1.8元。在不考虑自由采食的干稻秸、人工、水电等成本的基础上，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组肉牛试验期净利润分别比对照组提高了2.7、4.4、2.4元/(头·d)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.003.T005表5酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛养殖经济效益的影响组别添加剂价格/[元/(头·d)]饲料成本/[元/(头·d)]日增重收益/元利润/[元/(头·d)]对照组018.531.50试验Ⅰ组0.218.534.42.7试验Ⅱ组0.521.239.14.4试验Ⅲ组0.720.336.42.43讨论3.1酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛生产性能的影响酵母培养物、枯草芽孢杆菌等微生态制剂作为可提高肉牛日粮中蛋白质、粗纤维和有机物质的吸收和消化率的功能性产品，含有多种酶类、小分子肽、氨基酸等营养成分和生物活性物质[7-8]，可通过改善瘤胃内环境活化瘤胃微生物，提高饲料转化效率，实现多采食、多增重以及安全、绿色、低投入高产出的目的[9]。本试验表明，以0.2％水平添加酵母培养物、枯草芽孢杆菌复配的微生态制剂可有效提高肉牛的平均日增重，降低料重比，提高肉牛的生产性能。可能由于酵母培养物、枯草芽孢杆菌所含的活性物质可通过多种途径调节体内营养物质的代谢，改善肠道健康，提高其饲料中营养物质的利用率。酵母培养物、枯草芽孢杆菌微生态制剂中含有多种促生长因子，可有效抑制肠道有害菌群生长，促进肠道中有益菌和有害菌的平衡，改善机体肠道健康，促进营养物质在体内的利用率，进而提高动物的生产性能。3.2酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛血清生化指标的影响动物血清生化指标的变化与机体健康状态密切相关。血清中TP是机体蛋白质的主要来源，TP含量能够反映机体对蛋白质代谢的强弱。血清BUN含量与机体利用含氮物质能力有关。ALT和AST主要参与肝脏的物质代谢，与肝脏的损伤有关。TC、TG是评价体内脂类营养物质代谢的重要指标，具有参与多种激素的合成及代谢作用。BUN是反映机体内氮代谢的重要指标[10-13]。章亭洲等[11]研究表明，在肉牛日粮中添加不同酵母培养物利于改善肉牛血液生化指标，提高机体免疫和抵抗能力。高艳霞等[14]报道，在奶牛日粮中添加含有酵母培养物和枯草芽孢杆菌的益生菌可改善血清生化指标。本试验结果表明，0.2%水平添加含有酵母培养物和枯草芽孢杆菌的微生态制剂可有效改善牛的血清生化指标，与上述结论基本一致。原因可能是酵母培养物、枯草芽孢杆菌所含的活性物质可调节体内肝肾等器官代谢，减少肝肾损伤，减少肉牛的体内氨基酸异生成糖，改善蛋白质及其他营养物质的代谢，促进了蛋白质沉积，提高了肉牛对日粮中蛋白质的合成、吸收的作用，同时改善机体代谢水平，进而改善肉牛的血清生化指标。3.3酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛肠道菌群的影响动物胃肠道的菌群结构中有益菌和致病菌群处于动态平衡，胃肠菌群失调严重影响动物健康，降低动物生长性能[15-16]。在养殖过程中，反刍动物的饲养管理、环境、气候等多种因素均能够影响动物胃肠内菌群结构平衡[6]。反刍动物瘤胃中微生物主要对粗纤维分解与利用，故益生菌在反刍动物消化粗饲料中起重要作用。本试验结果表明，0.2％水平添加酵母培养物、枯草芽孢杆菌复配的微生态制剂可有效提高肉牛肠道内乳酸菌、双歧杆菌等有益菌含量，显著降低大肠杆菌含量。隋明等[6]报道，在奶牛日粮中酵母菌等益生菌可以提高奶牛肠道内乳酸菌的含量，降低大肠杆菌含量。亓秀晔等[17]研究表明，在哺乳仔猪教槽料中添加复合益生菌制剂可有效降低大肠杆菌含量，提高乳酸菌含量。本研究结果与上述报道一致，表明酵母培养物、枯草芽孢杆菌复配的微生态制剂可有效增加肉牛肠道有益菌数量，降低大肠杆菌等有害菌数量，改善肉牛的肠道健康。原因可能是添加酵母培养物、枯草芽孢杆菌等益生菌可有效抑制肠道有害菌生长，改善肉牛的肠道菌群结构，维持肠道健康，但酵母培养物、枯草芽孢杆菌改善肠道结构的作用机理有待进一步研究。3.4酵母培养物、枯草芽孢杆菌对育肥牛养殖经济效益的影响本试验中，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组肉牛育肥期平均日增重提升0.09、0.23、0.15 kg，全期增重提升了5.60、14.15、9.10 kg，同时降低了料重比，净利润提高了2.7、4.4、2.4元。结果表明，在肉牛日粮中按0.2%水平添加含有酵母培养物、枯草芽孢杆菌的微生态制剂，应用效果优于0.1%、0.3%水平，更利于提高肉牛饲料转化效率，提高养殖场经济效益。高堂亮等[4]、高慧兰等[10]报道，在肉牛日粮中添加枯草芽孢杆菌、酵母培养物等功能性微生态制剂后，育肥牛平均日增重、营养物质表观消化率等均得到不同程度的改善，牧场经济效益得到显著提高。上述结果与本研究结论一致，表明日粮中以0.2％水平添加酵母培养物、枯草芽孢杆菌复配的微生态制剂可提高育肥牛养殖的经济效益，在临床中具有一定的推广前景。4结论本试验条件下，在育肥期肉牛日粮中添加0.2％的酵母培养物、枯草芽孢杆菌复配的微生态制剂，可以提高肉牛的生产性能，改善血清生化指标和肠道菌群结构，提高经济效益，在临床中具有一定的推广与应用价值。