2020年我国提出饲料端全面禁抗策略[1]，寻找绿色、高效的替抗产品成为目前研究的热点。单宁广泛存在于油菜、高粱和豆科植物中[2]，根据化学结构可分为缩合单宁和水解单宁[3]。缩合单宁可使单胃动物的消化率和生长性能下降，而水解单宁是一种天然多酚的异构体。单宁酸是水解单宁中典型的代表物质[3]，具有抗菌、抗病毒、抗氧化和提高生产性能的作用[4]。肉仔鸡日粮中添加单宁酸能够改善肉鸡的平均日增重和采食量，降低料重比，提高肉鸡的生长性能[5]；改善十二指肠和空肠的形态，对有害菌增殖具有抑制作用，可以增加盲肠乳酸杆菌数量，对肠道酶活力具有一定的促进作用[6]。牛至油提取自天然植物牛至的挥发性油类，主要活性成分为香芹酚和百里香酚[7]。饲料中添加牛至油可提高家禽的生产性能、免疫功能，预防疾病[8]；提高绒山羊平均日增重，增加胴体质量，改善肉品质[9]。目前关于单宁酸和牛至油组合在肉仔鸡生产的研究较少。本试验以肉仔鸡为研究对象，探讨在肉仔鸡日粮中添加单宁酸和牛至油组合对其生长性能、屠宰性能、肉品质和抗氧化指标的影响，为单宁酸和牛至油在肉仔鸡中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料单宁酸是从五倍子中提取的红褐色粉状物质，含50%水解单宁酸，购自江苏无锡英特尔生物科技有限公司。牛至油购自潍坊中天饲料科技有限公司，主要组成为香芹酚、百里香酚、二氧化硅，其中百里香酚+香芹酚含量≥10%。1.2试验设计选用健康、体重相近的1日龄青脚麻鸡240只，随机分为4组，每组4个重复，每个重复各15只鸡。预试期7 d，正式试验期21 d。预试期各组肉仔鸡均饲喂基础日粮，正式试验期对照组肉仔鸡饲喂基础日粮，试验Ⅰ组肉仔鸡饲喂基础日粮+1 500 mg/kg的单宁酸，试验Ⅱ组肉仔鸡饲喂基础日粮＋1 500 mg/kg的单宁酸＋300 mg/kg牛至油，试验Ⅲ组肉仔鸡饲喂基础日粮＋1 500 mg/kg单宁酸＋500 mg/kg牛至油。参照NRC（2012）饲养标准配制玉米-豆粕型日粮，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.011.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米60.0代谢能/(MJ/kg)12.32豆粕24.0粗蛋白/%20.50棉粕2.0粗脂肪/%3.20芝麻粕6.0钙/%0.95玉米蛋白粉2.0有效磷/%0.29猪油1.0蛋氨酸/%0.42磷酸氢钙1.5赖氨酸/%1.20钙粉2.0蛋氨酸＋胱氨酸/%0.80预混料1.5色氨酸/%0.25注：1.预混料购自河南安能生物科技有限公司。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验于信阳农林学院动物房试验基地进行，采用笼养，参照肉仔鸡常规饲养管理技术规范进行饲养。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能正式试验期开始和结束前1 d 18：00肉鸡停止饲喂日粮并限制饮水，次日8：00称重，记录试验肉鸡初重和末重，统计试验期间肉鸡总采食量，计算平均日增重和料重比。平均日采食量=总采食量/试验天数(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)料重比=消耗饲料总量/增重总量(3)1.4.2屠宰性能从每个重复随机抽选体重、相近的肉仔鸡10只，在肉仔鸡28日龄进行屠宰称重，计算肉仔鸡全净膛率、半净膛率、屠宰率、胸肌率和腿肌率。全净膛率=全净膛重/宰前活重×100%(4)半净膛率=半净膛重/宰前活重×100%(5)屠宰率＝屠体重/宰前活重×100%(6)腿肌率=腿肌重/全净膛重×100%(7)胸肌率=胸肌重/全净膛重×100%(8)1.4.3肉品质取屠宰肉仔鸡左侧胸肌和腿肌部分肉样，采用便携式pH计测定pH45 min值、pH24 h值，于24 h后测定滴水损失和蒸煮损失。取右侧胸肌用于测定肌肉剪切力和肌肉色泽。剪切力由MAQC-12肉品剪切力测定仪（南京铭奥仪器设备有限公司）测定，肌肉色泽采用Ci6X分光光度仪（X-Rite公司）测定。1.4.4血清抗氧化指标于试验第28 d时采集血液，4 000 r/min离心10 min，上清置于消毒的离心管中，-20 ℃保存，用于测定肉仔鸡血清丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性，所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。其中GSH-Px使用酶标仪进行测定，T-AOC、T-SOD及MDA均使用分光光度计进行测定。1.5数据统计与分析采用Excel 2019软件进行记录并整理数据，采用SPSS 24.0软件进行单因素方差分析，LSD法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组肉仔鸡的末重、平均日增重显著提高（P0.05），各试验组肉仔鸡的料重比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.011.T002表2牛至油和单宁酸组合对肉仔鸡生长性能的影响组别初重/g末重/g平均日采食量/[g/(只·d)]平均日增重/[g/(只·d)]料重比对照组93.67±6.31461.58±50.10b47.93±15.8517.52±2.30b2.74±0.30a试验Ⅰ组89.79±5.12502.06±58.56b42.29±17.5719.63±2.81b2.15±0.32b试验Ⅱ组89.53±5.90554.25±77.74a43.68±15.1722.13±3.66a1.97±0.35b试验Ⅲ组89.99±8.33586.21±76.04a43.38±16.4423.63±3.66a1.84±0.32c注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3、表5与此同。2.2单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，各试验组肉仔鸡的全净膛率均显著升高（P0.05），试验Ⅲ组肉仔鸡的半净膛率显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.011.T003表3牛至油和单宁酸组合对肉仔鸡屠宰性能的影响组别全净膛率半净膛率屠宰率腿肌率胸肌率对照组68.21±0.63b81.61±1.05b90.80±0.0818.30±0.6715.01±0.42试验Ⅰ组69.92±1.15a82.66±0.75ab89.87±0.0917.82±0.7915.63±1.11试验Ⅱ组70.04±1.62a81.92±0.72ab90.52±0.1017.52±0.9814.97±1.33试验Ⅲ组70.63±4.52a82.84±1.88a90.36±0.0217.94±1.5815.26±1.14%2.3单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡腿肌和胸肌肉品质的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各试验组肉仔鸡腿肌和胸肌的pH45 min值均显著提高（P0.05），试验Ⅱ组和试验Ⅲ组肉仔鸡胸肌pH24 h值显著升高（P0.05）；试验Ⅱ组和试验Ⅲ组肉仔鸡胸肌剪切力显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.011.T004表4牛至油和单宁酸组合对肉仔鸡腿肌和胸肌肉品质的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组腿肌pH45 min值6.02±0.19b6.16±0.08a6.17±0.05a6.25±0.04apH24 h值5.14±0.11b5.26±0.05a5.24±0.03a5.23±0.03a滴水损失/%3.21±0.033.20±0.033.22±0.023.21±0.03蒸煮损失/%26.05±0.3926.12±0.3426.10±0.2426.07±0.14胸肌pH45 min值6.07±0.05b6.14±0.06a6.13±0.08a6.17±0.07apH24 h值5.13±0.05b5.17±0.03ab5.20±0.05a5.19±0.05a滴水损失/%4.63±0.044.61±0.054.59±0.044.60±0.06蒸煮损失/%30.48±0.3930.46±0.3030.32±0.2730.42±0.24剪切力/N29.55±1.25a29.47±2.02a26.04±1.32b25.56±1.53b亮度40.08±1.3340.86±1.6240.77±1.6841.04±1.00红度2.78±0.05a2.63±0.04b2.60±0.04b2.55±0.05b黄度11.99 ±0.1512.02±0.1712.14±0.1812.04±0.15注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.4单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡血清抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组肉仔鸡血清GSH-Px活性显著升高（P0.05），各试验组肉仔鸡血清MDA含量显著降低（P0.05）。试验Ⅲ组肉仔鸡血清GSH-Px活性显著高于其他各组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.18.011.T005表5牛至油和单宁酸组合对肉仔鸡血清抗氧化指标的影响组别GSH-Px/(U/mL)T-AOC/(U/mL)T-SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组1 043.04±261.59c20.02±0.31444.07±26.776.43±0.14a试验Ⅰ组1 384.81±224.07bc25.94±4.31456.31±42.252.99±0.62b试验Ⅱ组1 805.07±231.90b22.08±1.06445.18±26.773.27±0.87b试验Ⅲ组2 564.56±268.77a22.90±5.03490.82±40.892.65±0.30b3讨论3.1单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡生长性能的影响水解单宁酸的水解产物没食子酸和葡萄糖可提高单胃动物的生长性能，改善肠道健康[10]。王春明等[11]研究发现，添加不同浓度单宁酸能够明显降低肉鸭料重比，认为单宁可减少肠道蠕动，增加消化时间，从而提高饲料转化率。Cengiz等[12]研究发现，肉鸡日粮中添加2 000 mg/kg五倍子单宁酸可显著降低饲养前期（0~21 d）肉鸡的料重比。本试验中，肉鸡基础日粮添加1 500 mg/kg单宁酸能够显著降低青脚麻鸡的料重比，与上述研究结果一致。植物精油可刺激肉鸡腺胃表皮细胞分泌中性黏多糖和唾液蛋白，提高饲料转化率[13]。彭青云等[14]在日粮中添加300 mg/kg的牛至油可显著提高肉仔鸡的平均日采食量，改善1~21日龄料重比，对体重和平均日增重具有提高作用。Mohiti-Asli等[15]在肉仔鸡日粮中加入500 mg/kg的牛至油可改善饲料利用率和抗球虫力。本试验表明，日粮中添加牛至油和单宁酸组合能够显著提高肉鸡的平均日增重和饲料转化率，降低平均日采食量，表明单宁酸和牛至油组合使用比单一使用效果更好，但不排除植物提取物提取方法、植物生长环境不同对其有效成分的影响较大，并且肉鸡品种和饲养管理方法不同也会对试验结果造成影响。3.2单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡屠宰性能的影响屠宰性能是评价胴体品质的重要指标[16]。侯海峰等[17]研究表明，日粮中添加1 500和2 000 mg/kg的单宁酸均可有效提高肉仔鸡的屠宰性能，1 500 mg/kg可显著提高肉仔鸡的半净膛率。牛至油可促进消化道微生物种群动态平衡，促进肠道屏障完整性，通过刺激消化道黏膜感受器，提高营养物质吸收能力，有助于提高畜禽屠宰性能[18-20]。魏建东[21]研究发现，肉鸡日粮中添加100 mg/kg天然植物提取物（主要成分为百里香酚、香芹酚、丁香酚）可提高肉鸡的全净膛率。本试验表明，与对照组相比，各试验组肉仔鸡全净膛率显著提高，试验Ⅲ组肉仔鸡半净膛率显著提高，1 500 mg/kg单宁酸+500 mg/kg牛至油组合效果更优，原因可能是添加牛至油可提高肉鸡对营养物质的吸收利用率，进而改善肉鸡的屠宰性能。3.3单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡肉品质的影响pH值是肉品质指标中最重要的指标之一。动物宰杀后，肌肉内产生的乳酸使肉质呈弱酸性[22]。pH值可影响系水力、肉色、肌肉嫩度，减少肌蛋白变性，降低蒸煮损失。滴水损失可直观反映肉类的系水力。李玉礼[23]研究表明，在白羽肉鸡的基础日粮中添加百里香酚和肉桂酸混合物可有效提高白羽肉鸡的胸肌和腿肌pH24 h值，改善肉品质。侯海峰等[17]研究表明，在肉仔鸡日粮中添加1 500 mg/kg单宁酸，胸肌和腿肌的pH45 min值下降速度明显减慢。本试验表明，日粮中加入单宁酸和牛至油组合可显著提高pH45 min值和pH24 h值，单独添加单宁酸组pH24 h值无明显变化，但也呈上升趋势，可能是单宁酸和牛至油组合具有一定的抗氧化能力，可通过减少肌肉中的自由基减缓肌肉的氧化作用，降低肌蛋白被氧化的程度，影响肌糖原分解。肌糖原分解产生乳酸，乳酸沉积在组织中可降低肌肉pH值，肌糖原分解减弱使得乳酸产生减少，肌肉pH值的下降速度减慢。但日粮中单宁酸和牛至油组合对腿肌和胸肌蒸煮损失和滴水损失无显著影响，可能与日粮中添加单宁酸和牛至油组合的含量有关。剪切力与肌肉嫩度成反比[24]。张杏莉[25]研究表明，精油+有机酸可有效调节黄羽肉鸡的胸肌剪切力。李慧敏等[26]研究发现，包被喂量元素+植物精油可显著降低AA肉鸡的剪切力，改善肉品质，与本试验结果基本一致。原因可能是添加牛至油后可提高脂肪的含量，降低肌肉剪切力[27]。肉色亮度通常可以衡量氧合肌红蛋白含量，红度衡量脱氧肌红蛋白含量，黄度值则用于衡量高铁肌红蛋白含量[28]。Luna等[29]研究发现，日粮中加入百里香酚和香芹酚可使屠宰后的肉鸡肌肉中MDA含量下降。本试验中，单独添加各试验组肉仔鸡红度值显著降低，表明植物精油在一定程度上可抑制肌红蛋白氧化。3.4单宁酸和牛至油组合对肉仔鸡血清抗氧化指标的影响水解式单宁酸是一种多酚物质，酚类化合物具有良好的抗氧化性。单宁酸具有抗氧化作用，由于其酚基官能团具有氧化还原特性可作为还原剂、供氢体淬灭单氧自由基[30]。研究表明，百里香酚的主要起抗氧化作用的原因是其苯酚类羟基能够为过氧化氢的氧化反应提供氢供体，消除自由基[31]。有研究表明，牛至精油可降低血清MDA和一氧化氮浓度，提高SOD活性和T-AOC[32]。Hashemipour等[33]在日粮中添加香芹酚+百里香酚饲喂1~42日龄的肉鸡，结果表明，与对照组相比，24日龄肉仔鸡血清SOD和GSH-Px活性显著升高，并且血清MDA水平随添加浓度升高而降低，可延缓脂质氧化。本试验中，与对照组和单独添加单宁酸组相比，添加牛至油和单宁酸组合的两个试验组肉鸡血清GSH-Px活性升高，MDA含量下降，其中添加1 500 mg/kg+500 mg/kg牛至油组合T-SOD活性最高。本试验与上述研究结果不完全一致，原因可能是日粮中添加单宁酸额含量或动物的饲喂阶段不同。4结论本试验条件下，日粮中添加单宁酸和牛至油组合可显著提高肉鸡的生长性能、改善屠宰性能和肉品质，显著增强肉仔鸡的抗氧化能力，适宜添加量为1 500 mg/kg单宁酸＋500 mg/kg牛至油。