据《2021中国渔业统计年鉴》统计，2020年罗非鱼养殖产量1 655 410 t，占全国淡水养殖的5.36%，并且呈逐年增加的趋势[1]。农业农村部规定自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂（中药类除外）的商品饲料，开发新型促生长饲料添加剂代替抗生素对水产养殖具有重要意义[2]。中草药兼具药用价值与营养优势，在一定程度上可以减少食品污染，是抗生素较为理想的替代品[3]。中草药来源广泛、种类繁多，适合大规模推广使用，且植物具有天然性，能够保持药物结构的天然性和生物可降解等活性[4]。博落回又称号筒杆、三钱三、吹火筒等，系罂粟科博落回属多年生高大草本植物，已作为植物源性饲料在广西使用[5]。博落回活性物质主要为异喹啉类生物碱，具有消炎、杀菌、抗肿瘤和杀虫作用等多种功能[6-10]。研究发现，博落回不会导致菌株产生耐药基因[11]。因此，博落回可作为一种潜在的抗生素替代品应用于动物生产中[11-13]。吉富罗非鱼是我国重要的罗非鱼养殖品种之一，具有生长快、规格齐、抗病强等特点。目前，饵料中添加博落回对吉富罗非鱼的影响的相关报道较少。本研究探究饵料中添加博落回对吉富罗非鱼生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响，以期为博落回在罗非鱼的养殖生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料试验罗非鱼由广西水产科学院那马基地国家级广西南宁罗非鱼良种场提供。博落回由广东溢多利生物科技股份有限公司提供，主要活性成分为血根碱（1.5%）和白屈菜红碱（1.75%）。1.2试验设计试验于广西民族大学水产养殖多功能实验室进行。选取体表无外伤、体型相近的126尾罗非鱼，随机分为3组，每组3个重复，每个重复14尾，分配至9个规格为60 L的玻璃缸中，每个玻璃缸14尾。正式试验开始前，罗非鱼在2 m3的养殖池中驯养7 d，期间投喂基础饵料，暂养结束后，鱼禁食24 h，正式试验期30 d。对照组罗非鱼投喂基础饵料，0.1%博落回组和0.5%博落回组分别在基础饵料中添加0.1%、0.5%博落回，每天饱食投喂3次（9：00、17：00、22：00），根据照罗非鱼营养需要[14]并参照于海瑞等[15]对吉富罗非鱼的研究设计饵料配方，以豆粕、菜籽粕和次粉为主要蛋白源，鱼油和大豆卵磷脂为主要脂肪源，配制基础饵料，基础饵料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.012.T001表1基础饵料组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00豆粕30.00粗蛋白/%35.13鱼粉2.00粗脂肪/%4.75菜籽粕23.00粗灰分/%7.51次粉25.00米糠粕8.00啤酒酵母2.00鱼油2.00大豆卵磷脂1.00沸石粉2.72磷酸二氢钙1.50矿物质预混料1.00维生素预混料1.00氯化胆碱0.25乙氧基喹啉0.03三氧化二铬0.50注：1.预混料由山东康科润海洋科技有限公司提供。2.营养水平均为实测值。1.3饲养管理每次投喂前1 h吸污，投喂1 h后收集未吃饵料，记录各组摄食量，每日监测水温。若试验过程中出现死鱼，及时捞出称重，记录。每天换水1次，清理过滤装置。养殖期间水温为（30±5）℃，pH值7.2~8.0，溶解氧不低于6.50 mg/L。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集养殖试验结束，罗非鱼禁食24 h，使用间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐（MS-222）对鱼进行麻醉，对每个玻璃缸中的鱼称重和计数，分别记录鱼的体重和体长。使用1 mL无菌注射器对鱼进行尾部静脉采血，8 000 g/min离心5 min析出血清，-80 ℃冰箱保存。将抽血后的试验鱼解剖，取出内脏，分离肝脏，取样后的鱼体置于-20 ℃冰箱保存。1.4.2生长性能分别在正式试验第1 d和最后1 d，对各组试验鱼进行计数和称重，计算存活率（SR）、体重增重率（WGR）、特定生长率（SGR）、肝体比（HSI）、脏体比（VSI）、肥满度（CF）以及饵料系数（FCR）。SR=Nt/N0×100%(1)WGR=(Wt-W0)/W0×100%(2)SGR=(lnWt-lnW0)/t×100%(3)HIS=Wh/W×100%(4)VSI=WV/W×100%(5)CF=W/L3×100(6)FCR=Ws/(Wt-W0)(7)式中：Nt为每个重复缸终末尾数（尾）；N0为每个重复缸初始尾数（尾）；Wt为罗非鱼末重（g/尾）；W0罗非鱼初重（g/尾）；t为试验天数（d）；Wh为肝脏质量（g）；W为鱼体质量（g）；WV为内脏团质量（g）；L为鱼体长（cm）；Ws为摄食饵料总量（g）。1.4.3血清生化指标血清中碱性磷酸酶（AKP）、谷丙转氨酶（ALP）、谷草转氨酶（AST）活性以及白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、总蛋白（TP）和葡萄糖（CLU）含量均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定，具体测定步骤参考试剂盒说明书。1.4.4组织抗氧化能力肝脏和肌肉组织中过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定，具体测定步骤参考试剂盒说明书。1.5数据统计与分析采用SPSS 22.0对数据进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1博落回对吉富罗非鱼生长性能的影响（见表2）由表2可知，博落回组吉富罗非鱼的WGR、SGR和HSI、CF均显著高于对照组（P0.05），两组吉富罗非鱼的WGR分别比对照组提高了34.17%、17.50%，SGR提高了36.25%、20.73%，HSI分别提高了22.5%、13.3%，CF分别提高了11.91%、18.18%。0.1%博落回组吉富罗非鱼的VSI显著低于对照组（P0.05），而0.5%博落回组吉富罗非鱼的VSI显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.012.T002表2博落回对吉富罗非鱼生长性能的影响组别W0/gWt/gSR/%WGR/%SGR/(%/d)HSI/%VSI/%CF/(g/cm3)FCR对照组8.05±0.0433.53±1.16a88.10±4.12319.13±14.46c0.82±0.04c1.20±0.05b8.72±0.35b3.19±0.12c1.28±0.000.1%博落回组8.00±0.0842.27±0.56b90.48±8.25428.42±6.97b1.11±0.02a1.47±0.06a8.12±0.12c3.57±0.13b1.18±0.090.5%博落回组8.04±0.0738.06±0.82c92.85±7.14375.79±10.30a0.97±0.03b1.36±0.04a9.66±0.21a3.77±0.08a1.24±0.11注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2吉富罗非鱼WGR与博落回添加水平的回归分析（见图1）由图1可知，吉富罗非鱼WGR和博落回添加量的二次曲线回归方程为y=-2 831.6x2+1 567.4x+300 (R2=0.938 8)。当WGR达到最大值时，对应的博落回添加量为0.28%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.012.F001图1吉富罗非鱼增重率与博落回添加水平的回归分析2.3博落回对吉富罗非鱼血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，饵料中添加博落回可显著降低吉富罗非鱼血清TC、CLU含量及AKP、ALT和AST活性（P0.05）。与对照组相比，博落回组吉富罗非鱼血清TP含量显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.012.T003表3博落回对吉富罗非鱼血清生化指标的影响组别ALB/(g/L)TC/(mmol/L)TP/(g/L)AKP/(U/L)ALP/(U/L)AST/(U/L)GLU/(mmol/L)对照组35.10±0.00a6.05±0.02a64.20±0.18c4.90±0.22a23.24±3.97a36.27±3.10a7.26±0.14a0.1%博落回组35.30±0.10a5.71±0.12b67.70±0.18b3.39±0.21b0.67±0.08b5.75±1.49b6.86±0.11b0.5%博落回组33.70±0.10b4.46±0.25c70.66±0.55a3.51±0.19b3.19±0.19c8.50±0.58c6.54±0.10c2.4博落回对吉富罗非鱼抗氧化能力的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，0.1%博落回组吉富罗非鱼肝脏CAT活性显著提高（P0.05）；0.1%博落回组、0.5%博落回组吉富罗非鱼肝脏SOD活性均显著升高（P0.05）。0.1%博落回组吉富罗非鱼肌肉中SOD显著高于0.5%博落回组和对照组（P0.05）。与对照组相比，0.1%博落回组、0.5%博落回组吉富罗非鱼肌肉中MDA含量均显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.012.T004表4博落回对吉富罗非鱼抗氧化能力的影响组别0.2%肝脏CAT/(U/mg prot)0.1%肝脏SOD/(U/mg prot)2%肌肉SOD/(U/mg prot)25%肌肉MDA/(μmol/g prot)对照组0.34±0.05b61.12±0.49c62.15±0.85c0.89±0.01a0.1%博落回组0.49±0.02a71.76±0.98b78.81±0.40a0.69±0.00b0.5%博落回组0.33±0.01b84.34±1.20a74.32±0.65b0.58±0.00c3讨论3.1博落回对吉富罗非鱼生长性能的影响博落回作为饲料添加剂能够显著提高鸡、猪、牛羊等生长性能[16-19]。近年来，博落回在水产养殖中的研究应用愈发广泛。研究表明，博落回叶片中分离出的生物碱可有效杀死钉螺（Oncomelania hupensis Gredler）以减少血吸虫（Schistosoma japonicum Katsurada）传播[20]。且生物碱可杀死蓝藻（Cyanobacteria），预防蓝藻发生[21]。在饵料中添加0.2%博落回可有效抑制南美白对虾感染致命性弧菌，显著提高南美白对虾的生长性能[22]。本研究中，饵料中添加博落回能够促进吉富罗非鱼的生长，与在断奶羊羔、猪仔、南美白对虾[18-19,22]的基础饵料中添加博落回可以明显改善增重效果的研究结论一致。本研究发现，添加0.1%博落回组吉富罗非鱼生长性能优于添加0.5%博落回组，可能与博落回的最佳添加量相关，且饲料中添加博落回对饵料系数无明显影响，可能与饵料中添加博落回提高了吉富罗非鱼对饲料的摄入有关。Liu等[23]研究发现，添加博落回组的鹌鹑（Coturnix coturnix）表现出强烈的NADP-d+活性，表明博落回可以增加食物在肠腔中停留的时间，这可能是饲料中添加博落回能够提高生长性能的重要原因。此外，有研究发现，基础饵料中添加博落回对南美白对虾的生长性能无明显影响[22]。造成上述研究结果差异的主要原因可能是不同研究中各动物的种属、性别、生长阶段以及博落回添加水平的差异所致。3.2博落回对吉富罗非鱼血清生化指标的影响血清中ALT和AST活力是评价肝功能是否健康的重要指标，肝功能紊乱时，血清中的AST与ALT活性显著上升[24]。本研究中，与对照组相比，博落回可显著降低吉富罗非鱼血清中ALT与AST及AKP的活性。AKP活性升高与肝脏功能变差有关，本试验中，当饵料中博落回添加量为0.5%时，吉富罗非鱼血清中ALB含量显著降低，表明博落回作为饵料添加剂不会对吉富罗非鱼肝脏造成损伤，与张璐等[25]在花鲈上的研究相似。本试验中，添加适量博落回能够显著提高吉富罗非鱼血浆总蛋白质水平，与在大菱鲆（Scophthalmus maximus）和真鲷（Pagrus major）中的研究结论一致[26-27]。本试验中，添加适量博落回显著降低了吉富罗非鱼血清中TC与GLU的含量。表明饵料中适宜博落回可以抑制肝脏氨基酸的降解，提高血浆总蛋白水平，促进罗非鱼生长[28-29]。3.3博落回对吉富罗非鱼组织抗氧化能力的影响SOD、CAT和MDA等是鱼体抗氧化系统的重要组成部分[30]。本试验中，添加0.1%博落回组吉富罗非鱼CAT活性显著升高，SOD随饵料中博落回添加量的升高而升高。与对照组相比，饵料中添加博落回可以显著增强吉富罗非鱼肌肉中的SOD活性，降低MDA含量，与孟伟等[31]研究大黄鱼（Larimichthys crocea）肌肉抗氧化能力相一致。SOD是机体抗氧化系统中最重要的抗氧化酶，表明饵料中添加博落回能够增强吉富罗非鱼在应激条件下的抗氧化能力[32]。博落回的主要成分中存在异喹啉类生物碱，这些生物碱中多含抗氧化基团，可相互作用清除自由基，从而抑制脂质过氧化反应，进一步提高机体的抗氧化性能[34]。4结论本研究表明，饵料添加博落回可以显著提高吉富罗非鱼的生长性能，降低血清中碱性磷酸酶活性，增强组织中抗氧化活力。以增长率为指标经回归分析得知，博落回的添加量为0.28%时，效果最佳。