菊粉是一种天然果聚糖类，是天然的益生元和水溶性膳食纤维补充剂，具有促进动物肠道生长发育、抗氧化和抗菌等作用[1-3]。近年来，菊粉在家禽生产中的应用较多。研究表明，在海兰褐蛋雏鸡的日粮中添加一定比例的菊粉能够显著增加蛋鸡的平均日增重，降低料重比[4]。鱼腥草素作为一种药食皆宜的草本植物，含有丰富的黄酮苷，具有抗炎、抑菌和提高机体免疫力等功能[5-6]。研究发现，日粮中添加适量的鱼腥草素可促进肉鸡生长，提高机体免疫机能[7]。本试验在蛋鸡日粮中添加菊粉和鱼腥草素，研究其对蛋雏鸡生长性能、屠宰性能、肠道消化酶活性、激素水平和抗氧化功能的影响，为菊粉和鱼腥草素在海兰褐蛋雏鸡生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料菊粉购自西安圣青生物科技有限公司，纯度90%。鱼腥草素素由中国农业科学院提供，纯度100%。1.2试验设计选取108羽10日龄体重（55±0.08）g海兰褐蛋雏鸡，随机分为3组（A组、B组和C组)，每组6个重复，每个重复6羽鸡。A组蛋鸡饲喂基础日粮，B组蛋鸡饲喂基础日粮+1%菊粉，C组蛋鸡饲喂基础日粮+1%菊粉+0.4%鱼腥草素。预试期4 d，正式试验期14 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.011.T001表1基础日粮成分及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.07代谢能/(MJ/kg)13.19豆粕23.00粗蛋白/%19.60玉米蛋白粉6.00钙/%0.95豆油4.00有效磷/%0.39石粉1.20赖氨酸/%1.05磷酸氢钙2.00蛋氨酸/%0.42L-赖氨酸盐酸盐0.35蛋氨酸+胱氨酸/%0.76DL-蛋氨酸0.08食盐0.30预混料1.00注：1.预混料购自南京可莱威生物科技有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验蛋雏鸡饲养管理方案参照海兰褐蛋雏鸡饲养标准进行。所有试验鸡均采用笼养，自由饮水和采食，舍内温度保持22~28 ℃，湿度保持50%~70%。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集和制备试验最后1 d称量各重复鸡的体重，在每个重复中选取2只与重复内平均体重相近的海兰褐蛋雏鸡，颈动脉处死，褪毛后得到屠体重，去除气管、食管、嗉囊、肠、脾脏、胰腺、心脏、肝脏、腺胃、肌胃、腹脂和生殖器后得到全净膛重，分离出十二指肠、空肠和回肠，使用载玻片刮取各肠段黏膜，-80 ℃冻存。称取十二指肠、空肠和回肠黏膜样品，按重量（g）∶体积（mL）=1∶4加入4倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆。匀浆液4 ℃、3 000 r/min离心10 min，取上清液于-20 ℃保存。1.4.2生长性能以每个重复为单位，每天记录试验海兰褐蛋雏鸡的采食量，统计饲料消耗量，计算平均日采食量（ADFI）。于试验第14 d称取每个重复中海兰褐蛋雏鸡重量，计算蛋鸡的平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。ADG=(Mt-M0)/t（1）F/G=(F1+F2+F3+…+F14)/(Mt-M0)（2）式中：Mt为蛋鸡末重（g），M0为蛋鸡初重（g），t为饲养时间（d），F为采食量，F1为试验第1 d蛋鸡的采食量，以此类推。1.4.3屠宰性能试验第14 d，每个重复选取2只接近平均体重的海兰褐蛋雏鸡屠宰，根据《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》（NY/T 823—2004）测定蛋鸡的屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。屠宰率=100%×屠体重/宰前体重（3）全净膛率=100%×全净膛重/宰前体重（4）胸肌率=100%×胸肌重/全净膛重（5）腿肌率=100%×腿肌重/全净膛重（6）腹脂率=100%×腹脂重/全净膛重（7）1.4.4肠道消化酶活性将上述制备好的肠道黏膜上清液采用南京建成生物工程研究所淀粉酶、胰蛋白酶和蔗糖酶试剂盒进行活性测定，具体操作方法按照试剂盒说明书操作进行。1.4.5肠道激素水平将上述制备好的上清液采用南京奥青生物工程有限公司的试剂盒，测定海兰褐蛋雏鸡十二指肠、空肠和回肠中激素胆囊收缩素（CCK）、饥饿素（Ghrelin）和酪酪肽（PYY）水平。1.4.6肠道抗氧化性能肠道总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶活性（GSH-Px）分别采用南京建成生物工程研究所检测试剂盒进行测定，具体操作方法按照试剂盒说明书操作进行。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 25.0进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以平均值和总标准误（SEM）表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，各组蛋鸡的ADFI、ADG、F/G均差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.011.T002表2菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡生长性能的影响组别M0MtADFI/[g/(羽·d)]ADG/[g/(羽·d)]F/GA组55.02361.8665.2423.922.82B组55.01367.2071.5324.792.77C组55.03359.8764.1822.312.81SEM0.0819.289.843.560.09P值0.610.570.760.650.322.2菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，各组蛋鸡的屠宰率、全净膛率、半净膛率等屠宰性能指标均差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.011.T003表3菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡屠宰性能的影响组别屠宰率半净膛率全净膛率胸肌率腿肌率腹脂率A组91.0484.5273.6030.1220.962.85B组92.4685.4973.8930.7421.352.76C组92.5386.4173.5129.8821.182.39SEM0.40.440.090.210.090.12P值0.240.540.610.480.720.85%2.3菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道黏膜消化酶活性的影响（见表4）由表4可知，与A组相比，B组海兰褐蛋雏鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜中淀粉酶的活性显著增加（P0.05）。菊粉或菊粉鱼腥草素联用对十二指肠、空肠和回肠黏膜中蔗糖酶和胰蛋白酶的活性无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.011.T004表4菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道黏膜消化酶活性的影响项目A组B组C组SEMP值十二指肠淀粉酶127.69b141.26a131.19ab6.760.03蔗糖酶31.1429.0343.568.250.63胰蛋白酶764.02737.80703.1369.380.87空肠淀粉酶116.88b122.34a110.14b4.660.01蔗糖酶34.7529.5046.799.360.52胰蛋白酶826.05788.88747.2868.270.06回肠淀粉酶128.71b147.76a136.36ab5.260.01蔗糖酶35.8425.8530.967.500.52胰蛋白酶777.42839.89812.6071.720.06注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P＜0.05）；下表同。2.4菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道激素水平的影响（见表5）由表5可知，与A组相比，B组和C组海兰褐蛋雏鸡空肠中的CCK含量显著降低（P0.05）；B组海兰褐蛋雏鸡回肠中的CCK和Ghrelin含量显著降低（P0.05）。与B组相比，C组海兰褐蛋雏鸡回肠中CCK含量显著增加（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.011.T005表5菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道激素水平的影响项目A组B组C组SEMP值十二指肠CCK/(pmol/g)18.0217.7319.830.310.91PYY/(ng/g)92.38104.10102.181.710.63Ghrelin/(ng/g)826.49654.81714.2923.730.87空肠CCK/(pmol/g)18.06a16.07b16.99b0.270.01PYY/(ng/g)90.65102.2998.511.620.52Ghrelin/(ng/g)775.45709.22676.7413.690.06回肠CCK/(pmol/g)18.74a14.71c16.72b0.710.03PYY/(ng/g)98.38120.44109.086.090.07Ghrelin/(ng/g)822.13a698.35b750.77ab23.680.012.5菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道抗氧化功能影响（见表6）由表6可知，与A组相比，B组和C组海兰褐蛋雏鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜中的T-AOC显著增加（P0.05），十二指肠和空肠黏膜的SOD活性显著增加（P0.05）。与B组相比，C组海兰褐蛋雏鸡空肠黏膜T-AOC和SOD活性显著增加（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.011.T006表6菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道抗氧化功能的影响项目A组B组C组SEMP值十二指肠T-AOC/(mmol/g)0.60b0.65a0.68a0.040.03GSH-Px/(U/mg)7.958.529.100.770.06SOD/(U/mg)11.06b12.01a12.85a0.810.02空肠T-AOC/(mmol/g)0.63c0.67b0.71a0.020.01GSH-Px/(U/mg)9.2610.1911.180.740.07SOD/(U/mg)11.13c11.40b12.42a0.310.01回肠T-AOC/(mmol/g)0.62b0.67a0.71a0.010.03GSH-Px/(U/mg)8.618.109.000.660.21SOD/(U/mg)11.7510.8812.790.360.063讨论3.1菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡生长、屠宰性能的影响近年来，中草药在动物养殖中的应用研究较多。陈泽等[4]研究表明，添加一定水平的菊粉可显著增加雏鸡的ADG，降低F/G。日粮中添加0.8%菊粉具有促进蛋雏鸡生长的作用[8]。本试验结果表明，B组海兰褐蛋雏鸡的ADFI高于A组，而C组海兰褐蛋雏鸡的ADFI低于A组，这可能与鱼腥草素粉含有浓烈腥味有关，从而影响海兰褐蛋雏鸡的采食量。有研究表明，在21 d前饲喂菊粉对肉鸡生长性能具有负影响，而42 d后在日粮中添加菊粉能够显著提高肉鸡的生长性能[9]。郭杰等[10]在白羽肉鸡的日粮中加入不同浓度水平的菊粉，发现菊粉对肉鸡的生长性能和免疫器官指数均无显著影响。张艳[11]研究表明，在肉鸡日粮中添加不同比例菊粉，仅有添加比例为0.3%和0.8%对肉鸡生长性能具有促进作用。也有研究发现，在日粮中添加菊叶和菊粉对肉鸡的生长性能无明显促进作用[12]，原因可能是菊粉的添加比例并非蛋雏鸡阶段最适合的比例，也可能是菊粉的饲喂时间较短，菊粉的促生长性能作用尚未显现。屠宰性能与其机体的生长发育密切相关，通常可评价畜禽生产水平。本试验结果表明，日粮中加入1%菊粉以及1%菊粉和0.4%鱼腥草素联用，对28日龄海兰褐蛋雏鸡的屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率均无显著影响。有研究发现，在日粮中添加不同剂量的菊苣根水提物以及简单纯化的菊苣根水提物对21日龄和42日龄肉鸡的屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌率和腿肌率均无显著影响[13]，与本试验研究结果一致。3.2菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道内源消化酶活性的影响中草药及提取物对动物的主要功效包括促进食欲，提高采食量，调节内源性消化酶的活性等[14-15]。胃肠道作为动物最重要的消化器官，对动物的健康至关重要。肠道内源性消化酶是肠道消化营养物质最重要的催化剂。有研究表明，日粮中添加菊粉显著提高了克氏原螯虾胃组织中的消化酶活性[16]。本研究中，B组海兰褐蛋雏鸡十二指肠、空肠和回肠的淀粉酶活性显著增加，这可能与菊粉作为一种能量物质，被海兰褐蛋雏鸡肠道微生物利用，促进肠道有益微生物的繁殖，进一步调节肠道内源性消化酶活性密切相关。3.3菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道激素分泌的影响肠道作为最大的内分泌器官，肠道内的菌群可通过介导作用影响肠道的屏障功能、代谢调控和内分泌信号通路。此外，肠道内营养物质的状态还会影响食欲相关激素的分泌[17]。CCK、PYY和Ghrelin在调控动物食欲、胃肠平滑肌蠕动和能量平衡等方面发挥重要作用[18]。有研究发现，干预仔猪肠道的菌群可影响上述胃肠激素的分泌水平[19]。本研究结果表明，日粮中添加菊粉或菊粉鱼腥草素联用显著降低了海兰褐蛋雏鸡空肠中的CCK含量，而日粮中添加菊粉显著降低了回肠中的CCK和Ghrelin含量。CCK和Ghrelin作为抑制家禽食欲最主要的激素，浓度下降表明肠道的饱感下降，可促进家禽采食。原因可能是菊粉优化了海兰褐蛋雏鸡肠道微生物菌群，这些菌群参与调节肠道内分泌的功能。鱼腥草素作为一种天然的抗生素，具有抗炎，清热解毒等功效，日粮中添加鱼腥草素或许可进一步促进肠道上皮的健康，从而增强肠道消化吸收和排空功能[20]。3.4菊粉和鱼腥草素对海兰褐蛋雏鸡肠道抗氧化状态的影响T-AOC、GSH-Px和SOD作为体内抗氧化系统中的重要酶系，对清除自由基、抗氧化损伤和维持细胞结构方面至关重要。魏轶男等[21]研究表明，添加1.0%菊粉显著提高了肉仔鸡肝脏T-SOD、GSH-Px活性。日粮中添加鱼腥草多糖可显著改善小鼠的结肠炎[22]。本研究结果显示，日粮中添加菊粉或菊粉与鱼腥草素联用均提高了海兰褐蛋雏鸡十二指肠和空肠的抗氧化能力，且菊粉和鱼腥草素联用的效果在一定程度比添加菊粉效果更好。4结论本试验结果表明，日粮中添加菊粉和或菊粉鱼腥草素联用对海兰褐蛋雏鸡生长性能和屠宰性能无显著影响，但显著降低了海兰褐蛋雏鸡空肠中饱感激素的分泌，提高了肠道的淀粉酶活性和抗氧化性能。