犊牛的生长发育与成年后肉牛的生产性能紧密相关。犊牛出生后3个月内是正常哺乳期，其消化代谢系统尚未发育正常，消化代谢能力明显不足，需要定期哺乳。母乳是犊牛获取营养物质的来源，能够促进犊牛生长，饲喂犊牛母乳至断奶可提高成活率，减缓犊牛应激。西门塔尔杂交三代母牛所产乳中主要营养成分均明显优于荷斯坦牛，西杂母牛的牛乳具有较好的开发利用价值[1]。在宁夏地区各牛场普遍以舍饲西门塔尔牛为主[2]。目前，西杂犊牛哺乳期培育仍普遍采用随母过度哺乳的饲养方式，但这种哺乳方式很可能直接造成犊牛整体营养摄入水平相对较低，且过度哺乳会严重消耗母牛营养，从而导致犊牛营养性腹泻率较高，母牛体况变差。肉牛培育过程中，一般在犊牛90日龄实行早期断奶，但会引起犊牛不同程度断奶应激，产生不良反应，若未能提前做好预防管理工作，可能影响犊牛正常的消化代谢，明显改变幼畜体内激素分泌水平及免疫系统功能，从而造成幼畜自身免疫系统严重受损，诱发幼畜发生炎症性的免疫代谢反应[3-4]，增加犊牛长期患病和死亡的风险[5]。因此，研究哺乳期犊牛的饲养方式具有重要意义。李骁勇等[3]研究发现，随着哺乳期犊牛日龄增加，逐渐增加哺乳量可显著改善犊牛的生长性能，明显降低犊牛腹泻发病率，提高养殖效益。侯鹏霞等[4]研究发现，安格斯犊牛35日龄后连续每日哺乳3次，哺乳后离母能够改善犊牛的生长发育情况，增强犊牛机体免疫能力及抗氧化能力，哺乳母牛产后发情间隔时间缩短。本试验研究4种哺乳方式对西杂犊牛早期生长性能、血清指标、发病率以及母牛产后首次发情、配种的影响，筛选适合犊牛的哺乳方式，为缓解犊牛断奶应激、提高犊牛早期体重、加快母牛产后体况修复提供参考。1材料与方法1.1试验材料西杂犊牛和苜蓿干草由宁夏永宁犇旺生态养殖有限公司提供。1.2试验设计选取32头出生日期、体重相近、健康的西杂犊牛，随机分为4组（公、母各半），每组8个重复，每个重复1头犊牛，所有犊牛0~30日龄均随母哺乳；对照组犊牛30 d后继续随母哺乳，试验1组犊牛2月龄哺乳3次/d（7：30~09：30、12：00~14：00、17：00~19：00），每次2 h，3月龄哺乳2次/d（9：00~11：00、15：00~17：00）；试验2组犊牛哺乳3次/d（7：30~9：30、12：00~14：00、17：00~19：00）；试验3组犊牛哺乳2次/d（9：00~11：00、15：00~17：00）。预试期10 d，正式试验期60 d，犊牛90日龄断奶，试验结束。试验期间犊牛补饲日粮为商业犊牛颗粒料，由宁夏银川正大饲料有限公司提供。补饲日粮原料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T001表1补饲日粮原料组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.046棉粕10.0粗蛋白质/%19.1043豆粕10.8钙/%1.00玉米37.2磷/%0.60喷浆纤维1.0综合净能/(MJ/kg)5.69膨化大豆1.5白皮纤维8.0DDGS10.5麸皮5.0玉米胚芽粕7.0糖渣4.0预混料5.0注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 25 000 IU、VD 600 IU、VE 800 IU、Fe 1 500 mg、Cu 160 mg、Zn 1 000 mg、Mn 700 mg、Se 2.40 mg、I 20 mg、钴20 mg。2.营养水平中综合净能为计算值，其余均为实测值。犊牛自由采食苜蓿干草，苜蓿干草营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T002表2苜蓿干草营养水平（风干基础）项目干物质/%粗蛋白质/%粗脂肪/%粗灰分/%中性洗涤纤维/%酸性洗涤纤维/%钙/%磷/%总能/(MJ/kg)含量92.9612.632.575.5254.5326.110.590.3020.081.3饲养管理犊牛在出生后2 h内灌服初乳，7日龄左右开始隔栏补饲颗粒料，自由采食苜蓿干草、饮水。8头犊牛围栏饲养，围栏面积为4 m×5 m，其他饲养管理水平基本保持一致。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能测定各组犊牛初生重，30日龄、90日龄晨饲前体重，计算犊牛平均日增重。平均日增重=(末重-犊牛30日龄重)/试验天数(1)料重比=采食总量/总增重(2)1.4.2饲草料采食量每天对各组犊牛采食的颗粒料、苜蓿干草进行称重，记录饲草料采食量，计算犊牛干物质采食量。总干物质采食量=采食颗粒化日粮干物质+采食苜蓿草干物质(3)1.4.3营养物质表观消化率在犊牛试验开始和结束前分别连续3 d采用直肠采粪法收集粪样，利用内源指示剂法[5]测定犊牛体内粪样干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、盐酸不溶灰分（AIA）以及钙（Ca）、磷（P）表观消化率。营养物质表观消化率=[(a/c-b/d)/(a/c)]×100%(4)式中：a为饲粮中该养分的含量（%），b为粪便中该养分的含量（%），c为饲粮中AIA的含量（%），d为粪便中AIA的含量（%）。1.4.4粪便和腹泻治疗情况试验开始后，每日8：00和18：00观察记录犊牛粪便形态，对粪便进行评分[3]，粪便评分标准见表3，评分大于3分判断为发生腹泻。统计每日犊牛腹泻头数，记录腹泻持续时间，计算每组犊牛腹泻发病率。腹泻率＝(腹泻犊牛数×腹泻天数)/(试验犊牛数量×试验天数)(5)10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T003表3粪便评分标准项目评分粪便成条形或颗粒状1粪便成形，但质地较软2粪便不成形，且较稀3粪水分离明显，但颜色正常4粪水分离明显，且颜色异常51.4.5血清生化、免疫、抗氧化指标试验第60 d晨饲前，尾静脉采集犊牛的血液5 mL，静置30 min，3 000 r/min离心10 min收集血清，-20 ℃ 冰箱保存，测定血清指标。血清生化指标：谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）、碱性磷酸酶（ALP）。血清免疫指标：免疫球蛋白（IgA）、免疫球蛋白（IgE）、免疫球蛋白（IgG）、免疫球蛋白（IgM）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。血清抗氧化性指标：血清总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）。血清激素检测：三碘甲状腺原氨酸（T3）、生长激素（GH）、皮质醇（Cortisol）。血清生化及激素指标试剂盒购自爱德士公式，免疫指标试剂盒购自江苏晶美生物科技有限公司，抗氧化指标试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.4.6母牛产后配种情况试验开始和结束当天晨饲前称取母牛空腹体重，观察记录母牛体况恢复情况，记录产后初次发情日期和配娠情况。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件进行初步处理，SPSS 22.0统计分析软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1哺乳方式对犊牛生长性能的影响（见表4）由表4可知，试验1组犊牛90日龄体重极显著高于对照组（P0.01），显著高于试验2组、试验3组（P0.05），试验2组、试验3组犊牛90日龄体重显著高于对照组（P0.05）。试验1组犊牛平均日增重高于其他各组（P0.05），试验3组犊牛颗粒料采食量和料重比极显著高于其他各组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T004表4哺乳方式对犊牛生长性能的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组初生重/kg40.75±7.7243.75±7.2243.75±6.2744.62±6.1630日龄体重/kg85.75±6.6984.00±6.9283.25±7.2984.50±6.9190日龄体重/kg167.81±13.00Bd178.13±18.01Aa173.73±27.42ABbc170.60±18.73ABbc平均日增重/[g/(头·d)]1 367.67±0.25b1 568.83±0.31a1 508.00±0.20b1 435.00±0.18b颗粒料采食量/[g/(头·d)]6 659.22±140.52Bc8 065.25±120.67Bb8 927.63±136.17Bb12 174.85±146.32Aa苜蓿草采食量/[g/(头·d)]482.97±16.42683.44±16.13698.38±17.54947.22±18.64总干物质采食量/[g/(头·d)]7 142.19±46.358 748.69±48.129 626.01±75.6213 122.07±90.13料重比5.22±0.34B5.57±0.41B6.38±0.48B9.14±1.15A注：同行数据肩标不同大写字母表示差异极显著（P0.01），不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表7、表8与此同。2.2哺乳方式对犊牛营养物质表观消化率的影响（见表5）由表5可知，试验1组犊牛CP、ADF的表观消化率高于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T005表5哺乳方式对犊牛营养物质表观消化率的影响组别DMCPAshNDFADF对照组67.92±0.2972.83±0.67b51.43±2.4346.70±0.9436.90±0.87b试验1组76.92±0.3880.17±1.34a53.83±2.1947.60±0.8646.78±1.43a试验2组73.38±0.4274.99±0.68b52.81±0.9555.16±0.7436.74±0.67b试验3组75.62±0.5577.00±0.76b54.86±1.3453.60±0.5942.89±0.98b注：同列数据肩标不同大写字母表示差异极显著（P0.01），不同小写字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表6、表9~表10与此同。%2.3不同哺乳方式对犊牛粪便评分和腹泻发病率影响（见表6）由表6可知，试验1组犊牛的粪便评分极显著低于对照组和试验2组、试验3组（P0.01），试验2组、试验3组犊牛粪便评分显著低于对照组（P0.05）。试验1组犊牛发病天数最短。试验1组犊牛腹泻发病率极显著低于对照组和试验2组、试验3组（P0.01），试验2组、试验3组犊牛发病率显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T006表6不同哺乳方式对犊牛粪便评分和腹泻发病率影响组别粪便评分发病天数/d发病个体数/头发病率/%对照组4.38±0.65Aa32640.00Aa试验1组1.76±0.68Bc18311.25Bc试验2组2.57±0.50Ab23523.96Ab试验3组2.78±0.92Ab25526.04Ab2.4不同哺乳方式对犊牛血清生化指标的影响（见表7）由表7可知，与对照组相比，试验1组犊牛血清ALB含量极显著提高（P0.01），GLB、TG含量显著提高（P0.05），AST活性、BUN含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T007表7不同哺乳方式对犊牛血清生化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组ALT/(U/L)9.14±6.729.16±3.309.13±2.359.17±5.54AST/(U/L)73.00±17.65b64.50±28.59a65.13±15.04a72.77±7.44bTP/(g/L)59.73±2.5863.90±3.6060.77±4.6162.33±0.80ALB/(g/L)30.83±0.90B35.27±2.12A31.43±2.25B32.50±0.87BGLB/(g/L)27.00±3.61b29.33±1.53a26.67±2.31b28.00±1.00bUN/(mmol/L)3.71±0.60b2.71±1.55a2.96±1.33a3.12±0.85aTC/(mmol/L)3.81±0.873.11±0.623.29±0.903.45±0.43ALP/(U/L)155.58±92.58b126.47±119.60a155.80±9.40b144.47±67.16bT3/(nmol/L)31.35±1.0231.79±1.3040.00±5.0630.56±0.97GH/(μg/L)2.02±0.16b2.56±0.14a2.11±0.20b2.15±0.09b2.5不同哺乳方式对犊牛血清免疫指标的影响（见表8）由表8可知，与对照组相比，试验1组犊牛血清IgA、IgE、IgG、IgM含量极显著提高（P0.01），IL-2、IL-4含量显著提高（P0.05），TNF-α和IL-10含量显著降低（P0.05）。试验1组、试验2组、试验3组其他指标均与对照组差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T008表8不同哺乳方式对犊牛血清免疫指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组IgA/(mg/L)2 249.42±127.68B2 541.75±102.3A2 482.92±230.94A2 538.25±153.60AIgE/(mg/L)1 393.33±71.08B1 664.17±234.63A1 414.17±94.651 597.50±340.27IgG/(g/L)2.64±1.12B3.14±0.61A2.65±1.02B2.20±0.21BIgM/(mg/L)1 052.78±80.08B1 130.56±31.55A1 008.33±57.74B1 091.67±108.97BIL-2/(ng/L)418.22±81.90b505.33±163.03a432.83±29.17b435.00±167.29bIL-4/(ng/L)29.66±2.56b32.15±4.01a31.61±1.17b31.22±2.95bIL-10/(ng/L)47.72±1.41a34.40±10.59b42.76±5.40a42.34±1.86aTNF-α/(ng/L)89.12±20.85b69.03±14.45a79.54±19.05b79.68±12.47b2.6不同哺乳方式对犊牛血清抗氧化指标的影响（见表9）由表9可知，与对照组相比，试验1组犊牛血清GSH-Px、SOD的活性及GH含量显著提高（P0.05），MDA含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T009表9哺乳方式对犊牛血清抗氧化指标的影响组别GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)T-AOC/(mmol/L)MDA/(μmol/L)对照组600.74±125.23b10.01±3.31b0.080±0.0185.50±0.41a试验1组887.78±279.68a18.22±6.14a0.067±0.0134.41±3.47b试验2组672.96±130.36b21.57±11.41b0.075±0.0205.56±0.67a试验3组735.93±116.21b28.23±2.43b0.034±0.0145.60±0.83a2.7不同哺乳方式对母牛增重及产后发情天数的影响（见表10）由表10可知，哺乳方式对各组母牛的体重影响不显著（P0.05）。与对照组相比，试验1组母牛产后首次发情时间间隔显著缩短（P0.05），分别比对照组、试验2组、3组母牛产后发情天数缩短13.66、6.07和11.22 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.19.002.T010表10不同哺乳方式对母牛增重及产后发情天数的影响组别初重（犊牛30日龄）/(kg/头)末重（犊牛90日龄）/(kg/头)增重/(kg/头)产后首次发情时间/d对照组552.15±25.36570.72±24.2118.57±0.1773.11±3.46a试验1组555.37±28.62581.15±35.2325.78±0.1959.45±1.92b试验2组550.65±31.56573.71±32.8423.06±0.1865.52±2.57a试验3组553.11±38.34581.05±34.6727.94±0.2270.67±2.39a3讨论3.1哺乳方式对犊牛生长性能的影响在肉牛养殖生产中，犊牛体重增长可以直观反映其生长育肥效果[6]。侯鹏霞等[4]研究表明，限制哺乳每日3次的安格斯犊牛90日龄体重极显著增加。李骁勇等[3]研究发现，根据荷斯坦犊牛日龄先增加喂奶量后减少喂奶量，可显著提高犊牛100日龄体重和平均日增重。由于哺乳期犊牛尚未发育完全，其生长具有可塑性。本试验发现，试验1组犊牛90日龄体重极显著高于其他试验组。原因可能是犊牛的体重增长与采食饲草料和哺乳有关。犊牛时期是肉牛健康生长发育的关键阶段，日粮从以液体奶为主，逐渐过渡至以固体饲草料为主；主要消化器官由皱胃逐渐过渡至瘤胃，消化方式由化学消化过渡至微生物消化。因此，尽早饲喂犊牛固体日粮对瘤胃发育至关重要[7]，在犊牛哺乳期尽早添加燕麦干草能够促进瘤胃的健康发育，提高犊牛体重[8]。本试验中，试验组犊牛的平均日增重均高于对照组，因此适当减少犊牛摄入液态奶可有效促进犊牛采食固体日粮，促进瘤胃早期发育，提高犊牛体重。营养物质表观消化率可综合反映哺乳动物对饲料主要营养成分的消化、吸收和代谢效率，而日粮中营养成分的组成和营养水平是影响犊牛体内营养物质消化代谢的关键因素[3]。本试验中，试验1组犊牛CP、ADF的表观消化率高于其他试验组，料重比最低，综合考虑，使用试验1组的饲喂方式可显著提高犊牛的平均日增重、颗粒料采食量，降低料重比。3.2哺乳方式对犊牛粪便评分与腹泻发病率的影响哺乳期犊牛消化道尚未发育完全，且免疫力较差，容易发生腹泻，在生产过程中通过观察粪便形态、颜色可以判断犊牛腹泻的程度。李骁勇等[3]研究发现，通过荷斯坦公犊日龄改变日喂奶量，能够促进犊牛胃肠道发育，减少犊牛腹泻。本试验中，试验1组犊牛的粪便评分极显著低于其他试验组，试验1组犊牛腹泻发病率极显著低于其他试验组，且试验1组犊牛发病天数最短。3.3哺乳方式对犊牛血清指标的影响血清TP、ALB、GLB含量可以反映机体对蛋白质消化吸收和代谢情况、动物身体健康状态以及生长发育情况。ALB具有控制能量供应和修复动物机体免疫的功能，GLB在动物机体消化免疫系统中起重要作用，BUN是体内蛋白质消化代谢的终产物，随尿液排出，降低血清中BUN含量可减少机体氮损失，有利于动物体内氮沉积[9]。血清ALT、AST主要存在于肝细胞内，ALT、AST活性能够反映肝脏功能和受损程度[4]。血清TG来自食物的分解吸收和肝细胞的合成，是机体隐形的能量来源[10]。本试验结果显示，试验1组犊牛血清ALB含量极显著提高，GLB、TG含量显著提高，AST活性、BUN含量显著降低。表明试验1组的哺乳方式能够促进犊牛对蛋白质的消化吸收利用率，提高免疫力。血清TC水平升高并沉积在不同的组织和器官，会引起多种脂代谢紊乱性疾病，导致胆固醇代谢能力降低[11]，血清脂肪含量高会增加机体患病的概率[12]。罗焱鹏等[13]发现离母犊牛脂肪代谢分解能力更强，但脂肪合成代谢能力较弱。免疫球蛋白是抵御病原菌的第一道防线，细胞因子主要参与机体促炎和抗炎反应，其含量反映动物机体免疫功能状况。TNF-α是机体内重要的细胞因子，具有多种生物学效应。本研究发现，每日限制哺乳3次可使犊牛血清IgA、IgG、IgM和IL-4含量提高，TNF-α含量降低[4]。白雪等[14]研究发现，日粮添加复合微生态制剂和甘露寡糖可显著提高犊牛血清免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）含量和IL-2含量，降低TNF-α、IL-1含量。魏小霜等[15]研究发现，日粮中添加复合微生态制剂可提高犊牛血清IgA、IgM、IgG和IL-2含量。刘佳乐等[16]研究发现利用蒙兽药巴布-7治疗犊牛腹泻后，可不同程度地提高血液中IL-2、IL-4的含量。表明哺乳方式可通过提高主要免疫球蛋白和抗炎因子水平，降低TNF-α和促炎因子水平，提高犊牛免疫力。T-AOC反映机体酶类与非酶类抗氧化物的总体水平；MDA是体内脂质氧化反应后的终产物，可作为反映了机体过氧化损伤的指标。赵杰等[17]发现，饲喂牛源复合微生态剂后，黄牛血清T-AOC和GSH-Px活性均显著升高，MDA含量显著或极显著降低。侯鹏霞等[4]研究发现，试验组犊牛血清GSH-Px、SOD活性均极显著提高，MDA含量极显著降低。钟港等[18]研究发现，在母牛围产期日粮添加海藻提取物会影响初生犊牛血液中MDA含量和GSH-Px活性，提高初生犊牛抗氧化能力，利于犊牛健康成长。白雪等[14]研究发现，补充复合微生态制剂和甘露寡糖可提高犊牛血清SOD活性，降低MDA含量。王丽华等[19]研究发现，犊牛添加25羟基维生素D3后，血浆中SOD、GSH-Px活性和T-AOC显著增加，MDA含量随添加剂量增加而降低。GH属于肽激素，主要功能是促进动物生长发育。GH和甲状腺激素具有调节免疫机能的作用，T3和T4是甲状腺激素，GH与T3、T4具有协同作用，共同参与促进机体生长发育和新陈代谢过程。徐萍[20]研究发现，犊牛瘤胃菌群相对丰度与GH、T3、IgG含量以及ALT、AST活性呈显著正相关，与BUN、IL-2、TNF-α含量和AST活性呈显著负相关，补饲可显著提高放牧哺乳犊牛血清BUN和GLU含量。石林川[21]研究发现，饲喂复合益生菌可显著提高犊牛血清gA、IgM、IgG含量和SOD活性、T-AOC，与本试验结果一致。3.4哺乳方式对母牛产后首次发情、配种的影响侯鹏霞等[4]研究发现，犊牛限制哺乳可促进母牛产后体况恢复，有助于尽早发情配种。孙芳等[22]研究发现，犊牛通过定点哺乳可增加饲草料采食量，促进犊牛瘤胃早期发育，且利于母牛体况恢复，实现产后发情配种，犊牛早期断奶可促使母牛恢复发情行为并再次受孕。查铖[23]研究发现，日粮中添加复方中草药制剂可显著缩短奶牛妊娠天数和牛产后首次配种天数。王丽军[24]在犊牛哺乳期15日龄时开始饲喂代乳料，逐渐减少每日的母带犊次数与时间有助于母体营养损耗降低，母牛体重平均增长了14 kg，母牛产后正常发情配种，试验组产后60~100 d内的发情率高于对照组。本研究发现，3种哺乳方式对母牛体重无明显音系，试验1组母牛产后首次发情间隔显著缩短，与上述研究结果一致。4结论犊牛30日龄开始限制哺乳3次/d，满60日龄后2次/d，能够显著提高犊牛的平均日增重、采食量，降低犊牛腹泻发病率，减少发病天数；提高犊牛血液中免疫球蛋白、细胞因子和抗氧化指标含量；缩短母牛产后首次发情间隔，促进母牛产后首次发情。