在饲料端禁止使用抗生素的大背景下，寻求绿色、安全、高效的抗生素替代品已成为行业内关注的焦点。抗菌肽能够促进肉鸡的健康发育，提高肉鸡机体免疫力，改善肠道组织结构[1-2]；功能性寡糖可提高畜禽的机体免疫能力和生长发育[3]；有机酸可以使肉鸡机体内的养分被充分消化和吸收，进而提高生长性能[4]。上述三种饲料添加剂是目前生产中经常使用的抗生素替代品。但单一的饲料添加剂难以彻底取代抗生素成为其替代品，在畜禽生产中使用多种饲料添加剂复合物是未来畜牧生产的发展趋势。现阶段，在肉鸡日粮中单独使用抗菌肽、寡糖和有机酸等添加剂的研究报道较多，而将三者复配使用的相关报道较少。本试验旨在研究抗菌肽-寡糖-有机酸复合物替代抗生素对科宝肉鸡生长性能、肉品质、血清抗氧化指标和经济效益的影响，并筛选抗菌肽-寡糖-有机酸复合物的适宜添加剂量，为抗菌肽-寡糖-有机酸复合物在肉鸡养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料抗菌肽-寡糖-有机酸复合物由唐山中科康源有限公司提供，其成分含量主要为抗菌肽0.2%、寡糖0.5%、有机酸1.0%。1.2试验设计选用1日龄科宝肉仔鸡390只，随机分为5组，每组6个重复，每个重复13只鸡。对照组（Ⅰ组）为基础日粮；抗生素组（Ⅱ组）在基础日粮中添加200 mg/kg恩拉霉素，其余试验组（Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组）分别在基础日粮中添加200、400和600 mg/kg抗菌肽-寡糖-有机酸复合物。试验期42 d。1.3基础日粮与饲养管理基础日粮按照NRC（1994）肉鸡营养需求配制，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.20.004.T001表1基础日粮组成及营养水平项目1~14日龄15~35日龄36~42日龄原料组成/%玉米53.2055.8058.80豆粕（43%）25.9020.1015.30面粉8.0010.0010.00玉米蛋白粉（60%）2.902.303.00花生粕2.702.603.10羽毛粉1.001.502.00大豆油1.483.103.50磷酸氢钙1.401.200.90石粉1.201.161.20液体蛋氨酸0.220.240.20预混料2.002.002.00合计100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.2612.8913.18粗蛋白质/%21.2019.2018.50总赖氨酸/%1.431.271.20蛋氨酸+胱氨酸/%0.940.910.88苏氨酸/%0.940.880.85色氨酸/%0.220.190.17钙/%0.900.830.80总磷/%0.520.440.40注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 000 IU、VB1 3 mg、VB2 9 mg、VB6 4.5 mg、VB12 0.03 mg、VD3 4 500 IU、VE 36 000 mg、VK3 6 000 mg、生物素0.18 mg、D-泛酸钙13.5 mg、叶酸1.8 mg、烟酸45 mg、Fe 110 mg、Cu 16 mg、Mn 120 mg、Zn 110 mg、Se 0.35 mg、I 1.5 mg。2.营养水平中粗蛋白质、钙和总磷为实测值，其余均为计算值。试验鸡采用笼养，每个重复单独给料。试验期间肉仔鸡自由采食，充足饮水。控制试验初始温度为34 ℃，随后每周温度平均降低2~3 ℃，温度降至24 ℃后停止降温。其余饲养管理措施按科宝肉鸡饲养管理手册执行。每天观察肉仔鸡的精神状态、食欲和粪便状况，记录死亡数。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能42日龄时，对试验鸡进行空腹称重，称量余料重，计算试验组和对照组的平均日增重、平均日采食量和料重比。平均日采食量=总采食量/试验天数(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2肉品质42日龄时，每个重复随机选取接近平均体重的2只鸡进行屠宰，统一取左侧整块胸肌。采用取样器切取胸肌10 g左右，去除结缔组织，用自封袋包装，在0~4 ℃冰箱熟化24 h，称重（W1）。将肌肉放到温度约75~80 ℃的水浴锅中加热，肉中心温度70 ℃为宜。取出肉样流水中冷却后擦干，称重（W2），计算蒸煮损失。蒸煮损失=100%×[(W1-W2)/W1](4)切取胸肌5 g左右称重（W3），悬空放入自封袋，置于0~4 ℃环境中冷藏24 h，取出称重（W4），计算滴水损失。滴水损失=100%×[(W3-W4)/W3](5)屠宰后45 min，使用pH计和色差仪分别测定各胸肌相同部位的pH值及肉色（亮度、红度、黄度）。在完成蒸煮损失测定的基础上，各肌肉样品剪切力测定方法参照《肉嫩度的测定 剪切力测定法》（NY/T 1180—2006）。1.4.3血清抗氧化指标空腹翅下静脉采血后，4 000 r/min离心15 min，取血清分装，-20 ℃冰箱保存。肉鸡血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）以及总抗氧化能力（T-AOC），以上指标使用南京建成生物工程研究所的试剂盒检测。1.4.4经济效益根据饲养试验期间使用饲料单价成本、鸡肉市场定价及采食量，计算利润和欧洲效益指数，对各组鸡经济效益指标进行分析。饲料成本(元)=采食量×饲料单价(6)肉鸡收入(元)=肉鸡总重×肉鸡单价(7)相对利润值=试验组利润/对照组利润×100%(8)欧洲效益指数(EPI)=[成活率×体重]/(料重比×出栏天数)×10 000(9)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 22.0统计软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以平均值和标准误表示，以P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组肉鸡平均日增重分别增加4.57%、3.40%和5.40%（P0.05），末重分别增加4.47%、3.31%和4.60%（P0.05）；Ⅱ组和Ⅴ组肉鸡料重比分别降低3.03%和3.64%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.20.004.T002表2抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡生长性能的影响项目初重/g末重/g平均日采食量/[g/(只·d)]平均日增重/[g/(只·d)]料重比Ⅰ组（对照组）45.002 463.17b94.9957.58c1.65aⅡ组44.872 573.35a96.3460.21ab1.60bcⅢ组44.992 518.64ab95.8058.65bc1.63abⅣ组44.362 544.86a95.8859.54ab1.61abcⅤ组44.542 576.51a96.4960.69a1.59cSEM0.102.530.350.310.01P值0.170.020.670.010.01注：同列数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.2抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡肉品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组鸡肉蒸煮损失显著降低（P0.05），且三组间差异不显著（P0.05）。Ⅴ组鸡肉蒸煮损失显著低于对照组和Ⅱ组（P0.05），且对照组和Ⅱ组间差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.20.004.T003表3抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡肉品质的影响项目蒸煮损失/%滴水损失%pH45 min值剪切力肉色45 min亮度红度黄度Ⅰ组（对照组）29.28a3.456.2826.5444.545.8910.87Ⅱ组27.94ab3.566.2228.2445.746.3111.43Ⅲ组26.94bc3.416.3323.6644.176.5611.98Ⅳ组26.57bc3.386.3422.8443.787.0710.43Ⅴ组26.34c3.436.3223.2044.396.6212.16SEM0.330.120.020.810.400.240.45P值0.010.910.570.120.680.700.772.3抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，Ⅱ组、Ⅳ组、Ⅴ组肉鸡血清T-AOC显著增加（P0.05）；各组肉鸡血清MDA含量有降低趋势，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.20.004.T004表4抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡血清抗氧化指标的影响项目SOD/（U/mL）GSH-Px/（U/mL）T-AOC/（U/mL）MDA/（μmol/L）Ⅰ组（对照组）68.86441.241.17b4.67Ⅱ组79.91470.061.40a4.10Ⅲ组69.07450.191.28ab4.33Ⅳ组70.44465.101.37a4.17Ⅴ组74.79476.181.42a4.03SEM0.935.170.030.31P值0.100.150.040.062.4抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡经济效益的影响（见表5）由表5可知，以市场中肉鸡的饲料成本基础日粮价格为2.5元/kg、市场肉鸡价格8.0元/kg进行经济效益指标计算。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组肉鸡经济效益利润均高于对照组，且利润相对值较对照组分别提高14.13%、4.62%、10.91%、8.99%。各组的欧洲效益指数分别为311.97、382.44、338.48、377.11、358.51。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.20.004.T005表5抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂对肉鸡经济效益的影响组别饲料单价/（元/t）耗料量/kg成本/元肉鸡总重/kg肉鸡单价/（元/kg）收入/元利润/元利润相对值/%欧洲效益指数Ⅰ组（对照组）2 500.0284.31710.75179.8081 438.42727.66100.00311.97Ⅱ组2 516.8308.10775.43200.7381 605.87830.46114.13382.44Ⅲ组2 524.0294.59743.55188.1081 504.80761.26104.62338.48Ⅳ组2 548.0306.62781.27198.5481 558.31807.03110.91377.11Ⅴ组2 572.0296.71742.76194.5381 514.70793.07108.99358.513讨论3.1抗菌肽-寡糖-有机酸复合物对肉鸡生长性能的影响提高生长性能是增加肉鸡经济收益的重要保障[5]。研究发现，单独添加抗菌肽、寡糖、有机酸均可提高动物的生长性能[6-8]。日粮中添加有机酸和植物精油制成复合物可降低肉鸡料重比，从而改善饲料转化率[4]。关静姝等[9]研究表明，抗菌肽和微生态制剂复合物可使肉鸡的生长性能得到明显提高，抗菌肽和微生态制剂联合添加时效果优于单独添加。余绍海[10]报道，在肉用番鸭日粮中同时添加甘露寡糖与抗菌肽两种物质，对其生长性能的影响效果优于单独使用甘露寡糖和单独使用抗菌肽的效果。朱随亮[11]研究表明，日粮中联合添加抗菌肽、酸化剂和功能性寡糖可以提高肉仔鸡生长性能。本研究结果表明，在基础日粮中添加200、400和600 mg/kg的抗菌肽-寡糖-有机酸复合物可使肉鸡的平均日增重显著提升，料重比显著下降，对肉鸡生长性能的改善具有积极作用。原因可能是抗菌肽-寡糖-有机酸复合物中的抗菌肽可抑制和清除肠道中的有害细菌，调节肠道菌群结构，提高养分在肠道中的利用率[12]。寡糖可使肠道的微生态环境更加平衡，提高了宿主肠黏膜免疫力，进而改善动物的生长性能[13]。有机酸制剂能够抑制肠道有害菌的生长繁殖，增强机体相关消化道酶活性，提高机体肠道内营养成分的消化利用率[14]。抗菌肽、寡糖和有机酸均具备调节肠道微生物菌群平衡，提高机体营养吸收利用的能力[11]，三者联合添加可能产生协同作用，从而提高肉鸡的生长性能。3.2抗菌肽-寡糖-有机酸复合物对肉鸡肉品质的影响肉品质指标主要包括蒸煮损失、滴水损失、pH值、剪切力、肉色等。肉的理化特性因蒸煮而发生变化[15-16]。系水力是影响肌肉品质的主要因素，蒸煮损失、滴水损失和肌肉系水力之间呈负相关[17]。滴水损失表示液体流出肌肉体外的程度，可以间接反映肉品质[18]。pH值是评价肉品质的主要指标，反映了动物被屠宰后体内糖原降解的速度[19]。剪切力越大，肌肉嫩度越低[20]。肉色是肌肉发生理化变化等综合指标的外在表现，是消费者评判肉质的直观指标。亮度、红度和黄度分别反映的是肌肉的色素含量、肌红蛋白含量和血红蛋白含量[21]。苗旭等[22]研究表明，日粮或饮水中添加200、300、400 mg/kg抗菌肽对肉鸡的肉品质均无显著影响。崔海燕[23]发现，肉鸡日粮中添加适量包被复合有机酸对其剪切力、pH值、系水力和肉色等肉品质指标均无显著影响。王盼盼等[24]研究表明，三黄鸡的蒸煮损失在代谢有机酸的作用下明显减少，其胸肌的剪切力也有下降的趋势。李万军等[25]报道，在大骨鸡日粮中同时加入有机酸和益生菌，其肌肉滴水损失和剪切力呈下降趋势。马彦博等[18]研究表明，将果寡糖加入固始鸡日粮中，可降低肌肉的滴水损失率，改善肌肉pH值与系水力，表明日粮中添加果寡糖可提高肉品质。李俊[26]研究表明，日粮中添加壳寡糖可减少肉鸡滴水损失和蒸煮损失，胸肌pH值升高，从而改善其肌肉品质。本研究表明，随着基础日粮中抗菌肽-寡糖-有机酸复合物添加水平的升高，肉鸡的蒸煮损失显著降低，提示在基础日粮中添加抗菌肽-寡糖-有机酸复合物在一定程度上改善了鸡肉品质。MDA是膜脂质过氧化而产生的物质[27]。本试验中蒸煮损失下降可能是由肌肉中MDA含量降低造成的。原因可能是复合物中的寡糖可以抑制肌肉糖酵解代谢，能够在一定程度上改善肌肉氧化状态[28]。但也不排除是有机酸和寡糖协同作用提高了肉鸡的抗氧化能力，从而在一定程度上改善了肉品质。3.3抗菌肽-寡糖-有机酸复合物对肉鸡血清抗氧化指标的影响机体抗氧化功能强弱主要与SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量和T-AOC有关[29]。SOD可以清除生物体内的自由基，GSH-Px是清除细胞内的H2O2和游离基的主要物质，T-AOC可以综合反映机体的抗氧化能力，MDA指标可以反映脂质过氧化速度[30-31]。丁雪梅等[3]研究发现，基础日粮中加入200、350和500 mg/kg的壳寡糖均可显著增强肉鸡血清GSH-Px的活性，减少血清MDA含量，增强血清T-AOC，进而使机体的血清抗氧化能力得到明显增强。孙全有等[32]报道，饲喂含有姜黄素与抗菌肽的饲料可显著提升肉仔鸡抗氧化功能。刘娇等[33]研究发现，日粮中添加代谢有机酸可提高AA肉鸡的日增重，增强抗氧化能力。Sharma等[34]研究表明，适量的抗菌肽Hispidalin可消除70%的DPPH自由基，能够抑制69.5%的脂质发生相关的氧化反应。苏维发等[35]研究发现，与对照组相比，饲喂壳寡糖的生长育肥猪的血清MDA含量明显降低，T-AOC明显提高。本研究表明，添加抗菌肽-寡糖-有机酸复合物可增强肉鸡血清T-AOC，降低MDA含量。原因可能是抗菌肽具有较强的抗氧化能力以及消除自由基的作用，而功能性寡糖也会促进机体某些抗氧化基因的转录与翻译，从而增强机体的抗氧化能力[35]。目前3种物质两两进行联合混用的研究仍较少，具体的作用机理仍需深入研究。4结论本研究结果表明，在科宝肉鸡基础日粮中添加适量抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂，可提高肉鸡的生长性能和肉品质，改善血清抗氧化功能，提高经济效益。本试验条件下，科宝肉鸡日粮中抗菌肽-寡糖-有机酸复合制剂的适宜添加量为400 mg/kg。