蛋白质需要量是动物饲养标准中的核心指标之一，国内对山绵羊蛋白质需要量的研究起步较晚[1]，通常将《肉羊饲养标准》（NY/T 816—2004）和NRC（2007）作为山绵羊营养需要量研究的主要依据。研究发现，NRC（2007）推荐的需要量水平并不完全适合国内的肉羊营养需要[2-3]。不同品种生长期羔羊对蛋白质的需要量也存在很大差异，杜泊绵羊生长期蛋白质需要量为125.12~170.00 g/d[4]，大尾寒羊生长前期和后期的蛋白质维持需要量分别为43和51 g/d[5]，而关于云南半细毛羊生长期的蛋白质需要量的研究尚未见报道。云南半细毛羊是国内培育的粗档半细毛羊新品种，其生长期的生长速度较快，对营养物质的需求量相对较大，对蛋白质的需要量尚无可参考的标准。本研究以生长期云南半细毛羊为试验对象，探讨不同日粮蛋白质水平对其生长性能及氮代谢的影响，确定其蛋白质需要量，为生长期的云南半细毛羊饲养提供参考。1材料与方法1.1试验动物及试验设计试验动物为体重（37.48±2.40）kg的生长期云南半细毛羊公羊50只，试验羊体况良好。将试验羊编号，随机分为5组，每组10个重复，每个重复1只羊。各组羊分别饲喂蛋白质水平为8.38%（试验1组）、10.42%（试验2组）、12.49%（试验3组）、14.99%（试验4组）、19.29%（试验5组）的日粮。试验期共44 d，其中预试期14 d，正式试验期30 d。1.2试验日粮云南半细毛羊的试验日粮共5组。日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.001.T001表1日粮组成及营养水平（风干基础）项目试验1组试验2组试验3组试验4组试验5组原料组成/%玉米35.0032.3526.0017.000麦麸04.004.158.0021.60豆粕3.006.8013.0018.1521.50玉米淀粉5.000000磷酸氢钙0.150000食盐0.500.500.500.500.50小苏打0.350.350.350.350.40预混料1.001.001.001.001.00玉米青贮38.0039.0039.0040.0045.00小麦秸17.0016.0016.0015.0010.00合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)9.379.349.359.349.34粗蛋白/%8.3810.4212.4914.9919.29中性洗涤纤维/%36.7838.6138.5339.9444.45酸性洗涤纤维/%22.0222.7322.9623.6224.44钙/%0.440.460.450.440.45磷/%0.200.260.260.300.47注：1.预混料为每千克日粮提供：Mn 98 mg、Fe 245 mg、Zn 80 mg、Cu 10 mg、I 2.5 mg、Se 0.65 mg、Co 0.65 mg、VA 10 000 IU、VD3 1 000 IU、VE 50 IU。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验前栏舍打扫干净并消毒，单栏饲喂试验羊。每天8：00、17：00按先粗料后精料的顺序各饲喂1次，羊自由饮水。进入圈舍后进行驱虫，饲养5 d后，称重，分组，进入预试期。期间记录各组试验羊的采食量，根据当天的采食量，合理调整第2 d的饲喂量，每天的剩料量保持在10%左右。1.4样品采集在正式试验的第11 d，每组挑选5只羊到代谢笼中单笼饲养5 d。每天全收粪、尿，记录每只羊的总采食量、排粪总量、排尿总量。试验开始前采集粗料200 g、精料200 g。消化代谢试验期间每天各采集1次粗料和1次混合精料，各200 g，-20 ℃保存；试验结束65 ℃烘干，室温冷却，粉碎，过40目筛，样品在自封袋中保存。试验当天将每只羊的鲜粪混匀，称重后各取总重的20%。按粪重的5%加入10%稀盐酸，-20 ℃保存，试验结束后65 ℃烘干，室温冷却，粉碎、过40目筛，样品在自封袋中保存。每天将各只羊的尿收集混匀并记录尿量，6层纱布过滤，取10%尿样添加入10%的盐酸，使尿样的pH值低于3进行固氮，-20 ℃保存。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能试验开始和结束当天上午，试验羊空腹称重并记录；试验期间，每天准确记录每只羊的干物质采食总量，计算总增重、平均日增重和料重比。总增重=末重-初重(1)平均日增重=总增重/试验天数(2)料重比=干物质采食量/平均日增重(3)1.5.2氮代谢参照张丽英[6]主编的《饲料分析及饲料质量检测技术》测定日粮、粪、尿中的营养成分。可消化氮=摄入氮-粪氮(4)沉积氮=摄入氮-粪氮-尿氮(5)氮表观消化率=可消化氮/摄入氮×100%(6)氮沉积率=沉积氮/摄入氮×100%(7)1.6数据统计与分析试验数据采用Excel 2010软件进行整理，SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1蛋白质水平对生长期云南半细毛羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验1组、试验2组羊的总增重和平均日增重显著低于试验3组、试验4组和试验5组（P0.05）。随日粮蛋白质水平升高，各组羊干物质采食量逐渐升高（P0.05）。试验5组羊干物质采食量显著高于试验1组、试验2组和试验3组（P0.05），试验4组羊干物质采食量显著高于试验2组（P0.05）。试验1组羊料重比显著高于其他各组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.001.T002表2蛋白质水平对生长期云南半细毛羊生长性能的影响组别初重/kg末重/kg总增重/kg平均日增重/[g/(头·d)]干物质采食量/[kg/(头·d)]料重比试验1组37.63±1.7842.66±1.75b5.04±0.79b167.92±26.24b1.46±0.18bc8.82±1.14a试验2组38.35±1.5743.51±2.51ab5.50±0.78b188.33±33.43b1.35±0.26c7.38±1.11b试验3组37.73±1.6944.78±2.09ab7.05±1.55a235.00±51.67a1.50±0.16bc6.63±1.57b试验4组38.18±2.8145.46±2.54a7.29±1.04a242.92±34.66a1.63±0.19ab6.79±1.13b试验5组38.06±2.2745.28±2.79a7.21±1.25a240.42±41.73a1.76±0.24a7.43±1.16b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2蛋白质水平对生长期云南半细毛羊氮代谢的影响（见表3）由表3可知，生长期云南半细毛羊各组间氮摄入量、尿氮、可消化氮及氮消化率均随着日粮蛋白质水平的升高而升高（P0.05）。试验1组、试验2组羊的沉积氮显著低于试验5组（P0.05），试验1组羊的沉积氮显著低于试验4组（P0.05）。各组羊的粪氮及氮沉积率差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.001.T003表3蛋白质水平对生长期云南半细毛羊氮代谢的影响组别粗蛋白质采食量/[g/(W0.75·d)]氮摄入/[g/(W0.75·d)]尿氮/[g/(W0.75·d)]粪氮/[g/(W0.75·d)]消化氮/[g/(W0.75·d)]沉积氮/[g/(W0.75·d)]氮消化率/%氮沉积率/%试验1组9.30±1.05d1.46±0.17d0.17±0.04d0.76±0.150.72±0.06e0.55±0.06c49.10±5.88e37.60±6.93试验2组12.22±1.50c1.95±0.24c0.36±0.09d0.80±0.111.16±0.26d0.80±0.32bc58.78±7.23d39.86±11.82试验3组15.76+1.52b2.52±0.24b0.67±0.07c0.90±0.051.62±0.28c0.95±0.24abc63.93±4.98bcd37.29±6.24试验4组17.96±2.43b2.87±0.39b0.98±0.12b0.89±0.091.98±0.31b0.99±0.27ab68.80±2.28b33.87±5.56试验5组24.88±2.86a3.98±0.46a1.63±0.26a0.88±0.123.10±0.36a1.37±0.54a77.81±1.42a33.90±11.222.3生长期云南半细毛羊的采食氮与沉积氮的关系本研究未进行低氮日粮试验，但摄入氮（NI）与粪氮（FN）、摄入氮与尿氮（UN）之间均存在拟合度极高的抛物线性回归关系，见图1、图2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.001.F001图1粪氮与采食氮的回归关系10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.001.F002图2尿氮与采食氮的回归关系FN=0.003NI2+0.007NI+0.782（R2=0.981）UN=0.065NI2-0.040NI+0.16（R2=0.994）由图1可知，据FN与NI间的回归关系，得出生长期云南半细毛羊的代谢粪氮（MFN）排泄量（g/d）为：MFN=0.782 W0.75。由图2可知，据UN与NI间的回归关系，得出云南半细毛羊的内源尿氮（EUN）排泄量（g/d）为：EUN=0.160 W0.75。根据MFN和EUN，得出生长期云南半细毛羊的内源N损失为0.942 g/(W0.75·d)，相当于内源蛋白损失为0.942 g/(W0.75·d)×6.25=5.887 5 g/(W0.75·d)。2.4生长期云南半细毛羊蛋白质需要量分析根据营养学原理，动物的维持净蛋白质需要量即其蛋白质的内源损失。因此，维持净蛋白需要量是5.887 5 g/(W0.75·d)。生长期绵羊，日粮蛋白质转化为净蛋白的效率是40%，则维持蛋白质需要量为5.887 5 g/(W0.75·d)/40%=14.72 g/(W0.75·d)。按综合法，以平均日增重（ADG）为标识，以试验4组羊的ADG最高，该组羊的蛋白质摄入量为17.96 g/(W0.75·d)。因此，增重需要的蛋白质为：17.96 g/(W0.75·d)-14.72 g/(W0.75·d)=3.24 g/(W0.75·d)。试验4组羊日增重为242.92 g/d，试验羊日增重100 g需要的蛋白质为3.24 g/(W0.75·d)/242.92 g/d×100 g/d=1.33 g/(W0.75·d)。3讨论3.1蛋白质水平对生长期云南半细毛羊生长性能的影响蛋白质的合理供应对动物的健康和生长性能的发挥具有重要作用，动物采食量受日粮蛋白质水平的影响，而动物对营养素的摄入又受采食量的影响，最终影响动物日增重。日粮蛋白质水平对生长期羊生长性能的影响因品种、性别的不同而存在差异。巩峰等[4]研究表明，日粮蛋白质水平为9.79%、12.27%、14.18%时，杜泊羊生长期公母羊日采食量差异不显著，但其日增重显著增加，料重比显著降低。吴玉江等[7]研究得出，生长期西藏白绒山羊日增重、干物质采食量均随日粮蛋白质水平的增加而显著增加。Atti等[8]研究表明，山羊的平均日增重随着日粮蛋白质水平增加而显著提高。张宏伟[9]报道，放牧的高山美利奴育成羊随着自由采食量（40%、60%、80%、100%）的提高，末重、平均日增重、氮采食量、沉积氮显著降低；日粮蛋白质水平为11.67%、12.74%、14.07%时，未对杂交肉羊生长期的干物质采食量和日增重产生影响。张兵等[10]对中卫山羊羯羊的研究得出，日粮蛋白质水平为10.23%、11.41%、12.82%时，羊的平均日增重先升高后降低，蛋白质水平为11.41%时料重比最低。杜湖羊杂交F1代4~6月龄母羔平均日增重随日粮蛋白质摄入量的增加而显著增加[11]。王晨等[12]研究得出，随着饲喂水平的降低，高山美利奴育成羊公羊和育成母羊的末重、平均日增重、干物质采食量、氮采食量、沉积氮显著降低。日粮蛋白质水平对羊增重效果的不同影响，还可能是因为地理环境、品种、生理阶段的不同而对蛋白质的需要量不同。在本试验条件下，日粮蛋白质含量从8.38%升至12.49%时，生长期云南半细毛羊的平均平均日增重和干物质采食量显著增加，料重比降低；当蛋白质水平从12.49%升至19.29%时，干物质采食量、平均日增重的增加不显著，料重比降低不显著，与前人研究结果相似。当日粮蛋白质水平处于适宜浓度时，随着蛋白质水平提高，平均日增重增加，以满足动物生长需要；而当日粮蛋白质水平达到一定浓度后，平均日增重有所降低，可能是由于蛋白水平过高造成体内营养不平衡[13]。本试验结果表明，生长期云南半细毛羊的蛋白质添加水平为12.49%时，即可满足其生长需要，继续增加蛋白质并未显著提高日增重、沉积氮和降低饲料报酬。3.2蛋白质水平对生长期云南半细毛羊氮代谢的影响反刍动物对蛋白质的消化代谢除了受瘤胃微生物的影响，还受到粪氮和尿氮的排泄量影响[14]。刘海斌等[15]报道，提高蛋白质水平可显著提高辽宁绒山羊的沉积氮、可消化氮及尿氮，显著降低粪氮排放量。吴玉江等[7]也报道，日粮蛋白水平可显著影响氮代谢。周利勇等[16]报道，日粮蛋白质水平不影响粪氮及蛋白质表观消化率，但可提高蛋白质水平，并具有增加蛋白质摄入量和沉积氮的趋势。本研究表明，生长期云南半细毛羊的氮摄入量、尿氮排泄量和可消化氮随日粮蛋白质水平的增加而显著增加，与前人研究结果相似；而粪氮的排泄量却不受日粮蛋白质水平的影响，与王思宇等[17]的报道相似。赵若含等[18]报道，粪中蛋白质的排放量通常不受日粮蛋白质水平的影响，当日粮蛋白质水平过高时，氮主要通过尿液排出。本试验的研究结果与之相同，尿氮排放量随日粮蛋白质水平的增加而显著增加。也有研究表明，日粮蛋白质水平显著影响氮沉积量[19-20]，当日粮中蛋白质水平无法满足动物需要水平时，适当提高蛋白质水平可以提高蛋白质消化率；反之，再提高蛋白质水平，会降低动物对蛋白质的利用率，增加动物的消化器官负担[21]，与本试验结果一致。本试验中，日粮蛋白质水平由8.38%升至12.49%时，氮沉积量也逐渐增加；当日粮中蛋白质水平由12.49%上升至19.29%时，氮的沉积量未显著升高，氮沉积率逐渐降低；日粮蛋白质水平为19.29%时，氮的沉积率最低。3.3蛋白质需要量的研究不同品种、性别的羊在其生长期对蛋白质的维持需要量不同。Martins等[22]研究指出，特克赛尔羔羊的净蛋白质维持需要量为1.24 g/(kg·BW0.75·d)，和王晨等[12]研究中自由采食100%、80%、60%、40%的高山美利奴育成羊母羊和育成公羊的净蛋白维持需要量为1.19和1.38 g/(kg·BW 0.75·d)相似。本试验通过摄入氮量与粪氮、尿氮之间的回归分析，得出体重为37 kg左右的生长期云南半细毛羊的蛋白质维持需要量为14.72 g/(kg·W0.75·d)，远高于生长期杜泊绵羊的公、母羊的蛋白质维持需要量3.87、3.86 g/(kg·W0.75·d)[4]以及杂种肉绵羊的3.88 g/(kg·W0.75·d)[9]。通过综合法得出，生长期云南半细毛羊的蛋白质需要量为17.94 g/(kg·W0.75·d)。在相同体重和日增重条件下，与中国肉羊饲养标准（2004）相比较，本试验得出的蛋白需要量高于肉羊饲养标准的蛋白需要，也高于巩峰等[4]研究得出平均日增重达150~250 g/(头·d)的35~50 kg生长期杜泊羊，蛋白质需要量为125.12~170.00 g/(头·d)，而与张冠武等[23]研究得出的体重为35 kg、日增重为200 g/(头·d）的杂交绵羊公羊粗蛋白质需要量202 g/d[14.67 g/(kg·W0.75·d)]相近。本试验得出的蛋白维持需要量和蛋白需要量虽然高于其他相关研究，但每增重1 g需要蛋白质0.013 3 W0.75，却低于生长期杜泊绵羊的公母羊0.44和0.42 g[4]和生长期大尾寒羊的0.58 g[9]，可能与生长期云南半细毛羊平均日增重远高于其他品种的生长期日增重有关。4结论本试验结果表明，日粮蛋白质水平不影响生长期云南半细毛羊的粪氮排泄量，但对干物质采食量、平均日增重、料重比、可消化氮、沉积氮、氮的沉积率和消化率影响显著。生长期云南半细毛羊蛋白质维持需要量为14.72 g/(W0.75·d)，日增重100 g需要的蛋白质为1.33 g/(W0.75·d)。