蛋白质是动物生长发育的重要营养物质。豆粕中蛋白含量较高,营养均衡,是优质的植物蛋白原料,在动物饲料中应用十分广泛[1],是动物饲粮中植物蛋白质的主要来源[2]。但豆粕中含有植酸、胰蛋白酶抑制剂、低聚糖、大豆抗原蛋白等多种抗营养因子,阻碍动物对营养物质的消化吸收和充分利用[3],严重时还会引起动物腹泻[4]。发酵豆粕可以降低豆粕中的抗营养因子含量[5-6],提高粗蛋白水平及其他一些营养成分含量,改善饲粮的适口性,从而提高饲粮的消化率和利用率,改善动物的生长性能[7-8]。高升等[9]研究发现,利用10%发酵豆粕代替豆粕饲喂黑猪仔猪,能够改善仔猪的生长性能。王福慧等[10]研究表明,发酵豆粕能够提高犊牛的平均日增重、饲料的转化率,提高养殖经济效益。因此,本试验研究发酵豆粕对周岁伊犁马生长性能、抗氧化能力的影响,为发酵豆粕在伊犁马幼驹中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料发酵豆粕由植物乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母发酵而成,其粗蛋白≥48%,酸溶蛋白≥10%,由新疆酵博仕生物科技有限公司提供。1.2试验设计选取体况良好、体重相近的周岁伊犁马15匹,随机分为3组,每组5个重复(2公、3母),每个重复1匹马驹。对照组马驹饲喂添加5%普通豆粕的日粮,试验Ⅰ组使用2.5%发酵豆粕代替普通豆粕,试验Ⅱ组使用5%的发酵豆粕代替普通豆粕。预试期7 d,正式试验期56 d。试验在2021年6月至8月在昌吉良源牧业马场进行。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.014.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米25.00消化能/(MJ/kg)10.96豆粕5.00粗蛋白质/%10.96燕麦26.00粗脂肪/%6.29大麦33.00钙/%0.49豆油3.00磷/%0.26糖蜜3.00预混料5.00注:1.预混料购自成都蜀星饲料有限公司。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验期间,每匹马驹饲喂8 kg/d青干草(干草与苜蓿),精料每天饲喂3次(8:00、13:00和19:00),每次每匹马驹饲喂1 kg精料,自由饮水。饲喂时,马驹先采食青干草,再饲喂精料补充料,待精料采食完毕后,继续采食青干草。每天观察马驹健康状态,定期刷洗,驱虫。1.4测定指标及方法1.4.1体重及体尺指标试验第0、28、56 d早晨,马驹空腹称重,测量体高、体长、胸围、管围,计算各指标的平均日增长量。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日增长量=(末值-初值)/试验天数 (2)1.4.2血清抗氧化指标试验最后1 d,马驹颈静脉采血10 mL,室温静置2 h,3 000 r/min离心10 min,取上层清液分装至2 mL冻存管中,-20 ℃保存。测定血清抗氧化指标包括:谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA),均由北京北方生物技术研究有限公司进行检测。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵豆粕对伊犁马幼驹体重的影响(见表2)由表2可知,试验1~28 d,与对照组相比,试验Ⅱ组马的体增重提高了22.42%(P0.05)。试验29~56 d,与对照组相比,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组马的体增重显著升高(P0.05)。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组马的总增重分别提高了25.97%、38.81%(P0.01);试验Ⅰ组与试验Ⅱ组马的平均日增重提高了26.92%、38.45%(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.014.T002表2发酵豆粕对伊犁马幼驹体重的影响组别初重/kg28 d体重/kg56 d体重/kg增重/kg总增重/kg平均日增重/[(kg/匹·d)]1~28 d29~56 d对照组239.40±11.97271.50±11.88283.30±11.6532.10±2.75b11.80±3.98b43.90±4.36Bb0.78±0.08Bb试验Ⅰ组236.00±18.45271.70±22.11291.30±25.4935.70±5.63ab19.60±5.49a55.30±8.09Aa0.99±0.14Aa试验Ⅱ组237.40±25.32276.70±23.89297.90±21.5739.30±5.46a21.20±4.16a60.50±4.39Aa1.08±0.08Aa注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2发酵豆粕对伊犁马幼驹体尺的影响(见表3)由表3可知,试验期29~56 d,试验Ⅰ组马驹的体增高、体增长显著高于对照组(P0.05)。与对照组相比,试验Ⅱ组马驹体长最终增长量、平均日增长量显著提高(P0.05)。试验1~28 d,与对照组相比,试验Ⅰ组马驹胸围增长提高了43.75%(P0.05),试验Ⅱ组马驹胸围增长提高了78.13%(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.014.T003表3发酵豆粕对伊犁马幼驹体尺的影响项目体高体长胸围管围初始/cm对照组135.80±2.95129.60±2.30143.40±6.0717.60±0.42试验Ⅰ组135.30±4.06129.00±3.39140.40±3.2117.20±0.45试验Ⅱ组136.40±4.29127.20±2.05140.50±3.8916.80±0.451~28 d增长量/cm对照组3.70±0.913.10±1.5203.20±0.84Bb0.10±0.22试验Ⅰ组2.80±1.642.00±1.414.60±1.34ABa0.00±0.00试验Ⅱ组3.30±1.204.40±3.315.70±0.27Aa0.10±0.2229~56 d增长量/cm对照组1.40±0.65b2.70±0.84b4.60±1.140.20±0.45试验Ⅰ组3.40±0.96a5.40±2.19a4.40±1.820.30±0.27试验Ⅱ组2.40±0.74ab4.20±1.89ab4.20±0.450.30±0.45总增量/cm对照组5.10±0.425.80±1.30b7.80±1.790.30±0.45试验Ⅰ组6.20±2.467.40±1.52ab9.00±1.730.30±0.27试验Ⅱ组5.70±0.578.60±1.52a9.90±0.420.40±0.42平均日增长量/(cm/匹)对照组0.09±0.010.10±0.02b0.14±0.030.01±0.01试验Ⅰ组0.11±0.040.13±0.03ab0.16±0.030.01±0.00试验Ⅱ组0.10±0.010.15±0.03a0.18±0.010.01±0.012.3发酵豆粕对伊犁马幼驹血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,试验Ⅱ组马驹血清SOD活性显著高于对照组与试验Ⅰ组(P0.05);试验Ⅱ组血清CAT活性显著高于试验Ⅰ组(P0.05);试验Ⅱ组马驹血清GSH-Px活性、T-AOC均高于对照组(P0.05);试验Ⅱ组马驹血清MDA含量低于对照组与试验Ⅰ组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.014.T004表4发酵豆粕对伊犁马幼驹血清抗氧化指标的影响组别GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组1 095.29±44.20177.08±6.86b3.42±0.57ab11.07±0.674.49±0.27试验Ⅰ组1 075.68±41.99173.83±8.35b3.21±0.58b10.94±0.784.54±0.32试验Ⅱ组1 123.35±17.73187.31±5.96a4.06±0.16a11.73±0.314.22±0.103讨论3.1发酵豆粕对伊犁马幼驹体重的影响动物的生长发育与营养水平有着密不可分的关系[11]。研究表明,饲喂高营养水平的日粮可以提高马驹体重[12]。研究表明,微生物发酵可以降低豆粕抗营养因子含量,提高豆粕的营养水平[13]。植物乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌、酿酒酵母菌在发酵过程中能够分泌蛋白酶类等物质,可以降解一些大分子蛋白质,转化为易于吸收的小分子蛋白或小肽,在发酵过程会产生可以直接被吸收的有机磷,提高豆粕中营养物质的利用效率[14]。Kim等[15]研究发现,使用发酵豆粕代替普通豆粕,能够显著提高犊牛的体增重以及母乳的摄入量。Chi等[16]研究发现,豆粕经乳酸杆菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、酿酒酵母菌发酵后,可以显著提高豆粕的营养物质含量和生物活性。研究发现,给犊牛直接补喂枯草芽孢杆菌与乳酸杆菌也可以提高犊牛的平均日增重与饲料效益[17-18]。本试验中,试验Ⅰ组与试验Ⅱ组马的总增重分别提高了25.97%、38.81%,平均日增重提高了26.92%、38.45%,上述试验结果一致。原因可能是豆粕经发酵后降低了豆粕中抗营养因子含量,将蛋白降解为可吸收的一些氨基酸与小肽,提高了饲料利用率,从而提高了马驹的体重。3.2发酵豆粕对伊犁马幼驹体尺的影响营养与遗传是决定动物生长发育的决定因素[19]。蛋白质是动物机体的重要组成部分,蛋白质的利用效率直接影响畜禽的生长性能[20]。豆粕经发酵后提高了其蛋白水平及其他营养物质的利用率[9]。刘栩州[21]研究发现,在仔猪饲粮中添加5%的发酵豆粕可以提高仔猪的生长性能。王慧等[22]研究表明,使用发酵豆粕代替日粮中75%豆粕可以提高育肥猪的生长性能。蔡爱平[23]研究表明,在日粮中添加6%发酵豆粕可显著改善生长猪的生长性能。本研究发现,在试验1~28 d,试验Ⅱ组马的胸围增长明显高于对照组;试验29~56 d,试验Ⅰ组马的体增高与体增长均显著提高。原因可能是豆粕经发酵后提高了豆粕的营养物质含量,发酵菌种所含的活性物质可以刺激消化酶产生,提高了饲料中营养物质的转化与利用率,促进了马驹的生长发育。3.3发酵豆粕对伊犁马幼驹抗氧化能力的影响在应激状态时,活性氧会造成动物机体内氧化与抗氧化作用处于不平衡状态,会造成机体组织细胞损伤,甚至造成细胞凋亡[24-25]。GSH-Px是动物体内重要的活性氧自由基清除剂[26],GSH-Px以谷胱甘肽为还原剂,将动物体内的氢过氧化物催化还原成水或醇类物质。CAT可以将过氧化氢分解成为水和氧气[27],从而清除体内的过氧化物,维持机体正常生理功能[28]。SOD可以降解自由基在细胞内含量,保护细胞不被活性氧损伤[29]。MDA含量可以从侧面反映机体细胞由于自由基引起的损伤程度[30]。T-AOC可以体现动物机体总体的氧化应激水平,作为衡量动物机体抗氧化能力的综合指标[31]。发酵豆粕含有大量的益生菌,在发酵过程中会产生有机酸,可以清除动物体内的自由基,增强机体抗氧化能力[30]。发酵豆粕中的抗氧化肽结构稳定,抗氧化能力强,具有保护组织与细胞的作用[32]。冯海锋[33]研究表明,发酵豆粕可以显著提高母猪哺乳期血清中的总抗氧化能力,显著降低血清中MDA水平。鲁春灵等[24]使用发酵豆粕饲喂蛋鸡,发现随着发酵豆粕添加比例增加,肉鸡血清SOD活性显著提高,血清MDA含量显著降低。本研究中,随着发酵豆粕添加量增加,马血清中GSH-Px活性与T-AOC有增加趋势,MDA含量有降低趋势,SOD与CAT活性显著提高。原因可能是随着发酵豆粕添加量与饲喂时间变化,马驹机体内积累了抗氧化物质,从而改善了机体的抗氧化能力。4结论在日粮中添加发酵豆粕可以提高伊犁马驹的生长性能与抗氧化能力,添加5%发酵豆粕效果较好。
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