黄芪多糖（APS）是从中草药黄芪中提取出来的一种活性多糖，具有免疫调节、抗氧化、抗炎、抗病毒等生物学功能[1-2]。大量研究表明，APS能够提高动物机体的体液和细胞免疫力，促进幼龄动物的免疫器官发育，进而提高动物机体的整体免疫功能，还能在一定程度上提高畜禽的生长及生产性能和改善畜产品品质[3]。Tan等[4]研究表明，APS不仅可以提高畜禽的生长性能，而且能改善幼龄动物的肠道健康，促进其肠道发育等功能。APS作为一种中草药纯天然产品，价格低廉、来源广泛，即使长期使用对动物组织细胞的毒副作用较小，畜产品中残留量很低[5]。因此，APS在畜禽养殖生产的应用效果较为理想。羔羊在断奶阶段会受到严重的断奶应激，进而影响断奶羔羊的生长发育及肠道健康等问题，给养殖者带来严重的经济损失。APS作为一种绿色饲料添加剂，大量相关的研究主要集中在猪、鸡等的养殖生产中，在断奶羔羊养殖生产中的应用研究甚少。试验旨在研究APS对断奶羔羊生长性能、血液生化指标及免疫力的影响，并探讨黄芪多糖合适的添加剂量，为其在断奶羔羊的养殖生产中的合理应用提供数据支撑。1材料与方法1.1试验材料试验所用的黄芪多糖纯度含量70%，购自山东方舟生物科技有限公司。1.2试验动物及试验地点试验选用体重相近、健康的45日龄断奶羔羊80只，试验羊由河南绿塬畜牧实业有限公司提供，在河南农业职业学院微生物实验室进行。1.3试验设计及日粮试验采用单因素完全随机试验设计，将选择的80只羔羊完全随机分为4组，每个处理组4个重复，每重复5只羔羊。试验周期一共37 d，其中预试验7 d，正式试验30 d。对照组羔羊饲喂基础日粮，试验组羔羊饲喂含有0.1、0.2、0.4 g/kg的黄芪多糖日粮。试验羔羊的基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.005.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米48.20代谢能/(MJ/kg)12.45豆粕24.50粗蛋白/%17.98食盐0.45粗脂肪/%2.25石粉1.20中性洗涤纤维/%16.02麸皮20.00酸性洗涤纤维/%24.75磷酸氢钙1.15钙/%1.34预混料4.50磷/%0.55注：1.每千克预混料含有：VA 100 000 IU、VD 300 000 IU、VE 1 800 mg、烟酸350 mg、Zn 2 g、Cu 0.2 g、Mn 2.2 g、Ca 140 g、P 16 g、NaCl 80 g。2.营养水平中代谢能为计算值，其他均为实测值。1.4饲养管理试验开始前预试验期为每只羔羊打上耳标，方便记录数据。预试验期进行三联四防疫苗免疫，并使用伊维菌素为羔羊驱虫。每日8：00和16：00饲喂2次，自由饮水。每日清理圈舍保证饲养环境卫生，定期进行简单的消毒处理。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能正式试验开始和结束当天，羔羊禁食12 h后，准确称量其空腹体质量，并准确记录每组羔羊每天的采食量，采食数据用于计算羔羊的平均日增重、平均日采食量和料重比，计算公式如下：平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=试验期总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2血液生化指标试验第30 d，每个重复选取3只羔羊进行颈静脉采血10 mL，3 500 r/min离心10 min，取上层血清检测血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、尿素氮、总蛋白、胆固醇等血清生化指标，采用全自动生化分析仪进行检测，试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司。其余血清-20 ℃保存备用，用于免疫力指标的检测。1.5.3免疫力指标试验30 d采集的血液样品用于测定的免疫力指标包括：免疫球蛋白A（IgA）、G（IgG）M（IgM）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。以上免疫指标用ELISA的方法进行检测，试剂盒购自南京建成生物工程研究所，按照试剂盒说明书进行检测。1.6数据统计与分析试验记录和检测的数据采用Excel进行简单的整理，采用SPSS 20.0统计软件进行单因素方差分析检验，使用Duncan's法进行组间数据的多重比较，数据结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，在断奶羔羊日粮中添加黄芪多糖显著提高羔羊的生长性能。各处理组间的试验初重和平均日采食量无显著性差异（P＞0.05）。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的末重和平均日增重显著高于对照组（P0.05），分别提高8.92%、7.90%和32.84%、28.36%；0.1 g/kg APS组的末重和平均日增重比对照组略高，但差异不显著（P＞0.05）。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的料重比显著低于对照组（P0.05），分别降低24.55%和25.45%；0.1 g/kg APS组的料重比对照组略低，但差异不显著（P＞0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.005.T002表2不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊生长性能的影响项目对照组0.1 g/kg APS组0.2 g/kg APS组0.4 g/kg APS组初重/kg9.65±0.189.70±0.179.55±0.129.60±0.14末重/kg13.67±0.23b14.03±0.26ab14.89±0.21a14.75±0.20a平均日增重/(kg/d)0.13±0.02b0.14±0.03b0.18±0.04a0.17±0.03a平均日采食量/(g/d)0.30±0.080.31±0.050.30±0.060.29±0.04料重比2.24±0.25a2.15±0.20ab1.69±0.17b1.67±0.19b注：同行数据肩标小写字母不同表示差异显著（P＜0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊血液生化指标的影响（见表3）由表3可知，在断奶羔羊日粮中添加黄芪多糖可以改善羔羊的生长性能。各处理组间断奶羔羊血清中的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐活性无显著性差异（P＞0.05），白蛋白、总蛋白、尿素氮、甘油三酯、血糖含量无显著性差异（P＞0.05）。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的碱性磷酸酶活性显著低于对照组（P0.05），分别降低18.75%和16.81%；0.1 g/kg APS组断奶羔羊血清中碱性磷酸酶活性低于对照组，但差异不显著（P＞0.05）。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的胆固醇含量显著低于对照组（P0.05），分别降低13.79%和12.32%；0.1 g/kg APS组的胆固醇含量对照组略低，但差异不显著（P＞0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.005.T003表3不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊血液生化指标的影响项目对照组0.1 g/kg APS组0.2 g/kg APS组0.4 g/kg APS组谷丙转氨酶/(U/L)24.89±2.1623.26±1.8922.75±2.0323.69±2.17谷草转氨酶/(U/L)90.34±10.2389.12±10.0189.35±9.4888.74±9.83碱性磷酸酶/(U/L)508.31±87.34b436.86±80.20ab412.98±76.04b422.86±76.15b白蛋白/(g/L)33.41±2.4632.79±1.9732.19±1.8632.45±2.03总蛋白/(g/L)65.25±1.6767.23±1.7069.05±1.8968.75±2.04尿素氮/(mmol/L)5.28±1.105.03±1.124.96±0.935.14±1.20甘油三酯/(mmol/L)0.34±0.430.32±0.400.29±0.380.31±0.35胆固醇/(mmol/L)2.03±0.08a1.86±0.07ab1.75±0.04b1.78±0.05b血糖/(mmol/L)3.65±1.033.51±1.053.49±1.123.46±1.21肌酐/(μmol/L)53.12±4.1451.67±4.0251.28±3.8550.76±3.832.3不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊免疫指标的影响（见表4）由表4可知，在断奶羔羊日粮中添加黄芪多糖可以提高羔羊的免疫力。各个处理组间断奶羔羊血清中的IgM、IL-2、IL-6含量无显著性差异（P0.05）。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的IgA含量显著高于对照组（P0.05），分别提高9.86%和10.80%；0.1 g/kg APS组的IgA含量比对照组略高，但差异不显著（P0.05）。0.1 g/kg APS、0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的IgG含量显著高于对照组（P0.05），分别提高15.99%、23.18%和24.87%。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的TNF-α含量显著低于对照组（P0.05），分别降低16.50%和15.09%；0.1 g/kg APS组的TNF-α含量比对照组略低，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.005.T004表4不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊免疫指标的影响项目对照组0.1 g/kg APS组0.2 g/kg APS组0.4 g/kg APS组IgA/(g/L)2.13±0.12b2.28±0.12ab2.34±0.14a2.36±0.15aIgM/(g/L)1.06±0.091.09±0.071.11±0.101.12±0.11IgG/(g/L)13.63±1.34c15.81±1.40b16.79±1.52a17.02±1.63aIL-2/(ng/L)54.26±3.2155.71±3.3454.03±3.0255.25±3.18IL-6/(ng/L)66.92±3.6565.87±3.046484±3.1564.48±3.49TNF-α/(ng/L)520.76±67.12a482.37±63.90ab434.81±60.92b442.19±61.41b3讨论3.1不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊生长性能的影响黄芪多糖是一种新型天然绿色中草药提取物饲料添加剂。黄芪多糖含有丰富的营养物质，如多糖、氨基酸、维生素、微量元素及一些未知的生长因子等[6]。黄芪多糖可以促进幼龄动物免疫器官的发育，提高动物机体的免疫力，增强动物的抗病能力，提高动物的生长性能，在畜禽养殖各个领域都有很好的应用效果[3]。在断奶羔羊的研究中，在日粮中添加0.2 g/kg的黄芪多糖可以明显提高羔羊的日增重，降低料重比[7]。在湖羊羔羊的试验中，在精料中添加3%的黄芪多糖可以显著提高生长性能，极显著降低料重比[8]。在断奶仔猪的研究中，黄芪多糖可以显著提高平均日增质量和料重比[9-11]。本试验研究表明，在断奶羔羊日粮中添加0.1、0.2、0.4 g/kg的黄芪多糖可以提高羔羊的试验末重、平均日增重，降低料重比，其中0.2和0.4 g/kg试验效果较好，与上述研究结果基本一致。黄芪多糖提高动物生长性能的原因主要是可以提高动物机体的免疫力，并促进动物对营养物质的消化吸收效率。研究表明，黄芪多糖可显著提高动物对日粮中干物质、粗蛋白质、粗脂肪等营养物质的表观消化率，且能提高胰腺淀粉酶和脂肪酶的活性，进而促进动物的生长性能[5,8]。3.2不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊血液生化指标的影响血清生化指标反映动物机体的健康状态，并能反映动物机体新陈代谢的情况。本试验研究表明，断奶羔羊日粮中添加黄芪多糖对谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐活性，白蛋白、总蛋白、尿素氮、甘油三酯、血糖含量未产生负面影响，指标数值与对照组数值接近。0.2 g/kg APS组和0.4 g/kg APS组的碱性磷酸酶活性和胆固醇含量显著低于对照组（P0.05）。王庭祥等[12]研究黄芪多糖毒性，发现黄芪多糖属于无毒性物质。本试验结果也表明，黄芪多糖对断奶羔羊肝肾指标无显著影响，对断奶羔羊肝肾无负面效应，与刘邦等[13]研究诺丽果粉和黄芪多糖对海南黑山羊血清生化指标的影响的结果类似。以上研究表明，黄芪多糖作为天然绿色添加剂可以在动物养殖生产中应用，不会对动物肝肾等内脏器官产生负面影响，在一定添加量范围内可以安全放心使用。3.3不同水平的黄芪多糖对断奶羔羊免疫指标的影响动物体内的IgA可以阻止微生物在呼吸道上皮附着、抑制病毒增值，是阻碍病原体入侵动物机体的第一道防线[14]。IgG具有激活补体、中和毒素的作用[15]。IgM在动物机体感染初期起着非常重要的作用，是动物感染初期就产生的免疫球蛋白，抗体效能比较高，在机体受病原感染后能与机体的补体结合，进而将病原体溶解消除[16]。本试验研究表明，在断奶羔羊日粮中添加一定含量的黄芪多糖可以提高血清中IgA和IgG含量，降低TNF-α含量，说明黄芪多糖可以显著提高动物机体的免疫力。试验结果与鲍玉林等[17]使用黄芪多糖在舍饲藏羊的研究结果和杨浩杰[18]使用黄芪多糖在小尾寒羊的研究结果一致。黄芪多糖提高动物免疫力可能是由于黄芪多糖中的葡萄糖、果糖、阿拉伯糖、己糖醛酸、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等营养成分诱导动物机体生成大量的干扰素，进而增强其机体免疫功能。4结论在断奶羔羊日粮中添加一定量的黄芪多糖可以提高断奶羔羊的生长性能、改善血液生化指标，并提高断奶羔羊机体的免疫力。综合试验结果及成本因素，在断奶羔羊日粮中添加0.2 g/kg的黄芪多糖较为适宜。