半刺厚唇鱼(Acrossocheilius hemispinus),俗称石板、坑鱼、石湾,是福建省重要的小型经济鱼类,其肉质鲜美细腻、适应性强,具有较高的经济、生态和遗传育种价值。近年来,由于捕捞量的增大,半刺厚唇鱼野生资源量急剧减少[1-2]。半刺厚唇鱼人工养殖方法为土池主养、土池套养、水泥池精养、稻田生态养殖等,但均处在起步阶段,养殖技术还不成熟,养殖效果不理想,尚未形成规模和产业[3-5]。半刺厚唇鱼的生长速度缓慢,导致其养殖周期长,制约了半刺厚唇鱼的产业化发展。因此,研究如何提升半刺厚唇鱼的生长性能对实际生产具有重要意义。本试验在饵料中分别添加小球藻粉和螺旋藻粉,探究添加藻粉对半刺厚唇鱼的消化酶活性、抗氧化指标及体成分的影响,旨在为有效提高半刺厚唇鱼生长速度和专用配合饲料的研发提供参考。1材料与方法1.1时间与地点试验于2021年6月19日至9月19日在福建省南平市顺昌县兆兴鱼种养殖有限公司进行。1.2试验设计选取人工繁育规格一致、体型正常、体质健壮的半刺厚唇鱼秋苗2 700尾,平均体重为7.94 g/尾,平均全长为8.82 cm/尾,随机分为3组,每组3个重复,每个重复300尾鱼。试验选用鳗粉系列作为基础饵料,蛋白质含量实测值为40%,粗脂肪含量为5.10%。1组(对照组)半刺厚唇鱼饲喂基础饵料,2组在基础饵料中添加5%小球藻,3组在基础饵料中添加5%螺旋藻。将混合饵料揉成面团状,加水量为饵料干重1.2倍,每餐现揉现喂。试验期90 d。1.3饲养管理鱼苗放养前使用0.5 mg/L聚维酮碘浸及0.3%盐水泡2 d,镜检无异常后再分池养殖。试验在温棚内的玻璃钢桶中进行,圆桶内径3.0 m,高度1.2 m,有单独的进排水系统、微孔增氧设施,共9个圆桶。整个试验期内,水温变化范围21.0~29.5 ℃,pH值7.0~8.5,溶氧5.0~7.0 mg/L。每天定时进排水排污,换水量达到50%,及时将桶中残饵和粪便排出。每天8:00、17:00投喂两次,日投饵量为鱼体重的2%~3%。1.4测定指标及方法1.4.1消化酶活性试验最后1 d,将试验鱼停食24 h,每组取6尾鱼,处死,解剖,取出肠道,使用冰冻去离子水冲净内容物,滤纸揩干,置于超低温冰箱保存。使用试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)、胰蛋白酶(TRY)活性。1.4.2抗氧化指标试验最后1 d,每组另取鱼6尾,断尾取血,3 500 r/min离心5 min取血清。超氧化物歧化酶活性(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定。1.4.3肌肉常规营养成分每组取6尾鱼麻醉,于-20 ℃保存,用于测定全鱼常规营成分。水分含量采取常压103 ℃恒温干燥法(GB 5009.3—2010)测定,凯氏定氮法(GB 5009.5—2010)测定粗蛋白质含量,索氏抽提法(GB/T 5009.6—2003)测定粗脂肪含量,粗灰分含量采用马福炉550 ℃高温灼烧法(GB 5009.4—2010)测定。1.5数据统计与分析数据采用Microsoft Excel初步处理,SPSS 20.0进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1藻粉对半刺厚唇鱼肠道消化酶活性的影响(见表1)由表2可知,与对照组相比,试验2组、3组鱼肠道AMS、TRY活性显著提高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.013.T001表1藻粉对半刺厚唇鱼肠道消化酶活性的影响组别AMSLPSTRY1组(对照组)14.98±4.63c2.33±0.4910 975.80±2 420.98b2组34.63±4.33a2.20±0.3627 224.01±3 335.87a3组24.01±4.41b2.60±0.4226 075.46±4 538.00a注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。U/g prot10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.013.T002表2藻粉对半刺厚唇鱼血清抗氧化指标的影响组别SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)1组(对照组)43.92±4.601.88±0.12b6.55±1.20a2组44.87±3.862.57±0.16a4.20±0.87b3组45.30±6.112.46±0.23a4.71±1.02b2.2藻粉对半刺厚唇鱼血清抗氧化指标的影响(见表2)由表3可知,与对照组比,2组、3组鱼血清T-AOC显著提高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.013.T003表3藻粉对半刺厚唇鱼全鱼常规体成分的影响组别水分粗蛋白粗脂肪粗灰分1组(对照组)70.86±2.1121.27±0.152.25±0.062.68±0.052组71.07±1.8021.16±0.112.20±0.042.70±0.063组70.61±2.3621.69±0.182.24±0.082.66±0.10%2.3藻粉对半刺厚唇鱼全鱼常规体成分的影响(见表3)由表4可知,各组鱼的水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分含量均差异不显著(P0.05)。3讨论3.1藻粉对半刺厚唇鱼肠道消化酶活性的影响藻粉能够促进鱼类生长,提高鱼消化酶活性。孔维宝等[6]报道,小球藻中富含多种维生素和矿物质,具有高蛋白、低脂肪等优点。Morita等[7]研究表明,小球藻可以有效调节动物机体的肠胃消化吸收。研究发现,小球藻粉能够促进鲫鱼的饲料利用效率和生长[8-9]。Radhakrishnan等[10]发现,小球藻粉可提高罗氏沼虾消化道淀粉酶、蛋白酶及脂肪酶活性,促进消化吸收。吴佩佩[11]研究发现,饵料中添加一定量小球藻可以提高凡纳滨对虾肠道消化酶活性。虞为等[12]研究表明,螺旋藻能够显著提高花鲈的特定生长率和增重率,显著降低饲料系数,明显提高花鲈肠道蛋白酶活性。吕子君[13]研究表明,添加一定量的钝顶螺旋藻可以增强海南长臀鮠对饵料蛋白的消化吸收,促进海南长臀鮠生长。黄越峰等[14]研究发现,添加螺旋藻可以提高克氏原螯虾的消化酶酶活。全峰等[15]发现,适量的复合微藻对半滑舌鳎的生长具有一定的促进作用,可以改消化能力。小球藻和螺旋藻中丰富的维生素和矿物质可以调节鱼类肠道菌群[16-17],有效提高鱼类肠道消化酶活性和含量。本试验中结果显示,添加小球藻或螺旋藻均能够显著提高半刺厚唇鱼的淀粉酶和胰蛋白酶活性,提升生长潜力,但鱼肠道脂肪酶活性差异不显著,可能是因为半刺厚唇鱼对饵料中脂肪的需求不高,现有基础饵料脂肪水平完全符合其需求。在饵料中添加小球藻比添加螺旋藻的效果更好,可能是因为小球藻中富含可以满足动物生长所需的多种养分和生物活性物质,包括多糖、生物素以及叶绿素与叶酸等。3.2藻粉对半刺厚唇鱼血清抗氧化指标的影响养殖鱼类受到各种因素诱发的氧化应激,导致生长性能下降,提高机体的抗氧化能力有助于促进鱼体的生长。机体抗氧化能力可以通过抗氧化相关的酶进行评价。SOD可消除机体内氧自由基达到抗氧化作用[18-19]。T-AOC是反映机体酶促及非酶促体系总抗氧化水平的主要指标。MDA是动物机体脂质过氧化的产物,MDA含量越高,说明细胞膜脂质过氧化程度则越高,细胞膜的损伤就越严重,动物机体的抗氧化能力降低[20-21]。本试验中,饵料添加藻粉能够显著提升T-AOC,降低MDA含量,表明藻粉能够改善机体抗氧化能力,且小球藻的效果优于螺旋藻。研究表明,在饵料中添加适当藻粉有助于提升鱼体的健康状况。但本试验中各组鱼血清SOD酶活性差异不显著,相关原因仍需深入研究。3.3藻粉对半刺厚唇鱼全鱼常规体成分的影响饵料组成能够影响水产动物体成分,目前关于添加藻粉对水产动物体成分影响的研究较多,但结果不尽相同[22]。本研究中,各组半刺厚唇鱼体成分差异不显著,表明添加5%小球藻或5%螺旋藻,对基础饵料营养水平的改变较小,不会影响全鱼的生化组成,也表明半刺厚唇鱼把外源性粗蛋白、粗脂肪合成自身体组成的能力不会随着饵料营养水平的变化而显著变化,与Palmegiano等[23]在西伯利亚鲟上使用螺旋藻,曲扬华等[24]在罗氏沼虾上使用螺旋藻替代20%鱼粉等的研究结果一致。4结论在饵料中添加藻粉可以有效提高半刺厚唇鱼的淀粉酶和胰蛋白酶活性,增强鱼体的消化能力,在一定程度上提升鱼体抗氧化能力,且在饵料中添加小球藻粉的效果优于螺旋藻粉。
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