丁酸梭菌,是一种高度厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌。丁酸梭菌具有维持肠道健康、促进动物生长等作用。丁酸梭菌在动物肠道内能竞争性地抑制有害菌的生长,并为有益菌提供发酵底物,降低肠道pH值,促进有益菌的繁殖,从而维持肠道微生态平衡[1-3]。丁酸梭菌能通过保护和修复肠黏膜提高动物的肠道免疫功能,能治疗由肠道菌群紊乱引起的炎症、急慢性腹泻、肠应激综合征[4-6]。丁酸梭菌能在动物体内产生多种酶,合成多种维生素,为机体提供营养[7-8]。丁酸梭菌作为饲料添加剂具有耐高温、耐酸的特点,而且耐受部分抗生素药物,能在动物胃肠道内长时间发挥作用[9-10]。本试验研究饲粮添加丁酸梭菌对AA肉仔鸡日粮生产性能以及血清生化指标的影响,以期为丁酸梭菌在生产中的有效利用提供参考。1材料与方法1.1试验材料丁酸梭菌制剂,活菌数为1×1010 CFU/g,由武汉新华扬生物股份有限公司生产。金霉素购自福建浦城正大生化有限公司。1.2试验日粮试验日粮参照NRC(2012)制定,为玉米-豆粕型,基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.013.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成/%1~21 d22~42 d营养水平1~21 d22~42 d合计100.00100.00玉米60.0062.00代谢能/(MJ/kg)12.4612.72豆粕26.0023.00粗蛋白质/%21.5920.80玉米蛋白粉5.005.00钙/%0.950.81大豆油2.003.00总磷/%0.740.67磷酸氢钙2.002.00赖氨酸/%1.121.22氯化钠3.003.00蛋氨酸+胱氨酸/%0.840.64L-蛋氨酸0.800.60赖氨酸0.200.40预混料1.001.00注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 8 500 U、VB2 1.48 mg、VB6 7.95 mg、VB12 0.03 mg、VD3 3 000 U、VE 15.6 U、生物素0.12 mg、烟酸24 mg、泛酸7 mg、叶酸0.29 mg、Fe 76 mg、Cu 8 mg、Mn 12 mg、Zn 25 mg、I 10 mg、Se 0.05 mg。2.营养水平均为计算值。1.3试验设计1日龄AA肉仔鸡共2 000只随机分为5组:空白对照组(基础日粮)、抗生素对照组(基础日粮+金霉素100 mg/kg)和试验1、2、3组(基础日粮+丁酸梭菌制剂100、400、600 g/t),每组设4个重复,每个重复100只。1.4饲养管理在试验开始前7 d,对鸡舍进行常规消毒,试验过程中每日清扫鸡舍,每周进行带鸡消毒。舍内保持良好通风,温度维持在22~25 ℃。试验鸡采用3层笼养,以自然光照为主,人工照明为辅,自由采食和饮水。试验鸡7日龄点眼免疫鸡新城疫。随时观察、记录鸡只的健康状况和死亡淘汰情况。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能记录试验期日投料量、余料量、鸡只体重,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。平均日增重=(平均末重-平均初重)/饲养天数(1)平均日采食量=[(每天平均投料量-每天平均余料量)/当天饲养量]/饲养天数(2)料重比=试验期总耗料量/试验期总增重(3)1.5.2血清生化分别于试验第21 d和第42 d,每个重复选择体重相近的试验鸡10只,颈静脉采血,4 ℃、3 000 r/min离心15 min,取上清液-20 ℃保存,待测。测定指标为血清白蛋白(ALB)、血清球蛋白(GLB)、血清总蛋白(TP)、氨(NH3)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),采用日立7600全自动生化分析仪测定。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.6数据统计与分析采用Excel软件对试验数据进行整理,采用SPSS 20.0统计软件ANOVA进行单因素方差分析,多重比较采用LSD法,结果以“平均值±标准差”表示。P0.01表示差异极显著,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1丁酸梭菌对肉鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验第42 d,试验组末重极显著高于空白对照组(P0.01),与抗生素对照组相比差异不显著(P0.05)。第1~21 d,试验组平均日增重和平均日采食量与空白对照组和抗生素对照组差异不显著(P0.05),但试验组料重比极显著低于空白对照组(P0.01),但与抗生素对照组相比差异不显著(P0.05);第22~42 d,试验组平均日采食量与空白对照组和抗生素对照组均无无显著差异(P0.05),但试验组平均日增重极显著高于空白对照组(P0.01),试验3组平均日增重显著高于抗生素组(P0.05),试验组料重比极显著低于空白对照组(P0.01),试验3组料重比显著低于抗生素组(P0.05);第1~42 d,试验组平均日采食量与空白对照组和抗生素对照组差异不显著(P0.05),但平均日增重极显著高于空白对照组(P0.01),试验3组平均日增重显著高于抗生素组(P0.05),试验2、3组料重比极显著低于试验1组、抗生素组和空白对照组(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.013.T002表2丁酸梭菌对肉鸡生长性能的影响项目日龄/d空白对照组抗生素对照组试验1组试验2组试验3组初重/g140.25±0.1140.21±0.0940.12±0.1040.16±0.1140.15±0.05末重/g422 172.11±68.01Bb2 225.09±71.53ABa2 285.13±33.90Aa2 298.44±42.43Aa2 308.80±81.13Aa平均日采食量/g1~2150.80±0.3550.67±0.3650.56±0.2650.40±0.1250.62±0.2622~42152.06±1.16152.92±2.54153.81±1.49152.65±1.34153.12±1.681~42102.04±1.18102.92±2.55103.81±1.49103.15±1.01103.62±1.62平均日增重/g1~2131.41±0.37b31.90±0.31a31.91±0.34a31.92±0.20a32.01±0.24a22~4270.66±0.74Bc72.81±1.16Abc73.41±0.88Aab73.92±0.90Aab74.27±0.77Aa1~4250.69±0.73Bc52.56±0.99Ac53.24±0.56Aab53.52±0.59Aab54.02±0.70Aa料重比1~211.61±0.01Aa1.59±0.01Bb1.58±0.01Bb1.58±0.01Bb1.58±0.01Bb22~422.15±0.01Aa2.10±0.02Ba2.10±0.01Bab2.07±0.04Bab2.06±0.01Bb1~422.01±0.01Aa1.96±0.01Bb1.95±0.01Bb1.93±0.01Cc1.92±0.01Cc注:同行数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P0.01),不同小写字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2丁酸梭菌对肉鸡血清生化指标的影响(见表3)由表3可知,试验21 d,试验组肉鸡血清总蛋白含量显著高于抗生素对照组(P0.05),极显著高于空白对照组(P0.01),试验组肉鸡血清白蛋白和球蛋白含量显著和极显著高于空白对照组(P0.05,P0.01),肉鸡血清氨含量极显著低于空白对照组(P0.01),试验组肉鸡血清总胆固醇、甘油三酯含量与空白对照组和抗生素对照组相比差异不显著(P0.05);试验42 d,试验2、3组肉鸡血清总蛋白含量极显著高于抗生素对照组和空白对照组(P0.01),试验组肉鸡血清白蛋白、球蛋白含量极显著高于抗生素组和空白对照组(P0.01),肉鸡血清氨含量极显著低于空白对照组(P0.01),试验组肉鸡血清总胆固醇、甘油三酯含量与空白对照组和抗生素对照组相比差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.013.T003表3丁酸梭菌对肉鸡血清生化指标的影响项目日龄/d空白对照组抗生素对照组试验1组试验2组试验3组总蛋白/(g/L)2130.29±0.53Bc32.02±0.73Ab32.18±1.05Aa33.20±0.56Aa33.14±0.60Aa4232.04±0.33BCc33.00±0.61BCb33.08±0.40ABb34.27±0.79Aa33.72±0.63Aab白蛋白/(g/L)2110.30±1.18b10.53±0.72ab11.59±0.75a11.62±0.83a11.62±0.39a4217.97±0.88Bb16.33±0.57Bc20.04±0.83Aa20.21±1.14Aa20.03±0.37Aa球蛋白/(g/L)218.97±0.46Bb10.33±0.45Aa10.29±0.50Aa10.47±0.71Aa10.20±0.30Aa4214.22±0.78Bb14.33±0.71Bb17.54±0.70Aa18.22±0.80Aa18.20±0.98Aa氨/(mmol/L)21423.22±19.38Aa311.33±10.31Bb305.04±12.87Bb300.21±17.25Bb305.78±4.70Bb42423.05±19.35Aa319.03±4.66Bb312.53±5.46Bb305.21±11.94Bb310.78±12.53Bb总胆固醇/(mmol/L)212.97±0.202.90±0.143.05±0.203.04±0.193.01±0.22422.95±0.162.96±0.163.03±0.793.01±0.183.08±0.18甘油三酯/(mmol/L)210.79±0.020.81±0.040.79±0.040.80±0.040.80±0.03420.79±0.01b0.81±0.04ab0.83±0.02a0.83±0.02a0.83±0.03a3讨论3.1丁酸梭菌对肉鸡生长性能的影响Meng等[11]研究表明,枯草芽孢杆菌和丁酸梭菌能显著改善断奶仔猪平均日增重和料重比以及能量表观总消化率,从而提高仔猪生长性能。马洪庆等[12]研究表明,麻羽肉鸡饲粮中添加丁100 mg/kg酸梭菌三联制剂,可使肉鸡增重率提高7.6%,料重比降低10%,并能显著降低肠道大肠杆菌和沙门氏菌的数量,显著提高乳酸杆菌的数量。饲粮中添加丁酸梭菌2.0×108 CFU/kg,能显著提高犊牛平均日增重、干物质采食量,且每天饲喂的作用效果优于间隔2 d饲喂,说明丁酸梭菌的作用效果受菌剂用量及饲喂情况等因素的影响[13]。赵文文等[14]研究表明,饲粮中添加丁酸梭菌250 mg/kg,蛋雏鸭平均日增重、平均日采食量显著提高,显著降低料重比,说明丁酸梭菌可在一定程度上提高动物生长性能。本试验研究表明,添加丁酸梭菌100、400、600 g/t可极显著提高肉鸡平均日增重,且添加丁酸梭菌600 g/t与抗生素组差异显著,而添加丁酸梭菌400、600 g/t能极显著降低料重比,且效果优于抗生素组,与前人研究结果一致。说明丁酸梭菌具有提高肉鸡生长性能的作用,以饲粮添加量为400、600 g/t的效果更好。3.2丁酸梭菌对肉鸡血液生化指标的影响通过测定肉鸡血清中的总蛋白和白蛋白含量可以了解蛋白质代谢水平。血清总蛋白和白蛋白含量高,说明机体对蛋白质和氨基酸的利用水平较高,肝脏的蛋白质合成代谢的作用较强,从而提高机体的营养物质吸收率,降低饲料消耗。郑有秀等[15]研究表明,断奶仔猪饲粮中添加250、500、1 000和2 000 mg/kg丁酸梭菌可使血清总蛋白水平分别提高10.45%、17.64%、15.24%和17.54%,血清白蛋白水平分别提高0.78%、3.80%、3.50%和5.52%。本试验研究表明,添加丁酸梭菌100、400、600 g/t可极显著提高肉鸡血清总蛋白和白蛋白水平,对血清球蛋白的影响不显著,与前人研究结果一致,说明丁酸梭菌能够促进肉鸡对蛋白质和氨基酸的吸收利用。在机体代谢蛋白质的过程中,会有部分蛋白质无法分解成氨基酸,产生多余的蛋白质。而在脱氨基作用下,氨基酸会转化成氨。血清中氨含量的降低说明蛋白质得到充分的利用,而且低含量的血氨可通过脱氨基的逆反应参与机体代谢,高含量的血氨会使机体中毒[16]。Cao等[17]研究表明,在岭南黄肉鸡饲粮中添加5×107、1×108 CFU/kg丁酸梭菌可显著降低血清氨浓度。郑爱娟等[18]研究表明,丁酸梭菌可极显著降低21日龄和42日龄肉鸡的血清氨含量,且以添加量为2.5×108 CFU/kg较佳。本试验结果表明,丁酸梭菌100、400、600 g/t可极显著降低肉鸡血清氨含量,与前人研究结果一致,说明丁酸梭菌能促进蛋白质的利用。血清中的总胆固醇含量能够反映机体脂质代谢的情况,而血清中的甘油三酯含量可以反映脂肪与脂肪酸循环的情况[19]。甘油三酯是能量贮存的重要形式,其含量反映了脂肪组织的脂解活性。郑爱娟等[18]研究表明,丁酸梭菌能显著提高肉鸡血清总胆固醇和甘油三酯含量,显著改善血清碱性磷酸酶活性,从而改变肉鸡的脂类代谢,且以添加量为2.5×108 CFU/kg最佳。本试验研究表明,丁酸梭菌400 g/t可显著提高血清甘油三酯的含量,对血清总胆固醇含量也有一定提高作用,但差异不显著,可能是饲喂量和饲养环境不同造成的。4结论本试验研条件下,丁酸梭菌具有提高肉鸡生长性能、改善蛋白质、促进脂类沉积的作用,且以添加量为400 g/t效果较好。

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