鱼粉是水产饵料中应用最广泛的蛋白源，具有适口性好、蛋白质含量高等特点。近年来，随着饵料原料需求量大幅增加，鱼粉供不应求，世界鱼粉年产量从每年500万~700万t下降至440万~490万t[1]，寻找替代鱼粉的蛋白源成为研究热点。去皮豆粕品质稳定、蛋白含量高、价格合理，是应用在水产饵料中最多的植物蛋白源之一[2]。目前，关于去皮豆粕的研究多集中在草鱼（Ctenopharyngodon idella）[2]、鳕鱼（Pseudophycis bachus）[3]、大黄鱼（Larimichthys crocea）[4]、牛蛙（Rana catesbeiana）[5]、大口黑鲈（Micropterus salmoides）[6]、黄金鲫（Carassius auratus）[7]、多鳞（Sillago sihama）[8]、丝尾鳠（Mystus wyckioides Chaux et Fang）[9]、凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）[10]、松浦镜鲤（Songpu mirror carp）[11]、洛氏鱥（Phoxinus lagowskii Dybowski）[12]、齐口裂腹鱼（Schizothorax prenanti）[13]等鱼类。长须胡鲶属鲇形目（Siluriformes），胡子鲶科（Clariidae），胡鲶属（Clarias），具有生长快、个体大、耐低氧等特点，属名贵经济鱼类，我国在其人工繁殖和养殖方面取得一定成果。目前，关于长须胡鲶的研究报道多集中在鱼苗和鱼种的养殖技术与繁殖、肉品质改良和骨骼系统发育等方面。本试验探讨去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶生长性能、体成分和血清生化指标的影响，为合理优化长须胡鲶饵料组成及健康养殖提供参考。1材料与方法1.1试验饵料以进口鱼粉（天津源海进出口贸易有限公司提供）为动物蛋白源，去皮豆粕（济南顺阳化工科技有限公司）为植物蛋白源，混合油（鱼油∶玉米油=1∶1）、糊精为能源，纤维素为填充物配制饵料。使用不同比例的去皮豆粕（0、15%、30%、45%和60%）替代鱼粉蛋白，配制成等蛋白（40%）、等能（约15.80 MJ/kg）的5种饵料。试验饵料按饵料组成称其质量，搅拌混匀，经粉碎机粉碎，过60目筛，挤压成直径2.5 mm颗粒，烘干，置于-80 ℃冰箱中保存。基础饵料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.012.T001表1基础饵料组成及营养水平项目对照组试验1组试验2组试验3组试验4组原料组成鱼粉62.1052.3042.6032.9023.20去皮豆粕0.0013.0626.1239.1852.20鱼油1.501.701.902.102.30玉米油1.501.701.902.102.30糊精27.4024.1420.7817.3214.10纤维素4.003.603.202.902.40黏合剂1.001.001.001.001.00无机盐预混料1.001.001.001.001.00氯化胆碱0.600.600.600.600.60维生素预混料0.900.900.900.900.90合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平粗纤维4.314.324.334.334.34粗灰分7.086.586.115.635.15粗蛋白40.0440.0240.0340.0240.01粗脂肪6.496.496.496.496.49注：1.维生素预混料为每千克饵料提供：叶酸10 mg、泛酸钙60 mg、肌醇1 000 mg、生物素2.5 mg、盐酸硫胺素60 mg、盐酸吡哆醇200 mg、核黄素40 mg、VA 25 000 IU、VD 5 000 IU、VE 1 200 mg、VK 5 mg、VC 2 000 mg、VB12 41 μg。2.无机盐预混料为每千克饵料提供：MnSO4·H2O 60 mg、MgSO4·7H2O 1 040 g、ZnSO4·H2O 50 g、CuSO4·5H2O、8 mg、FeSO4·7H2O 75 g、AlCl3·6H2O 3 mg、CaCO3 3 g、NaHPO4·2H2O 500 g、CoCl2·6H2O 2 mg、Na2Se2O3 0.03 mg、KCl 2.3 g、NaF 1 g、KI 0.04 g。3.营养水平是计算值。%1.2试验设计鱼种购自吉林省珲春市英安承吉鱼苗良种场。试验前挑选体质健康、无伤的长须胡鲶鱼种750尾，养殖于吉林农业大学水产养殖室的控温单循环养殖系统中，随机分为5组，每组3个重复，每个重复放养长须胡鲶50尾。各组鱼饲喂不同比例的去皮豆粕（0、15%、30%、45%和60%）替代鱼粉蛋白的饵料。预试期15 d，正式试验期8周，预试期前长须胡鲶使用20 mg/L高锰酸钾药浴5 min进行消毒。1.3饲养管理饲养期间维持水质稳定，水温（23±1）℃，溶解氧（DO）5.0~7.0 mg/L，pH值7.0~8.0，氨氮小于0.3 mg/L，亚硝酸盐小于0.05 mg/L。每日投饵量为鱼体重的3%~4%，每日投饵3次（7：00、12：00、17：00），投饵方法为人工手撒。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能饲养试验结束时，参考吴莉芳等[14]、段晶等[15]的方法进行取样，计算鱼的肝体比、脏体比、特定生长率、饵料效率、蛋白质效率、蛋白质沉积率。肝体比=肝胰脏质量/体重×100%(1)脏体比=内脏质量/体重×100%(2)特定生长率=(lnHt－lnH0)/t×100%(3)饵料效率=(Ht－H0)/It×100%(4)蛋白质效率=(Ht－H0)/It×F×100%(5)蛋白质沉积率=(Ht×F1－H0×F2)/(It×F)×100%(6)式中：Ht、H0分别为末重和初重；t为试验时间；It为摄入干饵料质量；F、F1和F2分别是饵料、终末鱼体、初始鱼体中蛋白质含量（%）。1.4.2体成分饲养试验结束前鱼停食24 h，每组取长须胡鲶8尾，取侧线以上、背鳍以下的肌肉，将其捣碎均匀混合，-80 ℃冰柜保存，采用105 ℃恒温烘干失重法（GB/T 18654—2008）测定粗水分，采用凯氏定氮法（GB/T 18654—2008）测定粗蛋白，采用索氏乙醚抽提法（GB/T 18654—2008）测定粗脂肪，采用550 ℃马福炉灼烧法（GB/T 18654—2008）测定粗灰分。1.4.3血清生化指标取样前鱼空腹24 h，每试验组随机取试验鱼10尾，选用5 mL一次性无菌注射器从尾静脉抽取血液，3 000 r/min离心3 min，取上层血清于离心管中密封，-80 ℃冰箱保存。采用苏州梦犀生物试剂盒测定血清中葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比（A/G）、碱性磷酸酶（ALP）、酸性磷酸酶（ACP）、溶菌酶（LZM）及超氧化物歧化酶（SOD）。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 20.0软件对进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验1组长须胡鲶的末重、特定增长率显著降低（P0.05），试验4组长须胡鲶的蛋白质效率和蛋白质沉积率显著降低（P0.05）。各组长须胡鲶的脏体比、肝体比差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.012.T002表2去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶生长性能的影响组别初重/g末重/g特定生长率/%饵料效率/%蛋白质效率/%蛋白质沉积率/%脏体比/%肝体比/%对照组22.23±0.27124.35±3.15ab3.31±0.06ab128.51±5.38a3.21±0.13a55.03±2.16a7.57±0.291.93±0.08试验1组22.57±0.32107.26±6.31c3.02±0.11c119.00±2.67ab2.98±0.07ab51.20±0.89a7.03±0.241.46±0.06试验2组22.49±0.13118.49±5.61b3.19±0.10b124.06±9.78 a3.10±0.24ab53.16±3.91a7.06±0.081.44±0.06试验3组22.50±0.38126.89±5.34ab3.33±0.08ab126.06±6.16 a3.15±0.15a53.91±2.98a7.34±0.391.44±0.04试验4组22.53±0.39129.09±1.11a3.36±0.05a113.72±4.22b2.84±0.11b50.47±2.16b7.05±0.391.41±0.05注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3与此同。2.2去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶体成分的影响（见表3）由表3可知，与试验4组相比，其他各组长须胡鲶肌肉中水分含量显著降低（P0.05），粗蛋白质含量显著升高（P0.05）。各组长须胡鲶肌肉中的粗脂肪和粗灰分含量差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.012.T003表3去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶体成分的影响组别水粗蛋白质粗脂肪粗灰分对照组78.44±0.46b17.11±0.57a2.59±0.011.76±0.01试验1组78.51±0.35b16.71±0.58a2.58±0.061.77±0.01试验2组78.38±0.02b17.04±0.50a2.51±0.051.77±0.01试验3组78.44±0.71b17.29±0.55a2.50±0.041.75±0.03试验4组80.10±0.84a14.93±0.92b2.48±0.031.76±0.02%2.3去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，各组长须胡鲶血清GLU、BUN、TC、TG、TP、ALB和GLB含量及AST、ALT、ACP和ALP的活性差异不显著（P0.05）。与对照组相比，试验3组、试验4组长须胡鲶血清LZM、SOD活性显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.012.T004表4去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶体血清生化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组试验4组GLU/(mmol/L)7.13±1.675.90±0.825.96±2.016.99±0.626.95±1.50BUN/(mmol/L)1.10±0.171.13±0.331.00±0.501.32±0.561.14±0.32TC/(mmol/L)6.77±0.575.73±0.685.27±0.526.73±2.164.61±0.57TG/(mmol/L)2.64±1.35ab1.41±0.36a2.67±0.23ab2.49±0.09ab2.39±0.05abAST/(U/L)91.33±7.0272.66±16.6576.00±10.8277.33±5.5179.00±15.87ALT/(U/L)37.67±2.0827.33±2.0828.00±5.2032.67±10.0741.67±15.04AST/ALT2.42±0.082.64±0.422.88±0.212.57±0.992.09±0.87TP/(g/L)40.37±2.8041.00±7.8342.17±0.4741.20±1.6441.20±1.50ALB/(g/L)19.70±2.1719.03±4.5220.80±1.0820.87±1.0521.90±1.65GLB/(g/L)20.67±1.8019.03±4.5220.80±1.0820.33±1.6319.23±0.67A/G/(U/mL)0.96±0.131.17±0.121.03±0.081.03±0.111.14±0.11ALP/(U/mL)12.96±0.1313.06±0.1313.09±0.0913.11±0.1113.01±0.07ACP/(U/mL)8.42±0.088.82±0.048.81±0.618.85±0.518.61±0.08LZM/(U/mL)19.53±0.32a19.13±0.12a19.50±0.55a18.53±0.32b18.97±0.29bSOD/(U/mL)179.53±1.32a179.13±1.02ab179.01±1.78ab175.53±1.12b176.98±1.59b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。3讨论3.1去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶生长性能的影响去皮豆粕的蛋白质含量高于与其他植物蛋白原料，具有易吸收、抗营养因子低等特点。饵料中去皮豆粕适宜的添加量与鱼的种类、食性、大小、水体环境等因素有关。本研究结果表明，当去皮豆粕替代鱼粉蛋白15%时，长须胡鲶的特定生长率显著下降。从特定生长率、饵料转化率、蛋白质效率）和蛋白质沉积率等指标综合分析，本试验条件下，去皮豆粕替代鱼粉蛋白的适宜替代量为45%。闫晓波等[8]研究发现，多鳞（Sillago sihama）饵料中去皮豆粕替代鱼粉适宜比例为29.1%，超过一定替代比例对其特定生长率具有明显影响。吴莉芳等[16]研究表明，饵料中过量使用大豆蛋白会导致鱼类生长性能下降。本研究中，当去皮豆粕替代鱼粉蛋白比例为30%、45%和60%时，长须胡鲶的特定生长率和饵料转化率与对照组差异不显著，表明适量的去皮豆粕替代鱼粉蛋白对长须胡鲶的生长和饵料利用无显著影响。Chou等[17]研究表明，日本鲈鱼饵料中豆粕替代50%鱼粉较适宜。Viola等[18]对杂食性鱼类的研究发现，以去皮大豆为蛋白源添加限制氨基酸可以完全替代鱼粉。本研究中，当去皮豆粕替代鱼粉蛋白60%时，长须胡鲶的蛋白质效率和蛋白质沉积率显著下降。徐田田等[19]研究表明，去皮豆粕替代56%鱼粉，可使凡纳滨对虾的蛋白质效率、增重率显著下降。过量的去皮豆粕引起鱼类蛋白质效率和蛋白质沉积率下降，其主要原因是去皮豆粕与鱼粉相比较可消化性低。肉食性、草食性、杂食性鱼类的消化器官结构不同，对抗营养因子的敏感程度亦不相同。王洲等[3]研究发现，添加超过20%豆粕替代鱼粉可显著降低鳕鱼的蛋白质效率发现，随着替代比例增加，大口黑鲈的蛋白质沉积率显著下降，有蛋白合成但是效果不佳。吴莉芳等[14]研究表明，洛氏鱥饵料发酵豆粕替代鱼粉的适宜添加量为45%。3.2去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶体成分的影响随着生活水平提高，人们对肉质的需求越来越高[20]。本研究中，配合饵料中去皮豆粕替代60%鱼粉时，长须胡鲶肌肉中粗蛋白含量显著下降，可能是由于豆粕中含有抗营养因子，添加过量可抑制蛋白质的沉积从而影响蛋白合成。陈乃松等[21]研究发现，在欧洲鳗鲡饵料中，随着大豆蛋白添加量超过45%，肌肉中蛋白质含量逐渐下降。Kikuchi[22]指出，养殖过程中使用豆粕蛋白替代鱼粉蛋白对牙鲆（Paralichthys olivaaceus）粗脂肪含量不会产生影响，但超过一定比例后会使粗蛋白含量下降。王婧瑶等[23]研究表明，随着替代比例增加，黄金鲫（Carassius auratus）粗蛋白含量有所下降但不明显。Luo等[24]研究表明，随着发酵豆粕替代白鱼粉含量增加，石斑鱼（Epinephelus coioides）肌肉中脂肪含量下降。上述结果与本试验研究结果相似。3.3去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶血清生化指标的影响血清指标是反映机体健康状况、营养水平、繁殖和疾病预防等方面的重要参考依据[25]。LZM、ACP和AKP是鱼体内重要的非特异免疫因子。本研究结果表明，当去皮豆粕替代鱼粉蛋白高于45.00%时，LZM活性显著下降，长须胡鲶的免疫相关功能显著降低，抗营养因子对正常细胞的损伤能力增强。鱼类肝细胞功能障碍，则血清TC含量升高。SOD可清除对机体有害的活性氧。本研究发现，长须胡鲶血清SOD活性随比例升高逐渐上升，且试验3组、试验4组长须胡鲶血清SOD活性显著高于对照组，表明长时间摄食豆粕对机体的抗氧化能力具有影响。ALT活性增加能够反映肝功能障碍，AST是确定心脏病变的主要指标。血清GLB含量能够反映机体的抵抗力，血清ALB作为营养物质载体，能够维持血浆渗透压，是机体蛋白质的来源之一，可修补组织和提供能量。本研究结果表明，去皮豆粕对长须胡鲶血清GLU、BUN、TC、TG、TP、ALB、GLB含量及ALT、AST活性影响不显著，表明去皮豆粕替代鱼粉对长须胡鲶的健康尚未造成显著影响，与文献[26]至文献[30]研究结论相似。4结论本试验条件下，长须胡鲶配合饵料蛋白水平为40%时，去皮豆粕替代鱼粉的适宜替代量为45%。