奶牛日粮中不同的脂肪酸结构会对乳脂合成产生不同影响。C16和C18脂肪酸来自体脂动员和日粮中脂肪酸直接转移，给奶牛合理饲喂C16和C18脂肪酸可影响乳脂合成，进而影响奶牛产奶量、体脂动员和产后能量负平衡[1]。研究发现，饲喂C16和C18脂肪酸可增加奶牛产奶量和乳脂产量[2]，但过量摄入会对奶牛的干物质采食量与脂肪酸后肠道消化率[3]产生负面影响。目前，关于泌乳牛脂肪酸营养棕榈酸（C16∶0）、硬脂酸（C18∶0）的应用研究较多。Shepardson等[4]研究设置了棕榈酸、硬脂酸以及棕榈酸硬脂酸混合饲喂的3种高产牛日粮，结果显示，饲喂棕榈酸减少了奶牛干物质采食量，但增加脂肪酸消化率提高了乳脂产量；饲喂硬脂酸降低了脂肪酸消化率；混合饲喂方案则增加了乳脂校正乳产量，表明不同种类的脂肪酸组合饲喂方案存在较大变异性。此外，饲喂脂肪酸除通过油脂和脂肪酸的形式补充，还可通过脂肪酸盐的形式补充[5-7]。Dos等[8]通过分析近年来33篇饲喂棕榈酸钙的试验数据，总结认为饲喂棕榈酸钙可提高中性洗涤纤维（NDF）消化率、乳脂产量和乳脂校正乳产量，并且脂肪酸消化率具有提升趋势。因此，脂肪酸饲喂需要考虑脂肪酸的种类、理化状态以寻找最优方案。产后21 d内是由于泌乳需要和体脂动员，易产生能量负平衡的生理阶段[9]，脂肪酸营养的应用对泌乳早期具有重大意义。本试验旨探究不同脂肪酸饲喂方案对泌乳早期生产性能及血清生化指标的影响，为实际生产活动提供参考。1材料与方法1.1试验地点及动物试验在北京首农畜牧发展有限公司自有牧场开展。选取胎次相近的160头经产泌乳早期（产后21 d内）奶牛作为参试动物。1.2试验设计160头奶牛随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组，每组40个重复，每个重复1头牛。试验各组C16∶0、C18∶0和油酸（C18∶1）的总量为340 g，调整各组C16∶0和C18∶1两种脂肪酸的组成比例，试验设计见表1。该牧场原有脂肪酸饲喂方案设为对照组，其中棕榈酸脂肪粉C16∶0含量85.00%（IOI集团）；脂肪酸钙产品为棕榈酸和油酸的混合物，C16∶0含量51.00%，C18∶1含量35.00%（丰益油脂科技（天津）有限公司）；硬脂酸脂肪粉C16∶0含量34.00%，C18∶0含量66.00%（丰益油脂科技（天津）有限公司）；嘉能健脂肪粉C16∶0含量为70.00%，C18∶0含量为5.00%，C18∶1含量为20.00%（丰益油脂科技（天津）有限公司），上述所有脂肪酸产品均为过瘤胃保护产品。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T001表1试验设计组别C16∶0+C18∶0+C18∶1/[g/(头·d)](C16∶0)∶(C18∶1)产品组成对照组34072.20∶15.30棕榈酸脂肪粉266.00 g，脂肪酸钙产品100.00 g试验Ⅰ组34060.60∶26.10棕榈酸脂肪粉123.00 g，脂肪酸钙250.00 g试验Ⅱ组34056.00∶30.80美加力280.00 g，嘉能健添加84.00 g试验Ⅲ组34043.50∶2.00棕榈酸脂肪粉80.00 g，硬脂酸添加268.00 g注：不同脂肪产品的脂肪酸有效成分含量不同，产品本身脂肪含量为85%~95%，并非100%为脂肪酸，本试验设计保证脂肪酸总量为340 g，实际产品添加量会存在差异，且大于340 g。试验日粮组成及营养水平见表2，精粗比为56∶44。所有试验牛群分别在6：00与14：00饲喂日粮，自由采食、饮水，每日挤奶3次，试验期21 d（即泌乳牛的新产期）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T002表2试验日粮组成及营养水平（风干基础）项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组原料组成/%玉米粉14.414.014.114.4麸皮0.90.90.91.0豆粕18.018.518.818.0膨化大豆0.80.80.80菜粕1.51.01.02.0压片玉米4.95.25.34.9DDGS1.01.01.11.3大豆皮1.51.51.21.5全棉籽2.92.92.92.9棕榈酸脂肪粉1.50.700.4脂肪酸钙0.51.41.50硬脂酸脂肪粉0001.5脂肪粉000.40甜菜颗粒1.01.01.01.0糖蜜1.71.71.61.7苜蓿干草9.79.79.79.7燕麦干草2.52.52.52.5苜蓿青贮2.42.42.42.4玉米青贮29.429.429.429.45%预混料5.45.45.45.4合计100.0100.0100.0100.0营养水平泌乳净能/(MJ/kg)7.287.287.287.28粗蛋白/%18.0018.0018.0018.00中性洗涤纤维/%27.2027.1027.0027.40中性洗涤纤维/%20.8020.8020.7020.90淀粉/%23.0023.0023.0023.00C16∶0/%FA72.2060.6056.0043.50C18∶1/%FA15.3026.1030.802.00注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 180 000 IU、VD3 30 120 IU、VE 603 IU、铜360 mg、锰579 mg、锌1 000 mg、碘8 mg、硒7 mg。2.营养成分中泌乳净能为计算值，其余均为实测值。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能统计各试验组奶牛日粮饲喂量与剩余量，记录每日采食量，计算各组奶牛的干物质采食量。每头试验牛产奶量通过挤奶设备的流量及其配套软件记录。在分娩及产后21 d时，各组随机抽取10头试验牛测量体重，在产后7、14与21 d时由固定人员对抽取的牛进行体况评分，体况评分采用美式5分制标准。饲料转化率以每千克干物质采食量生产的3.5%乳脂校正乳量表示。干物质采食量=(投料量-剩料量)×TMR干物质/本组牛头数(1)饲料转化率=3.5%乳脂校正乳量/干物质采食量(2)3.5%乳脂校正乳量=0.432×乳产量+16.23×乳脂产量(3)1.3.2血清指标1.3.2.1血清生化指标奶牛产后21 d晨饲前，每组随机选择10头牛尾根采血10 mL，3 000 r/min离心10 min，分装于0.5 mL的离心管中，取上层血清-20 ℃保存。采用全自动血液生化分析仪检测血液生化指标，测定葡萄糖（GLU）、β-羟基丁酸（BHBA）、游离脂肪酸（NEFA）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、胰岛素（Insulin）、生长激素（GH）、总三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）含量。1.3.2.2血清肝功能代谢指标采用南京建成生物工程研究所试剂盒检测总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）活性。1.3.2.3血清抗氧化指标采用南京建成生物工程研究所试剂盒检测检测抗氧化指标，测定总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2010软件进行整理，SAS 9.4软件Mixed模型进行处理，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1不同脂肪酸比例对奶牛生产性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛的干物质采食量均极显著升高（P0.01），试验Ⅰ组奶牛的干物质采食量极显著降低（P0.01）；试验Ⅱ组奶牛的产奶量显著降低（P0.05）；试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛的饲料转化效率极显著降低（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T003表3不同脂肪酸比例对奶牛生产性能的影响项目干物质采食量/[(kg/(头·d))]产奶量/[(kg/(头·d))]乳脂率/%乳蛋白率/%体细胞/×104尿素氮/(mg/L)饲料转化率P值0.0000.0200.3410.4270.7240.6560.000对照组18.32±0.16B31.61±1.00a4.52±1.553.39±0.5627.42±5.52121.2±25.81.81±0.02A试验Ⅰ组17.07±0.18C30.50±0.66a4.54±1.603.35±0.6228.69±7.95119.5±27.31.87±0.03A试验Ⅱ组19.25±0.16A28.06±0.67b4.24±1.513.46±0.6124.75±4.54122.2±35.21.53±0.03B试验Ⅲ组19.35±0.18A29.88±0.89ab4.13±1.513.35±0.6127.00±6.63123.6±31.41.62±0.02AB注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4、表6、表7与此同。2.2不同脂肪酸比例对奶牛分娩后体重与体况评分的影响（见表4）由表4可知，各组奶牛产犊后体重、产犊21 d的体重及产后21 d失重差异均不显著（P0.05），试验Ⅰ组奶牛体重变化最大，比产后当天降低了80.58 kg，试验Ⅱ组奶牛体重变化最少，比产后当天降低了54.69 kg。与对照组相比，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛在产后0、7、14 d的体况评分均极显著升高（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T004表4不同脂肪酸比例对奶牛分娩后体重与体况评分的影响项目体重/(kg/头)体况评分/分产后当天21 d21 d体重变化0 d7 d14 d21 dP值0.5090.5130.4100.0000.0000.0000.081对照组704.08±30.65626.83±25.66-77.25±5.943.39±0.04B3.30±0.04B3.24±0.04B3.17±0.04试验Ⅰ组661.25±27.61580.67±26.20-80.58±5.963.40±0.03B3.33±0.03B3.22±0.03B3.17±0.03试验Ⅱ组674.31±25.46619.63±24.50-54.69±9.423.66±0.04A3.52±0.04A3.36±0.03A3.27±0.03试验Ⅲ组723.50±38.24648.25±51.5975.25±32.243.60±0.03A3.46±0.03A3.38±0.03A3.22±0.032.3不同脂肪酸比例对奶牛血清指标的影响2.3.1不同脂肪酸比例对奶牛血清生化指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验组Ⅱ和试验Ⅲ组奶牛血清BHBA、T4含量极显著降低（P0.01），GLU含量极显著升高（P0.01）；各试验组奶牛血清Insulin、T3含量极显著升高（P0.01）；试验Ⅰ组和试验Ⅲ组奶牛血清GH含量显著升高（P0.05）；试验Ⅱ组奶牛血清BUN含量极显著降低（P0.01）；试验Ⅰ组和试验Ⅱ组奶牛血清CREA含量极显著降低（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T005表5不同脂肪酸比例对奶牛血清生化指标的影响项目对照组试验Ⅰ组试验Ⅱ组试验Ⅲ组P值BHBA/(mmol/L)0.38±0.01A0.39±0.01A0.28±0.01B0.27±0.01B0.000NEFA/(μmol/L)38.68±1.0338.40±0.9539.62±1.1837.92±0.620.650TC/(mmol/L)3.38±0.183.60±0.153.12±0.143.28±0.100.140TG/(mmol/L)0.19±0.000.20±0.000.19±0.000.20±0.000.310GLU/(mmol/L)2.08±0.24B2.15±0.14B3.42±0.06A3.20±0.08A0.000Insulin/(mIU/L)17.83±0.97B21.99±0.81A22.22±1.12A22.40±0.72A0.000GH/(μg/L)1.19±0.07a1.00±0.05b1.12±0.05ab1.02±0.04b0.040T3/(μg/L)2.86±0.18C3.84±0.25AB4.14±0.19A3.47±0.18B0.000T4/(μg/L)96.31±5.66A90.71±4.27A72.93±2.97B75.07±3.06B0.000BUN/(mmol/L)5.39±0.26AB5.83±0.19A3.97±0.14C5.24±0.13B0.000CREA/(μmol/L)76.83±0.98A73.29±1.42B69.31±1.30C73.58±0.91AB0.000注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05），不同大写字母表示差异极显著（P0.01），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.3.2不同脂肪酸比例对奶牛血清肝功能代谢指标的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛血清AST活性显著降低（P0.05）。试验Ⅰ组和试验Ⅲ组奶牛血清ALP活性极显著高于试验Ⅱ组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T006表6不同脂肪酸比例对奶牛血清肝功能代谢指标的影响项目ALT/(U/L)AST/(U/L)ALP/(U/L)TP/(g/L)ALB/(U/L)P值0.1900.0300.0100.6500.730对照组16.51±0.9487.27±5.65a40.76±2.39AB70.40±1.2130.31±0.82试验Ⅰ组18.70±0.8376.92±4.13ab45.33±3.60A71.59±1.2630.52±0.54试验Ⅱ组16.42±0.7171.88±4.19b33.27±1.83B72.07±1.3829.69±0.35试验Ⅲ组16.72±0.7971.65±2.518b44.28±2.49A70.24±1.0130.13±0.272.3.3不同脂肪酸比例对奶牛血清抗氧化指标的影响（见表7）由表7可知，与对照组相比，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛血清MDA含量极显著升高（P0.01），试验Ⅰ组奶牛血清MDA含量极显著低于试验Ⅱ组（P0.01）；试验Ⅰ组奶牛血清SOD活性极显著降低（P0.01），试验Ⅲ组奶牛血清GSH-Px活性显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.003.T007表7不同脂肪酸比例对奶牛血清抗氧化指标的影响项目T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)P值0.1000.0100.0000.030对照组9.67±0.201.32±0.02C50.16±0.92A9.81±0.52a试验Ⅰ组9.84±0.201.35±0.02BC45.58±1.66B8.69±0.52ab试验Ⅱ组10.36±0.371.46±0.04A52.84±1.15A9.18±0.40ab试验Ⅲ组10.64±0.391.42±0.04AB51.73±0.93A8.00±0.30b3讨论3.1不同脂肪酸比例对奶牛生产性能的影响Weld等[10]汇总1987—2015年涉及奶牛饲喂脂肪酸的研究认为，饲喂长链脂肪酸钙盐会降低奶牛干物质采食量，而直接饲喂饱和脂肪则具有增加奶牛干物质采食量的潜力。本试验结果显示，与对照组相比，试验Ⅰ组的饲喂方案降低了试验奶牛的干物质采食量，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组增加了奶牛干物质采食量。本试验中，试验Ⅰ组奶牛饲喂脂肪酸主要是脂肪酸钙，而对照组使用的脂肪酸钙相对更少；试验Ⅱ组与试验Ⅲ组主要饲喂饱和脂肪酸的过瘤胃脂肪粉。因此，本试验在干物质采食量的结果与上述研究中的基本一致，进一步表明饲喂脂肪酸钙盐会降低奶牛的干物质采食量，处于产后能量负平衡的奶牛饲喂饱和脂肪酸含量高的日粮更利于恢复采食量。本研究中，仅有试验Ⅱ组牛的泌乳性能显著降低；试验Ⅰ组奶牛在干物质采食量下降的前提下，但其泌乳性能与对照组差异不显著，可能是由于补充了较多脂肪酸钙盐。有研究表明，饲喂脂肪酸钙盐会增加奶牛NDF消化率或脂肪酸消化率，进而提升产奶量[11-13]。本试验中，试验Ⅱ组是本试验中不饱和脂肪酸饲喂量最多的牛群。Chen等[14]在泌乳早期饲喂了过瘤胃油酸（日粮中C18∶1含量0.91%），同样出现了产奶量下降的现象。此外，由于饲喂产品均为过瘤胃产品，可能存在部分脂肪酸未能达到后消化道，在瘤胃中被消化代谢，而不饱和脂肪酸在瘤胃中的氢化作用可能会通过减少瘤胃中的氢底物进而减少丙酸生成，影响产奶量[15-17]。本试验结果与上述结论相似，日粮中脂肪酸组成(C16∶0)∶(C18∶1)=72.2∶15.3对奶牛产奶量的改善效果最好。3.2不同脂肪酸比例对奶牛分娩后体重与体况的影响泌乳早期奶牛利用机体的能量储备支持产奶、繁殖以及机体代谢能力，当产后体重损失过多时，机体处于能量负平衡状态，从而造成氧化应激和代谢紊乱[18]。因此，奶牛产后体重及体况的稳定性对其产后生产性能恢复、提升产奶量具有重要意义。本研究中，各组奶牛产犊后和产犊后21 d体重以及产后21 d体重变化差异均不显著，其中体重降低最多的为试验Ⅰ组，体重降低最小为试验Ⅲ组。体况评分的结果与体重结果稍有差异，主要是由于体况评分依据皮下脂肪沉积判断，而内脏脂肪的改变不易评判。3.3不同脂肪酸比例对奶牛血清指标的影响目前，国际上脂肪酸消化代谢的研究更多集中与营养和生产性能的评估，鲜有针对奶牛过瘤胃脂肪酸代谢产生的血清生化结果进行深入研究。王建平等[19]研究发现，日粮中添加饱和脂肪酸对泌乳牛血清GLU、TC、BHBA和Insulin含量无显著影响，但对血清NEFA具有降低效果。本研究中，试验Ⅱ组与试验Ⅲ组奶牛血清NEFA含量均有所降低。血清中NEFA主要来自脂肪组织中甘油三酯的动员和脂解作用，其含量与奶牛的能量平衡状态相关[20]。本试验结果表明，试验Ⅱ组与试验Ⅲ组的脂肪酸比例对奶牛产后能量负平衡具有很好的缓解作用。当机体发生氧化应激时能够引起脂质过氧化物及其降解产物MDA增多，因此血清MDA含量是检测氧化应激程度的一个重要指标。本研究中，试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛较高的血清MDA含量也表明了其正处于应激状态。动物机体存在两类抗氧化系统，即酶促系统（主要包括SOD、GSH-Px和CAT等）和非酶系统（又称抗氧化剂，包括VC、VE、VA、谷胱甘肽等）。其中SOD是机体的第一道防线，可将氧自由基转化为过氧化物（H2O2），而GSH-Px的作用主要是清除由SOD产生的H2O2，将其转化为对机体无害的水（H2O）。本试验中，对照组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组奶牛血清SOD活性增强，表明机体可能处于氧化应激状态。4结论本研究结果表明，奶牛泌乳早期日粮中脂肪酸组成（C16∶0）∶（C18∶1）=72.2∶15.3时，奶牛产奶量较高，（C16∶0）∶（C18∶1）=56.0∶30.8时，奶牛产后体脂动员维持体况较好。