原花青素是一种具有抗氧化、抗炎症、抗热应激、增强机体抗病力、降低血液胆固醇等生物学功能的一类多酚化合物的总称[1-2]。原花青素是一种天然食用色素，广泛存在植物中，目前主要应用于食品、药品以及化妆品等领域[3-4]，作为饲料添加剂在禽类生产中的应用还处于探索阶段[5-6]。禽类可很好地将饲料中的天然色素进行吸收和富集[7]。本试验主要探索蛋鸡饲料中添加适量原花青素对其生产性能、蛋品质以及胆固醇在蛋黄中含量的变化，为天然抗氧化剂作为家禽饲料添加剂提供参考依据。1材料和方法1.1试验材料试验材料由安阳工学院食品科学与工程和动物医学教研室提供和加工，采用真空包装（PET袋）备用或现用现制。1.2试验设计试验设在安阳市规范化商品蛋鸡场，选择280日龄海兰褐蛋鸡400只，要求健康、体重和体尺相近、生产性能相似，按试验设计要求分成4个处理组，第Ⅰ组设为对照组，Ⅱ~Ⅳ组设为试验组，每个处理5个重复，每个重复20只鸡。预试期7 d，所有蛋鸡全部饲喂基础饲料；试验期49 d，对照组蛋鸡饲喂基础饲料，Ⅱ~Ⅳ组蛋鸡分别饲喂在基础饲料中添加原花青素复方50、100 和150 mg/kg的饲料。采用3层阶梯式笼养，每日饲喂2次，采用自动喂料、饮水，机械清粪，保证光照时间稳定在16 h/d（每天定时开、关灯），纵向负压结合自然通风，每天14：30收集鸡蛋，基础饲料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.011.T001表1基础饲料组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.60代谢能/(MJ/kg)11.74豆粕17.50粗蛋白/%16.59菜粕3.20蛋氨酸/%0.35鱼粉1.90蛋氨酸+胱氨酸/%0.61小麦麸4.50赖氨酸/%0.74石粉7.90钙/%3.36磷酸氢钙1.10有效磷/%0.35食盐0.30预混料1.00注：1.预混料为每千克饲料提供：VA 12 500 IU、VD3 2 300 IU、VE 16 IU、VK3 2 mg、VB1 2.1 mg、VB2 7 mg、VB12 0.04 mg、生物素0.05 mg、VB11 1.23 mg、D-泛酸12 mg、烟酸27 mg、铁55 mg、铜9 mg、锌71 mg、锰74 mg、碘0.90 mg、硒0.37 mg。2.营养水平数据均为计算值。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能试验期间，每组蛋鸡采食量、产蛋量和蛋质量等指标每天记录1次，平均饲养日产蛋率、鸡蛋质量和料蛋比每周统计1次，并记录鸡群健康状况。1.3.2蛋品质试验期间，每组第7、21、35和49 d分别随机抽取20个（每个重复4个），共80个鸡蛋。使用0-150型游标卡尺测定蛋形指数、NFN380型蛋壳厚度测定仪测定蛋壳厚度、EFR-01型蛋壳强度测定仪进行测定蛋壳强度、NFN382型蛋白高度测定仪测量哈夫单位，求平均值[8]。1.3.3鸡蛋黄胆固醇的测定每组在试验第7、21、35和49 d按要求抽取10个鸡蛋（每个重复2个），共40个，注明日期和组号，置于冰箱冷藏室（4 ℃）保存。蛋黄中胆固醇前处理和测定方法主要参照鲁琼芬等[9]的方法。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel 2010、SPSS 19.0、One-way ANOVA和Duncan氏法进行数据统计，分析显著性检验和多重比较[8]。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1原花青素复方对蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，添加不同水平的原花青素复方于在蛋鸡饲料中，试验期间，试验组平均蛋质量与对照组相比差异不显著（P0.05），但有增加的趋势。从第21 d开始，试验Ⅲ组和Ⅳ组平均产蛋率和料蛋比显著高于对照组（P0.05），但是第Ⅲ组和第Ⅳ组之间差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.011.T002表2原花青素复方对蛋鸡生产性能的影响项目组别第7 d第21 d第35 d第49 d产蛋率/%Ⅰ组90.82±3.40a89.36±2.43b88.12±2.27b87.35±3.41bⅡ组90.91±2.61a89.50±2.37b88.43±3.34b87.56±3.52bⅢ组91.25±2.37 a90.89±2.33a89.41±2.35a88.40±3.35aⅣ组91.23±2.23a90.87±2.41a89.53±3.37a88.32±3.47a蛋质量/gⅠ组62.17±3.14a62.65±3.34a62.71±3.36a63.13±3.37aⅡ组62.24±3.21a62.72±3.31a62.82±3.27a63.24±3.25aⅢ组62.47±3.34a62.67±3.29a62.81±3.22a63.31±3.36aⅣ组62.45±3.25a62.78±3.23a62.85±3.19a63.31±3.28a料蛋比Ⅰ组2.16±0.34a2.19±0.52a2.22±0.19a2.25±0.54aⅡ组2.15±0.25a2.18±0.43a2.21±0.41a2.24±0.48aⅢ组2.15±0.33a2.15±0.41b2.16±0.25b2.16±0.24bⅣ组2.15±0.31a2.15±0.33b2.16±0.26b2.16±0.32b注：同列同项目数据肩标小写字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同表示差异不显著（P0.05），大写字母不同表示差异极显著（P0.01）；下表同。2.2原花青素复方对鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，试验组和对照组以及各试验组之间平均蛋形指数无显著差异（P0.05）。蛋壳厚度和蛋壳强度对照组以及各试验组之间无显著差异（P0.05），但各试验组蛋壳厚度和蛋壳强度有下降变缓的趋势。平均哈夫单位试验第21 d后第Ⅲ和Ⅳ试验组显著（P0.05）高于对照组，Ⅲ和Ⅳ组之间差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.011.T003表3原花青素复方对鸡蛋品质的影响项目组别第7 d第21 d第35 d第49 d蛋形指数Ⅰ组1.31±0.03a1.32±0.03a1.32±0.03a1.32±0.04aⅡ组1.31±0.03a1.32±0.02a1.32±0.03a1.32±0.03aⅢ组1.31±0.03a1.32±0.02a1.32±0.03a1.32±0.02aⅣ组1.31±0.02 a1.32±0.03a1.32±0.02a1.32±0.02a蛋壳厚/mmⅠ组0.33±0.04a0.32±0.04a0.31±0.03a0.30±0.01aⅡ组0.33±0.04 a0.33±0.04a0.32±0.03a0.31±0.02aⅢ组0.34±0.04 a0.33±0.03a0.32±0.02a0.31±0.03aⅣ组0.34±0.03 a0.33±0.03a0.32±0.02a0.31±0.03a蛋壳强度/（kg/cm2）Ⅰ组3.62±0.52 a3.59±0.28a3.52±0.33a3.49±0.31aⅡ组3.63±0.57 a3.61±0.36a3.54±0.25a3.51±0.23aⅢ组3.63±0.29 a3.62±0.41a3.55±0.31a3.52±0.26aⅣ组3.63±0.24 a3.62±0.39a3.55±0.30a3.52±0.27a哈夫单位Ⅰ组87.53±1.34a86.23±1.30b85.46±1.27b84.32±1.48bⅡ组87.53±1.36a86.36±1.34b85.51±1.24b84.39±1.26bⅢ组87.53±1.29a87.70±1.34a86.82±1.21a85.73±1.37aⅣ组87.54±1.32 a87.81±1.35a86.75±1.22a85.74±1.32a2.3原花青素复方对蛋黄胆固醇含量的影响（见表4）由表4可知，饲料中添加不同水平的原花青素复方，试验组蛋黄中平均胆固醇含量试验第7 d测定显著低于对照组（P0.05），各试验组之间差异不显著（P0.05）；蛋黄中平均胆固醇含量试验第21、35和49 d测定各试验组极显著（P0.01）低于对照组，且第Ⅲ和Ⅳ组极显著（P0.01）低于第Ⅱ组，第Ⅳ和第Ⅲ组间差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.02.011.T004表4原花青素复方对蛋黄平均胆固醇含量的影响组别第7 d第21 d第35 d第49 dⅠ组13.42±1.36a13.24±1.53 A13.19±1.51 A13.20±1.40 AⅡ组12.38±1.35b11.87±1.43B11.26±1.38B10.72±1.36BⅢ组12.27±1.26b10.16±1.31C9.45±1.32C9.43±1.37CⅣ组12.23±1.25 b10.14±1.36C9.46±1.36C9.43±7.37Cmg/g随着饲料中原花青素复方水平的提高胆固醇在蛋黄中含量的减少越来越明显，试验35 d测定蛋黄中的胆固醇含量比对照组降低约29%，降低量最大的试验Ⅲ和Ⅳ组于试验第35 d后胆固醇含量已基本趋于稳定。3讨论3.1原花青素对蛋鸡生产性能的影响原花青素具有抗氧化、增强鸡体免疫力、抗热应激、清除鸡体多余自由基的生物学功能。随着养殖业的快速发展，高负荷生产、高强度代谢和高密度生活环境使家禽经常处于应激状态，降低鸡体的抗病力和生产性能[10]。原花青素等自由基清除剂进入鸡体后可清除机体有害自由基，维持鸡体健康和生产性能，在家禽饲料中添加抗氧化剂来保持机体健康、提高生产性能是当前采用的一种重要的调控方式[3,11]。试验表明，不同水平的天然抗氧化剂原花青素复方添加到蛋鸡饲料中可以显著提高蛋鸡的产蛋率和饲料利用率，对蛋质量影响不显著，但有增加的趋势；胡如久等[12]研究显示，在280 d罗曼白蛋鸡饲料中添加100 mg/kg原花青素，42 d测定料蛋比显著降低、产蛋率提高极显著；张玉等[13]在蛋鸡饲料中添加50 mg/kg原花青素可显著抑制产蛋后期蛋鸡的产蛋率的下降。上述两个试验研究表明，虽然选择的试验鸡种及产生的效果有差异，但和本试验的结论基本是一致的，蛋鸡饲料中添加适量的原花青素可以提高蛋鸡生产性能，可能是通过其增强机体免疫力来实现的。3.2原花青素复方对鸡蛋品质的影响蛋形指数、蛋壳厚度、蛋壳强度和哈夫单位是衡量鸡蛋品质的重要指标。本试验中，平均蛋形指数、蛋壳厚度和蛋壳强度各试验组和对照组差异不显著（P＞0.05），但试验组的蛋壳更厚一些、蛋壳强度更大一些，说明试验组的蛋壳厚度和蛋壳强度比对照组有下降减缓的趋势，这与张玉等[13]的研究结果一致。优质的蛋壳厚度和蛋壳强度可以降低鸡蛋破损率，有利于提高鸡蛋合格率和蛋鸡产蛋效益[14]。蛋鸡饲料添加原花青素复方能增加蛋壳强度，改善蛋壳质量，可能与原花青素较强的抗氧化性有关。本试验结果表明，第21、35、49 d试验组平均哈夫单位显著（P0.05）提高。Kaya等[15]研究表明，原花青素的合理应用可提高鸡蛋哈夫单位。哈夫单位是目前国内、外对禽蛋内部品质进行评价的理想指标。哈夫单位越大，蛋白质含量相对较高，鸡蛋品质越好。试验表明蛋鸡饲料适当添加原花青素复方可改善鸡蛋品质。3.3原花青素复方对鸡蛋黄胆固醇的影响原花青素能够加速机体胆固醇分解，降低蛋黄中胆固醇的沉积[16]。试验表明，在饲料中添加原花青素复方，21 d可极显著（P＜0.01）降低蛋黄中胆固醇的含量，降低最大的第Ⅲ和Ⅳ组于试验第35 d胆固醇含量已基本趋于稳定，第Ⅳ和第Ⅲ组差异不显著（P0.05）。在448 d罗曼蛋鸡饲料中添加原花青素50 mg/kg，试验56 d，胆固醇含量显著（P0.05）降低[13]；在280 d罗曼白蛋鸡饲料中添加100 mg/kg葡萄源原花青素，42 d测定蛋黄胆固醇含量显著（P0.05）降低[12]。说明将原花青素应用于鸡蛋生产，降低蛋黄胆固醇含量、生产低胆固醇保健蛋是可行的。鸡蛋因其易加工、风味好、营养全、价格低、分布广、适合各类人群消费等优点[17]，是我国居民在日常饮食中应用最为广泛的动物性食品。低胆固醇保健鸡蛋对我国广大高脂血人群的体质健康具有积极的推动作用。本试验中，试验Ⅲ、Ⅳ组蛋鸡的生产性能、鸡蛋品质最佳、蛋黄胆固醇含量最低，且两组之间各测试指标差异不大。综上所述，添加100 mg/kg的原花青素复方较好。4结论饲料中添加原花青素复方，可提高蛋鸡生产性能、改善鸡蛋品质和降低蛋黄中胆固醇的含量。本试验条件下，添加量以100 mg/kg为宜。低胆固醇保健鸡蛋对人体血浆胆固醇的影响和原花青素的抗氧化性对延长鸡蛋的贮藏期还需要进一步研究。