菌糠是食用菌栽培的底料，由麦秸、稻草、玉米芯、棉籽壳等原料组成，通过菌体的生物固氮、酶解等作用，改善其营养成分，并产生多糖类、有机酸等有益动物健康的物质，具有一定的饲用潜力[1-3]。菌糠因木质纤维素含量高，直接饲喂动物难以消化；且质地松软含水量高，易霉变，难保存，故需要加工处理以提高利用率[4]。菌糠通过微生物发酵能够降解畜禽难以利用的抗营养因子，提高粗蛋白、粗脂肪含量，降低纤维素含量，使菌糠利用率更高[5]。李成舰等[6]研究发现，杏鲍菇菌糠经混合菌发酵后，其粗蛋白、粗脂肪含量明显提高，纤维素含量明显降低。因此，利用混合菌发酵能够明显改善菌糠的营养成分。在动物饲料中添加一定量的发酵菌糠，能够提高动物的生产性能，降低畜禽饲养成本，解决资源浪费问题。张耀等[7]研究发现，繁殖母猪饲粮中添加30%平菇菌糠的饲喂效果最好。目前，发酵菌糠在猪、禽、牛生产中应用较多，在羊生产中的应用研究较少。本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊生长性能、营养物质表观消化率及抗氧化能力的影响，确定菌酶协同发酵金针菇菌糠在湖羊饲粮中的适宜添加比例，为菌酶协同发酵金针菇菌糠饲料在肉羊生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料金针菇菌糠原料主要有棉籽壳、麦秸、稻草、玉米芯等，由徐州正海食用菌种植有限公司提供。复合微生态制剂（枯草芽孢杆菌≥1.0×1013 CFU/kg、酵母菌≥5.0×1011 CFU/kg）和复方酶制剂（纤维素酶≥2.0×106 U/kg、葡聚糖酶≥8.0×106 U/kg、木聚糖酶≥2.0×107 U/kg）。复方微生态制剂和复方酶制剂均由徐州隆兴生物有限公司提供。在金针菇菌糠中添加250 mg/kg混合菌剂，装入塑封袋中，排出空气，密封发酵12 d。1.2试验设计选取90只体重（21.78±0.67）kg的健康湖羊公羔，随机分为5组，每组3个重复，每个重复6只羊。C组（对照组）湖羊饲喂基础饲粮，Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别在基础饲粮中添加20%、25%、30%、35%菌酶协同发酵金针菇菌糠。试验期60 d。基础饲粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.005.T001表1基础饲粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米56.00粗蛋白质/%17.00豆粕7.55钙/%0.90小麦麸10.00总磷/%0.58棉籽粕8.00粗脂肪/%3.16菜籽粕5.00酸性洗涤纤维/%8.44玉米皮5.00中性洗涤纤维/%18.42葵花饼3.00消化能/(MJ/kg)12.33玉米干酒糟及其可溶物2.00石粉1.80磷酸氢钙0.75食盐0.60预混料0.30注：1.每千克预混料为日粮提供：Cu 5 000.0 mg、Fe 20 000.0mg、Mn 50 000.0 mg、Se 25.0 mg、 Zn 35 000.0 mg、I 200.0 mg、Co 150.0 mg、VA 16 666.7 kIU、VD 6 666.7 kIU、VE 66 666.7 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验前彻底打扫、消毒羊舍，各试验组严格按照统一要求进行管理。预试期对湖羊进行健康检查，严格按照羊场免疫程序进行接种疫苗，做好试验羊驱虫和饲料过渡。试验期按时按量饲喂，自由饮水，每天清理饲槽，做好采食记录。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验期间做好投喂量和剩料量记录，试验前和试验结束清晨湖羊空腹称重，试验结束计算试验羊的平均日采食量、平均日增重和料重比。平均日采食量=(总投喂量-总剩料量)／(试验动物数×试验天数)(1)平均日增重=(末重-初重)／试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2营养物质表观消化率饲喂试验结束前，每个重复选取2只羊，采用全收粪法进行代谢试验，每天晨饲后连续5 d采集粪便，将收集的鲜粪使用10%稀硫酸进行固氮处理，按照《饲料分析与饲料质量检测技术》[8]测定干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）、中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）、钙（Ca）、磷（P）指标，计算营养物质的表观消化率。营养物质表观消化率=(A-B)/A×100%(4)式中：A为实际营养物质摄入量；B为粪中营养物质排出量。1.4.3血清生化指标及抗氧化指标试验结束后，每个重复随机取2只羊，颈静脉采血10 mL，收集血清，-20 ℃冰箱保存。采用富士全自动干式生化分析仪（dri-chen nx500ivc+）测定总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）含量，试剂盒购自上海安加商国际贸易有限公司。使用试剂盒测定总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量，具体步骤按照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒进行测定。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2013进行处理，SPSS 17.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊生长性能的影响（见表2）由表2可知，试验Ⅲ组湖羊的平均日增重分别比C组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅳ组提高了25.47%、23.60%、16.51%、10.19%（P0.05）；试验Ⅲ组湖羊的料重比显著低于C组和Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.005.T002表2菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[kg/(只·d)]料重比C组（对照组）21.75±0.3629.68±2.35132.17±9.54c1.22±0.109.23±1.21aⅠ组22.03±1.0230.08±1.81134.17±16.74c1.28±0.039.54±2.01aⅡ组21.12±0.6929.66±1.79142.33±28.01b1.26±0.028.85±1.24bcⅢ组21.57±1.1331.52±3.02165.83±11.45a1.29±0.077.78±0.98cⅣ组22.45±0.9231.48±1.89150.50±18.74b1.27±0.158.44±0.79bc注：同列数据肩标含有相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05），不同字母表示差异显著（P0.05）；下表同。2.2菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊营养物质表观消化率的影响（见表3）由表3可知，Ⅲ组湖羊CP、EE、NDF、ADF、DM表观消化率显著高于C组、Ⅰ组、Ⅱ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.005.T003表3菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊营养物质表观消化率的影响组别DMCPEENDFADFCaPC组（对照组）67.21±4.67c68.43±0.87c63.23±5.34b61.23±2.45c48.34±2.97c44.21±2.1947.43±3.24Ⅰ组70.01±3.98b70.02±1.24c65.34±4.49b64.73±3.01b51.23±3.21c45.32±2.1447.89±2.98Ⅱ组71.34±3.45b74.76±2.04b66.21±3.27b66.45±2.05ab55.62±4.39b45.01±3.0348.32±1.89Ⅲ组74.83±3.09a80.41±1.89a70.53±3.23a69.89±4.03a59.54±5.29a46.12±3.1948.91±2.87Ⅳ组75.89±4.01a79.98±1.24a68.32±2.45ab64.45±3.76b56.65±6.23b45.89±2.2748.78±2.04%2.3菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，各试验组湖羊血清TP、GLU和TG含量显著高于对照组（P0.05），且以试验Ⅲ湖羊血清TP、GLU和TG含量最高；试验Ⅲ组、Ⅳ组湖羊血清BUN含量显著低于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.005.T004表4菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)GLU/(mmol/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)BUN/(mmol/L)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)C组（对照组）60.53±3.02b30.01±1.973.04±0.59b60.39±2.7862.89±0.295.15±0.23a1.43±0.160.25±0.03bⅠ组64.83±3.19a31.13±1.284.57±0.79a59.97±3.1260.64±0.125.04±0.29a1.39±0.130.42±0.04aⅡ组66.61±3.30a31.52±1.334.59±0.81a61.00±1.9861.34±0.254.54±0.12a1.48±0.120.46±0.03aⅢ组66.91±2.98a31.93±1.684.76±0.39a60.83±3.0163.04±0.224.12±0.25b1.49±0.090.51±0.03aⅣ组66.13±3.12a30.83±1.324.34±0.33a59.21±5.4960.41±1.454.01±0.12b1.47±0.210.46±0.01a2.4菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，试验Ⅲ组湖羊血清GSH-Px、SOD的活性和T-AOC最高，显著高于C组和试验Ⅰ组（P0.05）。试验Ⅲ组湖羊血清MDA含量最低，显著低于C组和试验Ⅰ组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.005.T005表5菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊抗氧化指标的影响组别GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)C组（对照组）66.22±4.35c81.07±1.64c2.11±0.23c3.98±0.14aⅠ组118.23±4.23b92.89±2.34b2.59±0.24b3.85±0.19aⅡ组166.86±3.24a99.23±3.14a3.42±0.31a2.42±0.08bⅢ组174.23±3.76a101.89±2.49a3.65±0.34a2.02±0.10bⅣ组172.34±4.35a98.56±2.61a3.39±0.21a2.13±0.42b3讨论3.1菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊生长性能的影响金针菇菌糠是生产食用菌的下脚料，含有大量粗纤维，而反刍动物能够将金针菇菌糠中的粗纤维降解为容易吸收的营养物质，从而改善原料的适口性，提升生产性能。盛清凯等[9]在饲粮中添加金针菇菌渣饲喂肉羊，发现肉羊增重提高了16.58%。史陈博等[10]研究发现，在饲粮中添加25％杏鲍菇菌糠可增加湖羊的平均日采食量，降低料重比，饲粮适口性得到改善。本试验研究表明，饲粮中添加30%菌酶协同发酵金针菇菌糠增重效果较好，表明发酵菌糠对湖羊的生长具有促进作用，与王霞等[11]、高旭红等[12]研究结果相似。郭万正等[13]研究发现，饲粮中添加12%~20%杏鲍菇饲喂波尔山羊的增重不明显，当添加36%杏鲍菇时，波尔山羊增重反而下降。本试验中，随着菌酶协同发酵金针菇菌糠添加量增加，湖羊的平均日增重呈先升高后降低的趋势，当金针菇菌糠添加量为35%时，湖羊的平均日采食量、平均日增重均有所降低，可能是因为金针菇菌糠中过高水平的木质素影响了动物对营养成分的消化和利用，表明在湖羊饲粮中发酵菌糠的添加量不宜过高。3.2菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊营养物质表观消化率的影响饲料原料经微生物发酵后，能够降解大分子营养物质，改善瘤胃内环境和发酵效率，从而提高饲粮营养物质的表观消化率[14-15]。林萌萌等[16]研究发现，肉牛饲粮中添加23%菌糠时，肉牛饲料营养物质表观消化率最高。孟梅娟等[17]研究发现，饲粮中添加15%和25%金针菇菌糠，提高了波杂山羊营养物质消化率。本试验中，饲粮中添加30%菌酶协同发酵金针菇菌糠各指标表观消化率均高于其他组，表明饲粮中添加30%菌酶协同发酵金针菇菌糠可以提高湖羊的消化率。原因可能是添加发酵菌糠能够改善湖羊的瘤胃微生态内环境，从而提高湖羊的营养物质的消化率。本试验中，添加35%菌酶协同发酵菌糠时，湖羊的各指标表观消化率均出现下降，可能是因为菌糠中含有大量的纤维素，影响了瘤胃的发酵功能，在消化吸收过程中，营养成分未被完全吸收，导致营养物质表观消化率下降。3.3菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊血清生化指标的影响血清生化指标能够反映动物机体的健康情况及营养物质的代谢水平，其中TP、ALB、BUN和GLU作为蛋白质和糖代谢的重要指标，可反映饲粮中的蛋白质水平及动物对蛋白质的消化吸收程度[18]。TP含量能够直接影响动物机体代谢的水平、动物生长的速度及饲料转化的效率。本试验结果表明，试验组湖羊血清TP、ALB含量均高于对照组，且发酵菌糠添加量为30%时，湖羊血清中TP、ALB最高，表明机体蛋白质代谢旺盛，促进了动物生长，提高了代谢水平和饲料转化率。因此，发酵菌糠具有促进蛋白质合成的作用。BUN是衡量动物机体氮沉积的重要指标，是蛋白质代谢后的产物，与蛋白质的利用率呈负相关，BUN含量升高，蛋白质分解代谢增强，体内氮沉积降低；BUN含量降低，蛋白质合成代谢增强，体内氮沉积上升[19-20]。本试验结果表明，随着发酵菌糠添加量增加，血清BUN含量降低，表明湖羊饲喂发酵菌糠促进了机体的尿素循环，降低BUN含量，改善羊体内的氮素营养，增加体内蛋白质的贮备。GLU是动物机体能量平衡的主要指标，正常情况下，GLU含量会达到动态平衡[21]。有研究报道，若饲粮能量不足或动物机体出现消化不良等现象，将会影响饲粮的利用率，进而导致动物血清GLU含量降低[22]。Stanley[23]研究发现，动物机体中的血糖含量应在6.1 mmol/L以下。本试验结果表明，各试验组湖羊血清GLU含量显著低于对照组，且各试验组湖羊血清GLU含量均在3.04~4.76 mmol/L之间，表明饲粮能量平衡，菌酶协同发酵金针菇菌糠促进了湖羊瘤胃微生物的生长繁殖，有利于饲粮粗纤维发酵并产生挥发性脂肪酸[17]。TC和TG可作为脂肪代谢和肝功能的指标，也能够直接反映机体对脂肪消化吸收的情况[24]。本试验结果表明，各试验组湖羊血清TG含量均高于对照组；随着发酵菌糠添加量增加，TG含量升高；当发酵菌糠添加量为30%时，湖羊血清TG含量达到最高，表明发酵后的金针菇菌糠提高了湖羊脂类代谢。AST和ALT活性是衡量肝脏合成蛋白质功能的两大重要指标[25]。本研究表明，各组湖羊血清AST和ALT活性差异不显著，表明不同比例发酵菌糠对湖羊的蛋白质和氨基酸代谢无显著影响。3.4菌酶协同发酵金针菇菌糠对湖羊抗氧化能力的影响GSH-Px、SOD、T-AOC和MDA是反映机体抗氧化水平的重要指标[26]。有研究发现，发酵金针菇菌糠饲喂母猪能够提高母猪的免疫和抗氧化性能[27]。孙廷等[28]研究发现，饲粮中添加蘑菇菌渣可使蛋鸡血清MDA含量降低，GSH-Px和SOD活性显著提高。史陈博[29]研究发现，饲喂杏鲍菇菌糠湖羊肝脏中的SOD活性高于对照组，湖羊血清和背最长肌中GSH-Px活性升高，MDA含量降低。本试验结果发现，饲粮中添加30%菌酶协同发酵的金针菇菌糠，湖羊血清T-AOC以及GSH-Px和SOD的活性最高，MDA含量最低，表明饲粮中添加菌酶协同发酵金针菇菌糠能够提高动物机体的抗氧化能力，减少机体损伤。4结论本试验条件下，在饲粮中添加菌酶协同发酵金针菇菌糠可改善湖羊的生长性能，提高血清抗氧化功能和营养物质表观消化率。综合各项指标，在湖羊饲粮中添加30%发酵菌糠效果较好。