厚朴是木兰科,厚朴属植物[1],主要成分是厚朴酚[2],在中医临床中主要用于化湿导滞、行气平喘、化食消痰、祛风镇痛,具有抗炎[3]、抗氧化[4]、抗癌[5]、缓解应激[6]等生物学功能。厚朴中的活性物质可显著改善仔猪粗蛋白的表观消化率,促进蛋白吸收,改善肠道菌群结构,增加有益菌数量,保障仔猪肠道健康[7]。在猪卵母细胞体外培养时添加厚朴提取物可以降低活性氧(ROS)水平,提高热应激猪卵母细胞体外成熟率[8]。厚朴提取物可有效缓解小鼠胚胎损伤[9]。日粮中添加厚朴提取物可增加临武鸭胸肌蛋白含量,降低胸肌肌纤维直径,增加胸肌、腿肌肌纤维密度[10]。日粮中添加厚朴等复合中药可显著提高肉鸡生长性能、抗氧化和免疫能力[11],显著改善肉质,增强抗氧化能力[12]。厚朴提取物可降低猪链球菌诱导的炎症反应和细胞损伤[13-14]。目前,关于厚朴提取物在动物生产中的研究主要集中在热应激、抗炎、免疫、繁殖等方面,在育肥猪生长性能及经济效益方面的研究较少。本研究在日粮中添加厚朴提取物,探索其对育肥猪生长性能、抗氧化能力、血清指标和经济效益的影响,为厚朴提取物在猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料及地点饲用厚朴提取物购自扶风斯诺特生物科技有限公司,其主要有效活性成分为:厚朴总酚含量大于95%、水分含量低于6%。试验于山东烟台顺伟养猪合作社进行。1.2试验设计选择100日龄胎次一致、品种相同、体况相近、公母各半的“杜×长×大”三元杂交猪96头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复8头。对照组猪饲喂基础日粮,试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮中添加0.015%、0.030%、0.045%厚朴提取物。基础日粮为玉米-豆粕型,参照《猪饲养标准》(NY/T 65—2004)并结合本地实际配制,基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T001表1基础日粮及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米67.20消化能/(MJ/kg)13.50豆粕15.00粗蛋白质/%14.50麦麸6.45钙/%0.77棉粕4.00总磷/%0.63次粉3.50有效磷/%0.24石粉0.80赖氨酸/%0.90磷酸氢钙0.60蛋氨酸+半胱氨酸/%0.52食盐0.45苏氨酸/%0.55预混料2.00注:1.预混料购自山东和美华饲料有限公司。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理试验前对栏舍进行全面消杀,空栏1周。预试期5 d,正式试验期60 d。试验期间,试验猪自由采食、饮水,保证猪舍内通风、保温条件良好。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始及试验结束时,所有试验猪空腹称重,记为初重和末重,记录每天的投料量和余料量,计算平均日增重、平均日采食量和料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=(投料量-余料量)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2血清抗氧化指标和生化指标屠宰时收集血液10 mL,3 000 r/m离心20 min,取上清液于无菌无酶EP管中,-20 ℃冰箱保存,用于检测血清抗氧化、生化和免疫指标。使用免疫比浊法测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量,试剂盒购自南京建成生物工程研究所。采用酶联免疫吸附法测定甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等脂代谢指标。使用罗氏C701自动生化分析仪测定血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、白球比(A/G)、尿素氮(BUN)等生化指标。1.4.3血清免疫指标使用罗氏C701自动生化分析仪测定血清中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量。ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-B(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)含量,试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.4.4屠宰性能试验结束时,每个重复中随机选取2头猪进行屠宰,进行屠宰性能和肉质检测。去头蹄内脏、保留板油和肾脏称重为胴体重。背膘厚度=(六七胸椎结合部脂肪厚度+胸腰椎结合部脂肪厚度+腰间椎结合部脂肪厚度)/3(4)屠宰率=胴体重/活重×100%(5)眼肌面积=眼肌宽度×眼肌厚度×0.7(6)1.4.5肉品质和猪肉常规营养成分背最长肌肉色和大理石纹评分参考《猪肉质测定技术规程》(NY/T 821—2019)。使用手持pH计测定宰后背最长肌45 min和24 h的pH值;采用悬挂法测定滴水损失。采用恒温干燥失重法测定水分,采用马福炉灰化法测定粗灰分,采用凯氏定氨法测定粗蛋白;采用索氏抽提法测定粗脂肪。1.4.6经济效益综合考虑厚朴提取物添加后对肥育猪的采食量和生猪活重的影响,计算育肥猪的养殖经济效益。经济效益以各组单头猪养殖60 d计算。饲料成本=采食量×饲料单价(7)养殖收入=猪增重×生猪销售价(8)利润=养殖收入-饲料成本-厚朴提取物使用成本(9)混合日粮成本为3 518元/t,厚朴提取物单价为70元/kg,生猪售价为22.2元/kg。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件初步整理,SPSS 25.0统计分析软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较,若方差不齐,采用Dunnetfs(T3)进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.01表示差异极显著,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1厚朴提取物对育肥猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,试验2组和试验3组猪的末重、平均日增重、平均日采食量极显著升高(P0.01),料重比极显著降低(P0.01);试验1组猪的料重比显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T002表2厚朴提取物对育肥猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食/[kg/(头·d)]料重比对照组51.32±3.5898.23±5.24Bb0.78±0.12Bb2.21±0.12Bb2.83±0.02Aa试验1组51.12±3.62101.58±5.67ABb0.84±0.14ABab2.29±0.10ABab2.72±0.01Ab试验2组51.23±4.02105.49±4.37Aa0.90±0.10Aa2.34±0.13Aa2.60±0.05Bc试验3组51.18±3.78106.28±5.01Aa0.92±0.11Aa2.37±0.14Aa2.58±0.07Bc注:同列数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P0.01),不同小写字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表3、表6与此同。2.2厚朴提取物对育肥猪血清抗氧化及生化指标的影响(见表3、表4)由表3可知,与对照组相比,试验2组、试验3组猪血清SOD、GSH-Px活性和T-AOC极显著升高(P0.01),MDA含量极显著降低(P0.01),试验1组猪血清MDA含量显著降低(P0.05);试验3组猪血清CAT活性极显著升高(P0.01),试验2组猪CAT活性显著升高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T003表3厚朴提取物对育肥猪血清抗氧化指标的影响组别SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)T-AOC/(U/mL)CAT/(U/mL)对照组145.23±4.12Bb575.46±5.46Bb10.27±1.02Aa1.97±0.12Bc46.58±1.12Bc试验1组150.29±4.23ABab580.21±5.21ABb8.57±1.35ABb2.08±0.18ABbc47.68±1.31ABbc试验2组154.31±3.89Aa587.43±4.89Aa7.94±0.12Bb2.34±0.20Aab49.32±1.28ABab试验3组156.42±4.02Aa589.38±5.06Aa7.26±0.58Bb2.41±0.16Aa50.12±1.67Aa由表4可知,与对照组相比,试验2组和试验3组猪血清TC、TG、HDL-C含量均极显著降低(P0.01);试验3组猪血清BUN含量极显著降低(P0.01)。试验3组猪血清TC含量显著低于试验1组(P0.05),BUN含量显著低于试验1组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T004表4厚朴提取物对育肥猪脂质代谢及血清生化指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组TC/(mg/L)1 952.30±34.50Aa1 904.20±40.20ABab1 855.60±36.80Bb1 832.80±42.90BcTG/(mmol/L)1.21±0.15Aa1.01±0.18ABab0.86±0.11Bb0.78±0.13BbLDL-C/(mmol/L)0.32±0.120.34±0.210.28±0.180.31±0.20HDL-C/(mmol/L)2.85±0.15Aa2.78±0.17Aa2.43±0.12Bb2.31±0.20BbTP/(g/L)75.40±10.3076.10±9.5078.40±8.4079.10±13.80BUN/(mmol/L)5.64±1.12Aa4.85±1.25ABab3.67±0.84ABbc3.15±0.46BcALB/(g/L)48.50±3.1049.20±4.5050.90±5.2051.80±5.40GLB/(g/L)26.90±2.1026.90±1.8027.50±3.1027.30±2.60A/G1.801.831.851.90注:同行数据肩标不同大写字母表示差异极显著(P0.01),不同小写字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表5、表7与此同。2.3厚朴提取物对育肥猪血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,试验2组和试验3组猪血清IgA含量极显著升高(P0.01);试验3组猪血清IgG含量显著升高(P0.05)。与对照组相比,试验3组猪血清IL-6含量极显著降低(P0.01),试验2组猪血清IL-6含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T005表5厚朴提取物对育肥猪血清免疫指标的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组IgA/(g/L)2.68±0.15Bb2.98±0.18ABab3.21±0.20Aa3.28±0.23AaIgM/(g/L)2.01±0.202.14±0.232.21±0.192.29±0.21IgG/(g/L)14.35±2.01b15.62±2.15ab16.78±1.89ab18.23±2.05aIL-1β/(ng/L)14.58±1.8913.42±1.3512.56±1.4811.86±2.01TNF-α/(ng/L)165.23±8.47163.14±8.68158.25±9.01155.32±7.49IL-6/(ng/L)13.46±1.45Aa12.35±1.52ABab11.15±1.31ABb10.46±1.35BbIL-8/(ng/L)163.84±2.35162.48±3.01160.35±4.21159.42±3.02IFN-γ/(ng/L)7.46±1.027.23±1.147.15±1.056.98±1.472.4厚朴提取物对育肥猪屠宰性能的影响(见表6)由表6可知,与对照组相比,试验3组猪背膘厚度显著降低(P0.05),眼肌面积极显著升高(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T006表6厚朴提取物对育肥猪屠宰性能的影响组别胴体重/kg屠宰率/%背膘厚度/mm眼肌面积/cm2对照组73.03±3.4674.35±2.0526.33±2.12a55.34±2.01Bb试验1组75.74±4.0674.56±2.3225.58±1.89ab56.39±1.64ABb试验2组78.47±5.2374.39±3.5624.12±1.03ab58.32±1.47ABab试验3组79.31±4.8374.62±4.6123.01±1.74b59.57±1.52Aa2.5厚朴提取物对育肥猪肉品质及猪肉常规养分的影响(见表7)由表7可知,与对照组相比,试验2组和试验3组肉色评分极显著升高(P0.01);试验3组肉的滴水损失极显著降低(P0.01);试验3组肉的pH45 min值极显著升高(P0.01);试验3组肉的大理石纹极显著升高(P0.01)。与对照组相比,试验3组肉的水分含量极显著降低(P0.01),试验2组肉的水分含量显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T007表7厚朴提取物对育肥猪肉品质及猪肉常规养分的影响组别对照组试验1组试验2组试验3组肉色评分2.49±0.21Bb2.68±0.23ABab2.98±0.18Aa3.16±0.16Aa滴水损失/%2.68±0.24Aa2.54±0.21ABa2.32±0.18ABb2.21±0.16BbpH45 min值6.01±0.11Bb6.15±0.18ABab6.23±0.10ABab6.37±0.16AapH24 h值5.82±0.235.73±0.265.81±0.315.67±0.19大理石纹2.48±0.11Bb2.52±0.20Bb2.68±0.18ABab2.94±0.15Aa粗蛋白/%15.23±1.9516.45±2.0117.31±2.1318.21±1.96粗脂肪/%1.64±0.541.75±0.611.81±0.591.92±0.70粗灰分/%1.67±0.541.72±0.491.84±0.621.96±0.53水分/%81.46±1.45Aa80.08±1.23ABa79.04±1.52ABb77.91±1.34Bb2.6厚朴提取物对育肥猪经济效益的影响(见表8)由表8可知,与对照组相比,试验期内各组的养殖收入分别增加78.81、163.17和181.82元;各添加组的经济效益分别增加60.48、132.78和143.57元,各厚朴提取物添加组的经济效益分别比对照组增加10.52%、23.10%和24.97%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.21.008.T008表8厚朴提取物对育肥猪经济效益的影响组别饲料成本/元厚朴提取物成本/元养殖收入/元经济效益/元对照组466.4901 041.40574.92试验1组483.371.441 120.21635.40试验2组493.932.951 204.57707.70试验3组500.264.481 223.22718.483讨论3.1厚朴提取物对育肥猪生长性能的影响厚朴可以提升畜禽的生长性能。张玉千[15]研究发现,在断奶仔猪日粮中添加厚朴复合中草药可显著提高断奶仔猪末重和平均日增重。刘忠银[16]研究发现,在日粮中添加含厚朴的中草药制剂可降低育肥猪的料重比。屈圣富等[17]报道,在日粮中添加0.04%厚朴提取物可显著提高断奶仔猪平均日增重,降低料重比。本研究发现,日粮中添加0.030%、0.045%厚朴提取物可极显著提高育肥猪末重、平均日采食量和平均日增重,极显著降低料重比,与上述研究结果一致。原因可能与厚朴提取物能够有效结合生长抑素,稳定肠道黏膜细胞,有效保护肠道黏膜屏障,提高血清胃泌素、胃动素分泌,促进肠道蠕动,提高消化机能有关[18]。3.2厚朴提取物对育肥猪血清抗氧化指标的影响血清T-AOC以及GSH-Px、SOD和CAT活性可以反映机体抗氧化能力。GSH是机体内最重要的非酶性抗氧化物,是评断机体抗氧化能力的重要指标[19];GSH-Px能够特异性结合GSH催化过氧化氢的还原[20]。MDA是氧化应激的主要标志物,其含量可反映机体的抗氧化水平,MDA含量越低表明机体抗氧化能力越强。屈圣富等[17]研究发现,添加0.04%的厚朴提取物显著提高了断奶仔猪肝脏GSH-Px、SOD、CAT活性,原因可能是添加厚朴提取物清除了自由基,诱导了肝脏中抗氧化酶活性基因的表达,继而增强抗氧化酶活性[21-22]。本研究结果发现,试验2组和试验3组猪血清SOD、GSH-Px的活性和T-AOC极显著提高,CAT活性显著提高,MDA含量极显著降低,与上述报道结果一致。3.3厚朴提取物血清生化指标的影响脂代谢对机体的生长、繁殖、免疫等方面具有重要作用。畜禽的背膘厚度、肌内脂肪含量、腹脂率等重要经济性状均与脂代谢密切相关。衡量脂代谢的指标主要有TC、TG、HDL-C、LDL-C、NEFA等。其中HDL-C是血浆脂蛋白的主要成分,主要作用是将TC转运至肝脏分解。LDL-C主要是转运内源性胆固醇,将脂类转运至肝脏外组织,含量过高会导致动脉粥样硬化。TG是机体内脂肪沉积的重要判断因子。梅华迪等[7]发现,添加厚朴提取物后可显著降低断奶仔猪血清中TG含量。屈圣富等[17]研究发现,日粮中添加0.04%厚朴提取物显著降低了肝脏中TC和HDL-C含量。本研究发现,在日粮中添加0.030%和0.045%的厚朴提取极显著降低了育肥猪血清TG、TB、HDL-C含量,与上述研究结论一致。TP和ALB能够直接反映机体蛋白合成代谢水平。机体蛋白质代谢状态良好时,TP、ALB含量升高,BUN降低[23]。梅华迪等[7]研究发现,在日粮中添加0.04%厚朴提取物显著降低了断奶仔猪血清尿素和肌酐含量。本研究结果发现,各厚朴提取物添加组育肥猪血清BUN含量均有所降低,与上述结果一致。3.4厚朴提取物对育肥猪血清免疫指标的影响免疫球蛋白是体内具有抗体活性的球状蛋白质,可与抗原特异性结合,降低机体损伤,保证机体健康[24]。张玉千[15]研究发现,添加含厚朴的中草药可显著提高仔猪血清IgG、IgA和IgM含量。本研究发现,添加0.030%和0.045%的厚朴提取物显著增加了育肥猪血清IgG和IgA的含量。细胞因子是判别动物机体健康状况的重要指标,TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6和IL-8是重要的促炎因子。TNF-α能够调节中性粒细胞的活性和渗出,刺激血管内皮细胞,上调细胞黏附分子表达,促进氧化自由基分泌,造成组织损伤[25]。IL-1β和IL-6可调节内皮细胞黏附分子表达和中性粒细胞趋化性,控制中性粒细胞向组织聚集[26]。上述细胞因子启动会放大和延续炎症反应,对机体造成严重损伤,通过检测其含量即可判断机体是否健康。本研究发现,各组猪血清TNF-α、IFN-γ、IL-1β和IL-8含量差异不显著,表明饲养过程中育肥猪健康状况良好;试验2组、试验组猪血清IL-6含量均低于对照组,表明添加厚朴提取物后可保障育肥猪的健康。3.5厚朴提取物对育肥猪屠宰性能的影响动物屠宰性能能够反映动物生产性能的经济价值,胴体重、屠宰率、背膘厚度和眼肌面积是评价屠宰性能的重要指标[27]。本研究发现,日粮中添加0.045%的厚朴提取物可显著降低背膘厚度,添加0.030%和0.045%均显著增加了育肥猪的眼肌面积。背膘厚度越小,眼肌面积越大,瘦肉率越高,表明添加厚朴提取物可显著提高育肥猪的瘦肉率。3.6厚朴提取物对肉品质及猪肉营养成分的影响肉色能够直接反映猪肉的品质[28]。曹蓉等[12]研究发现,在日粮中添加150 mg/kg厚朴总酚显著改善了黄羽肉鸡肉色,降低了滴水损失,与本研究结果相似。本研究发现,添加0.045%厚朴提取物极显著提高了肉色和大理石纹,降低了滴水损失。肉色越鲜艳,表明含铁量越高;大理石纹评分越高,表明猪肉中沉积的脂肪越多,肉越香嫩,口感越好。综上所述,育肥猪日粮中添加0.045%的厚朴提取物可显著改善肉品质。粗蛋白、粗脂肪、粗灰分及水分是评估猪肉营养价值的重要指标,其中的脂肪与肌肉的多汁性、嫩度和风味显著相关。本研究发现,随着厚朴提取物添加量增加,猪肉粗蛋白、粗脂肪含量呈上升趋势,表明添加厚朴提取物提高了猪肉的营养价值。3.7厚朴提取物对育肥猪经济效益的影响刘忠银[16]研究发现,在育肥猪日粮中添加含厚朴提取物的中草药提高了每头猪的销售收入。本研究发现,养殖收入和经济效益随着厚朴提取物添加量增加而提高,但添加量高于0.030%后,经济效益的增幅减小。因此,本试验条件下,厚朴提取物的适宜添加量为0.030%。4结论本研究结果表明,添加厚朴提取物可有效改善育肥猪的生长性能、抗氧化能力、脂质代谢、屠宰性能和肉质,获得更高的经济效益。本试验条件下,厚朴提取物的建议添加量为0.030%。

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