彭泽鲫是江西省水产科学研究所和九江市水产科学研究所通过遗传育种技术获得的一个全新的水产品种，其生长快、抗病强、耐低氧、肉质鲜嫩，富含8种人体所需的必需氨基酸，是农业农村部重点推广的五大淡水鱼之一[1]。近年来，关于如何提高无公害绿色健康生态养殖质量、利用生态方法调节养殖水环境、提高鱼类的生长速度和抗病免疫能力成为目前研究的重点。益生菌具有成本投入低、收益效果好、无残留、不产生抗药性等优势，在水产养殖中的应用研究较多[2-3]。研究发现，益生菌能够快速降解、转化有机物，调节养殖水环境[4]。在饵料中添加益生菌能够提高饵料转化能力、加快生长速度、提高水产动物代谢水平、增强机体免疫能力[5-6]。益生菌在罗非鱼[7]、对虾[8]等养殖中应用较为广泛，但益生菌对彭泽鲫的影响及养殖水环境调节的研究较少。本试验在饵料中添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、低聚木糖和复合益生菌，研究其对彭泽鲫生长性能、生化指标以及养殖水质的影响，为益生菌在水产养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料彭泽鲫由江西省水产科学研究所黄马基地提供。枯草芽孢杆菌（2.0×1010 CFU/g）和地衣芽孢杆菌（2.0×1010 CFU/g）由山东宝来利来生物工程股份有限公司提供，低聚木糖（纯度95%）由山东龙力生物科技股份有限公司提供。1.2试验设计与饲养管理养殖试验于江西省水产科学研究所循环水养殖系统中进行。选取体重（10.81±0.47）g、健康的彭泽鲫300尾，随机分为5组，每组3个重复，每个重复20尾鱼，在15个柱形养殖桶（800 mm × 650 mm）中进行养殖。对照组鱼饲喂基础饵料，4个试验组分别在基础饵料中添加0.5%枯草芽孢杆菌、0.5%地衣芽孢杆菌、0.5%低聚木糖和0.5%复合益生菌（枯草芽孢杆菌∶地衣芽孢杆菌∶低聚木糖=1∶1∶1）。各组饵料采用逐级混匀的方式混匀，制粒成2 mm直径的颗粒饲料，晾干，置于-20 ℃冰箱保存。基础饵料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.014.T001表1基础饵料组成及营养水平原料组成含量营养水平合计100.0鱼粉15.0粗蛋白36.7豆粕45.0水分9.5谷朊粉5.0粗脂肪6.8玉米淀粉27.0灰分7.3鱼油5.0维生素复合物0.5矿物质复合物1.0磷酸二氢钙1.0氯化胆碱0.5注：1.维生素复合物为每千克饵料提供：VB1 15 mg、VB2 25 mg、吡哆醇15 mg、氰钛胺0.2 mg、叶酸5 mg、碳酸钙50 mg、肌醇500 mg、VB3 100 mg、VH 2 mg、VC 100 mg、VA 313 000 IU、VD 800 000 IU、VE 55 mg、VK 5 mg。2.矿物质复合物为每千克饵料提供：CoSO4·4H2O 0.5 mg、KI 1.5 mg、CuSO4·5H2O 10 mg、MnSO4·4H2O 40 mg、ZnSO4·7H2O 108 mg、NaCl 600 mg、FeSO4·7H2O 950 mg、MgSO4·7H2O 4 500 mg、NaH2PO4·2H2O 8 500 mg、KH2PO4 13 500 mg。3.营养水平均为实测值。%正式试验开始前，所有鱼使用基础饵料暂养2周，正式试验期8周。试验鱼每天9：30和16：30各喂1次，以鱼体重4%投喂饵料。养殖期间循环水系统保持开启状态，使养殖水环境保持稳定。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验最后1 d停止投料24 h后，称量每组试验鱼的总重量，随机选取3尾鱼，测定鱼的体重、体长，计算增重率、特定生长率、饵料系数、肥满度、蛋白质效率。增重率(WGR)=(Wt-W0)/W0×100%(1)特定生长率(SGR)=(lnWt－lnW0)/t×100%(2)饵料系数(FCR)=Fw/(Wt－W0)(3)肥满度=Wt/L3×100%(4)蛋白质效率(PER)=(Wt-W0)/(Fw×P)×100%(5)存活率(SR)=Nt/N0×100%(6)式中：Fw为饲料投喂重量（g）；W0为鱼的初始总重量（g）；Wt为鱼的终末总重量（g）；t为试验天数（d）；L为鱼的体长（cm）；P为饲料蛋白含量（%）；Nt为试验结束彭泽鲫数量；N0为试验开始彭泽鲫数量。1.3.2肝脏抗氧化和肠道消化酶指标测定生长性能后，试验鱼在冰上解剖，分离肝脏和肠道组织，分装于离心管中，于-80 ℃冰箱中保存。采用南京建成生物工程研究所试剂盒检测超氧化物歧化酶、溶菌酶、丙二醛、总抗氧化能力、过氧化氢酶、胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶指标。1.3.3水样采集及指标测定试验第6周，关闭循环水，试验鱼正常进行投喂饵料。在关闭循环水后的第1、3、5、10、15 d将养殖桶内水体搅拌混匀，在离水面20 cm处使用棕色玻璃瓶采集水样，检测水体中氨氮、总磷、总氮和化学需氧量。氨氮采用纳氏试剂法，总磷钼采用酸铵分光光度法，总氮采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法，化学需氧量采用碱性高锰酸钾法[9]。1.4数据统计与分析采用SPSS 25.0软件的单因素方差进行数据分析，Duncan's法进行组间的多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1益生菌对彭泽鲫生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，枯草芽孢杆菌组、地衣芽孢杆菌组、低聚木糖组和复合益生菌组彭泽鲫的肥满度均有所增加（P0.05），彭泽鲫的增重率、特定生长率和蛋白质效率显著提高（P0.05），饵料系数显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.014.T002表2益生菌对彭泽鲫生长性能的影响组别初重/g末重/g增重率/%特定生长率/(%/d)饵料系数肥满度/%蛋白质效率/%存活率/%对照组10.81±0.0320.23±0.17b87.14±1.20b0.83±0.01b2.12±0.03a3.40±0.34128.36±2.03c100.00±0.00枯草芽孢杆菌组10.83±0.0421.74±0.91a100.77±8.99a0.92±0.05a1.75±0.15bc3.66±0.10156.85±13.55ab100.00±0.00地衣芽孢杆菌组10.85±0.0121.78±0.59a100.67±5.40a0.92±0.03a1.79±0.09b3.68±0.42152.29±8.19b100.00±0.00低聚木糖组10.78±0.0321.70±0.45a101.43±4.65a0.93±0.03a1.75±0.08bc3.64±0.12155.50±6.73ab100.00±0.00复合益生菌组10.77±0.0722.71±0.44a110.94±5.16a0.99±0.03a1.59±0.06bc3.61±0.36171.28±7.06a100.00±0.00注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3、表4与此同。2.2益生菌对彭泽鲫肝脏抗氧化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，枯草芽孢杆菌组、地衣芽孢杆菌组、低聚木糖组和复合益生菌组彭泽鲫肝脏超氧化物歧化酶、溶菌酶活性均显著升高（P0.05），酸性磷酸酶活性显著降低（P0.05）；枯草芽孢杆菌组和复合益生菌组彭泽鲫肝脏丙二醛含量显著降低（P0.05），过氧化氢酶活性显著提高（P0.05）；低聚木糖组和复合益生菌组肝脏总抗氧化能力显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.014.T003表3益生菌对彭泽鲫肝脏抗氧化指标的影响组别超氧化物歧化酶/(U/mg)丙二醛/(μmol/g)酸性磷酸酶/(金氏单位/g)过氧化氢酶/(U/mg)溶菌酶/(U/mg)总抗氧化能力/(mmol/g)对照组933.11±9.56d4.12±0.04a333.18±22.11a33.77±2.28b14.61±3.81b0.046±0.002c枯草芽孢杆菌组1 132.73±36.28c3.40±0.45bc228.60±38.27b48.12±3.25a25.32±3.20a0.055±0.002bc地衣芽孢杆菌组982.37±7.87d3.54±0.12abc247.54±17.13b37.62±0.82b25.23±3.76a0.058±0.006bc低聚木糖组1 041.20±27.23a3.81±0.09ab258.91±21.40b36.98±2.05b24.48±3.51a0.066±0.014b复合益生菌组989.61±7.61d2.96±0.55c264.68±39.12b44.11±3.33a29.50±2.52a0.091±0.012a2.3益生菌对彭泽鲫肠道消化酶活性的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，枯草芽孢杆菌组、地衣芽孢杆菌组、低聚木糖组和复合益生菌组彭泽鲫肠道胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性均显著提高（P0.05）。枯草芽孢杆菌和低聚木糖组的胰蛋白酶活性显著高于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.014.T004表4益生菌对彭泽鲫肠道消化酶活性的影响组别胰蛋白酶/(U/mg)脂肪酶/(U/g)淀粉酶/(U/mg)对照组41 425.20±356.36d4.25±0.41b48.94±0.35b枯草芽孢杆菌组51 796.04±176.20a5.16±0.70a65.04±2.87a地衣芽孢杆菌组46 963.68±309.24c5.33±0.33a68.74±6.60a低聚木糖组48 592.46±393.92b5.42±0.04a67.43±2.29a复合益生菌组46 581.25±341.05c5.89±0.33a65.14±3.92a2.4益生菌对彭泽鲫养殖水体环境的影响（见表5）由表5可知，第15 d，各益生菌添加组水体中氨氮含量均显著低于照组（P0.05）。养殖水体中总磷含量变化呈现稳定升高的趋势。第15 d时，地衣芽孢杆菌组、低聚木糖组和复合益生菌组水体中总磷含量显著低于对照组（P0.05）。总氮含量整体呈上升趋势，第15 d时，与对照组相比，益生菌添加组总氮含量均显著降低（P0.05）。养殖期间各益生菌添加组化学需氧量含量相比对照组均明显降低（P0.05），第15 d时，地衣芽孢杆菌组化学需氧量含量降低效果最好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.014.T005表5益生菌对养殖水体环境的影响时间/d项目对照组枯草芽孢杆菌组地衣芽孢杆菌组低聚木糖组复合益生菌组1氨氮0.08±0.010.07±0.010.09±0.010.08±0.010.08±0.02总磷0.64±0.010.65±0.010.64±0.010.64±0.020.64±0.02总氮1.05±0.011.06±0.021.06±0.021.05±0.011.06±0.02化学需氧量2.35±0.032.37±0.032.36±0.022.37±0.032.35±0.023氨氮0.35±0.03a0.34±0.01a0.29±0.02b0.27±0.02b0.26±0.01b总磷0.67±0.01b0.67±0.01b0.73±0.02a0.75±0.03a0.68±0.03a总氮1.86±0.03a1.68±0.07b1.58±0.04c1.51±0.04c1.42±0.02d化学需氧量5.86±0.14a3.12±0.04d3.53±0.05c2.96±0.06e4.25±0.09b5氨氮0.63±0.01a0.54±0.01b0.38±0.02c0.39±0.02c0.27±0.01d总磷1.16±0.05a1.04±0.09b0.92±0.03c0.96±0.03bc0.87±0.02c总氮2.15±0.05a1.78±0.01d1.66±0.05e1.87±0.02c1.97±0.02b化学需氧量5.13±0.05a2.80±0.02c1.76±0.04e2.42±0.02d4.11±0.05b10氨氮0.63±0.03a0.45±0.01b0.34±0.01c0.38±0.01d0.27±0.02e总磷0.92±0.031.11±0.031.06±0.051.07±0.071.03±0.02总氮3.32±0.06a2.77±0.02b2.60±0.07cd2.68±0.04bc2.52±0.06d化学需氧量7.77±0.26a3.50±0.20c2.33±0.04d3.23±0.08c3.91±0.06b15氨氮0.46±0.02a0.33±0.01b0.34±0.01b0.35±0.01b0.26±0.02c总磷1.34±0.04a1.19±0.02b1.01±0.03c0.94±0.01d0.92±0.03d总氮4.50±0.05a3.70±0.02b3.68±0.03b3.93±0.02c3.18±0.03d化学需氧量6.91±0.04a3.91±0.04c2.93±0.05e3.47±0.17d4.57±0.20b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。mg/L3讨论3.1益生菌对彭泽鲫生长性能的影响益生菌可有效提高水产动物的生长性能、存活率、机体免疫力和抗病力[10-11]。李盈锋等[12]研究发现，添加枯草芽孢杆菌可以显著提高黑鲷的增重率、特定生长率，显著降低饵料系数。罗莎等[13]也发现，添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌及枯草-地衣复合菌对彭泽鲫的生长具有显著的促进作用。添加地衣芽孢杆菌可以显著提高尖吻鲈的增重率和特定生长率，显著降低饵料系数[14]。本试验中，在饵料中添加枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、低聚木糖以及复合益生菌对彭泽鲫的生长均具有明显的促进作用，其中复合益生菌效果较好。不同的益生菌的生理特性、代谢产物不同，可能导致宿主在生长过程中分泌的代谢物不同，产生的作用效果也会存在差异[15]。3.2益生菌对彭泽鲫肝脏抗氧化指标的影响肝脏受到氧化应激作用导致损伤会造成鱼体器官功能性障碍，严重影响养殖效益[16]。超氧化物歧化酶和过氧化氢酶可以有效清除机体中过多的自由基[17]。丙二醛可以体现动物抗氧化状况以及对外界环境胁迫的能力[16]。酸性磷酸酶能够水解细胞表面的磷酸酯，提高吞噬细胞的吞噬能力[18]。溶菌酶通过破坏、水解细菌和真菌的细胞壁，消除体内入侵异物，提高机体的免疫功能[19]。张维娜等[20]研究发现，添加益生菌能够显著提高异育银鲫的肝脏抗氧化能力。叶海斌等[21]研究发现，单一益生菌制剂、复合益生菌制剂均能提高虹鳟酸性磷酸酶、总抗氧化能力、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛含量。赵瑞祯等[22]研究发现，添加益生菌能够显著提高刺参超氧化物歧化酶活性。本试验结果表明，复合益生菌比单一菌种改善机体的抗氧化功能的效果显著，可能是因为复合菌制剂含有的抗原类营养物质诱导机体先天性免疫，也可能和菌群的结构变化有关系[23]。3.3益生菌对彭泽鲫肠道消化酶活性的影响研究表明，在动物饲料中添加芽孢杆菌，在鱼体肠道内可以产生多种消化酶，补充内源酶的不足，促进肠道内营养物质的吸收[24]。低聚木糖能够促进肠道内有益菌的增殖，刺激消化酶的分泌和肠道蠕动，加快营养物质的吸收，抑制大肠杆菌、梭状杆菌等有害菌[25]。刘小刚等[26]发现，在异育银鲫饵料中添加芽孢杆菌显著提高了肠道与肝胰脏中蛋白酶的活性。史东杰等[27]研究也发现，添加益生菌能够显著提高锦鲤幼鱼消化酶的活性。李君华等[28]发现，低聚木糖可提高仿刺参肠道消化酶活力，促进生长。本研究中，试验组彭泽鲫肠道的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均显著高于对照组，表明添加益生菌提高了鱼对营养物质的消化吸收能力。可能是因为益生菌改变了鱼肠道内碳水化合物、脂类和糖类物质的含量，从而提高胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性；也可能是因为微生物刺激肠道或是摄入的有益菌分泌的酶能在鱼体内发生作用，使鱼体肠内蛋白酶、淀粉酶活力性升高[13]。3.4益生菌对彭泽鲫养殖水体环境的影响在封闭的水产养殖模式中，残饵、排泄物等的累积会加重养殖池底的污染，导致养殖环境恶化。益生菌能够分泌多种物质，抑制水中病原菌生长，有效减少水体中有害菌，分解水中部分小分子有机物，减少养殖水体中有害物质或富营养物质的积累，降低水体中氨基氮、硫化物和亚硝基氮等浓度，达到调节水质的作用[29]。齐欣等[30]发现，在彭泽鲫饵料中添加枯草芽孢杆菌，养殖水体中亚硝酸盐氮、化学需氧量和氨氮浓度显著降低。胡凡光等[31]在大菱鲆鱼饵料中添加不同比例的枯草芽孢杆菌制剂，发现养殖水体中的NH4+-N、NO2--N、NO3--N浓度显著下降。仇明等[32]在斑点叉尾鮰试验中发现，饵料中添加一定浓度的枯草芽孢杆菌，能够显著降低水体中氨氮和亚硝酸盐含量。本研究中，与对照组相比，试验组水体中氨氮、总磷、总氮和化学需氧量含量和对照组的变化趋势是一致的，从第3 d开始，不同试验组水体中氨氮、总磷和化学需氧量指标出现差异，总氮含量差异不明显。可能是因为益生菌进入肠道后能够较快定植，在鱼体肠道内进行硝酸盐和亚硝酸盐的消解，减少排放；随排泄物一同进入水体的益生菌也能够消耗水体中的有机物，降低因有机物发酵和水体环境变化而产生的耗氧行为，从而减少水体中化学需氧量[33]，达到改善水质的作用。4结论本试验结果表明，在饵料中添加适宜的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、低聚木糖、复合益生菌可以提高彭泽鲫的生长性能，增强消化酶活性和抗氧化能力，有利于调节养殖水体的水质。