2020年我国全面禁止在饲料中添加抗生素[1-2]。因此，寻找能够替抗的饲料添加剂对发展环保、高效、健康可持续畜牧业具有重要意义。地顶孢霉培养物（ATC）是一种新型真菌酵解饲料添加产品，属于一种虫草类饲料添加产品，是将虫草分离菌（地顶孢霉菌）进行发酵培养获得的产品。研究表明，ATC含有多种活性物质[3]，如虫草酸、虫草素、虫草多糖等，具有促生长、抗氧化、提高免疫功能等作用[4]。目前，ATC在家禽[5]、小鼠[6]、生猪和反刍动物[7]等领域均有应用。肉羊产业是畜牧业的重要组成部分，羊肉因营养丰富、肉质鲜美深受人们喜爱。本试验结合赵崇学等[8]的研究和预试验基础上筛选确定ATC的添加量，研究ATC对肉羊增重、免疫及抗氧化指标的影响，以期为ATC在肉羊养殖领域的推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料及地点地顶孢霉培养物（ATC）购自甘肃汇能生物工程有限公司。小反刍兽疫（PPR）疫苗购自天康生物制药有限公司。试验于武威海之华现代农业有限责任公司进行。1.2试验设计选取100只80日龄健康且体重相近的雄性小尾寒羊断奶羔羊，随机分为2组，每组5个重复，每个重复共10只羔羊，为1栏圈养（有运动场）。对照组羔羊饲喂基础日粮，试验组在基础日粮中添加0.2%ATC。预试期10 d（适应期前完成圈舍的清粪消毒、羊的分组分圈及驱虫健胃），正式试验期60 d。预试期结束次日清晨对两组羔羊进行小反刍兽疫（PPR）疫苗初次免疫接种（皮下1 mL计量），观察并记录健康状况。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米29.20代谢能/(MJ/kg)9.62豆粕3.50干物质/%91.56葵花籽壳14.00粗脂肪/%3.95加浆玉米皮5.00粗灰分/%7.67玉米白皮6.00中性洗涤纤维/%38.44胚芽20.00酸性洗涤纤维/%14.92酒糟5.00钙/%0.76膨润土3.50磷/%0.48稻壳3.50菜粕2.20糖蜜2.00棉粕1.50细石粉1.50豆油1.00预混料2.10注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 350 000 IU、VB1 62 mg、VB2 188 mg、VB3 750 mg、VB5 500 mg、VB6 62 mg、VB7 3.7 mg、VB9 38 mg、VD3 93 750 IU、VE 938 mg、VK3 63 mg、硒18 mg、锌3 000 mg、碘23 mg、钴30 mg、锰2 500 mg、铁3 240 mg、铜500 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理试验期间羔羊每天饲喂2次（6：00、18：00），自由采食饮水，定期巡视、打扫圈舍卫生及消毒，观察羊健康状况并作好记录。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验羊分别在正式试验期第0、15、30、45、60 d末禁食12 h，空腹称重，记录各阶段羔羊的体重变化，统计正式试验期全期饲料消耗量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。增重=末重-初重(1)平均日增重=全期总增重/全期总天数(2)平均日采食量=总采食量/试验天数(3)料重比＝平均日采食量/平均日增重(4)1.4.2血清抗体水平、免疫指标及抗氧化指标试验羊分别在正式试验期第0、15、30、45、60 d末禁食12 h，每个重复随机选择1只羔羊，共选择10只，进行第1~5次颈静脉采血（3 mL），静置分离血清。使用试剂盒（青岛立见生物科技有限公司）检测肉羊血清中小反刍兽疫病毒（PPRV）抗体水平。使用试剂盒（南京森贝伽生物科技有限公司）检测羊血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）等免疫指标；使用试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）检测免疫球蛋白A（IgA）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）等免疫指标。孔阻断率（PI）＝(1-样本值/阴性对照孔均值)×100%(5)使用试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）、血清总抗氧化能力（T-AOC）等抗氧化指标，上述指标均采用ELISA试剂盒检测，具体操作按照说明书进行。1.4.3经济效益收入项目以试验期累计增重计算，活羊销售价格按30.00元/kg计算。支出项目包括饲料投入、ATC投入、人员投入、防疫水电投入；饲料单价按1.9元/kg计算，ATC单价为100.00元/kg；投入人员工资按0.5元/(只·d)计算，防疫费与水电费按0.05元/(只·d)。收入=活羊售价×试验期累计增重(6)饲料成本=饲料单价×试验期累计采食量(7)ATC成本=0.2%饲料消耗量(kg)×ATC单价(8)经济效益=收入项目总额-支出项目总额(9)1.5数据统计与分析试验数据采用Excel软件整理，采用SPSS 17.0软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），GraphPad prism 5软件绘制图形。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著，P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1ATC对小尾寒羊羔羊生长性能的影响（见图1、表2）由表2、图1（a）可知，两组羔羊在不同阶段的平均体重均呈升高趋势，且试验组在各时期均高于对照组。试验第15、30 d时，试验组肉羊平均体重的比对照组分别提高1.97%、4.08%（P0.05）；试验第45、60 d时，试验组肉羊的平均体重分别比对照组提高5.96%、7.65%（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.T002表2ATC对小尾寒羊羔羊生长性能的影响项目时间对照组试验组P值平均体重/(kg/只)0 d17.81±0.8917.68±0.990.72815 d21.32±0.9521.74±1.180.52630 d24.98±1.2726.00±1.920.36245 d28.86±1.1630.58±2.02*0.02860 d32.81±1.0935.32±1.87**0.010平均日增重/[g/(只·d)]1~60 d250.01±0.95294.03±0.68*0.034总采食量/(kg/只)1~60 d75.2281.83—平均日采食量/[g/(只·d)]1~60 d1 253.601 363.80—料重比1~60 d5.014.64—注：1.“*”表示与对照组相比差异显著（P0.05），“**”表示与对照组相比差异极显著（P0.01）；下表同。2.“—”表示未统计。由表2、图1（b）可知，两组羔羊在不同阶段平均日增重均呈增长趋势，试验组羔羊各阶段的平均日增重比对照组分别提高15.67%、16.39%、18.04%、20.00%；试验组羔羊整个试验期的平均日增重比对照组提高了17.6%（P0.05）；试验组羔羊的料重比比对照组降低7.38%。图1ATC对小尾寒羊羔羊平均体重和平均日增重影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.F1a1（a）平均体重10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.F1a2（b）平均日增重2.2ATC对小尾寒羊羔羊抗体水平的影响（见图2）由图2（a）可知，试验期两组羔羊PPRV抗体水平呈升高趋势，且对照组抗体水平低于试验组。由图2（b）可知，试验前两组羔羊的PPRV抗体合格率为0；试验15、30、45、60 d，试验组羔羊的抗体合格率分别为50%、100%、100%、100%，对照组羔羊的抗体合格率分别为40%、100%、100%、90%。研究表明，试验组羔羊抗体产生的速度更快，持续时间更长。图2ATC对小尾寒羊羔羊抗体水平的影响10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.F2a1（a）PPRV抗体水平10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.F2a2（b）抗体合格率2.3ATC对小尾寒羊羔羊免疫功能的影响（见表3）由表3可知，试验第0 d时，两组羔羊血清IgA、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10的含量差异均不显著（P0.05）；试验组羔羊血清IgG含量显著低于对照组（P0.05），IgM含量显著高于对照组（P0.05）。试验第60 d，试验组羔羊血清IgG、IL-6、IL-10含量均显著高于对照组（P0.05），羔羊血清IgA、IgM、IL-2含量均极显著高于对照组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.T003表3ATC对小尾寒羊羔羊免疫功能的影响项目时间对照组试验组P值IgA/(g/L)0 d0.75±0.120.71±0.130.82360 d0.81±0.111.16±0.15**0.002IgG/(g/L)0 d11.30±0.199.86±0.27*0.03960 d9.15±0.2111.78±0.21*0.021IgM/(g/L)0 d1.07±0.011.26±0.02*0.02960 d1.01±0.061.31±0.03**0.007TNF-α/(ng/L)0 d84.36±0.8583.42±0.580.18560 d72.54±4.6274.58±4.380.121IL-2/(ng/L)0 d205.14±9.81204.96±5.680.18760 d253.35±4.25278.27±6.41**0.004IL-4/(ng/L)0 d9.32±1.029.25±0.970.84860 d8.76±0.838.91±1.210.657IL-6/(ng/L)0 d95.80±1.4593.96±2.830.19260 d84.01±5.21101.02±4.52*0.016IL-10(ng/L)0 d12.96±0.4513.17±0.380.36260 d9.63±0.9111.21±0.87*0.0172.4ATC对小尾寒羊羔羊抗氧化功能的影响（见表4）由表4可知，试验第0 d时，试验组羔羊血清CAT、T-SOD活性及MDA含量、T-AOC差异均不显著（P0.05）。试验第60 d时，试验组羔羊血清中CAT、GSH-Px、T-SOD活性均显著高于对照组（P0.05），MDA含量极显著低于对照组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.T004表4ATC对小尾寒羊羔羊抗氧化功能的影响项目时间对照组试验组P值T-SOD/(U/mL)0 d66.62±3.7167.06±4.400.30660 d70.61±4.5874.82±4.33*0.030T-AOC/(U/mL)0 d3.17±0.113.25±0.130.63460 d3.96±0.434.12±0.240.748MDA/(μmol/L)0 d4.72±0.204.59±0.220.56860 d5.39±0.253.62±0.20**0.002GSH-Px/(U/mL)0 d136.10±0.56131.97±2.13*0.01760 d223.51±0.36230.01±1.26*0.043CAT/(U/mL)0 d4.81±0.074.62±0.010.29560 d3.43±0.025.14±0.18*0.0462.5ATC对肉羊经济效益的影响（见表5）由表5可知，试验组羔羊增重收入为529.2元/只，对照组为450元/只；试验组饲料总成本为171.88元/只（包括饲料投入155.48元/只，ATC添加剂投入16.4元/只），对照组饲料总成本为142.92元/只。试验组羔羊平均利润比对照组多0.84元/(只·d)，平均利润提高18.38%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.006.T005表5ATC对小尾寒羊经济效益的影响组别总增重/(kg/只)增重收入/(元/只)饲料总成本/(元/只)人员管理费/(元/只)防疫费与水电费等/(元/只)平均利润/[元/(只·d)]对照组15.00450.0142.923034.57试验组17.64529.2171.883035.413讨论近年来，虫草类饲料添加剂在动物日粮中的应用较多[9]。冯柳柳等[10]、柴明杰等[11]、陈晓春等[12]在育肥猪和断奶仔猪日粮中添加0.1%~0.3%ATC，发现仔猪腹泻率明显降低、体内抗体水平明显提高，育肥猪肉品质得到改善。张建伟等[13]、粟元文等[14]在北京油鸡、肉仔鸡日粮中添加0.2%ATC，发现ATC能够提高北京油鸡的屠宰性能，改善肠道微生物，提高抗体效价，且肉仔鸡免疫力及生长性能有所增强。李洋等[15]、张永根等[16]、黄恒新等[17]研究表明，ATC可改善牛瘤胃发酵环境，提高瘤胃微生物活性。也有研究表明，添加ATC可提高杜寒杂交羊的抗氧化能力[18-19]。3.1ATC对小尾寒羊羔羊生长性能的影响ATC有动物界“冬虫夏草”美誉[20]。研究发现，ATC中的虫草多糖、虫草素、生物碱类和多种氨基酸等[3,20]成分具有促进动物生长、抗氧化、增强免疫力的功效。本研究中，45和60 d时，试验组肉羊平均体重明显高于对照组，试验全期试验组肉羊的平均日增重比对照组提高17.6%，料重比比对照组降低7.38%，高于前人的研究结果[18-19]，与黄新等[21]研究结果不一致，原因可能与选择试验羊的品种和日龄不同有关。3.2ATC对小尾寒羊羔羊抗体水平的影响本试验结果显示，试验15 d时，试验组羔羊PPRV抗体合格率达到50%，对照组PPRV抗体合格率为40%，试验组羔羊机体抗体产生速度快于对照组，与魏建忠等[22]、张丽佳等[23]的ATC对保育仔猪和小鼠免疫功能影响的研究结果一致。魏建忠等[22]研究发现，28日龄杜长大保育仔猪饲喂添加0.25%ATC后，能够提高仔猪体内猪瘟抗体效价。张丽佳等[23]研究发现，ATC以高剂量添加时能够特异性增强小鼠的免疫应答能力，提高体内抗体滴度。本试验中，试验30 d时，对照组和试验组PPRV抗体检测合格率达到100%，与田凯鸽[24]研究结果一致。试验60 d时，对照组和试验组羔羊PPRV抗体合格率分别为90%和100%，对照组羔羊PPRV抗体下降的原因可能与羔羊个体差异有关。ATC能否影响羔羊体内PPRV抗体水平下降速度，因本试验时间有限无法给出准确结论，需要进一步研究。3.3ATC对小尾寒羊羔羊免疫功能的影响血清中的免疫因子在机体的免疫体系中发挥重要作用。IL-2可以促进T细胞的增殖分化，IL-4是传统的抗炎因子，IL-6能够促进B细胞的增殖分化。研究表明，虫草类物质可以调节动物机体内炎性因子IgG、IgM、TNF-α和IL-10等水平，促进免疫细胞活化，增强机体免疫力[25-27]。本试验中，试验前两组羔羊血清IgG、IgM含量存在明显差异，可见免疫因子含量存在个体差异；试验第60 d，试验组羔羊血清IgA、IgG、IgM、IL-2、IL-6、IL-10的含量均高于对照组。因此，添加ATC能够改善肉羊免疫功能，增强机体免疫力。3.4ATC对小尾寒羊羔羊抗氧化功能的影响动物机体内的氧化和抗氧化过程通常处于动态平衡状态，受酶促抗氧化系统调控，如MDA、CAT、T-SOD、GSH-Px、T-AOC等均是该系统的重要组成部分，能够反映机体抗应激的能力。朴美子等[28]、Deng等[29]、程洁等[30]研究表明，ATC可以改善动物机体的免疫及抗氧化能力，清除自由基，具有抗氧化功效。本试验表明，与对照组相比，试验组羔羊血清T-SOD、CAT、GSH-Px的活性升高，MDA含量降低，表明试验组羔羊的抗氧化能力优于对照组，与王一臻[31]、雒诚龙等[32]研究结果一致。分析试验组羔羊血清中部分抗氧化指标升高原因可能是ATC中含有的活性成分激活了与抗氧化相关的酶系统，促使机体抗氧化能力增强，加快自由基代谢[33]，但调控的作用机理尚不明朗，有待进一步研究。4结论本试验条件下，ATC能够提高肉羊的生长性能，改善疫苗免疫后体内抗体水平，增强机体免疫力和抗氧化功能。