葛根属于天然可饲用植物，其粉碎物或粗提物可作为饲料添加剂用于饲料生产[1]。葛根中的主要活性物质为葛根素、葛根黄酮、香豆素等，具有抗炎、抗氧化、抗菌及改善肠道菌群结构等生物学功能[2-4]。研究表明，日粮中添加葛根及其粗提物可提高畜禽生长性能以及机体的抗氧化能力和免疫性能[5]，促进断奶仔猪生长，提升机体免疫能力[6]。随着饲料中禁止添加抗生素，开发安全、高效的替抗产品是目前动物营养研究的重要方向之一[7]。本研究在育肥猪日粮中添加不同水平的葛根粗提物，通过饲喂试验观察不同水平葛根粗提物对育肥猪生长、免疫指标及肉品质的影响，以期为促生长类新型饲料添加剂的开发提供参考。1材料与方法1.1试验材料葛根粗提物购自陕西瑞沃生物科技有限公司，其中葛根素含量40%、葛根黄酮含量1%、香豆素含量0.05%。“杜×长×大”三元商品猪由山西忻州新兴养猪专业合作社提供。1.2试验设计选取130日龄、体重86 kg、健康的育肥猪240头，随机分为4组，每组6个重复，每个重复10头猪。A组（对照组）、B组、C组、D组分别在基础日粮中添加0、500、1 000、1 500 mg/kg葛根粗提物。预试期7 d，正式试验期40 d。试验育肥猪基础日粮根据《仔猪、生长育肥猪配合饲料》（GB/T 5915—2020）和NRC（2012）《猪的营养需要》推荐量进行配制。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.010.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.55消化能/(MJ/kg)13.48豆粕23.93粗蛋白质/%15.11麦麸11.95钙/%0.78石粉1.12磷/%0.65磷酸氢钙0.74赖氨酸/%0.98食盐0.35赖氨酸盐酸盐0.25蛋氨酸0.05苏氨酸0.06复合预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 3 500 IU、VE 70 IU、VK3 3.58 mg、VB1 3.32 mg、VD3 2 500 IU、VB6 3.86 mg、VB12 0.05 mg、D-泛酸14.57 mg、叶酸0.95 mg、烟酸30.15 mg、生物素0.20 mg、叶酸1.15 mg、铜23.45 mg、锌50.27 mg、铁86.43 mg、碘0.25 mg、锰20.55 mg、硒0.2 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理使用自动饲喂系统（小巨人畜牧设备有限公司）对试验猪进行饲喂，保证试验猪自由采食、饮水。试验猪日常免疫、疾病治疗与保健严格按照合作社的规章制度执行。试验人员每日观察猪采食、排便情况，及时对亚健康试验猪进行统计与治疗。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能饲喂试验开始与结束前，试验育肥猪空腹12 h，称重，分别记录试验猪的初重和末重，试验结束后统计各组试验育肥猪的总采食量，计算猪平均日采食量、平均日增重及料重比。平均日采食量=采总食量/(试验天数×试验猪头数)(1)平均日增重=总增重/(试验天数×试验猪头数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2屠宰性能各组选择接近平均体重的3头试验猪进行屠宰，测定与计算试验猪胴体重、背膘厚度、屠宰率与眼肌面积。以第六、七胸椎结合处及胸腰椎结合处、腰间椎结合处等3个部位脂肪平均厚度为试验猪背膘厚度。眼肌面积=眼肌宽度×眼肌厚度×0.7(4)屠宰率=胴体重/活重×100%(5)1.4.3肉品质参照《猪肌肉品质测定技术规范》（NY/T 821—2004）分别测定试验猪pH值（宰后45 min和24 h）、肌肉失水率及贮存损失；参照《肉嫩度的测定剪切力测定法》（NY/T 1180—2006）测定试验猪肌肉剪切力；使用色差仪测定肌肉肉色亮度、红度、黄度，比色卡对猪肉进行大理石纹评分。1.4.4血清抗氧化指标饲喂试验结束后，每个重复中随机选择1头试验猪，使用前腔静脉采血法收集血液约5 mL，置于离心机中以3 500 r/min离心10 min，获取上清液于聚丙烯EP管，置于-20 ℃冰箱中保存。使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GHS-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。所用试剂购自南京建成生物工程研究所，具体操作步骤参考试剂盒说明书。1.4.5血清细胞因子含量使用ELISA方法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8)、白细胞介素-10（IL-10）、干扰素-α（IFN-α）、干扰素-β（IFN-β）及干扰素-γ（IFN-γ）含量。所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所，具体操作步骤参考试剂盒说明书。1.5数据统计与分析数据采用Excel软件进行初步整理，SAS 9.2统计分析软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1葛根粗提物对育肥猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，与A组相比，C组、D组育肥猪的平均日增重显著升高（P0.05），D组育肥猪的平均日采食量显著升高（P0.05），C组、D组育肥猪的料重比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.010.T002表2葛根粗提物对育肥猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比A组（对照组）86.38±2.36122.78±4.360.910±0.021b2.68±0.05b2.94±0.04aB组85.24±1.87122.44±3.270.930±0.013b2.72±0.06ab2.92±0.06aC组86.43±3.25125.63±2.550.980±0.018a2.72±0.07ab2.78±0.05bD组86.01±4.55126.41±3.681.010±0.025a2.82±0.05a2.79±0.03b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表3、表5与此同。2.2葛根粗提物对育肥猪屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，随着葛根粗提物添加量增加，各组试验猪胴体重和屠宰率均呈提高趋势，但差异均不显著（P0.05）。与A组相比，各试验组育肥猪眼肌面积均随葛根粗提物添加量提高呈上升趋势，且C组、D组显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.010.T003表3葛根粗提物对育肥猪屠宰性能的影响组别宰前活重/kg胴体重/kg屠宰率/%背膘厚度/mm眼肌面积/cm2A组（对照组）122.38±3.4287.31±2.0871.34±2.2822.59±1.8462.58±1.35bB组122.30±3.3788.97±2.9472.75±1.9722.48±1.2165.37±1.60abC组125.20±2.2191.96±2.1173.45±1.9122.86±1.0967.81±1.81aD组126.25±3.0793.78±2.9574.28±2.8423.97±0.9469.03±1.45a2.3葛根粗提物对育肥猪肉品质的影响（见表4）由表4可知，与A组相比，随着葛根粗提物添加量增加，各组猪肉失水率和贮存损失逐渐下降，其中C组、D组猪肉失水率显著降低（P0.05），各试验组猪肉贮存损失均显著降低（P0.05）。宰后24 h，与A组相比，各试验组猪肉pH24 h值显著升高（P0.05）。与A组相比，各试验组肉色等级均显著升高（P0.05），但各试验组间差异不显著（P0.05）。日粮中添加葛根提取物对剪切力、大理石纹评分及肉色亮度、红度、黄度等指标无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.010.T004表4葛根粗提物对育肥猪肉品质的影响项目A组（对照组）B组C组D组失水率/%2.56±0.13a2.36±0.10ab2.33±0.09b2.21±0.12bpH45 min值6.45±0.236.50±0.246.51±0.156.48±0.21pH24 h值5.42±0.17b5.86±0.11a5.83±0.14a5.92±0.15a贮存损失/%1.02±0.04a0.93±0.03b0.94±0.02b0.92±0.02b生肉剪切力/N14.38±1.3413.24±1.5514.37±2.0113.69±1.80熟肉剪切力/N30.47±3.4631.36±2.8833.29±2.9331.84±3.12大理石纹评分3.03±0.153.12±0.273.28±0.193.34±0.21肉色等级3.03±0.13b3.28±0.08a3.35±0.10a3.34±0.07a亮度33.21±2.9134.27±3.6634.56±2.0733.85±3.07红度4.03±0.583.97±0.754.19±0.574.20±0.68黄度1.01±0.071.04±0.101.01±0.131.00±0.15注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表6与此同。2.4葛根粗提物对育肥猪血清抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与A组相比，各试验组猪血清GSH-Px活性、T-AOC、SOD活性均显著升高（P0.05），MDA含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.010.T005表5葛根粗提物对育肥猪血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组（对照组）13.12±1.05c223.48±14.64d269.56±20.24b4.21±0.25aB组15.53±1.36b251.36±17.55c352.46±27.69a3.59±0.28bC组17.59±2.10ab315.49±16.25b363.15±26.97a3.64±0.19bD组18.84±1.54a355.07±17.65a359.08±24.20a3.52±0.33b2.5葛根粗提物对育肥猪血清细胞因子含量的影响（见表6）由表6可知，与A组相比，随着日粮中葛根提取物添加量增加，各组试验猪血清TNF-α含量呈下降趋势，其中C组、D组TNF-α含量显著降低（P0.05）；各组试验猪血清IL-2和IL-6含量均显著降低（P0.05）。C组猪血清IL-10含量显著高于A组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.010.T006表6葛根粗提物对育肥猪血清细胞因子含量的影响项目A组（对照组）B组C组D组TNF-α282.36±14.69a262.49±13.02a233.32±10.13b218.15±15.92bIL-114.38±1.7814.03±1.5114.28±1.3713.65±1.40IL-2186.49±9.58a153.24±7.39b161.36±5.27b149.57±10.30bIL-635.27±3.84a21.63±4.57b22.81±3.09b24.25±4.13bIL-8231.46±13.46240.95±10.58233.06±12.71235.67±15.01IL-104.38±0.35b4.79±0.28ab5.48±0.36a4.73±0.39abIFN-α7.12±0.516.83±0.387.05±0.447.11±0.32IFN-β38.14±3.4236.42±2.8635.17±4.3534.28±2.96IFN-γ17.28±0.4617.21±0.3717.42±0.5017.35±0.47ng/L3讨论3.1葛根粗提物对育肥猪生长性能的影响平均日采食量、平均日增重及料重比是反映育肥猪生长性能和影响养殖效益的重要指标。刘仲昊[6]在育肥猪日粮中分别添加金银花粗提物1 000 mg/kg、葛根粗提物1 000 mg/kg和混合粗提物（金银花粗提物500 mg/kg+葛根粗提物500 mg/kg），与对照组相比，各试验组育肥猪的平均日采食量和平均日增重均有提高趋势，其中混合提取物组显著提高；各试验组育肥猪的料重比均显著降低。董毅[8]通过构造大肠杆菌感染7日龄仔猪腹泻模型，分别观察仔猪灌服枯草芽孢杆菌（每天1×108 CFU/kg BW剂量）、葛根粗提物（每天5 mg/kg BW剂量）、氧化锌（每天100 mg/kg剂量）对仔猪生长性能和肠道的保护作用，发现葛根粗提物组与枯草芽孢杆菌组断奶仔猪的平均日采食量显著高于未经任何处理的感染猪。胥洁等[9]在断奶仔猪日粮中分别添加500、1 000、2 000 mg/kg葛根粗提物，结果表明，与对照组相比，1 000 mg/kg组仔猪平均日增重提高26.06%，中量组和高量组仔猪料重比分别降低19.42%和12.30%。本研究结果表明，与A组相比，C组、D组育肥猪平均日增重显著提高，D组育肥猪平均日采食量显著提高，各试验组料重比均显著降低，与上述研究结果大体一致。3.2葛根提取物对育肥猪屠宰性能的影响屠宰率、背膘厚度及眼肌面积等屠宰性能可以有效反映试验阶段葛根提取物对育肥效率和其对肌肉和脂肪合成的影响[10]。刘仲昊等[11]研究发现，在日粮中添加1 000 mg/kg葛根粗提物或添加金银花粗提物500 mg/kg+葛根粗提物500 mg/kg均可显著提高眼肌面积；胴体重和屠宰率具有提高趋势。本研究结果显示，葛根粗提物添加量达到1 000 mg/kg后可显著提高育肥猪眼肌面积，但对其他屠宰性状无显著改善作用，与上述研究结果基本一致。葛根粗提物目前在猪生产中的应用研究成果相对较少。在肉牛和肉鸡生产中的研究结果均表明，葛根粗提物能够有效改善牛和鸡的屠宰性能[12-13]。3.3葛根提取物对育肥猪肉品质的影响猪肉失水率与贮存损失反映了肌肉的保水能力，同时对肉产品嫩度具有直接影响[14]。剪切力反映可以猪肉嫩度，同时剪切力与大理石评分等指标共同影响猪肉口感[15]。较快的pH值变化表明蛋白质变性速度快，猪肉容易偏白，导致肉色等级下降[16]。刘仲昊等[11]研究表明，添加1 000 mg/kg葛根提取物可以有效提高猪肉pH值和肌内脂肪含量，提升猪肉品质。本研究结果显示，葛根粗提物添加量超过1 000 mg/kg后可以有效降低猪肉失水率，与A组相比，各试验组猪肉贮存损失均显著降低，猪肉肉色、pH24 h值有所升高，表明葛根粗提物可有效提高肌肉系水力、降低肌肉内糖酵解速度，对改善肉品质具有明显作用，与上述研究结果基本一致。3.4葛根提取物对育肥猪血清抗氧化指标的影响T-AOC是反映动物机体整体抗氧化能力的综合指标，GSH-Px和SOD活性分别反映了体内清除谷胱甘肽还原过程产生的过氧化物和超氧化物自由基的能力，MDA含量反映了体内脂质过氧化反应程度[17]。葛根提取物具有较强的抗氧化性。匡慕予[18]研究表明，在60 ℃条件下提取的葛根素对羟基和过氧自由基具有较强的清除率，分别为41.68%和21.36%。刘雁等[2]在肉鸡日粮中分别添加100、300、600 mg/kg葛根提取物，结果表明，试验组肉鸡血清T-AOC及GSH-Px、SOD活性均显著高于对照组，MDA含量均显著低于对照组。王芳芳等[19]在母猪基础日粮中添加王不留行提取物（2 g/kg）、葛根提取物（2.5 g/kg）及混合提取物（王不留行提取物2 g/kg+葛根提取物2.5 g/kg），观察其对母猪抗氧化能力的影响，结果表明，饲喂第10、21 d时，各试验组猪血清GSH-Px活性显著高于对照组，MDA含量显著低于对照组；整个试验阶段内混合提取物组母猪血清SOD活性均显著高于对照组。本研究结果显示，添加葛根粗提物可以增强试验猪总体抗氧化能力及相关酶活性，减少血清MDA含量，尽管添加量与上述研究存在一定差异，但总体可认为葛根粗提物能够有效提升育肥猪机体的抗氧化能力。3.5葛根提取物对育肥猪血清细胞因子含量的影响细胞因子是机体内部分子量小而生物学活性较高的一类物质，主要由免疫细胞、血管内皮细胞、表皮细胞等多类细胞经过刺激而生成，主要参与炎症、细胞增殖与凋亡及免疫应答等[20]。TNF-α、IL-6及IFN-γ等可参与T细胞和CD4+T细胞应答反应，IL-1、IL-2、IL-8等是较为常见的炎性因子，而IL-10属于抗炎因子[21-23]。研究发现，葛根及其粗提物主要通过阻断ERK/JNK/MAPKs等蛋白磷酸化途径，抑制IκB-α/NF-κB降解和p65/NF-κB信号转导通路的激活，下调iNOS、COX-2蛋白的表达量，进而抑制巨噬细胞合成TNF-α、IL-6等炎性因子和NO、PGE2等炎症介质[24]。本研究结果表明，葛根粗提物可抑制TNF-α、IL-2和IL-6合成，促进抗炎因子IL-10合成，与上述葛根粗提物抗炎机制基本吻合。4结论本研究结果表明，葛根粗提物可以显著提高育肥猪生长性能和屠宰性能，改善肉品质，提高血清抗氧化能力，降低血清炎性细胞因子含量，提高抗炎因子含量，且改善效果随着葛根粗提物浓度升高而呈上升趋势，且育肥猪日粮中添加1 500 mg/kg葛根粗提物效果较好。