硒是动物生长发育必需的微量元素之一,在动物日粮中合理添加硒可以提高动物生产性能与繁殖性能[1-2],改善动物健康[3]。研究发现,硒元素摄入不足可导致心肌纤维变形、骨骼肌坏死等疾病,而硒元素摄入过量又可引起动物硒中毒,造成“蹒跚盲”综合征或“碱性病”[4]。农业农村部公告指出,动物日粮中添加硒元素的推荐添加范围为0.1~0.3 mg/kg[5]。目前,亚硒酸钠在畜禽养殖使用较多,酵母硒和纳米硒也在畜禽养殖中逐步应用,但动物机体对不同形态硒元素的吸收效率存在差异[6],使用效果不完全一致。本研究在育肥猪日粮中添加不同来源的硒元素类饲料添加剂,保持硒元素在全价配合饲料中的水平一致,观察其对猪生产性能、血清生化指标及肉品质等的影响,旨在为畜禽养殖中硒元素的选择提供参考。1材料与方法1.1试验地点及试验材料亚硒酸钠(硒含量为1.0%)购自湖北成丰化工,酵母硒(硒含量为0.2%)购自深圳零零壹生物科技有限公司,纳米硒(硒含量为0.5%)购自博仕奥集团。试验于重庆真诚养猪专业合作社进行。1.2试验设计选取240头105~115日龄、健康、体重约为65 kg的“杜×长×大”去势公猪,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10头猪。A组公猪饲喂基础日粮,B组、C组、D组分别在基础日粮中添加30 g/t亚硒酸钠、150 g/t酵母硒、60 g/t纳米硒,硒元素添加水平统一为0.3 mg/kg。基础日粮组成及营养水平见表1。预试期7 d,正式试验期60 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.00消化能/(MJ/kg)13.53豆粕18.93粗蛋白质/%14.51麦麸11.83钙/%0.75次粉4.51磷/%0.66米糠粕1.35赖氨酸/%0.95石粉0.92蛋氨酸/%0.28磷酸氢钙0.75苏氨酸/%0.62食盐0.36赖氨酸盐酸盐(98%)0.24蛋氨酸(99%)0.05苏氨酸(98%)0.06复合预混料1.00注:1.预混料由湖南优久农牧有限公司提供。2.营养水平中消化能为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理试验期间每天7:30、11:30、14:30、18:30定时饲喂猪,观察试验猪健康状况,保证试验猪自由采食与饮水。试验猪日常保健、治疗与免疫程序均按照猪场要求进行。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始前与结束前,试验猪空腹12 h称重,分别记录各重复内试验猪的初重和末重,每天7:30统计试验猪每天的采食量。计算试验猪平均日增重、平均日采食量及料重比。平均日采食量(ADFI)=试验阶段采食量/(试验天数×试验猪头数)(1)平均日增重(ADG)=试验阶段增重/(试验天数×试验猪头数)(2)料重比(F/G)=ADFI/ADG(3)1.4.2屠宰性能各重复随机选择3头体重接近的试验猪屠宰,按照《瘦肉型猪胴体性状测定技术规范》(NY/T 825—2004)测定胴体长、胴体直长、胴体重、屠宰率、背膘厚度与眼肌面肌指标。胴体重为去头蹄内脏、保留板油和肾脏称重。测量第六、七胸椎结合处,胸腰椎结合处和腰间椎结合处脂肪厚度,取3处平均值为背膘厚度。屠宰率=胴体重/活重×100%(4)眼肌面积=眼肌宽度×眼肌厚度×0.7(5)1.4.3血清生化指标1.4.3.1样品采集各重复随机选择3头猪进行前腔静脉采血,每头猪采集约5 mL血样置于离心管中,3 500 r/min转速下离心10 min,获得上清液,置于-20 ℃冰箱中保存。1.4.3.2血清抗氧化指标采用酶联免疫吸附法测定总抗氧化能力(T-AOC),过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GHS-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。上述指标使用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定,具体操作按照说明书进行。1.4.3.3免疫指标使用BK600型自动生化分析仪(济南博坤科学仪器有限公司)测定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、补体C3及补体C4含量;使用免疫透射比浊法测定血清中溶菌酶(LZM)活性。上述指标均使用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定,具体操作按照说明书进行。1.4.3.4血清中硒元素含量硒含量的测定参考《食品安全国家标准 食品中硒的测定》(GB 5009.93—2017)中的方法进行测定。1.4.4肉品质指标参照《猪肉品质测定技术规程》(NY/T 821—2019),从第3~6腰椎处取背最长肌约200 g,测定肌肉失水率、pH值、贮存损失;肌肉剪切力参考《肉嫩度的测定剪切力测定法》(NY/T 1180—2006)进行测定,使用28.504型色差仪(邢台德延科技有限公司)测定肌肉肉色、亮度(L*值)、红度(a*值)、黄度(b*值),根据美国NPPC大理石花纹等级评定进行大理石纹评分。1.4.5背最长肌营养成分的含量使用Artemis 6000全自动氨基酸分析仪(赛里安仪器公司)测定肌肉氨基酸含量;使用GC-2030气象色谱仪(日本岛津)测定肌肉脂肪酸含量。1.4.6经济效益试验阶段所用亚硒酸钠单价为8元/kg,酵母硒单价为120元/kg,纳米硒100元/kg,混合日粮成本为3 435元/t,生猪售价为23.32元/kg。饲料成本=试验阶段采食量×饲料单价(6)养殖收入=试验阶段猪增重×生猪销售价(7)利润=养殖收入-饲料成本-硒使用成本(8)1.5数据统计与分析采用Excel软件对数据进行初步统计,SAS 9.0软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同硒源对育肥猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,B组、C组、D组试验猪ADG分别比对照组高6.97%、12.08%、12.96%(P0.05);各试验组猪的F/G均显著低于对照组(P0.05)。各组试验猪的末重差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T002表2不同硒源对育肥猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kgADG/[g/(头·d)]ADFI/[g/(头·d)]F/GA组(对照组)65.06±3.15115.12±4.91834.27±13.45c2 691.69±131.093.23±0.04aB组65.24±2.84118.79±4.38892.46±10.27b2 747.36±110.473.08±0.05bC组64.79±2.35120.89±3.81935.07±11.18a2 776.95±123.262.97±0.04cD组65.11±3.01121.65±4.27942.39±9.55a2 788.32±101.172.96±0.04c注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2不同硒源对育肥猪屠宰性能的影响(见表3)由表3可知,各试验组猪的眼肌面积显著高于对照组(P0.05)。试验组猪其他各项指标与对照组相比差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T003表3不同硒源对育肥猪屠宰性能的影响组别宰前活重/kg胴体长/cm胴体直长/cm胴体重/kg屠宰率/%背膘厚度/mm眼肌面积/cm2A组(对照组)116.82±4.65102.41±4.8188.46±2.5985.35±4.9973.06±2.7624.45±1.7656.48±2.03cB组118.76±4.53103.81±5.1789.73±3.8186.91±5.2973.18±3.4823.21±2.2359.41±2.41bC组120.89±3.87104.27±4.3290.25±3.2688.77±5.4773.43±3.0722.78±1.5763.29±2.05abD组121.62±3.93103.95±4.6889.99±3.4889.21±6.1273.35±4.1822.01±1.8966.45±3.21a2.3不同硒源对育肥猪血清生化指标的影响2.3.1不同硒源对育肥猪血清抗氧化指标的影响(见表4)由表4可知,C组和D组猪血清T-AOC和GSH-Px活性显著高于B组和对照组(P0.05),各试验组猪血清中CAT活性均显著高于对照组(P0.05),各试验组猪血清SOD活性均显著高于对照组(P0.05);各试验组猪血清中MDA含量显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T004表4不同硒元素对育肥猪血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)A组(对照组)10.32±1.30c8.27±3.58b202.54±16.34c265.43±20.27d5.30±0.72aB组14.01±1.05b13.01±2.64a243.48±18.87b332.48±18.19c3.24±0.48bC组17.23±2.08a15.34±2.81a291.36±17.43a382.57±16.06b3.98±0.51bD组17.59±2.10a16.28±3.77a305.49±19.25a434.39±25.97a3.87±0.39b2.3.2不同硒源对育肥猪血清免疫指标的影响(见表5)由表5可知,C组和D组猪血清IgG含量和LZM活性显著高于B组和对照组(P0.05);各试验组猪血清中IgA含量显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T005表5不同硒源对育肥猪 血清免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgA/(g/L)IgM/(g/L)补体C3/(g/L)补体C4/(g/L)LZM/(mg/L)A组(对照组)10.33±1.32c1.03±0.23b2.20±0.280.39±0.050.10±0.033.10±0.45cB组14.28±1.25b1.46±0.28a2.23±0.320.43±0.040.11±0.024.28±0.36bC组17.17±0.96a1.50±0.36a2.26±0.430.42±0.060.13±0.035.31±0.46aD组18.04±1.76a1.48±0.29a2.32±0.390.45±0.050.12±0.015.43±0.27a2.3.3不同硒源对育肥猪血清中硒元素含量的影响(见表6)由表6可知,试验各组猪血清中硒元素含量显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T006表6不同硒源对育肥猪血清硒元素含量的影响项目A组(对照组)B组C组D组硒含量0.012±0.006c0.090±0.008b0.117±0.010a0.125±0.009a注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。mg/kg2.4不同硒源对育肥猪肉品质的影响(见表7)由表7可知,C组和D组猪肉失水率显著低于B组和对照组(P0.05),猪肉pH24 h值、a*值、L*值显著高于B组和对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T007表7不同硒源对育肥猪肉品质的影响项目A组(对照组)B组C组D组失水率/%2.50±0.08a2.47±0.06a2.28±0.07b2.28±0.06bpH45 min值6.24±0.316.35±0.286.28±0.366.31±0.41pH24 h值4.92±0.21b5.12±0.17b5.53±0.23a5.57±0.16a贮存损失/%0.98±0.060.95±0.070.94±0.050.94±0.07生肉剪切力/N13.56±3.2813.88±2.3412.04±1.9412.34±2.09熟肉剪切力/N33.26±5.9933.17±8.4632.57±6.8833.39±7.93大理石纹评分3.21±0.673.43±0.523.32±0.493.35±0.61肉色等级3.33±0.593.42±0.673.51±0.813.47±0.53L*值32.10±2.81b36.21±1.32a35.33±1.81a36.46±1.20aa*值3.10±0.29c3.73±0.41b4.83±0.42a4.79±0.50ab*值0.97±0.130.98±0.091.03±0.111.01±0.122.5不同硒源对育肥猪背最长肌成分的影响2.5.1不同硒源对背最长肌氨基酸含量的影响(见表8)由表8可知,各组试验猪背最长肌各类氨基酸含量差异均不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T008表8不同硒源对背最长肌氨基酸含量的影响项目A组(对照组)B组C组D组赖氨酸107.45±4.18108.34±3.27110.48±2.43109.94±3.05精氨酸60.24±4.8759.46±5.3158.49±4.2758.36±3.95脯氨酸94.98±6.1294.61±8.4095.42±3.0796.33±6.19酪氨酸58.49±5.0759.01±4.3860.25±5.1961.32±4.55苯丙氨酸279.10±12.46278.34±11.85283.42±10.67274.32±13.26亮氨酸77.81±3.8678.46±5.3277.39±4.1076.47±4.88异亮氨酸42.17±3.3342.38±2.7444.36±3.5143.81±2.93缬氨酸85.18±4.0687.35±4.6988.81±5.0786.35±4.23蛋氨酸21.36±3.7020.07±3.8122.48±2.1023.48±2.74半胱氨酸14.39±2.0015.34±1.3514.82±1.7314.67±1.69丙氨酸505.75±19.43504.38±20.49510.91±18.67508.77±16.45丝氨酸60.38±4.1162.58±3.4761.80±3.9363.55±4.09苏氨酸365.20±13.37368.34±11.29373.54±8.40362.91±10.49甘氨酸213.47±9.58222.34±10.81214.03±9.46219.68±11.32谷氨酸99.46±7.5798.37±8.26101.23±7.19103.51±6.98mg/kg2.5.2不同硒源对背最长肌中脂肪酸含量的影响(见表9)由表9可知,试验各组猪背最长肌中亚油酸、豆蔻酸含量显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T009表9不同硒源对背最长肌中脂肪酸含量的影响项目A组(对照组)B组C组D组硬脂酸(C18∶0)13.22±1.3514.18±1.4712.89±1.2713.07±1.56棕榈油酸(C16∶1)2.69±0.342.78±0.232.71±0.262.94±0.28棕榈酸(C16∶0)24.38±1.0125.29±1.0224.57±0.9625.18 ±1.17豆蔻酸(C14∶0)1.25±0.06b1.28±0.03a1.31±0.04a1.33±0.06a亚油酸(C18∶2n6c)7.45±0.87b9.54±0.52a8.97±0.85a9.12±0.69aα-亚麻酸(C18∶3n3)0.53±0.040.52±0.060.54±0.030.52±0.04饱和脂肪酸(SFA)41.33±1.9341.20±1.6742.03±2.0741.93±1.59不饱和脂肪酸(UFA)58.32±2.3558.01±1.5857.32±1.7656.88±2.41%2.6不同硒源对猪养殖经济效益的影响(见表10)由表10可知,B组、C组、D组育肥猪养殖收入分别比对照组高6.97%、12.07%、12.94%,B组、C组、D组育肥猪试验阶段饲料成本分别比对照组高2.07%、3.17%、3.59%。B组、C组、D组育肥猪试验阶段养殖利润分别比对照组高69.88、120.28、130.20元。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2022.22.011.T010表10不同硒源对猪养殖经济效益的影响项目A组(对照组)B组C组D组养殖收入1 167.401 248.791 308.251 318.51饲料成本554.76566.23572.33574.67硒使用成本00.043.001.00利润612.64682.52732.92742.84元/头3讨论3.1不同硒源对育肥猪生长性能的影响张少涛[7]分别在育肥猪日粮中分别添加亚硒酸钠(0.3 mg/kg)、酵母硒(0.3 mg/kg)、硒代蛋氨酸(0.3 mg/kg)及混合有机硒(0.15 mg/kg酵母硒+0.15 mg/kg硒代蛋氨酸),结果表明,各有机硒组育肥猪ADG、出栏重显著高于亚硒酸钠组,F/G显著低于亚硒酸钠组。何宏超等[8]在日粮中分别添加0.3 mg/kg亚硒酸钠和酵母硒,结果显示,不同硒源对育肥猪ADG、ADFI、F/G等指标均无显著影响。戴五洲[9]在育肥猪日粮中分别添加0.1、0.3、0.5 mg/kg纳米硒,结果显示,猪生产性能没有随着纳米硒的添加量增加而出现显著差异。目前尚无关于纳米硒与亚硒酸钠、酵母硒等其他硒源对猪生产性能的对比研究。但赵亚伟等[10]在肉鸡养殖中的研究发现,纳米硒对提高ADG和F/G效果优于亚硒酸钠和酵母硒。本研究结果发现,与亚硒酸钠相比,酵母硒与纳米硒可以显著提高育肥猪ADG,降低F/G。不同的研究中对不同硒源对育肥猪生产性能的影响报道不完全一致,这可能与育肥猪所处生长阶段、养殖水平和饲料营养水平有关。3.2不同硒源对育肥猪屠宰性能的影响屠宰性能可以反映猪在此阶段的育肥效果,是衡量猪生产效率的重要指标。邓亚军等[11]在育肥猪日粮中添加不同来源的硒元素(硒元素的添加量为0.5 mg/kg),结果显示,与亚硒酸钠组相比,各有机硒组试验组育肥猪的瘦肉率、屠宰率和眼肌面积有增加的趋势,并且背膘厚度具有降低的趋势。本研究发现,纳米硒组猪的眼肌面积显著高于亚硒酸钠组,但酵母硒组与各组差异不显著,造成差异的原因可能与硒元素在日粮中浓度低于0.5 mg/kg有关。3.3不同硒源对育肥猪血清抗氧化指标的影响T-AOC是衡量机体总体抗氧化能力的关键指标。CAT的主要作用是催化H2O2变成H2O和O2。GSH-Px可以特异性催化谷胱甘肽还原机体中的过氧化物,降低生物膜和生物大分子受到的氧化损伤,且其活性可以受硒元素的影响。SOD主要催化机体内超氧化自由基,MDA是脂质过氧化产物。上述指标均可不同程度地反映机体的抗氧化能力[12-14]。张乙山等[15]在生长育肥猪日粮中分别添加0.3 mg/kg亚硒酸钠、0.5 mg/kg酵母硒、0.8 mg/kg纳米硒,结果表明,相同添加水平下,纳米硒组和酵母硒组猪血清GSH-Px与SOD活性显著高于亚硒酸钠组。戴五洲等[16]研究发现,添加0.1 mg/kg甘氨酸纳米硒可以显著提高育肥猪血清中T-AOC和SOD活性;添加0.3和0.5 mg/kg甘氨酸纳米硒还可以进一步提高血清中CAT和GSH-Px活性,纳米硒添加量为0.5 mg/kg对提升猪体内抗氧化能力效果较好。本研究认为,纳米硒和酵母硒在提升T-AOC及GSH-Px、SOD活性方面比亚硒酸钠效果更好。综上所述,认为酵母硒和纳米硒对提高机体抗氧化能力的效果优于亚硒酸钠。3.4不同硒源对育肥猪免疫指标的影响IgG、IgA、IgM是猪血清中主要的免疫球蛋白,能够反映机体免疫功能。补体C3和C4对免疫应答和机体稳定具有重要作用,是补体系统中的关键物质。LZM是体内碱性小分子蛋白水解酶,在非特异性免疫和免疫应答中起重要作用[17-18]。林长光[19]研究表明,纳米硒组母猪血清IgA含量分别比亚硒酸钠组提高142.65%和35.29%,IgM含量分别比亚硒酸钠组和酵母硒组提高63.83%、8.51%;纳米硒和酵母硒组断奶仔猪和育肥猪血清中IgA、IgG、IgM含量显著高于对照组和亚硒酸钠组,表明纳米硒的效果优于酵母硒和亚硒酸钠,且纳米硒适宜添加量为0.3~0.7 mg/kg。胡培全等[20]发现,在日粮中增加硒水平有助于提高仔猪血清LZM活性。研究发现,硒元素摄入量高与LZM活性具有剂量效应[21-23]。本研究结果显示,亚硒酸钠组猪血清中IgG和LZM活性显著低于酵母硒和纳米硒组,且酵母硒和纳米硒组间差异不显著,与上述研究结果基本类似。3.5不同硒源对育肥猪血清中硒元素含量的影响硒是构成生物细胞组织的必需元素,能够参与生物体内重要的生化反应,而血清和肌肉组织中硒元素含量可以较好地反映该元素在体内的沉积情况。丁斌鹰等[24]在育肥猪日粮中添加不同水平酵母硒,使日粮中硒元素水平为0.3 mg/kg,结果表明,酵母硒组猪血清硒元素含量范围为0.11~0.12 mg/kg。戴五洲[9]在育肥猪基础日粮中分别添加0.1、0.3、0.5 mg/kg纳米硒,结果表明,试验各组均能提高肥育猪血清及各组织器官的硒含量,育肥猪体内硒沉积随纳米硒添加水平增加而增加。本研究结果显示,纳米硒组与酵母硒组育肥猪血清中硒元素含量高于对照组和亚硒酸钠组,可能是由于纳米硒和酵母硒的吸收效率高于亚硒酸钠,与上述研究相比结论基本一致。3.6不同硒源对育肥猪肉品质的影响失水率和贮存损失能够反映肌肉对水分的保持能力,pH值能够反映肌糖原降解速度,剪切力能够直观反映肌肉的嫩度,嫩度越大剪切力越小。肉色能够反映猪肉的新鲜程度,大理石纹能够反映肌间脂肪含量与分布均匀程度[25]。林长光[19]研究表明,纳米硒和酵母硒对猪肉色、pH值、滴水损失、大理石纹、肉色等性状的改善效果显著高于亚硒酸钠组,认为酵母硒和纳米硒在改善肉品质方面的作用强于亚硒酸钠,与本研究结论一致。3.7不同硒源对育肥猪背最长肌营养成分的影响氨基酸是蛋白质合成底物,也是肌肉形成的关键物质。猪肉中氨基酸的组成与含量直接影响其营养价值[26]。猪肉中苯丙氨酸、色氨酸、谷氨酸等多种游离氨基酸可以影响猪肉风味,提高猪肉产品的市场竞争力[27]。异亮氨酸等氨基酸含量对生猪肉气味具有直接影响[28]。苏氨酸可使猪肉具有甜味,加热后与糖类物质发生化学反应,同样可产生挥发性风味,从而提高猪肉风味[29]。但本研究结果显示,不同硒源对猪背最长肌的氨基酸含量无显著影响。饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸也是影响猪肉风味和营养的重要营养物质。不饱和脂肪酸与猪肉营养价值有关,是形成风味物质的前体。猪肉中α-亚油酸和亚麻酸在烹饪过程中可形成挥发脂质,影响猪肉气味[25]。有研究认为,日粮中添加硒元素对猪肉中脂肪酸含量具有一定影响,但并不能从整体改变脂肪酸组成结构[30]。申佳洁[31]在延边黄牛日粮中分别添加0.1%、0.2%、0.3%富硒酵母,结果发现,0.3%富硒酵母组牛肉外脊和臀肉中豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸含量高于对照组,0.2%和0.3%组牛肉外脊亚油酸含量高于对照组,0.1%和0.3%组牛臀肉中亚油酸显著高于对照组。本研究结果显示,各试验组中猪肉中亚油酸和豆蔻酸高于对照组。因此,日粮中添加硒可以改变肌肉中部分脂肪酸含量,但可能与硒的添加形式、动物品种有关。3.8不同硒源对育肥猪养殖经济效益的影响养殖经济效益是判定不同硒源在猪日粮中添加可行性的根本因素。硒属于微量元素,在日粮中的添加浓度较低,因此不同硒源的使用成本所占总饲料成本比例极低。本试验中,与对照组相比,日粮中添加不同硒源可以有效提高养殖经济效益,纳米硒组猪试验阶段的养殖经济效益最高。4结论本试验结果表明,酵母硒、纳米硒在提高育肥猪生产性能、屠宰性能、血清生化指标及肉品质的效果优于亚硒酸钠。综合分析认为,日粮中添加纳米硒效果较好。

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