在现代集约化养猪的大环境中,为提高母猪的生产效率,各猪场普遍采取早期断奶技术[1],但是可能导致出现“早期断奶仔猪应激综合征”,致使仔猪生长速度放缓、腹泻率升高。腹泻是引起仔猪死亡的主要原因[2-3]。以往养猪场通过在日粮中添加抗生素来应对仔猪腹泻问题[4]。随着2020年7月中国实施严格的限抗禁抗政策以来,寻求更为绿色、健康、无公害的饲料添加剂成为研究热点[5]。大量实践证明,使用中草药饲料添加剂,不仅可以获得良好的防病治病和促生长效果,而且能解决毒副作用、耐药性及药物残留问题,与抗生素及其他替代品相比,具有明显优势[6-7]。试验结合中草药的功能药性和断奶仔猪的生理需求,研发一种针对断奶仔猪生长缓慢、腹泻率高及免疫力低等问题的复合中草药添加剂[8],同时设计不同添加剂量,研究该复合中草药添加剂对断奶仔猪生长性能、抗腹泻效果及免疫指标的影响,同时筛选出相对最优添加量,为研制相关饲料添加剂提供参考。1材料与方法1.1试验材料复合中草药添加剂包括:党参、黄芪、白术、山楂、茯苓、连翘、甘草、神曲8味中药材,由“四君子汤”及“保和丸”增减而来,按7∶5∶5∶5∶5∶1∶1∶1比例混合配制,打粉过50目筛,放置通风干燥处备用。免疫球蛋白IgA、IgM、IgG试剂盒购自上海晶抗生物工程有限公司;补体C3、C4试剂盒购自上海通蔚实业有限公司;总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、血尿素氮(BUN)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)等试剂盒均购自北京百奥莱博科技有限公司。1.2试验设计及饲养管理试验选取84头健康无病、体重为(8±0.5)kg的(28±1)日龄“杜×长×大”三元杂交断奶母仔猪。随机分成4组,每组3个重复,每个重复7头猪。1组为空白对照组饲喂基础日粮;2组为饲喂基础日粮+2.0 g/kg中草药添加剂;3组为饲喂基础日粮+2.5 g/kg中草药添加剂;4组为饲喂基础日粮+3.0 g/kg中草药添加剂;试验周期为28 d,试验期间每组单独饲喂,自由采食与饮水。定期环境消毒与免疫。1.3试验日粮基础日粮参照NRC(2012)断奶仔猪营养需求设计与配制,试验基础饲粮中不添加任何添加剂和抗生素,基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米54.1消化能/(MJ/kg)14.32膨化大豆10.0粗蛋白/%17.96发酵豆粕8.0粗脂肪/%6.12高蛋白豆粕10.0钙/%0.75进口鱼粉3.0有效磷/%0.51乳清粉5.2赖氨酸/%1.41血浆蛋白粉1.6苏氨酸/%0.88磷酸二氢钠0.8蛋氨酸/%0.49石粉0.8色氨酸/%0.24豆油2.5预混料4.0注:预混料为每千克日粮提供:硫酸亚铁80 mg、硫酸锰4 mg、硫酸锌75 mg、硫酸铜5 mg、碘酸钙0.3 mg、生物素0.2 mg、叶酸0.3 mg、烟酸28 mg、泛酸20 mg、VA 350 IU、VD3 750 IU、VE 15 IU、VK3 0.5 mg、VC 20 mg、VB12 0.02 mg。1.4生长性能的测定试验期间,空腹称重,记录初重、末重、试验期间每个重复组的耗料量及腹泻情况,并测定平均日采食量、平均日增重、料重比及腹泻率等指标。平均日采食量=耗料量/(试验天数×试验头数)(1)平均日增重=增重/试验天数(2)腹泻率=腹泻头数/仔猪总数×100%(3)料重比=平均日采食量/平均日增重(4)1.5血清生化指标和免疫指标测定试验结束后,断料12 h,从各试验组随机选取5头试验仔猪,前腔静脉采集血液10 mL,分离血清待测。按各专用试剂盒测定血清生化指标含量,采用ELISA法测定各项免疫指标。1.6数据统计与分析采用SPSS 21.0软件进行统计分析。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.05表示差异不显著。2结果与分析2.1不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪生长性能的影响(见表2)由表2可知,试验3、4组仔猪平均日增重显著高于试验1组(P<0.05)。试验4组仔猪平均日采食量显著高于试验1、2、3组(P<0.05)。试验2、3、4组仔猪料重比显著低于试验1组(P<0.05)。试验4组仔猪腹泻率显著低于试验1组(P<0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.006.T002表2不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪生长性能的影响项目试验1组试验2组试验3组试验4组始重/kg8.16±3.418.32±5.788.38±4.678.27±2.88末重/kg19.32±5.7319.67±4.3520.72±1.7420.45±2.16平均日增重/(g/d)398.57±5.15b405.35±5.61b440.71±4.98a435.00±2.63a平均日采食量/(g/d)651.45±12.58c677.89±15.47b688.14±10.11b701.43±17.45a料重比1.74±0.25a1.67±1.22b1.66±0.77b1.64±1.19b腹泻率/%5.00±0.27a3.75±0.31c2.50±0.28c1.25±0.12b注:同行数据肩标字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),字母不同表示差异显著(P<0.05);下表同。2.2不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪血液生化指标的影响(见表3)由表3可知,试验2~4组的TP、ALB含量显著高于试验1组(P<0.05)。试验3、4组的BUN、ALT含量显著低于试验1组(P<0.05)。试验2~4组的AKP含量显著高于试验1组(P<0.05),且试验4组与试验2、3组间差异显著(P<0.05)。试验2~4组的CAT活性显著高于试验1组(P<0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.006.T003表3不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪血液生化指标的影响项目试验1组试验2组试验3组试验4组TP/(g/L)42.39±7.12c44.85±2.38b47.98±2.47a48.56±6.59aALB/(g/L)33.91±1.44b35.09±2.52a35.21±3.79a35.60±4.12aBUN/(mmol/L)6.75±0.38a5.78±0.31b5.44±0.47b5.41±0.15bALT/(mmol/L)58.35±8.22a57.21±7.65a53.89±7.14b53.11±4.12bAST/(mmol/L)41.35±3.17a43.57±5.37a42.58±2.84a44.21±3.49aAKP/(mmol/L)165.01±16.68c179.19±11.87b181.57±15.68b187.86±10.22aCAT/(U/mL)6.56±1.22c7.83±1.37b8.12±0.98a8.35±0.86a2.3不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪免疫指标的影响(见表4)由表4可知,试验2~4组IgG含量显著高于试验1组(P<0.05)。4个试验组IgM含量无显著差异(P>0.05)。试验3、4组IgA含量显著高于试验1组(P<0.05)。试验2~4组补体C3、C4含量显著高于试验1组(P<0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.006.T004表4不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪免疫指标的影响项目试验1组试验2组试验3组试验4组IgG1.98±0.11c2.26±0.35b2.33±0.27b2.55±0.31aIgM0.33±0.01a0.34±0.03a0.33±0.01a0.35±0.04aIgA1.81±0.01b1.88±0.03b2.18±0.05a2.24±0.02a补体C30.43±0.01d0.49±0.02c0.54±0.01b0.60±0.03a补体C40.054±0.005c0.065±0.004b0.072±0.003a0.073±0.006ag/L3讨论3.1试验复合中药添加剂的配伍试验中药配方是依照古典方剂“四君子汤”及“保和丸”增减而来。“四君子汤”是一种常用药方,其主要功效为提高脾胃功能、增强食欲、增强消化吸收功能、增膘复壮[9]。其药物组成为:党参、白术、茯苓、甘草。该方中党参补中益气为主药;白术苦温,健脾燥湿为辅药;茯苓甘淡,健脾渗湿为佐药,与白术合用,健脾祛湿之功更甚;甘草甘温,益气和中,调和诸药为使药[10]。在此方基础之上,试验为结合断奶仔猪生理特征及仔猪断奶后,食物转变为饲料,且自身消化系统尚未发育完善、脾胃功能较弱、消化能力不足,从而导致营养摄入不足等情况。因此,严格遵守配伍原则,加入中药典型方剂“保和丸”中的几位药材,增加黄芪、山楂、连翘、神曲4味药材。其中,黄芪性温,味苦,主治补气固表、拖毒排脓、利尿、生肌。冯言言等[11]研究表明,黄芪中含有的黄芪多糖能显著增强仔猪免疫功能;山楂、神曲两药连用,能健脾开胃,可助消化、消食理气,治疗饮食积滞,在实际生产中还可降低断奶仔猪腹泻率及断奶应激发生率[12]。3.2不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪生长性能的影响本试验结果表明,在平均日增重方面,试验3、4组较试验1组分别高出10.57%、9.14%。在平均日采食量方面,试验2、3、4组较对照组1组分别高出4.06%、5.63%、7.67%。在料重比方面,试验2~4组较试验1组分别降低4.02%、4.60%、5.75%。腹泻率方面,试验2、3组分别均低于试验1组,试验4组显著低于1组。试验结果与任丹丹等[13]研究加味四君子汤对仔猪消化吸收功能及小肠EGF表达影响的结果一致。该研究发现,加味四君子汤能显著提高仔猪平均日增重和平均日采食量,降低料重比,还可提高仔猪血清中D-木糖水平及淀粉酶水平,增加小肠EGF蛋白的表达,从而提高仔猪消化吸收能力。章华其等[14]在研究两组复方中草药添加剂对生长肥育猪生产性能的试验中发现,添加山楂、神曲均能显著分别提高仔猪日增重11.26%和全程日增重9.66%。研究表明,本试验选取的复合中草药添加剂能有效提高断奶仔猪的生长性能。3.3不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪血液生化指标的影响血液生化指标可以直接观测有机体内物质代谢情况及动物健康状况[15]。王宇等[16]在研究黄芪何首乌提取物对断奶仔猪血液指标及免疫的影响中,研究对象与本试验一致,该结果表明在日粮中添加0.5%黄芪、何首乌提取物,相对于饲喂基础日粮的对照组而言,能显著提高TP含量,ALP含量显著增加14.19%。易延彬[17]在研究中草药添加剂对断奶仔猪血清生化指标试验中发现,添加黄芪、茯苓、连翘的1.5 g/kg中草药添加剂能显著提高TP含量,ALB含量高于对照组,能显著降低BUN含量,ALT、AST均低于对照组。本试验结果同样发现,本试验选取的复合中草药添加剂能显著提高TP、ALB、AKP、CAT含量,能显著降低BUN及ALT含量。3.4不同剂量复合中草药添加剂对断奶仔猪免疫性能的影响血清中的IgG、IgM、IgA等是构成体液免疫的重要物质,在免疫过程中起重要的作用[18]。黄子慧等[19]在研究加味四君子汤对仔猪血清免疫因子水平及肠黏膜免疫的影响中发现,加味四君子汤能显著或极显著提高仔猪血清中4种免疫因子水平,极显著提高IgA的mRNA相对表达量,结果表明在日粮中添加2%的加味四君子汤能提高仔猪机体免疫应答能力。本试验结果与以上研究结果一致。综上所述,复合中草药添加剂因其含有多种活性物质,从而能有效地提高断奶仔猪机体的免疫应水平。4结论在本试验条件下,选取由“四君子汤”与“保和丸”两种方剂增减而来的方剂,在日粮中添加3.0 g/kg的复合中草药添加剂可有效地提高断奶仔猪生长性能及调节代谢水平,增强其机体免疫应答能力。
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