硅是动物机体重要的基础元素,对动物具有重要的生理作用。硅能够影响动物骨骼生长,缺硅会导致动物的骨密度降低、骨骼严重畸形[1-3],降低皮肤和心血管弹性[4-6]。目前,关于硅对家禽影响的相关研究主要集中于骨骼方面。有研究表明,饲喂人工低硅饮食的禽类生长速度降低[7],当喂食含硅量超过正常水平的日粮时不会对家禽生产性能产生不良影响[8]。Clarke等[9]研究表明,日粮中补充硅对改善家禽跛足具有良好的效果。环境和食物中存在大量的硅,但是多数含硅复合物不易溶于水,生物利用度低。研究表明,人对硅的需求为5~25 mg/d,而硅的人均摄入量为20~50 mg/d[10]。目前尚未见家禽对硅的每日需要量的相关报道,也没有关于硅对鸡蛋蛋品质方面影响的研究报道。本研究以罗曼蛋鸡为研究对象,探索日粮中添加硅对蛋鸡蛋品质和蛋中氨基酸含量的影响,为硅在蛋鸡生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试剂与仪器主要试剂:五水硅酸钠(Na2SiO3·5H2O,纯度≥99%)购自天津致远科技有限公司,盐酸、柠檬酸钠为国产分析纯。主要仪器:S-433D全自动氨基酸分析仪(塞卡姆科学仪器有限公司)、DGG-9620A电热恒温干燥箱(上海森信实验仪器有限公司)、52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂有限公司)、DZF-6020真空干燥箱(上海博讯医疗生物仪器股份有限公司)。1.2试验设计与饲养管理选择310日龄、体重相近的健康罗曼蛋鸡300只,随机分成5组,每组6个重复,每个重复10只鸡。各组分别在基础日粮中添加0(CK组)、0.5%(Ⅰ组)、1.0%(Ⅱ组)、3.0%(Ⅲ组)、5.0%(Ⅳ组)硅酸钠。按照NRC《家禽营养需要》[11]设计日粮,试验全程采用粉料。试验鸡采取限饲,定时饲喂两次,自由饮水。预试期10 d,试验期42 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.012.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干基础)原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.00粗蛋白/%17.00豆粕24.00钙/%3.57豆油1.00总磷/%0.54鱼粉2.00有效磷/%0.34磷酸氢钙1.00赖氨酸/%0.90石粉9.00蛋氨酸/%0.41食盐0.32代谢能/(MJ/kg)11.44DL-蛋氨酸0.12L-苏氨酸0.1050%氯化胆碱0.10预混料0.30植酸酶0.02L-赖氨酸盐酸盐0.04注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 10 000 IU、VD 3 000 IU、VE 29 mg、VB1 3 mg、VB2 8 mg、VB6 6 mg、VB12 30 μg、烟酸50 mg、叶酸1.5 mg、Cu 12.5 mg、Fe 90 mg、Zn 82.8 mg、Mn 95.4 mg、I 0.19 mg、Se 0.15 mg。2.营养水平均为计算值。试验鸡采用3层全阶梯式笼养,早晚进行人工照明补光,光照时间为16 h。鸡舍专人看管,按时清理粪便,每天10:00和16:00捡蛋2次,并对各组进行标记,其他饲养管理按常规进行。1.3测定指标及方法1.3.1产蛋性能试验期间记录每组蛋鸡每天产蛋总数、蛋重,计算全期产蛋率、全期平均蛋重、料蛋比。全期产蛋率=日产蛋总数/存栏蛋鸡数×100%(1)全期平均蛋重=总蛋重/总蛋数(2)料蛋比=平均日采食量/平均蛋重(3)1.3.2蛋品质试验结束后,从每个试验组随机选取10枚鸡蛋,放入4 ℃冰箱中保存。采用电子天平测定总蛋重,蛋黄水分、蛋清水分采用恒温干燥箱测定。蛋黄水分比例=蛋黄水分/蛋黄重×100%(4)蛋清水分比例=蛋清水分/蛋清重×100%(5)1.3.3蛋中氨基酸含量采用分蛋器分离蛋黄和蛋清,放入干净的小烧杯中,分别将蛋黄、蛋清搅拌混匀,称取样品0.1 g,放入水解管中,分别加入10 mL的6 mol/L浓盐酸,混匀,密封,置于110 ℃恒温干燥箱中消解24 h。消解结束后,冷却至室温,混匀,开管,过滤,使用移液管精确吸取滤液100 μL,置于旋转蒸发器中,60 ℃真空干燥箱中干燥至干。加入1~2 mL柠檬酸钠缓冲溶液复溶,摇匀,经0.45 μm有机系针头滤膜过滤,上清液置于S-433D全自动氨基酸分析仪自动进样器上进样分析。氨基酸测定条件:预柱(除氨柱):LCA K04/Na;分离柱:LCA K06/Na。分离柱柱温:58 ℃,反应单元温度:130 ℃;缓冲泵流速:0.45 mL/min,试剂泵流速:0.25 mL/min,进样体积:50 μL,检测器波长:570 nm、440 nm,分析时间:60 min。1.4数据统计与分析试验数据使用SPSS 24.0统计分析软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值和标准误(SEM)”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡产蛋性能的影响(见表2)由表2可知,与CK组相比,Ⅳ组蛋鸡的全期产蛋率、全期平均蛋重均显著降低(P0.05),Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组蛋鸡的全期产蛋率、全期平均蛋重及料蛋比差异不显著(P0.05);各试验组蛋鸡的平均日采食量均显著升高(P0.05)。研究表明,在基础日粮中添加5.0%硅酸钠或会对罗曼蛋鸡产生不利影响,降低了全期产蛋率、全期平均蛋重,提高了料蛋比。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.012.T002表2不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡产蛋性能的影响项目CK组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组SEMP值全期产蛋率/%90.39a90.09a89.44a88.68a85.76b0.390.001全期平均蛋重/(g/枚)56.80a56.18a57.06a55.47a52.81b0.280.001平均日采食量/[g/(只·d)]118.75b119.35a119.35a119.35a119.35a0.020.001料蛋比2.11b2.12b2.09b2.16b2.26a0.010.001注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋品质的影响(见表3)由表3可知,与CK组相比,各试验组的总蛋重、蛋黄重、蛋清重、蛋壳重、蛋黄比例、蛋清比例、蛋壳比例差异不显著(P0.05);Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组的蛋黄和蛋清中的水分比例显著升高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.012.T003表3不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋品质的影响项目CK组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组SEMP值总蛋重/g61.8366.0464.0363.4863.631.180.898蛋黄重/g19.5619.6718.0919.8618.770.410.689蛋清重/g35.2638.8638.6136.3437.590.990.806蛋壳重/g7.017.517.347.297.270.150.911蛋黄比例/%31.5430.0128.4531.2629.520.670.647蛋清比例/%57.1458.5860.0957.2759.070.690.688蛋壳比例/%11.3311.4211.4611.4811.410.130.998蛋黄水分/g7.958.058.329.118.130.200.323蛋清水分/g27.5931.1331.8929.5730.870.900.665蛋黄水分比例/%40.54c40.95bc46.04a45.94a43.41ab0.700.002蛋清水分比例/%78.25c79.92bc82.50a81.41ab82.11ab0.490.0072.3不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋中氨基酸含量的影响(见表4、表5)由表4可知,与CK组相比,试验组蛋清中天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸、脯氨酸含量差异均不显著(P0.05);除蛋氨酸外,Ⅱ组鸡蛋其余16种氨基酸含量均高于CK组。与CK组相比,Ⅱ组蛋清中氨基酸总量(TAA)、鲜味氨基酸(FAA)含量显著升高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.012.T004表4不同水平硅酸钠对蛋清中氨基酸含量的影响项目CK组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组SEMP值天门冬氨酸#/(mg/kg)12.9313.5915.3014.2913.430.330.189苏氨酸*/(mg/kg)5.125.176.065.214.930.190.376丝氨酸/(mg/kg)7.507.638.828.197.250.210.084谷氨酸#/(mg/kg)13.7214.0615.4114.4013.360.250.072甘氨酸#/(mg/kg)3.373.484.073.913.470.130.322丙氨酸#/(mg/kg)5.115.365.926.305.640.190.317胱氨酸/(mg/kg)1.431.501.641.651.450.050.633缬氨酸*/(mg/kg)7.667.978.598.017.790.230.807蛋氨酸*/(mg/kg)1.591.791.562.101.470.080.081异亮氨酸*/(mg/kg)5.846.136.846.335.960.130.122亮氨酸*/(mg/kg)9.109.0510.5910.259.050.250.104酪氨酸/(mg/kg)4.544.264.644.753.920.110.130苯丙氨酸*/(mg/kg)6.247.217.797.636.410.240.101组氨酸*/(mg/kg)3.033.063.603.932.900.140.083赖氨酸*/(mg/kg)8.849.0910.169.538.670.200.104续表4 不同水平硅酸钠对蛋清中氨基酸含量的影响由表5可知,与CK组相比,Ⅳ组蛋黄中丙氨酸和脯氨酸含量显著降低(P0.05),Ⅰ组蛋黄中TAA、EAA及FAA显著升高(P0.05),Ⅳ组蛋黄中TAA、FAA显著降低(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.012.T005表5不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋黄中氨基酸的影响项目CK组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组SEMP值精氨酸#/(mg/kg)6.336.547.436.666.240.180.219脯氨酸/(mg/kg)1.962.221.982.191.950.060.151氨基酸总量(TAA)/(mg/kg)104.32b108.11ab120.41a115.33ab103.88b2.250.047必需氨基酸(EAA)/(mg/kg)44.3946.4051.5949.0544.281.030.086鲜味氨基酸(FAA)/(mg/kg)41.46b43.03b48.13a45.57ab42.13b0.830.030EAA/TAA/%42.5242.9042.8442.5442.600.000.988EAA/NEAA/%73.9975.1374.9774.0374.270.010.923FAA/TAA/%39.7839.8439.9739.5140.590.220.677注:“*”为必需氨基酸,“#”为鲜味氨基酸;下表同。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.012.T006表5不同水平硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋黄中氨基酸的影响项目CK组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组Ⅳ组SEMP值天门冬氨酸#/(mg/kg)15.3216.5915.8616.0715.590.180.199苏氨酸*/(mg/kg)7.597.617.707.446.980.110.303丝氨酸/(mg/kg)12.3012.5712.1212.1911.360.160.171谷氨酸#/(mg/kg)16.7816.7916.9716.9215.290.230.073甘氨酸#/(mg/kg)4.064.174.033.973.540.090.179丙氨酸#/(mg/kg)6.55a6.85a6.20a6.32a4.99b0.190.003胱氨酸/(mg/kg)0.650.610.590.510.660.030.453缬氨酸*/(mg/kg)8.198.768.318.398.120.090.204蛋氨酸*/(mg/kg)1.731.671.671.711.540.040.722异亮氨酸*/(mg/kg)7.257.917.327.497.170.100.145亮氨酸*/(mg/kg)12.4013.3912.5212.8812.290.160.181酪氨酸/(mg/kg)5.885.535.466.125.340.120.182苯丙氨酸*/(mg/kg)6.60ab7.03a6.43ab6.80a5.94b0.130.031组氨酸*/(mg/kg)5.476.145.365.845.750.110.176赖氨酸*/(mg/kg)12.0513.0712.0512.5212.090.210.522精氨酸#/(mg/kg)11.2711.8211.1411.5211.090.120.273脯氨酸/(mg/kg)4.70a4.82a4.61a4.36a3.72b0.120.006TAA/(mg/kg)138.81b145.31a138.34b141.04b131.46c1.260.001EAA/(mg/kg)55.82bc59.44a55.99bc57.23ab54.13c0.540.004FAA/(mg/kg)53.98b56.20a54.20b54.80ab50.50c0.550.001EAA/TAA/%40.2140.9140.4740.5841.170.000.229EAA/NEAA/%67.2569.2567.9968.3269.980.010.417FAA/TAA/%38.8938.6839.1838.8538.410.130.4903讨论3.1硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡产蛋性能的影响大多数硅在中性pH值下生物利用度并不高,硅酸盐最终均以原硅酸的形式才能够被吸收,并作用于动物靶组织[12]。商品日粮中提供的硅难以满足家禽对生物有效硅的需求[13-14]。Burton等[15]研究发现,与对照组相比,饲喂新型膳食硅补充剂单晶硅(MONO-Si)可以显著增加0~21日龄肉鸡初重,并提高其骨强度;但随着日龄增大和肉鸡体重的增加,在基础日粮中添加1 000 mg/L的单晶硅也无法满足肉鸡最佳生长对硅的需求。本试验结果显示,在基础日粮中添加0.5%~3.0%的硅酸钠对罗曼蛋鸡产蛋率、平均蛋重和料蛋比无显著影响,添加5.0%硅酸钠会显著降低罗曼蛋鸡全期产蛋率、全期平均蛋重,提高料蛋比,表明日粮中添加低浓度硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡产蛋性能无不良影响,但是基础日粮中添加高浓度硅酸钠会降低产蛋高峰期罗曼蛋鸡产蛋性能。3.2硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋品质的影响蛋重、蛋黄比例、蛋白比例等指标可以评估蛋品质[16]。因蛋黄营养物质比蛋白多,通常认为蛋黄比蛋白具有更高的营养价值[17-18],而蛋黄占比越高,其营养价值更好[19]。本试验结果显示,在基础日粮中添加0.5%~5.0%硅酸钠对罗曼蛋鸡蛋重、蛋黄重、蛋清重、蛋壳重无显著影响,但添加1.0%~5.0%的硅酸钠会显著升高蛋黄和蛋清中的水分比例,可能是饲粮中添加较高含量的硅酸钠导致鸡饮水增加,导致蛋黄、蛋清中水分比例升高。3.3硅酸钠对产蛋高峰期罗曼蛋鸡蛋中氨基酸的影响赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸是人体所需的EAA,天冬氨酸、丝氨酸、酪氨酸、脯氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、组氨酸等是人体NEAA[20]。本试验表明,添加不同水平硅酸钠对蛋清中17种氨基酸含量无显著影响;各试验组蛋清中TAA为103.88~120.41 mg/g,EAA/TAA为42.52%~42.90%,各组均高于WHO/FAO理想蛋白质标准规定的40%;EAA/NEAA范围为73.99%~75.13%,高于WHO/FAO理想蛋白质标准规定的60%[21-23]。本试验中,添加1.0%硅酸钠可显著升高鸡蛋蛋清中TAA、EAA含量,但添加0.5%~5.0%的硅酸钠不会影响蛋清EAA/TAA、EAA/NEAA。天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、精氨酸是呈鲜味的特征氨基酸,对食物风味具有重要影响[24-26]。本试验中,各试验组鸡蛋蛋清中FAA为42.13~48.13 mg/g,占蛋清总氨基酸的39.51%~40.59%;各试验组蛋黄中FAA为50.50~56.20 mg/g,占蛋黄总氨基酸的38.41%~39.18%。因此,添加不同水平硅酸钠对蛋清和蛋黄中氨基酸组成影响不大,均接近或高于WHO/FAO理想蛋白质标准。4结论本研究表明,添加0.5%~3.0%的硅酸钠对罗曼蛋鸡产蛋率、平均蛋重和料蛋比无明显影响,但添加硅酸钠含量过高会显著降低罗曼蛋鸡产蛋率、平均蛋重,提高料蛋比,显著提高蛋黄和蛋清中的水分比例,降低蛋黄中丙氨酸和脯氨酸含量,表明添加高剂量的硅酸钠会对蛋中氨基酸组成会造成不利影响。综合考虑产蛋性能和蛋品质,蛋鸡日粮中硅酸钠的添加量以0.5%~1.0%为宜。
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