鱼粉作为优质蛋白原料，在断奶仔猪的养殖中具有重要作用，但由于鱼粉价格较高，需要寻找优质蛋白源替代鱼粉[1]。干蝇蛆粉粗蛋白含量可高达62.52%，总糖、粗灰分、粗脂肪含量约为2.87%、6.14%和18.05%，蝇蛆粉中必需氨基酸与非必需氨基酸总量比值约为0.91，不饱和脂肪酸含量约为58.50%[2]。蝇蛆粉中富含维生素A、维生素D、维生素E等多种维生素和几丁质、抗菌肽等活性物质[3-4]。使用蝇蛆粉替代鱼粉可以有效提高家禽和水产动物的生长性能和免疫能力，维护肠道菌群，具有较高的饲用价值[5]，但在目前蝇蛆粉在猪生产中的报道较少。因此，本试验使用蝇蛆粉替代断奶仔猪日粮中的鱼粉，观察蝇蛆粉对仔猪生长性能、血清免疫、肠道消化酶活性、肠道微生物和经济效益的影响，为蝇蛆粉在猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验地点与试验材料试验于山东慧牧养猪专业合作社进行。蝇蛆粉由章丘蝇蛆养殖基地提供，蝇蛆粉营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T001表1蝇蛆粉营养水平项目粗蛋白粗灰分粗脂肪总磷钙含量61.1311.213.651.121.18%1.2试验设计选取26日龄健康程度一致的断奶仔猪360头，随机分为4组，每组6个重复，每个重复15头仔猪，A组（对照组）、B组、C组、D组分别使用蝇蛆粉替代仔猪基础日粮中0、50%、75%、100%的鱼粉，试验日粮组成及营养水平见表2。预试期7 d，正式试验期30 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T002表2试验日粮组成及营养水平项目A组B组C组D组原料组成/%膨化玉米9.859.859.859.85玉米48.3648.3648.3648.36面粉5.135.135.135.13椰油粉1.371.371.371.37大豆油1.851.851.851.85葡萄糖2.382.382.382.38乳清粉2.702.702.702.70豆粕13.8513.8513.8513.85鱼粉3.001.500.750蝇蛆粉01.502.253.00膨化大豆8.508.508.508.50磷酸氢钙0.830.830.830.83石粉0.830.830.830.83食盐0.350.350.350.35预混料1.001.001.001.00合计100.00100.00100.00100.00营养水平消化能/(MJ/kg)13.4513.4413.4313.42粗蛋白/%18.7818.7518.7318.72赖氨酸/%1.361.361.361.36蛋氨酸/%0.390.390.390.39钙/%0.780.780.780.77磷/%0.310.310.310.30注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 1 250 IU、VD3 280 IU、VE 55 IU、VK3 3.48 mg、VB2 2.98 mg、VB6 1.47 mg、烟酰胺1.62 mg、泛酸钙8.22 mg、生物素0.4 mg、铜5.3 mg、铁90 mg、锌100 mg、锰 5.7 mg、碘0.3 mg、硒0.25 mg。2.营养水平均为实测值。1.3饲养管理仔猪在试验期间自由采食与饮水，每天6：30记录并统计前1 d采食量。观察试验猪健康状况，发现问题及时处理，其他饲养管理均根据场内规章制度执行。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能正式试验开始与结束时，仔猪禁食12 h，统计仔猪空腹体重。饲喂结束后，以重复为单位统计仔猪体重、采食量、死亡数及腹泻情况，计算仔猪平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率及成活率。平均日增重=试验期总增重/(试验天数×仔猪头数)(1)平均日采食量=试验期总采食量/(试验天数×仔猪头数)(2)腹泻率=仔猪累计腹泻次数/(仔猪头数×试验天数)×100%(3)成活率=(仔猪总数-仔猪死亡数)/仔猪总数(4)料重比=采食量/增重(5)1.4.2血清免疫指标在各重复中选择1头与该组平均体重相近的试验仔猪，前腔静脉采血5 mL，室温静置15 min，3 000 r/min离心15 min，获得血清。使用试剂盒（南京建成生物研究所）测定免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）、白细胞介素-2（IL-2）、细胞因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）含量，具体操作步骤参照试剂盒说明。1.4.3十二指肠消化酶活性与组织形态仔猪采血后屠宰获取十二指肠，使用试剂盒（Abcam（中国）贸易有限公司）检测仔猪十二指肠中淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶活性，操作步骤参照试剂盒说明书。剪取3 cm十二指肠，在多聚甲醛中固定24 h，经石蜡包埋后染色，封于中性树脂中，测量十二指肠的隐窝深度、绒毛高度，计算绒毛高度/隐窝深度比值（V/C）。1.4.4肠道微生物数量在试验最后1 d，各重复随机选择2头仔猪，收集仔猪粪便置于无菌袋中，在无菌工作台中将粪样分装于无菌离心管。参考胡文平等[6]的研究方法，使用平板涂布法测定粪样中双歧杆菌、大肠杆菌及乳酸杆菌、沙门氏菌数量。1.4.5经济效益试验中断奶仔猪基础日粮价格约为5 500元/t，鱼粉平均采购价格约为13.40元/kg，蝇蛆粉平均采购价格约为12.50元/kg，仔猪销售价格约为44.09元/kg，计算饲料成本、增重收入、利润指标数据。饲料单价=基础日粮价格-(鱼粉价格-蝇蛆粉价格)×每吨日粮中蝇蛆粉添加量(6)饲料成本=试验阶段仔猪采食量×饲料单价(7)仔猪增重收入=每头仔猪总增重×仔猪销售价格(8)利润=仔猪增重收入-饲料成本(9)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 26软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1蝇蛆粉对仔猪生长性能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，C组和D组仔猪料重比具有下降趋势（P0.05）；试验组仔猪腹泻率具有下降趋势（P0.05）。D组仔猪的平均日增重和平均日采食量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T003表3蝇蛆粉对仔猪生长性能的影响组别初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量[g/(头·d)]腹泻率/%成活率/%料重比A组（对照组）8.43±0.5619.30±2.28363.23±12.61a615.79±23.46a2.03±0.431001.70±0.08B组8.45±0.4319.50±1.87368.28±15.41a629.76±31.27a1.94±0.391001.71±0.06C组8.39±0.4518.69±1.96343.29±13.34ab576.73±28.54ab1.82±0.261001.68±0.08D组8.42±0.5118.31±2.12329.57±10.32b547.09±19.72b1.86±0.421001.66±0.08注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2蝇蛆粉对仔猪血清免疫指标的影响（见表4）由表4可知，D组仔猪血清中IgG显著高于其他组（P0.05），试验组仔猪血清IgA含量显著高于对照组（P0.05）。D组仔猪血清中TNF-α含量显著低于对照组（P0.05），试验组仔猪血清中IL-6含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T004表4蝇蛆粉对仔猪血清免疫指标的影响组别IgG/(g/L)IgA/(g/L)IgM/(g/L)TNF-α/(ng/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)A组（对照组）6.02±0.37b1.93±0.14c1.34±0.24231.25±17.43a168.26±10.7862.28±2.08aB组5.97±0.25b2.07±0.17b1.36±0.27226.48±20.56a170.25±9.6958.72±2.29bC组6.34±0.32b2.45±0.18a1.42±0.20206.53±18.72ab163.46±9.2045.57±3.21cD组7.61±0.27a2.59±0.20a1.43±0.23188.95±20.08b167.75±11.1744.34±3.18c2.3蝇蛆粉对仔猪十二指肠消化酶活性与组织形态的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，试验组仔猪十二指肠中脂肪酶和蛋白酶活性显著提高（P0.05），蝇蛆粉对仔猪十二指肠淀粉酶无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T005表5蝇蛆粉对十二指肠消化酶活性与组织形态的影响组别淀粉酶/(U/mg prot)脂肪酶/(U/mg prot)蛋白酶/(U/mg prot)隐窝深度/μm绒毛高度/μm绒毛高度/隐窝深度A组（对照组）2.46±0.3541.26±2.87c153.42±8.47d289.43±16.48410.58±25.361.42±0.36B组2.49±0.2847.52±3.24b175.67±6.39c290.26±12.17412.39±18.241.42±0.28C组2.33±0.4749.38±3.65ab196.38±8.86b295.39±15.08409.87±19.341.39±0.22D组2.51±0.3655.81±4.63a225.04±10.27a294.16±11.43408.23±15.791.39±0.18蝇蛆粉对仔猪十二指肠的绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度/隐窝深度无显著影响（P0.05），表明日粮中添加蝇蛆粉未改变仔猪十二指肠形态。2.4蝇蛆粉对仔猪肠道微生物的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，C组与D组仔猪粪便中大肠杆菌数量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T006表6蝇蛆粉对仔猪肠道微生物的影响组别双歧杆菌大肠杆菌乳酸杆菌沙门氏菌A组（对照组）4.36±0.356.89±0.43a4.28±0.252.89±0.53B组4.52±0.616.44±0.35ab4.29±0.192.88±0.46C组4.47±0.425.79±0.41b4.24±0.162.82±0.62D组4.35±0.485.78±0.36b4.25±0.172.75±0.38lgCFU/g2.5蝇蛆粉对仔猪养殖经济效益的影响（见表7）由表7可知，B组、C组、D组饲料单价分别比对照组低27.0、40.5、54.0元/t。C组、D组试验阶段增重收入分别比对照组低25.05元、43.20元。综合经济效益指标，B组每头仔猪利润比对照组高6.20元，而C组、D组每头仔猪利润分别比对照组低17.91元和30.98元。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.01.008.T007表7蝇蛆粉对仔猪养殖经济效益的影响组别饲料单价/(元/t)采食量/(kg/头)饲料成本/(元/头)增重收入/(元/头)利润/(元/头)A组（对照组）5 500.0018.47101.61479.12377.52B组5 473.0018.89103.40487.12383.72C组5 459.5017.3094.46454.07359.61D组5 446.0016.4189.38435.92346.543讨论3.1蝇蛆粉对仔猪生长性能的影响蝇蛆粉作为蛋白饲料来源在动物生产中已有初步研究成果。简政等[7]分别使用蝇蛆粉、黄粉虫粉完全替代仔猪日粮中鱼粉（比例为5%），结果发现，断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量差异不显著，但21日龄后蝇蛆粉组仔猪采食量快速上升，腹泻率和死淘率明显降低。杨海英等[8]使用蝇蛆粉、黄粉虫粉完全替代仔猪日粮中鱼粉（比例为5%），结果发现，黄粉虫组仔猪体重显著低于鱼粉组和蝇蛆粉组，且蝇蛆粉组和鱼粉组体重差异不显著；21~35日龄阶段鱼粉组仔猪采食量显著高于其他组；蝇蛆粉组仔猪的料重比显著低于鱼粉组和黄粉虫组。郭瑞萍等[9]使用蝇蛆粉分别替代仔猪日粮中50%、100%比例鱼粉，结果发现，添加蝇蛆粉可显著降低仔猪腹泻率。Li等[10]在宁乡猪基础日粮中添加8%蝇蛆粉，结果发现，日粮中添加蝇蛆粉可以显著提高宁乡猪平均日增重。本研究认为，蝇蛆粉替代日粮中50%和75%比例的鱼粉对仔猪生长性能无负面影响，但完全替代后会导致生长性能显著下降，表明蝇蛆粉不能完全替代仔猪日粮中的鱼粉。3.2蝇蛆粉对仔猪血清免疫指标的影响免疫球蛋白是机体具有抗体活性的蛋白类物质，可反映机体主动免疫能力[11-12]。TNF-α、IL-6属于炎性因子，可以反映机体内部炎症水平[13]；IL-2可促进B细胞增殖分化，保证机体健康[14]。宋宇琨等[15]分别在肉鸡日粮中添加0、1.6%、3.2%、4.7%、6.4%的蝇蛆粉，结果发现，6.4%蝇蛆粉组肉鸡血清IgA含量显著高于对照组。郭瑞萍等[9]认为，蝇蛆粉可以提高外周血T淋巴细胞阳性率，显著提升仔猪免疫能力。目前，关于蝇蛆粉增强仔猪血清免疫能力的报道较少。抗菌肽具有提高仔猪血清中免疫球蛋白和降低细胞炎症因子的功能[14,16]，且蝇蛆粉中含有丰富的抗菌肽，由此可推测蝇蛆粉替代鱼粉能够在一定程度上提高仔猪血清免疫能力。3.3蝇蛆粉对仔猪十二指肠消化酶活性和组织形态的影响仔猪消化系统功能尚未完善，对日粮中营养物质的消化吸收率较低，提高消化道内消化酶活性有助于仔猪减少腹泻情况[17]。肠道结构与肠道功能密切相关，营养物质消化吸收主要依赖小肠绒毛和隐窝，但目前尚未有关于蝇蛆粉改善肠道结构的报道。白燕等[18]使用蝇蛆粉以1%、2%、3%及4%的比例替代刺参基础饵料中的鱼粉，结果发现，2%蝇蛆粉替代组刺参淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、纤维素酶活性显著高于其他组。孙丽慧等[19]在青蟹日粮中添加10%蝇蛆粉发现，与对照组相比，日粮中添加蝇蛆粉后青蟹淀粉酶活性、蛋白酶活性、脂肪酶活性显著提高。张玉栋等[20]使用大肠杆菌造模引起小鼠腹泻，并在小鼠日粮中分别添加2.5%、5.0%和8.0%蝇蛆粉。结果发现，5.0%和8.0%蝇蛆粉组小鼠脂肪酶、淀粉酶活性显著高于对照组，2.5%组小鼠脂肪酶活性显著高于对照组。本研究认为，蝇蛆粉替代鱼粉可以有效提高仔猪十二指肠脂肪酶和蛋白酶活性，与上述研究结果基本一致。但目前关于蝇蛆粉替代鱼粉提高消化道内消化酶活性常见于水产养殖的报道中，关于蝇蛆粉提高仔猪消化酶活性的作用机制有待进一步研究。3.4蝇蛆粉对仔猪肠道微生物数量的影响肠道微生物结构是影响肠道健康和功能的重要因素，增加益生菌和减少病菌是动物肠道方面的研究重点。张雪等[3]在鹌鹑日粮中分别添加0、100、200、300 mg/kg蝇蛆抗菌肽，结果表明，与对照组相比，试验组鹌鹑肠道乳酸杆菌和双歧杆菌数量显著提高。Li等[10]使用16S rDNA扩增子测序技术测定饲喂蝇蛆粉的宁乡猪粪便微生物群构成，结果表明，蝇蛆粉组宁乡猪厚壁菌属微生物数量显著上升，而拟杆菌属微生物数量显著下降，与糖水解和蛋白水解相关的梭菌类微生物数量显著上升，表明添加蝇蛆粉可以抑制猪肠道中有害微生物增殖，促进有益菌生长，进而提高营养物质消化利用率。张玉栋等[20]研究认为，日粮中添加蝇蛆粉可以显著减少肠道中大肠杆菌数量。本研究认为，蝇蛆粉替代日粮中鱼粉能够显著降低十二指肠大肠杆菌数量，对乳酸杆菌和双歧杆菌无显著影响，可能是仔猪日粮中蝇蛆抗菌肽含量与上述研究相比相对较低的原因。3.5蝇蛆粉对仔猪养殖经济效益的影响养殖经济效益是评估蝇蛆粉替代鱼粉可行性的关键指标。本研究发现，蝇蛆粉替代75%和100%比例的鱼粉仔猪的养殖经济效益下降。郭瑞萍等[9]研究发现，使用蝇蛆粉替代50%鱼粉可使仔猪养殖经济效益最高，与本研究结果一致。4结论本研究结果表明，使用适量的蝇蛆粉替代仔猪日粮中鱼粉对仔猪生长性能无负面影响，可以提高机体免疫能力及消化酶活性，有助于维护仔猪肠道健康。综合经济效益指标，认为仔猪日粮中蝇蛆粉替代鱼粉的适宜比例为50%。