我国农业农村部第194号公告要求，自2020年7月1日起，禁止除中草药外的所有促生长类药物饲料添加剂，以减少抗生素造成的危害。因此，开发植物提取物（中草药）、微生态制剂、酶制剂、抗菌肽等替抗类饲料添加剂成为目前的研究热点。假蒟（Piper sarmentosum）是一种传统的药用植物，收录于2010年版《中国药典》，广泛分布在印度、马来西亚、泰国以及中国等地[1]。假蒟根茎叶中含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素以及Cu、Fe、Mn、Zn等微量元素[2]。假蒟根茎叶可用于治疗风寒咳嗽、发热、风湿关节痛、腹泻痢疾、产后足肿胀、胃痛、牙痛、糖尿病和外伤[3]。陈川威等[4]研究表明，假蒟提取物（PSE）具有抗氧化活性，能够抑制动物体内的炎症反应，并对猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）炎性因子的分泌具有一定的影响。Hafizah等[5]研究表明，PSE具有抗氧化作用。有研究发现，PSE具有抗菌消炎等作用[6-7]。研究发现，在仔猪日粮中添加50 mg/kg PSE能够提高仔猪生长性能和肠道黏膜屏障功能，改善免疫力，促进蛋白质合成代谢，减少炎性因子含量[8-9]。周璐丽等[10]和王定发等[11]在雏鸡日粮中添加100~300 mg/kg PSE，发现PSE能够缓解球虫感染所导致的盲肠黏膜损伤，提高机体免疫功能，具有一定的抗球虫效果。Abidin等[12]研究表明，PSE对斑马鱼的生长具有促进作用。因此，本试验旨在研究不同添加量PSE对雏鸡生长性能、免疫器官指数和血清生化指标的影响，以期为假蒟提取物在家禽生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料假蒟地上茎叶部分采自儋州市华南热带植物园，置于60 ℃烘干24 h，粉碎，使用95%的乙醇溶液常温浸提3次，合并滤液，旋转蒸发得到膏状假蒟提取物，经冷冻干燥处理与沸石粉1∶1比例混合成粉状假蒟提取物（PSE），置于4 ℃保存。1.2试验设计选取500只健康状况良好、体重相近的1日龄儋州鸡（海南热科源生态养殖有限公司），随机分为5组，每组5个重复，每个重复20只雏鸡，每个重复一笼。BC组（对照组）雏鸡饲喂基础日粮，PC组（抗生素组）在基础日粮中添加200 mg/kg恩诺沙星，PSE1组、PSE2组、PSE3组分别在基础日粮中添加100、200、300 mg/kg的PSE。试验期28 d。基础日粮购自海南热科源生态养殖有限公司，基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.011.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.00代谢能/(MJ/kg)12.01豆粕35.50粗蛋白质/%21.00石粉1.70赖氨酸/%1.11磷酸氢钙1.30蛋氨酸/%0.53预混料1.50钙/%1.05总磷/%0.58注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 11 000 IU、VE 20 mg、VK 3 mg、VD 3 000 IU、VB1 2 mg、VB2 8 mg、VB12 0.04 mg、泛酸19 mg、叶酸1.1 mg、Fe 65 mg、Cu 10 mg、Mn 77 mg、Zn 70 mg。2.营养水平均为计算值。1.3饲养管理试验在中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所畜牧研究基地进行。试验期间雏鸡自由采食、饮水，定期进行鸡舍的消毒和清理工作，保持鸡舍整洁卫生。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验第1 d、第29 d清晨，以每个重复为单位对空腹雏鸡进行称重，计算雏鸡平均日增重，以重复为单位每天记录采食量，计算雏鸡平均日采食量和料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2免疫器官指数试验结束时各重复随机取2只健康状态良好的雏鸡称重，屠宰，摘取肝脏、胸腺和法氏囊。使用电子天平对肝脏、胸腺、法氏囊称重，计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重/活体重×100%[13] (4)1.4.3血清免疫及抗氧化指标试验结束时，各重复随机取2只健康状态良好的雏鸡，颈静脉采血，静置后离心取血清，-80 ℃保存。血清免疫指标：采用酶联吸附法（ELISA）对测定血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）以及免疫球蛋白G（IgG）。试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。抗氧化指标：使用试剂盒测定总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性，测定过程严格按照说明书步骤进行。试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.4.4血清生化指标使用迈瑞生化免疫流水线BS2000全自动血液生理生化分析仪测定血清中白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、总蛋白（TP）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、肌酐（CREA）、尿酸（UA）含量以及谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）活性。1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 18.0统计软件进行单因素方差方差分析，Turkey法多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1假蒟提取物对雏鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，各组雏鸡的生长性能差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.011.T002表2假蒟提取物对雏鸡生长性能的影响项目初重/g末重/g平均日增重/[g/(只·d)]平均日采食量/[g/(只·d)]料重比P值0.5970.0720.0630.0520.267BC组（对照组）51.90±3.02264.72±15.997.60±0.5523.60±1.623.12±0.35PC组50.98±2.09270.01±6.057.82±0.1922.34±1.552.85±0.14PSE1组50.73±1.70262.83±16.197.57±0.6222.11±0.422.94±0.25PSE2组50.30±1.53285.40±16.778.40±0.5524.22±2.302.88±0.12PSE3组50.00±0.45276.42±1.638.09±0.0624.59±0.573.04±0.062.2假蒟提取物对雏鸡免疫器官指数的影响（见表3）由表3可知，各组雏鸡的免疫器官指数差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.011.T003表3假蒟提取物对雏鸡免疫器官指数的影响项目肝脏指数胸腺指数法氏囊指数脾脏指数P值0.3230.7420.4200.076BC组（对照组）3.07±0.570.73±0.100.49±0.080.26±0.03PC组3.43±0.440.74±0.190.48±0.100.24±0.01PSE1组3.59±0.370.79±0.160.56±0.140.30±0.04PSE2组3.19±0.370.85±0.300.44±0.090.27±0.07PSE3组3.19±0.320.89±0.200.52±0.070.29±0.02%2.3假蒟提取物对雏鸡血清中免疫指标的影响（见表4）由表4可知，PSE3组雏鸡血清IgG含量显著高于BC组与PC组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.011.T004表4假蒟提取物对雏鸡血清中免疫球蛋白的影响项目IgA/(ng/L)IgM/(mg/L)IgG/(mg/L)P值0.0660.2400.022BC组（对照组）316.84±22.73513.40±76.552 182.41±142.43bPC组267.00±43.24522.67±46.702 159.87±35.36bPSE1组315.88±32.72508.82±49.812 196.46±198.86abPSE2组282.56±37.32479.28±40.262 243.15±188.51abPSE3组263.05±26.91556.13±24.702 501.54±196.94a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表6与此同。2.4假蒟提取物对雏鸡血清生化指标的影响（见表5）由表5可知，与BC组相比，PC组、PSE2组及PSE3组雏鸡血清UA含量显著降低（P0.05），PSE1组与PC组雏鸡血清ALP活性显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.011.T005表5假蒟提取物对雏鸡血清生化指标的影响项目BC组（对照组）PC组PSE1组PSE2组PSE3组P值TP/(g/L)35.22±5.5534.34±3.1837.40±6.7637.00±6.5539.20±3.300.634ALB/(g/L)13.54±2.1713.44±0.9913.70±2.0914.06±1.5215.46±1.220.326GLB/(g/L)21.68±4.1420.90±2.3523.70±4.7922.94±5.0623.74±2.470.726BUN/(mmol/L)0.66±0.300.58±0.260.84±0.290.52±0.150.58±0.260.356GLU/(mmol/L)13.56±1.4113.82±0.9014.07±2.2711.81±1.8812.86±1.470.234AST/(U/L)254.60±32.12249.80±25.39261.80±14.69236.20±29.23255.20±30.840.654ALT/(U/L)3.80±0.454.40±1.524.67±0.415.00±0.714.00±0.020.155ALP/(U/L)2 146.50±14.85b3 937.33±157.87a3 659.00±191.63a2 107.75±971.37b2 959.00±231.93ab0.005TC/(mmol/L)3.19±1.093.11±0.523.19±0.343.11±0.633.49±0.630.896TG/(mmol/L)0.47±0.070.49±0.150.46±0.120.40±0.100.52±0.050.220LDL/(mmol/L)0.82±0.260.64±0.090.74±0.190.69±0.190.88±0.220.490HDL/(mmol/L)2.14±0.742.24±0.402.26±0.332.21±0.372.30±0.550.990UREA/(μmol/L)1.20±0.451.40±0.551.40±0.550.80±0.231.00±0.020.450UA/(μmol/L)280.80±93.33a232.80±9.35b253.40±10.61ab218.60±9.35b224.00±5.48b0.021注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.5假蒟提取物对雏鸡抗氧化指标的影响（见表6）由表6可知，PSE3组雏鸡血清SOD活性显著高于PC组（P0.05）；与BC组相比，PC组、PSE1组和PSE2组雏鸡血清T-AOC显著上升（P0.05），且PSE1组和PSE2组雏鸡血清T-AOC显著高于PC组（P0.05）；PSE1组雏鸡血清CAT活性显著高于BC组和PC组（P0.05）；与BC组相比，PC组、PSE2组和PSE3组中雏鸡血清MDA含量均显著下降（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.011.T006表6假蒟提取物对雏鸡抗氧化指标的影响项目SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)P值0.0030.0140.0020.3150.023BC组（对照组）23.68±1.63ab6.78±0.87c6.72±1.22b652.48±76.6721.04±2.94aPC组21.48±0.56b14.92±2.74b8.09±1.71b643.97±19.3412.77±1.42bcPSE1组24.19±4.67ab18.99±1.06a12.56±1.12a804.26±147.4415.91±2.29abPSE2组20.46±1.58b18.32±0.65a9.43±3.29ab765.96±140.7214.15±4.24bcPSE3组27.38±2.12a7.12±0.98c9.10±1.67ab699.71±106.108.41±4.00c3讨论3.1假蒟提取物对雏鸡生长性能的影响假蒟可提高动物的生长性能，提高经济效益，在家禽养殖业中具有良好的开发前景[12]。本课题前期研究结果显示，日粮中添加PSE对断奶仔猪[14]和文昌鸡[15]的ADG和ADFI均具有积极影响。本研究发现，与BC组相比，PSE2组、PSE3组雏鸡的末重与平均日增重具有提高的趋势，与王定发等[15]研究PSE对文昌鸡生长性能的结果一致，可能是因为这一时间段雏鸡消化吸收功能尚未发育完善且PSE具有特殊的气味，雏鸡对假蒟需要有一个适应过程。3.2假蒟提取物对雏鸡免疫器官指数的影响胸腺、脾脏和法氏囊等是在动物体内发挥免疫功能的重要器官，其重量可以作为评价雏鸡免疫状态的指标[16]，免疫器官的发育状况直接影响机体对病原微生物感染和入侵的反应和抵抗能力[17]。动物体受到病毒攻击后，免疫系统立即被激活，免疫器官也在早期抵抗病毒中起到关键作用[18]。本试验中，与BC组相比，PSE3组雏鸡的肝脏指数提高了14.5%，且PSE2、PSE3组雏鸡的胸腺指数具有提高趋势，表明PSE对雏鸡免疫器官的发育具有积极的影响，但在本试验中各组雏鸡的免疫器官无显著差异，可能与饲养时间不充足、雏鸡还处于发育阶段，各器官发育水平不成熟有关，具体原因需要进一步试验验证。3.3假蒟提取物对雏鸡血清中免疫球蛋白的影响免疫球蛋白是一类具有抗体活性的球状蛋白，是动物体液免疫的重要组成部分。免疫球蛋白含量可以反映动物体液免疫功能，主要包括IgA、IgM、IgG等，IgG占血液中免疫蛋白含量的70%~75%，具有抗菌、抗毒等活性，能够有效提高动物体的免疫功能[19-20]。本试验中，PSE3组雏鸡血清IgG含量显著高于BC组，PSE2组、PSE3组雏鸡血清IgG含量与BC组相比具有提高的趋势，表明本试验中PSE能够通过提高动物血清IgG含量从而提高雏鸡免疫性能。3.4假蒟提取物对雏鸡血清生化指标的影响血清生化指标是哺乳动物生理学功用的内在微观体现，间接反映了营养物质新陈代谢、生理器官功用和健康[21-22]。血清UA含量低时，表明畜禽对蛋白质吸收利用较好、生理功能稳定；而UA含量升高，超过机体新陈代谢能力会引发机体痛风[23-24]。Siu等[25]认为，UA是嘌呤衍生物的产物，通过电压敏感的尿酸盐通道和尿酸盐-阴离子交换机制在近端小管中被重吸收和排泄，较低的UA水平能够降低动物体患肾脏疾病的可能性。鸡体内的尿酸含量一般在100~900 μmol/L[26]。本试验中，各组鸡血清的UA含量均在正常范围内，其中PSE2组、PSE3组鸡血清UA含量显著低于BC组，表明添加PSE利于雏鸡对蛋白质的消化吸收。ALP是参与脂肪消化代谢的重要酶类。张立永等[27]发现，添加地衣芽孢杆菌显著提升了雏鸡血清ALP活性。本试验中，PSE1组雏鸡血清ALP活性显著高于BC组，与上述研究结果一致，表明添加PSE有助于提高雏鸡对磷酸单酯的水解能力，不会影响雏鸡对于其他蛋白质及氨基酸的吸收利用。3.5假蒟提取物对雏鸡血清抗氧化指标的影响由动物体内的抗氧化酶所形成的保护屏障是体内抗氧化防御系统的一部分，可以提高机体抗氧化能力，降低氧化损伤[28]。GSH-Px、SOD、CAT等酶是构成抗氧化防御系统一部分。T-AOC可以反映机体整体的抗氧化能力。MDA是脂质过氧化的终产物之一，其含量可反映动物体受攻击的严重程度，从而反映动物体抗氧化能力，MDA含量越低，表明动物体抗氧化能力越强[29-30]。MDA含量会受到GSH-Px、SOD、CAT等酶的抑制[31-32]，SOD是缓解氧化损伤的重要物质之一，可反映了机体对于氧化损伤的缓解能力[33]。本试验中，PC组、PSE1组及PSE2组雏鸡血清的T-AOC均显著高于BC组，且PSE1组和PSE2组雏鸡血清T-AOC显著高于PC组，且添加100 mg/kg和200 mg/kg PSE的效果优于抗生素组。本试验中，PSE2组、PSE3组雏鸡血清的MDA含量显著低于BC组，PSE1组血清CAT活性显著高于BC组，PSE3组雏鸡血清SOD活性显著高于PC组。PSE能够显著提高T-AOC及CAT活性，可能是因为假蒟提取物中富含的多酚类和生物碱类活性物质能够使雏鸡的抗氧化能力得到提高，与Wang等[14]研究结果相同。结果表明，一定剂量的PSE能够提高动物体抗氧化能力，对雏鸡健康养殖及经济效益具有积极作用。4结论在本试验条件下，PSE能够提高雏鸡生长性能和抗氧化性能，PSE添加剂量以200 mg/kg为宜。