蛋白桑是由普通桑树经人工选育而成的新品系，因其蛋白含量高而命名为蛋白桑[1]。研究表明，蛋白桑的粗蛋白含量不低于20%，部分品种蛋白桑的粗蛋白含量可高达30%[2]，且其使用成本与麸皮接近，具有较高的应用研究价值。蛋白桑富含桑叶黄酮、桑叶多糖及生物碱等活性物质，可以提高动物机体抗氧化能力、免疫能力，促进脂质代谢[3-5]。蛋白桑在动物生产中的应用已有初步的研究成果[6-8]。目前关于蛋白桑提高育肥猪生长性能的机制和对养殖经济效益的影响的研究较少。因此，本研究研究日粮中添加不同水平蛋白桑对育肥猪生长性能、血清生化指标、养殖经济效益的影响，为蛋白桑在育肥猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料及地点蛋白桑购自烟台市九鼎山桑树种植专业合作社，桑叶自然风干，粉碎，过20目筛，蛋白桑营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T001表1蛋白桑营养水平项目干物质粗蛋白粗脂肪中性洗涤纤维酸性洗涤纤维含量88.1523.413.8716.4717.39%试验在烟台为民养猪专业合作社进行。1.2试验设计选取健康程度一致、平均体重约为78 kg的“杜×长×大”三元杂交育肥猪192头，随机分为4组，每组6个重复，每个重复8头猪。对照组育肥猪饲喂基础日粮，各试验组分别添加4%、8%、12%蛋白桑等量替代基础日粮中麸皮。试验期30 d。试验日粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T002表2试验日粮组成及营养水平项目对照组4%组8%组12%组原料组成/%玉米67.8567.8567.8567.85豆粕16.1316.1316.1316.13麸皮12.008.004.000蛋白桑04.008.0012.00石粉1.361.361.361.36磷酸氢钙0.820.820.820.82赖氨酸0.360.360.360.36蛋氨酸0.080.080.080.08食盐0.400.400.400.40预混料1.001.001.001.00合计100.00100.00100.00100.00营养水平消化能/(MJ/kg)15.6415.7515.8515.96粗蛋白/%14.8415.0615.2715.49粗纤维/%16.1816.2016.2216.24钙/%0.780.780.780.79磷/%0.630.640.640.65注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 3 000 IU、VE 85 IU、VK3 3.61 mg、VD3 2 500 IU、VB6 2.45 mg、VB12 0.05 mg、D-泛酸14.57 mg、叶酸0.95 mg、铜19.45 mg、锌19.27 mg、铁66.35 mg、碘0.2 mg、锰21.35 mg、硒0.3 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。试验期间，保证试验猪自由饮水、采食，试验人员定期清洗料槽与粪便，每日记录采食量，其他管理按照养殖场要求执行。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能正式饲喂前和试验最后1 d，育肥猪空腹称重，计算试验期间肥猪平均日增重，统计育肥猪采食量，计算平均日采食量和料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2血清指标每个重复随机选择1头试验猪，前腔静脉采血约5 mL，3 500 r/min离心10min获取上清液，-20 ℃冰箱保存，用于测定血清指标。试剂盒购自Abcam艾博抗（上海）贸易有限公司，具体检测步骤参考试剂盒说明。抗氧化指标包括：总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）。免疫指标包括：血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6)、补体C3、补体C4及干扰素-γ（IFN-γ）。使用全自动生化分析仪检测各组试验猪血清中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）活性及总蛋白（TP）、球蛋白（GLB）、总胆固醇（TC）、葡萄糖（GLU）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）含量。1.3.3经济效益指标育肥猪基础日粮生产成本约为3 950元/t，麸皮平均采购价格约为1 600元/t，蛋白桑平均采购价格约为1 800元/t，生猪销售价格约为24.83元/kg，计算育肥猪试验阶段的饲料成本和猪增重所创造的经济效益。饲料单价=基础日粮采购价-(麸皮采购价-蛋白桑采购价)×蛋白桑添加量(4)饲料成本=试验阶段采食量×饲料单价(5)增重收入=试验阶段增重×育肥猪销售价格(6)利润=试验阶段增重收入-试验阶段饲料成本(7)1.4数据统计与分析试验数据采用SAS 9.4软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1日粮中添加蛋白桑对育肥猪生长性能的影响（见表3）由表3可知，8%组和12%组育肥猪的平均日增重显著高于对照组（P0.05），12%组育肥猪平均日采食量显著高于对照组（P0.05），12%组育肥猪的料重比显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T003表3日粮中添加蛋白桑对育肥猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量/[g/(头·d)]料重比对照组78.89±2.84106.59±4.61923.48±15.43c2 142.47±58.41b2.32±0.04a4%组78.67±3.12106.99±5.72943.96±20.26c2 152.23±47.19b2.28±0.06a8%组78.79±1.97109.76±3.961 032.31±28.42b2 198.82±45.37ab2.13±0.04b12%组79.12±3.04112.67±5.181 118.47±35.67a2 292.86±51.60a2.04±0.07c注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4与此同。2.2日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，12%组育肥猪血清T-AOC显著升高（P0.05），8%组和12%组育肥猪血清GSH-Px活性显著升高（P0.05），12%组育肥猪血清SOD活性显著升高（P0.05），各试验组育肥猪血清MDA含量均显著降低（P0.05）。各组育肥猪CAT活性差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T004表4日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组9.33±0.95c243.10±12.77c238.84±9.67b11.56±1.835.48±0.22a4%组11.36±1.27b253.81±14.52c243.65±11.29ab10.97±2.464.96±0.17b8%组12.68±1.39ab278.64±12.97b247.58±10.30ab12.58±1.314.34±0.23c12%组15.73±1.13a333.40±15.28a259.07±9.82a13.48±2.103.84±0.17d2.3日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，8%组和12%组育肥猪血清IgG含量显著提高（P0.05），12%组育肥猪血清IgA含量显著提高（P0.05），各试验组育肥猪血清中IgM含量均显著升高（P0.05），各试验组育肥猪血清IL-6含量显著升高（P0.05），12%组育肥猪血清中补体C3含量显著升高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T005表5日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清免疫指标的影响项目对照组4%组8%组12%组IgG/(g/L)5.63±0.52c6.28±0.65bc6.71±0.42ab7.36±0.56aIgA/(g/L)2.23±0.13b2.35±0.18ab2.42±0.16ab2.51±0.14aIgM/(g/L)1.58±0.06c1.72±0.07b1.83±0.11ab1.88±0.08aTNF-α/(ng/L)396.53±30.67383.08±32.55375.69±34.30362.98±37.63IL-1/(ng/L)45.35±4.6747.61±5.8046.13±2.9247.36±4.54IL-6/(ng/L)30.38±3.79b41.43±4.15a39.94±3.08a39.53±2.63a补体C3/(g/L)0.27±0.05b0.31±0.04ab0.33±0.04ab0.39±0.05a补体C4/(g/L)0.12±0.030.10±0.020.13±0.030.11±0.04IFN-γ/(ng/L)7.53±0.817.28±0.627.56±0.397.41±0.56注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表6与此同。2.4日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清生化指标的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，试验组肥猪血清UREA含量和AST、ALT活性具有下降趋势，TP含量有所升高。与对照组相比，12%组育肥猪血清GLB、HDL含量显著升高（P0.05），8%组和12%组育肥猪血清GLU、LDL含量显著降低（P0.05），各试验组育肥猪血清中TC含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T006表6日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清生化指标的影响项目对照组4%组8%组12%组AST/(U/L)41.35±3.7135.27±4.3042.53±2.8838.41±3.56ALT/(U/L)75.53±5.3274.75±3.6768.43±9.2565.43±8.86TP/(g/L)39.26±3.6243.07±4.8742.95±2.9545.83±4.71GLB/(g/L)13.48±1.43b15.27±1.69ab16.46±2.10ab17.10±1.78aALB/(g/L)25.36±3.8126.22±2.7524.96±3.4127.08±4.15GLU/(mmol/L)7.86±0.84a6.62±0.76ab6.12±0.48b5.78±0.53bUREA/(mmol/L)5.03±0.484.97±0.674.62±0.314.48±0.22TG/(mmol/L)0.38±0.070.39±0.070.35±0.040.36±0.05TC/(mmol/L)3.82±0.45a2.43±0.38b2.48±0.39b2.39±0.63bHDL/(mmol/L)0.78±0.45b0.82±0.52ab0.85±0.60ab0.93±0.59aLDL/(mmol/L)1.61±0.13a1.56±0.08a1.33±0.07b1.34±0.10b2.5日粮中添加蛋白桑对育肥猪经济效益的影响（见表7）由表7可知，4%组、8%组、12%组育肥猪单头利润分别比对照组高13.58、73.32、125.77元。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.02.009.T007表7日粮中添加蛋白桑对育肥猪经济效益的影响组别饲料单价/(元/t)采食量/kg饲料成本/(元/t)育肥猪增重/(kg/头)育肥猪单价/(元/kg)增重收入/(元/头)利润/(元/头)对照组3 95064.27253.8827.7024.83687.90434.024%组3 95864.57255.5628.3224.83703.16447.608%组3 96665.96261.6230.9724.83768.96507.3412%组3 97468.79273.3533.5524.83833.15559.793讨论3.1日粮中添加蛋白桑对育肥猪生长性能的影响蛋白桑为桑树杂交育种形成的品系，具有桑科植物的药用功能，还具备较高的饲用价值[9]。宋琼莉等[10]在育肥猪日粮中分别添加5%、10%和15%水平的桑叶替代基础日粮中的膨化大豆和豆粕，与对照组相比，5%和10%组育肥猪的平均日增重、平均日采食量和料重比差异不显著。李飞鸣等[11]在宁乡土杂猪基础日粮中分别添加10%、13%、16%水平的发酵蛋白桑以替代日粮中的豆粕，与对照组相比，3个试验组平均日增重、平均日采食量和料重比差异不显著。樊路杰[12]分别在基础日粮中添加5%蛋白桑和5%发酵蛋白桑，与对照组相比，5%蛋白桑和5%发酵蛋白桑组育肥猪平均日增重显著提高，料重比显著下降。丁鹏等[13]研究发现，添加9%蛋白桑可以显著提高宁乡花猪的生产性能。本研究发现，日粮中添加蛋白桑可显著提高育肥猪平均日增重、平均日采食量，降低肥猪料重比。但本研究使用蛋白桑替代肥猪日粮中的麸皮，而上述部分研究使用蛋白桑替代豆粕等，这可能是造成研究结论不一致的原因。3.2日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清抗氧化指标的影响血清中抗氧化酶活性是反映机体清除自由基和机体健康的重要指标，桑科植物中的桑叶多糖、黄酮及多酚类化合物均具有较强抗氧化活性[4,14]。宋琼莉等[10]研究发现，日粮中添加5%、10%、15%的蛋白桑可显著提高育肥猪血清中SOD活性，显著降低MDA含量。丁鹏等[13]研究发现，日粮中添加15%蛋白桑可提高宁乡花猪血清T-AOC，且日粮中蛋白桑添加比例超过9%可降低血清中MDA含量。本研究结果认为，日粮中添加蛋白桑可提高肥猪血清中T-AOC和抗氧化酶活性，降低MDA含量，与上述研究结果基本一致。3.3日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清免疫指标的影响免疫球蛋白含量反映机体的免疫功能状态，TNF-α、IL-1和IL-6等细胞因子参与体内炎症通路，与机体健康具有密切关联[15]。补体C3、补体C4及IFN-γ参与机体免疫应答，是体内重要的非特异性免疫指标[16]。李伟玲[17]在肉羊日粮中添加5%、10%、15%的饲用桑，与对照组相比，桑叶组肉羊生长性能和血清抗氧化能力显著提高，IL-2和IL-6含量显著提高。崔艺燕等[18]在育肥猪基础日粮中添加10%发酵蛋白桑，试验组育肥猪血清IgA、IL-6、IL-2、IL-8含量显著上升，IgG和IgM含量也有提高趋势。本研究认为，日粮中添加蛋白桑可以提高肥猪血清中IgG、IgA、IgM、IL-6和补体C3含量，与上述研究结论基本一致。目前，蛋白桑对育肥猪血清非特异性免疫指标的报道偏少，仍需进一步研究。3.4日粮中添加蛋白桑对育肥猪血清生化指标的影响AST和ALT是反映肝脏代谢功能的重要指标，其在血清中活性上升可能与肝脏损伤有关[19]。本研究结果显示，日粮中添加蛋白桑育肥猪血清AST和ALT活性具有下降趋势，但与对照组差异不显著，表明日粮中添加蛋白桑对肝脏无损伤。TP反映了育肥猪体内对蛋白消化利用、合成代谢及体液免疫情况，血清中ALB和GLB含量上升表明育肥猪体内蛋白消化利用率高、代谢旺盛，也是机体健康的重要标志[7]。本研究结果显示，日粮中添加蛋白桑可提高育肥猪血清中TP和GLB含量，表明日粮中添加蛋白桑可以提高蛋白质合成利用率，对机体健康有促进作用。UREA为体内蛋白代谢的终产物，血清中含量下降表明日粮氨基酸较为平衡和体内蛋白代谢效率较高[20]。本研究中，血清UREA含量随着蛋白桑在日粮中添加量的提升而呈下降趋势，表明蛋白桑具有促进蛋白代谢的潜质。GLU是为细胞供能的重要物质，本研究结果显示，日粮中添加蛋白桑可显著降低血清GLU含量，这可能与桑叶中活性物质具有降血糖功能有关[4]。TG和TC是反映机体脂肪合成与分解功能的重要指标[21]，LDL主要作用为转运内源胆固醇，HDL主要作用为将胆固醇从外周组织转移至肝脏进行代谢分解[22]，可反映育肥猪体内脂质代谢情况。樊路杰[12]研究显示，蛋白桑或发酵蛋白桑均可显著降低育肥猪血清中TG和TC含量，HDL和LDL含量分别极显著提高和下降，表明日粮中添加蛋白桑可以加快育肥猪体内脂质代谢和促进胆固醇转运。丁鹏等[13]研究发现，日粮中添加9%~12%水平蛋白桑可降低宁乡花猪血清中TC含量。本研究认为，日粮中添加蛋白桑可以降低血清中HDL、TC含量，降低LDL含量，与上述研究结果基本一致。3.5日粮中添加蛋白桑对育肥猪饲料成本和养殖经济效益的影响本研究中蛋白桑主要用于替代基础日粮中的麸皮，发现蛋白桑可以降低育肥猪料重比。因此，蛋白桑替代麸皮可提高育肥猪生长性能，从而提高养殖经济效益，进而弥补因使用蛋白桑造成的饲料成本升高。部分研究使用蛋白桑替代育肥猪日粮中豆粕，尽管未能提高猪的生长性能，但饲料生产成本下降同样可以提高整个试验阶段的养殖经济效益[22-23]。4结论本研究认为，使用蛋白桑替代育肥猪日粮中麸皮可有效提高肥猪生长性能、血清抗氧化和免疫指标，对肝脏无负面作用且能够促进机体代谢。综合各项指标，蛋白桑在育肥猪日粮中的适宜添加量为12%。