蝇蛆粉是一种优质的动物性蛋白原料，易人工饲养，质量稳定，蛋白质、氨基酸含量高，维生素、矿物质丰富，是一种营养全面的蛋白源[1-3]。近年来，因鱼粉资源有限，价格居高不下，导致其使用受到了限制。如何在保证养殖动物健康生长的同时，开发出能够部分替代鱼粉的蛋白原料，进而降低鱼粉的添加量、降低饲料成本、提高养殖经济效益，已成为水产饵料生产单位和科研部门研究的热点方向之一[4-7]。研究表明，蝇蛆粉富含中干物质含量为92.7%，粗蛋白含量为47.6%，脂肪含量为25.3%，粗纤维含量为7.5%，粗灰分含量为6.25%，其氨基酸组成与鱼粉相当[8-9]。本试验研究不同比例蝇蛆粉替代鱼粉对德国镜鲤生长性能、体组成、非特异免疫指标的影响，为蝇蛆粉在水产养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验蝇蛆粉试验所用蝇蛆粉粗蛋白含量为66%，粗脂肪含量为6.2%，磷含量为0.43%，钙含量为6.4%。1.2试验设计试验在水泥池中架设网箱进行，水深1.0 m，网箱规格1 m×1 m×1.2 m。选取健壮、体重为13.2 g/尾的德国镜鲤540尾，随机分为6组，每组3个重复，每个重复30尾（每个网箱为1个重复）。对照组鱼投喂基础饵料，试验组采用蝇蛆粉替换基础饵料中20%、40%、60%、80%和100%的鱼粉。试验饵料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.04.011.T001表1试验饵料组成及营养水平项目对照组20%组40%组60%组80%组100%组原料组成鱼粉15.0012.009.006.003.000蝇蛆粉03.006.009.0012.0015.00豆粕30.0030.0030.0030.0030.0030.00面粉20.0020.0020.0020.0020.0020.00豆油3.003.103.203.303.403.50维生素混合物0.500.500.500.500.500.50矿物盐混合物0.500.500.500.500.500.50氯化胆碱0.200.200.200.200.200.20磷酸二氢钙2.002.002.002.002.002.00麦麸28.7028.6028.5028.4028.3027.20防霉剂0.100.100.100.100.100.10合计100.00100.00100.00100.00100.00100.00营养水平粗脂肪6.16.16.16.16.16.1粗蛋白31.131.131.131.131.131.1注：1.维生素混合物和矿物盐混合物购自沈阳炯道化工有限公司。2.营养水平均为计算值。%1.3饲养管理试验鱼每天投喂4次（7：00、10：30、14：00、17：30），根据摄食情况适时调整，日饵率约3%。试验期间的水源为曝气大于7 d的地下水，24 h连续充气，每2 d换水1次，换水量为1/5，试验水温25.4~29.2 ℃，溶氧大于5.7 mg/L，pH值7.56~8.14，氨氮含量小于0.2 mg/L。试验日期为6月28日至10月8日，共102 d。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能及饵料成本在试验开始前和结束后，测量各池30尾鱼的体重指标，计算各组增重率，精确记录每日投喂量。增重率=(末重-初重)/初重×100%(1)蛋白质效率=(末重-初重)/[(投饵量-残饵量)×饵料蛋白含量]×100%(2)饵料系数=(投饵量-残饵量)/(末重-初重)(3)饵料成本=饲料价格/1 000×饵料系数(4)1.4.2鱼体体成分试验结束时，每组随机取样10尾，进行鱼体成分分析，取背肌测定鱼体蛋白、脂肪、灰分水分含量使用105 ℃常压干燥法，粗灰分含量采用550 ℃高温炉灼烧法，粗脂肪含量采用索氏抽提法测定，粗蛋白采用微量凯氏定氮法测定。1.4.3血清生化指标试验采血方式采用鱼尾静脉取血法，每组随机选取10尾试验鱼使用注射器抽取血液后4 ℃静置保存2 h，4 000 r/min离心10 min，取上层血清后混匀待测，使用南京建成生物工程研究所试剂盒测定过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性以及丙二醛（MDA）含量。1.5数据统计与分析采用Excel软件进行统计学分析，SPSS 25软件进行方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1蝇蛆粉替代鱼粉对鱼生长性能及饵料成本的影响（见表2）由表2可知，40%组、60%组、80%组、100%组鱼的增重率、蛋白质效率显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.04.011.T002表2蝇蛆粉替代鱼粉对鱼生长性能及饵料成本的影响组别初重/g末重/g增重率/%蛋白质效率/%饵料系数饵料成本/(元/kg)饵料价格/(元/t)对照组13.20±0.1646.31±0.35a351.00±5.00a1.46±0.21a2.20±0.22d10.34±0.35c4 69820%组13.08±0.1843.99±0.29b336.00±4.00ab1.36±0.18ab2.36±0.15cd10.79±0.31c4 57440%组13.13±0.1134.64±1.81d263.00±15.00d0.93±0.08cd3.44±0.27b15.34±0.47a4 45960%组13.15±0.2033.74±1.56d256.00±9.00d0.89±0.12d3.60±0.10a15.60±0.32a4 33580%组13.17±0.1540.97±2.22c279.00±14.00cd1.00±0.16c3.20±0.17b13.50±0.41b4 219100%组13.16±0.1741.74±2.55c305.00±8.00bc1.27±0.14b2.52±0.16c10.35±0.28c4 095注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2蝇蛆粉替代鱼粉对鱼体成分的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，20%组、40%组、60%组、80%组、100%组全鱼水分显著升高（P0.05），20%组、40%组、60%组、80%组、100%组鱼肌肉水分含量显著升高（P0.05），20%组全鱼粗灰分显著升高（P0.05），100%组全鱼粗灰分含量显著降低（P0.05）；80%组鱼肌肉粗灰分显著升高（P0.05）；20%组、40%组、80%组、100%组全鱼粗蛋白显著降低（P0.05），40%组、100%组鱼的肌肉粗蛋白均显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.04.011.T003表3蝇蛆粉替代鱼粉对鱼体成分的影响组别全鱼水分肌肉水分全鱼粗灰分肌肉粗灰分全鱼粗蛋白肌肉粗蛋白对照组73.84±0.56c78.61±0.59b11.01±0.08bc5.95±0.04bc80.55±2.10a59.89±1.14a20%组78.77±0.32ab80.09±1.01a12.66±0.56a6.13±0.22ab79.105±2.14b57.43±0.89ab40%组79.04±1.42a81.22±0.52a11.29±0.27bc5.86±0.15bc77.80±1.95c55.18±0.21b60%组79.27±0.96a80.59±0.68a11.96±0.51ab5.71±0.27c79.20±1.88ab58.04±0.18ab80%组77.80±0.85b81.03±0.93a10.57±0.12c6.22±0.18a79.47±3.01c55.13±0.19ab100%组77.66±1.21b81.19±2.25a9.75±0.21d6.08±0.13ab77.77±2.15c53.51±0.56b%2.3蝇蛆粉替代鱼粉对鱼体血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，20%组鱼血清CAT活性显著高于对照组（P0.05），20%组、60%组、80%组鱼血清SOD活性均显著高于对照组（P0.05），40%组、60%组、80%组鱼血清MDA含量显著低于对照组（P0.05），60%组鱼血清ALT活性显著高于对照组（P0.05），80%组和100%组鱼血清AST活性显著低于对照组（P0.05），而其他试验组鱼血清AST活性均高于对照组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.04.011.T004表4蝇蛆粉替代鱼粉对鱼体血清生化指标的影响组别CAT/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)ALT/(卡门氏单位)AST/(卡门氏单位)对照组1.84±0.15b136.59±2.91d13.78±1.17a10.27±1.62b82.92±2.98b20%组2.58±0.26a176.37±4.01a13.07±0.40ab11.80±1.38ab92.62±1.74ab40%组1.42±0.21bc152.39±1.73bcd10.24±0.58c11.80±2.40ab100.31±2.54a60%组1.75±0.60b157.65±2.19bc10.71±0.37c13.49±1.46a89.33±1.05ab80%组1.51±0.11bc164.68±3.39ab12.27±0.78b12.11±1.86ab67.18±3.78c100%组1.12±0.46c143.61±5.81cd12.74±1.40ab12.26±0.99ab62.24±5.84c3讨论3.1蝇蛆粉替代鱼粉对鱼体生长性能和饵料成本的影响本试验中，蝇蛆粉替代鱼粉水平从40%逐渐提高至100%时，德国镜鲤生长性能具有降低趋势，当蝇蛆粉替代鱼粉水平低于20%时，饵料成分的变化并未导致德国镜鲤的生长性能明显变化。因此，蝇蛆粉在一定水平内替代鱼粉不会影响德国镜鲤的生长性能，但使用过高比例的蝇蛆粉替代会导致鱼体生长性能降低。本试验中，蝇蛆粉替代鱼粉水平在20%时，蛋白质效率和饲料利用率与实验组无显著差异。蝇蛆粉替代鱼粉水平在60%时，鱼的蛋白质效率最低，饲料系数最高，原因可能是昆虫体内所含的几丁质不易被鱼体消化[10]。刘世胜[11]研究发现，使用黑水虻幼虫蛋白作为鱼饵料中鱼粉的替代品时，黑水虻幼虫蛋白占比过高会对建鲤幼鱼造成一定伤害，控制黑水虻幼虫在建鲤幼鱼饵料中替代鱼粉蛋白的比例保持在75%以内，能够实现较好的饲养效果和经济效益。以上结果的差异可能与不同鱼类所需的氨基酸和对氨基酸的利用机制有关。Herawati等[9]探究了蝇蛆粉替代鱼粉对乳香鱼生长性能及营养物质含量的影响，结果显示，蝇蛆粉替代鱼粉对总耗料量（TFC）和存活率（SR）具有显著影响，各处理中效果最好的是50%替代鱼粉的处理，其TFC值达到40.17，相对生长速率（RGR）为2.34，同一处理中营养成分含量最高，分别为赖氨酸10.95%和亚油酸脂肪酸8.06%，表明50%替代的饵料配方具有较好整体饲养效果。本研究中，蝇蛆粉替代鱼粉水平在20%时，试验鱼的增重率、蛋白质效率和饵料系数显著高于其他试验组。因此，若只考虑将鱼体生长性能最佳可以考虑将蝇蛆粉替代鱼粉比例提升至20%。3.2蝇蛆粉替代鱼粉对鱼体成分的影响本试验中，各组鱼的全鱼水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分均具有明显差异。马利等[12]研究发现，使用鸡肉粉替代鱼粉鱼的生长性能、饵料系数、全鱼体成分、蛋白质以及脂肪沉积率无明显差异，与本试验研究结果存在差异。本研究发现，蝇蛆粉替代组的全鱼水分和肌肉水分的含量比对照组高，可能是由于蝇蛆粉蛋白与鱼粉蛋白结构的不同和鱼体消化机制的影响所导致。本试验中，80%组鱼的肌肉粗灰分含量最高，20%组鱼的粗灰分含量最高，试验各组全鱼粗蛋白和肌肉蛋白均低于对照组，原因可能是蝇蛆粉替代比例的不同导致粗蛋白含量不同，鱼体对饲料蛋白利用率不同。3.3蝇蛆粉替代鱼粉对鱼血清生化指标的影响本研究中，蝇蛆粉替代水平到达20%时，鱼血清中的CAT活性显著高于对照组。昆虫粉替代鱼粉往往会对鱼类的抗氧化系统产生影响，不同类型的昆虫蛋白粉具有不同的作用。在本试验中，在替代水平低于20%时，使用蝇蛆粉替代鱼粉能够在一定程度上提高德国镜鲤的抗氧化水平，原因是蝇蛆蛋白中含有几丁质、抗微生物多肽、凝集素和溶菌酶等免疫活性成分。杨贺舒等[13]发现，使用蝇蛆粉替代鱼粉能够提高黄颡鱼的抗氧化能力。本试验中，随着替代水平的增加，鱼的抗氧化能力开始减弱。可能是由于替代水平提高，饵料中亮氨酸和精氨酸含量呈现明显减少趋势[14-15]。4结论本试验研究表明，使用蝇蛆粉替代鱼粉水平约为20%时能够提高德国镜鲤肝中抗氧化酶活性，不改变德国镜鲤的生长性能与鱼体成分。