我国每年可产生大量的玉米、水稻、大豆等农作物秸秆，但大部分农作物秸秆均被用于焚烧或废弃，造成了资源浪费和环境污染，仅有小部分农作物秸秆用于反刍动物养殖的粗饲料[1-2]。由于农作物秸秆中粗纤维含量较高，而粗蛋白质含量较低，且秸秆质地粗硬，难以被动物消化，导致秸秆被动物机体的吸收利用率低[3-4]。利用益生菌对农作物秸秆进行发酵，可将秸秆中的纤维素等大分子物质进行降解、分解，转化生成易于消化吸收的小分子物质，提高秸秆中的蛋白质含量，提高秸秆的吸收利用率和营养水平，提升农作物秸秆的饲用价值[5-8]。目前，发酵农作物秸秆在反刍动物生产中的研究与应用尚处于起步阶段，且主要集中在提高反刍动物营养物质表观消化率和生长性能方面[9-11]，对反刍动物屠宰性能、肉品质、免疫功能等方面的研究与应用报道较少。因此，本研究利用益生菌发酵玉米秸秆制备发酵玉米秸秆，探讨发酵玉米秸秆对育肥牛生长性能、屠宰性能、肉品质和免疫指标的影响，为发酵玉米秸秆在反刍动物养殖生产中的推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料西门塔尔育肥公牛购自广河瑞腾牛羊养殖农民专业合作社。酵母菌（活菌总数≥1.0×109 CFU/g）、枯草芽孢杆菌（活菌总数≥1.0×109 CFU/g）、乳酸菌（活菌总数≥1.0×109 CFU/g）购自山东宝来利来生物工程股份有限公司。总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.2发酵玉米秸秆的制备将酵母菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、乳酸菌菌液等比例混合，制成复合益生菌菌液，其活菌总数≥1.0×1010 CFU/g。将玉米秸秆粉碎至长度小于2 cm，加入0.5%复合益生菌菌液，调节湿度约为40%，混匀，置于发酵袋中密封发酵21 d。发酵后的玉米秸秆松散完整、青绿色、具有浓烈的酸香味。1.3试验设计选取45头体重（419.53±21.11）kg育肥公牛随机分成3组，每组3个重复，每个重复5头牛。对照组（C组）育肥牛饲喂基础日粮，T1组、T2组分别利用50%、100%发酵玉米秸秆替代基础日粮中玉米秸秆。日粮组成及营养水平见表1。试验育肥牛自由采食与饮水，试验期120 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.004.T001表1试验日粮组成及营养水平原料组成/%C组T1组T2组营养水平C组T1组T2组合计100.0100.0100.0玉米秸秆60.030.00代谢能/(MJ/kg)12.5812.5812.58发酵玉米秸秆030.060.0粗蛋白/%15.3215.3315.32玉米31.031.031.0钙/%1.211.211.20豆粕2.02.02.0总磷/%0.740.740.74麦麸2.02.02.0中性洗涤纤维/%41.3241.3441.35棉籽粕3.03.03.0酸性洗涤纤维/%28.1428.1528.17预混料2.02.02.0注：1.每千克预混料为日粮提供：VA 100 000 IU、VD3 30 000 IU、VE 500 IU、Fe 5.0 g、Cu 1.0 g、Zn 3.0 g、Mn 3.0 g、I 20 mg、Se 10.0 mg、Co 10 mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始和结束分别对试验牛进行空腹称重，计算平均日增重。记录每头试验牛的每日饲料消耗量，计算平均日干物质采食量，根据平均日干物质采食量和平均日增重计算料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日干物质采食量=饲料消耗总量/试验天数(2)料重比=平均日干物质采食量/平均日增重(3)1.4.2屠宰性能试验结束后，每个重复中随机选择3头牛进行屠宰，按照马吉锋等[9]的方法分别计算各处理组屠宰牛的屠宰率、净肉率、背膘厚度、眼肌面积。1.4.3肉品质取屠宰牛的第12~13肋间背最长肌肉样，按照黄文明等[10]的方法分别测定pH45 min值、pH24 h值、亮度（L*值）、红度（a*值）、黄度（b*值）以及剪切力、滴水损失率、蒸煮损失率。1.4.4免疫指标试验结束后，试验牛屠宰前，利用一次性注射器对每头牛采集血液10.0 mL，分离血清样品。利用试剂盒分别测定血清中的抗氧化指标（T-AOC、SOD、GSH-Px、MDA）和免疫指标（IgA、IgG、IgM、IL-2、IFN-γ）。1.5数据统计与分析采用SPSS 17.0软件对试验数据进行单因素方差统计分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵玉米秸秆对育肥牛生长性能的影响（见表2）由表2可知，与C组相比较，T2组育肥牛的平均日增重显著提高（P＜0.05），料重比显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.004.T002表2发酵玉米秸秆对育肥牛生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[kg/(头·d)]平均日干物质采食量/[kg/(头·d)]料重比C组418.25±20.14522.14±28.870.87±0.08b8.56±0.659.84±0.56aT1组421.18±22.35531.74±26.750.92±0.09ab8.87±0.719.64±0.62abT2组419.17±24.51537.07±27.510.98±0.08a8.95±0.759.13±0.58b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2发酵玉米秸秆对育肥牛屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，与C组相比较，T2组育肥牛背膘厚度显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.004.T003表3发酵玉米秸秆对育肥牛屠宰性能的影响组别屠宰率/%净肉率/%背膘厚度/mm眼肌面积/cm2C组54.26±1.0242.51±0.894.17±0.12b87.56±1.25T1组54.67±1.1242.58±0.914.25±0.11ab87.61±1.32T2组55.19±1.1742.76±0.954.33±0.10a87.60±1.652.3发酵玉米秸秆对育肥牛肉品质的影响（见表4）由表4可知，与C组相比，T1组育肥牛的滴水损失率、蒸煮损失率均显著降低（P0.05）；T2组育肥牛的pH45 min值、pH24 h值均显著升高（P0.05），剪切力、滴水损失率、蒸煮损失率均显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.004.T004表4发酵玉米秸秆对育肥牛肉品质的影响组别pH45 min值pH24 h值L*值a*值b*值剪切力/N滴水损失率/%蒸煮损失率/%C组6.71±0.06b6.43±0.06b55.87±1.1411.21±0.582.89±0.1258.74±1.32a2.85±0.25a36.74±1.18aT1组6.74±0.07ab6.47±0.05ab55.91±1.1111.24±0.622.87±0.1457.81±1.28ab2.54±0.27b35.11±1.27bT2组6.79±0.06a6.52±0.05a55.95±1.0811.21±0.612.84±0.1457.12±1.24b2.16±0.31c33.27±1.16c2.4发酵玉米秸秆对育肥牛机体免疫指标及抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，与C组相比，T1组育肥牛血清SOD活性、GSH-Px活性、IgG含量均显著升高（P0.05），T2组育肥牛血清T-AOC、SOD、GSH-Px活性及IgA、IgG、IL-2、IFN-γ含量均显著升高（P0.05），MDA含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.004.T005表5发酵玉米秸秆对育肥牛免疫指标及抗氧化指标的影响组别抗氧化指标免疫指标T-AOC/(U/mL)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)MDA/(μmol/L)IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IFN-γ/(ng/L)C组45.12±2.14b123.41±3.85b235.28±5.11b6.87±0.52a0.91±0.04b7.95±0.32c2.45±0.14141.28±4.32b36.14±1.12bT1组46.85±2.21ab127.94±3.58a242.14±4.98a6.32±0.56ab0.95±0.05ab8.48±0.29b2.51±0.18144.56±4.28ab36.84±1.35abT2组48.65±2.32a129.37±3.42a245.21±5.18a6.11±0.59b0.98±0.05a8.91±0.31a2.57±0.17146.58±4.41a37.91±1.24a3讨论3.1发酵玉米秸秆对育肥牛生长性能的影响反刍动物的粗饲料经过微生物发酵后，可降低原料中粗纤维含量，提高可利用的蛋白质含量，均衡日粮中各种营养物质的营养成分比例，提高反刍动物对其营养物质的消化吸收利用率，进而提高反刍动物的生长性能及养殖经济效益。罗靖[11]研究表明，利用50%、75%复合益生菌发酵玉米秸替代普通玉米秸秆能够提高肉羊的平均日增重，降低料重比，提高养殖经济效益。劳俊等[12]研究表明，利用50%、100%益生菌发酵小麦秸秆替代饲粮中的青贮饲料可使肉牛的平均日增重分别提高14.81%和12.35%，料重比分别降低6.33%和4.60%。周剑辉等[13]研究表明，15%、20%益生菌发酵红薯渣替代饲粮中的玉米可提高肉牛的平均日增重，降低料重比。本研究结果表明，利用发酵玉米秸秆完全替代基础日粮中的玉米秸秆后，能够显著提高育肥牛的平均日增重，降低育肥牛的料重比，与上述研究结果相似。3.2发酵玉米秸秆对育肥牛屠宰性能的影响随着玉米等饲料原料价格的不断提高，反刍动物养殖经济效益不断降低，屠宰性能直接影响肉牛养殖的产肉量和养殖利润[14-15]。本研究中，发酵玉米秸秆完全替代基础日粮中的玉米秸秆能够提高肉牛的屠宰率和净肉率，表明发酵玉米秸秆具有提高肉牛屠宰性能的趋势，原因可能为试验时间较短，而屠宰性能的改善是一个长期积累的过程，如果在犊牛阶段就开始饲喂发酵玉米秸秆，也许屠宰性能的改善将明显增强。因此，后续试验将进一步研究在肉牛在犊牛和育肥牛阶段持续饲喂不同剂量的发酵玉米秸秆对肉牛屠宰性能的影响，为发酵玉米秸秆的推广应用提供一定参考。3.3发酵玉米秸秆对育肥牛肉品质的影响随着人们生活质量的不断提高以及饮食结果的不断改善，对牛肉的需求量和质量要求也逐步提高，改善牛肉的肉品质成为肉牛养殖的重点。pH值是肉品质理化特性的最主要检测指标；剪切力反映牛肉的嫩度；滴水损失率和烹煮损失率反映牛肉的系水性[16-17]。本研究中，发酵玉米秸秆完全替代基础日粮中的玉米秸秆后，能够提高牛肉的pH45 min值和pH24 h值，降低牛肉的剪切力、滴水损失率和蒸煮损失率，表明发酵玉米秸秆能够显著提高育肥牛对各种营养成分的吸收和利用，提高育肥牛肌肉的能量代谢，进而提高育肥牛对能量的吸收和利用，改善育肥牛的理化特性、嫩度和系水性，提高牛肉的肉品质。3.4发酵玉米秸秆对育肥牛抗氧化功能及免疫功能的影响抗氧化指标能够反映动物机体消除自由基和抗氧化能力。T-AOC可以体现机体抵抗外来刺激的总能力；SOD和GSH-Px能够清除活性自由基，是抗氧化酶促系统的重要组成部分[18]；MDA是体内脂质过氧化反应的终产物，MDA含量越低，机体的抗氧化能力越强[19]。免疫球蛋白直接参与动物机体的体液免疫反应，其中起主要免疫作用的是IgA、IgG、IgM[20]。细胞因子在免疫反应中发挥调节免疫应答、参与炎症反应等生物学功能，其中IL-2可促进淋巴细胞增殖和发育，IFN-γ能够活化巨噬细胞和自然杀伤细胞[21]。本研究中，发酵玉米秸秆完全替代基础日粮中的玉米秸秆能够提高育肥牛血清中的T-AOC、SOD、GSH-Px活性以及IgA、IgG、IL-2、IFN-γ含量，显著降低血清中MDA含量。表明发酵玉米秸秆完全替代基础日粮中的玉米秸秆能够改善育肥牛血清中的抗氧化指标、免疫球蛋白含量和细胞因子含量，提高育肥牛的抗氧化功能和免疫功能。4结论在本试验条件下，发酵玉米秸秆完全替代基础日粮中玉米秸秆能够显著提高育肥牛的生长性能、肉品质、抗氧化功能和免疫功能。