仔猪在断奶时容易发生断奶应激，此阶段仔猪的免疫系统和胃肠道功能发育尚不完善，导致仔猪肠道功能紊乱、机体免疫力下降、腹泻率升高，进而影响仔猪的生长发育[1]。随着饲料端禁用抗生素，需要寻找一种安全、高效、低残留、无耐药性的饲料添加剂。植物甾醇是植物油中的一种天然活性成分，可以合成维生素D及多种激素[2]，具有抗炎、调节血脂、提高免疫力等生物学功能[3-4]。仔猪生产中使用植物甾醇可以调节肠道菌群组成，降低腹泻率，提高生长性能[5-7]。家禽生产中使用植物甾醇可以提高雏鸡成活率，降低腹脂率，降低血清中胆固醇含量，提高生长性能[8-9]。植物甾醇还可以提高奶牛的产奶性能[10]。本试验探究不同水平酯化植物甾醇对断奶仔猪生长性能、免疫功能及血清生化指标的影响，为酯化植物甾醇在仔猪生产中的高效推广与应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料酯化植物甾醇的有效含量大于55%。1.2试验设计及饲养管理选取100头28日龄的断奶仔猪随机分为4组，每组5个重复，每个重复5头。对照组仔猪饲喂基础日粮，试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮中添加200、400、800 mg/kg的酯化植物甾醇。基础日粮组成及营养水平见表1。预试期1周，正式试验期4周。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米63.82消化能/(MJ/kg)14.07豆粕19.00粗蛋白/%18.80麸皮6.00钙/%0.75大豆浓缩蛋白4.00总磷/%0.63鱼粉2.50有效磷/%0.42豆油1.20赖氨酸/%1.30食盐0.30蛋氨酸/%0.45DL-蛋氨酸0.18蛋氨酸+半胱氨酸/%0.72L-赖氨酸（98%）0.43苏氨酸/%0.80磷酸氢钙1.12石粉0.45预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 7 000 IU、VD 2 500 IU、VE 20 IU、VB1 2.4 mg、VB2 4.5 mg、VB6 6 mg、VB12 0.025 mg、烟酸50 mg、泛酸15 mg、生物素0.1 mg、铜120 mg、铁90 mg、锌85 mg、锰30 mg、碘0.5 mg、硒0.35 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙、总磷为实测值，其余均为计算值。试验期间所有断奶仔猪自由采食和饮水，每日观察仔猪的健康状况，驱虫和免疫程序按照养殖场的常规管理程序进行。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能在试验开始和结束时，所有仔猪禁食12 h空腹称重，记为初重和末重；记录养殖过程中各组仔猪采食量、每日各组仔猪腹泻头数及腹泻天数，计算仔猪的平均日增重、平均日采食量、料重比及腹泻率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=总采食量/总增重(3)腹泻率=(腹泻仔猪数量×腹泻天数)/(试验仔猪总数×试验天数)×100%(4)1.3.2血清免疫指标试验最后1 d，断奶仔猪禁食后，晨饲前，每组选取10头仔猪，颈静脉采血约10 mL，3 000 r/min离心10 min，收集上层血清，用于检测血清免疫及生化指标。血清免疫指标采用北京索莱宝科技有限公司试剂盒进行测定。检测指标包括：免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。1.3.3血清生化指标血清生化指标使用BS-420全自动生化分析仪（迈瑞医疗国际股份有限公司）、南京建成生物工程研究所试剂盒进行检测。血清生化指标包括：白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）低密度脂蛋白胆固醇（LDH-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 24软件进行单因素方差分析，LSD法进行组间多重比较。结果以平均值和总标准误表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平酯化植物甾醇对仔猪生长性能及腹泻率的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验2组仔猪末重显著提高（P0.05），试验2组和试验3组仔猪的料重比显著降低（P0.05），试验1组、试验2组、试验3组仔猪的腹泻率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.006.T002表2不同水平酯化植物甾醇对仔猪生长性能及腹泻率的影响项目初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量/[g/(头·d)]料重比腹泻率/%对照组7.3013.83b233.21485.502.08a2.73a试验1组7.3214.10ab242.14488.602.02ab1.85b试验2组7.2814.50a257.86490.551.90b1.25c试验3组7.2514.06ab243.21490.152.02c1.19cSEM0.621.3112.1820.460.180.16P值0.9310.0420.0930.1300.0280.013注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同水平酯化植物甾醇对仔猪免疫功能的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验2组和试验3组仔猪血清中IgA含量显著提高（P0.05），试验2组仔猪IgG含量显著提高（P0.05）；试验1组、试验2组和试验3组仔猪血清IL-10含量显著提高（P0.05），TNF-α含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.006.T003表3不同水平酯化植物甾醇对仔猪免疫球蛋白指标的影响项目IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)IL-10/(ng/L)TNF-α/(ng/L)对照组0.87b3.20b0.48117.3473.21119.34b221.93a试验1组1.32ab3.74ab0.52114.3071.04131.23a183.03b试验2组1.74a4.63a0.55108.3969.32146.01a162.20b试验3组1.52a4.02ab0.53112.4370.34140.47a183.19bSEM0.100.310.097.023.049.1813.01P值0.0430.0370.4180.6290.5930.0150.0112.3不同水平酯化植物甾醇对仔猪血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验2组和3组仔猪血清中TC、TG含量显著降低（P0.05），试验2组仔猪血清中HDL-C含量显著提高（P0.05），试验2组和3组仔猪血清中BUN含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.006.T004表4不同水平酯化植物甾醇对仔猪血清生化指标的影响项目TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)LDL-C/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)ALP/(U/L)GLU/(mmol/L)对照组2.81a0.48a1.485.31b59.3030.425.84a40.9368.43184.325.20试验1组2.10ab0.40ab1.445.80ab60.0430.955.23ab39.0667.39180.495.33试验2组1.84b0.35b1.406.47a61.4231.474.72b38.3766.44174.205.38试验3组1.80b0.32b1.385.93ab60.8430.854.80b38.9967.18178.495.31SEM0.120.030.110.363.952.040.412.043.067.040.32P值0.0380.0450.1830.0390.8160.6070.0330.6270.8940.6310.8373讨论3.1不同水平酯化植物甾醇对仔猪生长性能及腹泻率的影响仔猪的生长性能及机体健康与整个养殖周期的生产效益密切相关。本试验中，添加400 mg/kg的植物甾醇能够显著提高仔猪末重，添加400、800 mg/kg植物甾醇显著降低仔猪料重比，各试验组仔猪的腹泻率均显著降低，表明添加400 mg/kg的植物甾醇可以改善仔猪的生长性能及肠道健康。赵云博等[6]研究发现，仔猪生产中添加不同配方的植物甾醇可以显著降低腹泻率，提高平均日增重。周萌等[11]研究发现，育肥猪生产中使用120、180 mg/kg的植物甾醇可以提高育肥猪的采食量，显著降低料重比，提高平均日增重。卓锐文等[12]研究发现，仔猪在生产中使用450 mg/kg的酯化植物甾醇可以有效提高断奶仔猪的采食量。植物甾醇提高仔猪生长性能可能是因为其能够调节肠道菌群结构，改善肠道健康，促进消化酶的分泌，提高机体吸收营养物质的能力，从而促进机体生长发育[13-15]。3.2不同水平酯化植物甾醇对仔猪免疫功能的影响动物机体的免疫球蛋白和免疫细胞因子可以反映机体免疫功能的强弱。植物甾醇具有调节动物机体免疫力的功能。本试验中，添加400、800 mg/kg的酯化植物甾醇可以显著提高仔猪血清中IgA含量，添加400 mg/kg的酯化植物甾醇可以提高仔猪IgG含量；且添加植物甾醇后，仔猪血清免疫细胞抗炎因子IL-10含量显著提高，促炎因子TNF-α含量显著降低，表明仔猪生产使用适量的酯化植物甾醇可以提高机体的体液免疫和细胞免疫功能。赵云博等[16]研究发现，在脂多糖诱导的小鼠模型中使用适量的植物甾醇可以有效抑制小鼠的炎症反应。胡巧玲等[7]研究表明，断奶仔猪生产中添加200 mg/kg植物甾醇可以有效降低仔猪血清促炎因子的水平，降低腹泻率，改善肠道绒毛形态，进而提高机体的抗炎能力。植物甾醇提高仔猪机体免疫功能，主要是由于植物甾醇可以促进淋巴细胞和吞噬细胞的生长和繁殖，提高自然杀伤细胞裂解癌细胞，刺激干扰素和IL-2的生成，进而调节机体的免疫系统[17-19]。3.3不同水平酯化植物甾醇对仔猪血清生化指标的影响血清生化指标可以间接反映动物机体的健康状态。TP、ALB、BUN含量可以反映机体的免疫力及对蛋白质代谢情况；TG、TC、HDL-C及LDL-C可以反映机体血脂代谢能力；AST和ALT可以反映肝功能是否正常。本研究中，仔猪生产中添加植物甾醇后，改善了血脂代谢，其中400、800 mg/kg的酯化植物甾醇组仔猪血清中TC、TG含量显著降低，BUN含量显著降低，400 mg/kg的酯化植物甾醇组仔猪血清中HDL-C含量显著提高，表明适量的酯化植物甾醇可以有效改善仔猪机体的健康。卓锐文等[12]研究发现，在断奶仔猪日粮中添加150 mg/kg的酯化植物甾醇可以有效提高血清中HDL-C的含量。祝惠等[20]研究发现，在肉鸡生产中使用25 mg/kg的植物甾醇可以提高血清中的HDL-C含量。邹胜龙等[9]研究发现，在快大黄鸡生产中使用200 g/t植物甾醇可有效降低血清中LDL-C、TC及TG水平，提高HDL-C含量，具有降低血清BUN的趋势。因此，在家禽和猪生产中使用适量的植物甾醇可以有效调节机体的血脂代谢及蛋白质代谢，促进机体健康及蛋白质沉积。4结论本研究结果表明，添加酯化植物甾醇可以提高仔猪的生长性能及免疫力，改善血脂代谢，酯化植物甾醇的适宜添加量为400 mg/kg。