益生菌是通过在宿主体内定植，改变宿主特定区域菌群结构、对宿主健康有益的一类活性微生物[1]。畜禽生产中常用的益生菌包括乳杆菌、芽孢杆菌、酵母等[2]，可在饮水或者饲料中单一或者混合添加益生菌，从而改善动物的生产性能[3]。益生菌具有提高营养物质消化率、增强机体免疫、维持消化道微生态平衡等功能[4]，在动物养殖中广泛应用[5-6]。本试验旨在研究复合益生菌制剂对肉羊生长性能、屠宰性能、肉质性状、瘤胃发酵参数及经济效益的影响，为益生菌在反刍动物养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料与地点复合益生菌由河南益富源生物科技有限公司生产，复合益生菌组成及活菌数见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T001表1复合益生菌组成及活菌数项目乳酸菌双歧杆菌酵母菌芽孢杆菌总微生物数量含量≥6×109≥5×109≥3×109≥3×109≥2×1010CFU/kg试验于驻马店宏运养殖场进行。1.2试验设计选取100日龄、平均体重约为21 kg、健康的杜寒杂交肉羊96头，随机分为4组，每组4个重复，每个重复6头羊。对照组羊饲喂基础日粮，各试验组分别在基础日粮中添加500、1 000、1 500 mg/kg复合益生菌。预试期7 d，正式试验期90 d。基础日粮组成及营养水平见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T002表2基础日粮组成及营养水平（干物质基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00全株玉米青贮23.50代谢能/(MJ/kg)10.42苜蓿干草23.00粗蛋白/%10.68青贮高粱秸秆3.50中性洗涤纤维/%47.98玉米28.36酸性洗涤纤维/%24.28豆粕6.67钙/%0.75麸皮4.25磷/%0.53棉籽粕3.33花生粕3.37磷酸氢钙0.42石粉0.36食盐0.38油粉0.86预混料2.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 850 IU、VD3 500 IU、VE 100 IU、VB1 6.35 mg、VB2 15.43 mg、VB6 5.17 mg、VB12 0.05 mg、烟酸10.3 mg、Cu 7.3 mg、Fe 22.5 mg、Mn 15.3 mg、Zn 23.2 mg、I 0.02 mg、Se 0.03 mg、Co 0.1mg。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.3饲养管理在预试期前7 d对栏舍、场地进行消毒。试验期间，每天7：30、12：00和17：30进行投料，保证试验羊自由采食和自由饮水。每日6：30统计前1 d试验羊的采食量，其他日常管理程序参考养殖场规章制定执行。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验开始和结束对试验羊空腹称重，记为初重和末重，统计采食量，计算平均日增重、平均日采食量及料重比。平均日增重=总增重/(试验天数×试验羊数)(1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×试验羊数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2屠宰性能每个重复中随机选择1头与该组平均体重接近的试验羊进行屠宰。参考《肉羊生产性能测定技术规范》（T/CAAA 080—2022）测定宰前活重、胴体重、眼肌面积、GR值数据，计算屠宰率。眼肌面积：使用硫酸纸和铅笔描出第12~13根肋骨间眼肌横截面积。GR值为第12~13肋骨之间距背中线11 cm处的组织厚度，以评价羊组织脂肪厚度。屠宰率=胴体重/宰前活重×100%(4)1.4.3肉品质收集屠宰后试验羊背最长肌，使用SX700型pH测定仪（上海三信仪表厂）分别测定宰后0、24 h羊肉pH值；使用MAQC-12型肌肉嫩度测定仪（南京铭奥仪器设备有限公司）测定1.5 cm厚度的剪切力值；使用CR-400色差计（柯尼卡美能达（中国）投资有限公司）测定肌肉亮度（L*值）、红度（a*值）、黄度（b*值）。使用细铁丝将肉样悬挂在倒置的塑料杯中央，确保肉样无法接触杯壁和顶部，24 h后称重为肉样末重，计算滴水损失。滴水损失=(肉样初重-肉样末重)/肉样初重×100%(5)1.4.4瘤胃发酵参数每个重复中随机选择1头试验羊，通过瘤胃液收集管收集瘤胃液，使用多层灭菌纱布过滤，置于无菌离心管中，-20 ℃保存，用于测定瘤胃液pH值、挥发性脂肪酸含量及氨态氮含量。挥发性脂肪酸、氨态氮分别使用离子色谱法和苯酚-次氯酸钠比色法测定。1.4.5经济效益统计试验羊在试验阶段的增重、饲料成本，计算经济效益。基础日粮平均价格为2 436元/t，羊出售价格约为24.3元/kg，复合益生菌制剂采购价格为25元/kg。饲料成本=总采食量×日粮单价(6)增重收入=总增重×羊出售单价(7)养殖利润=养殖收入-饲料成本-复合益生菌成本(8)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 26软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合益生菌对肉羊生长性能的影响（见表3）由表3可知，1 000 mg/kg组、1 500 mg/kg组试验肉羊平均日增重显著高于对照组（P0.05），料重比显著低于对照组（P0.05）。复合益生菌对试验肉羊的平均日采食量未产生显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T003表3复合益生菌对肉羊生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[(g/(头·d)]平均日采食量/[(g/(头·d)]F/G对照组21.39±1.3546.89±3.14283.29±7.43c1 807.39±46.876.38±0.13a500 mg/kg组21.26±1.8647.85±2.58295.42±6.51bc1 846.38±62.456.25±0.16ab1 000 mg/kg组21.42±2.0148.80±3.32304.27±6.29ab1 849.96±58.366.08±0.12bc1 500 mg/kg组21.38±1.1749.86±3.70316.45±8.04a1 863.89±68.775.89±0.15c注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或者无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2复合益生菌对肉羊屠宰性状的影响（见表4）由表4可知，1 500 mg/kg组试验肉羊胴体重显著高于对照组（P0.05）。复合益生菌对试验肉羊的屠宰率、眼肌面积及GR值未产生显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T004表4复合益生菌对肉羊屠宰性状的影响组别宰前活重/kg胴体重/kg屠宰率/%眼肌面积/cm2GR值/mm对照组46.85±2.9521.02±1.27b44.87±3.4621.14±4.879.68±0.68500 mg/kg组47.73±2.7321.65±1.56ab45.36±2.1821.66±3.629.73±1.011 000 mg/kg组48.72±2.6922.40±1.17ab45.97±1.9521.83±2.989.62±0.741 500 mg/kg组49.83±2.7523.27±1.23a46.69±2.3622.05±5.339.65±0.832.3复合益生菌对肉羊肉品质的影响（见表5）由表5可知，1 500 mg/kg组肉羊肉的pH24 h值显著高于对照组（P0.05），a*值显著高于对照组（P0.05）。复合益生菌对其他肉品质指标无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T005表5复合益生菌对肉羊肉品质的影响组别pH0 h值pH24 h值剪切力/NL*值a*值b*值滴水损失/%对照组6.45±0.075.32±0.05b66.19±2.9434.23±2.1813.81±1.07b4.25±0.6711.93±0.52500 mg/kg组6.42±0.035.38±0.06ab67.28±4.4335.29±1.9414.69±1.35ab4.29±0.7811.68±0.701 000 mg/kg组6.46±0.085.39±0.05ab63.67±3.0636.28±3.0114.93±1.11ab4.13±0.4311.42±0.641 500 mg/kg组6.45±0.035.43±0.04a65.05±2.8836.39±2.4916.03±1.02a4.58±0.5210.89±0.582.4复合益生菌对肉羊瘤胃发酵参数的影响（见表6）由表6可知，1 500 mg/kg组肉羊瘤胃液中丙酸和总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组（P0.05）。复合益生菌对肉羊瘤胃其他发酵参数无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T006表6复合益生菌对肉羊瘤胃发酵参数的影响组别pH值氨态氮/(mg/L)乙酸/(mmol/L)丙酸/(mmol/L)丁酸/(mmol/L)戊酸/(mmol/L)异丁酸/(mmol/L)异戊酸/(mmol/L)总挥发性脂肪酸/(mmol/L)对照组6.58±0.19106.23±8.1350.67±4.3813.08±1.26b10.87±1.131.02±0.260.74±0.171.10±0.3878.05±3.27b500 mg/kg组6.52±0.10110.46±5.2452.48±5.6114.65±2.15ab11.03±0.961.12±0.370.63±0.151.05±0.1682.37±4.13ab1 000 mg/kg组6.52±0.26105.44±4.8653.61±3.2715.91±1.78ab10.76±1.051.21±0.230.69±0.090.98±0.2484.16±5.57ab1 500 mg/kg组6.57±0.15103.27±7.3455.83±4.3616.64±2.02a11.14±0.821.23±0.480.65±0.121.12±0.1588.24±4.86a2.5复合益生菌对肉羊养殖经济效益的影响（见表7）由表7可知，对照组每头肉羊试验阶段增重收入为619.65元，500 mg/kg组、1 000 mg/kg组、1 500 mg/kg组每头肉羊增重收入分别比对照组高4.27%、7.37%和11.69%，各试验组每头肉羊利润分别比对照组高15.86元、32.19元、53.73元。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.004.T007表7复合益生菌对肉羊养殖经济效益的影响组别总增重/(kg/头)增重收入/(元/头)总采食量/(kg/头)饲料成本/(元/头)复合益生菌用量/kg复合益生菌使用成本/(元/头)利润/(元/头)对照组25.50619.65162.67396.2500223.40500 mg/kg组26.59646.14166.17404.800.082.08239.261 000 mg/kg组27.38665.33166.50405.590.174.16255.591 500 mg/kg组28.48692.06167.75408.640.256.29277.133讨论3.1复合益生菌对肉羊生长性能的影响益生菌具有提高反刍动物生产性能的作用。白天天等[7]将24只绵羊随机分为4组，分别为CK组（添加10 mL发酵液）、S组（添加10 mL 1×1010 CFU/mL屎肠球菌发酵液）、K组（添加10 mL 1×1010 CFU/mL枯草芽孢杆菌发酵液）和F组（添加5 mL 1×1010 CFU/mL屎肠球菌发酵液+5 mL 1×1010 CFU/mL枯草芽孢杆菌发酵液），饲喂60 d。结果发现，S组和K组的绵羊的平均日增重显著高于K组，认为屎肠球菌对湖羊生产性能的改善效果优于枯草芽孢杆菌。孙康等[8]在7日龄羔羊日粮中分别添加0.2%的枯草芽孢杆菌，试验第7 d，枯草芽孢杆菌组羔羊体重显著低于对照组；但在试验第8~14 d和15~21 d枯草芽孢杆菌可显著提高羔羊平均日增重。刘宇阳[9]分别在波尔山羊日粮中分别添加1%、2%、3%复合益生菌制剂（由酵母、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌组成），试验29~56 d和整个试验期，所有试验组山羊平均日增重显著高于对照组。本研究结果表明，1 000、1 500 mg/kg组杜寒杂交肉羊平均日增重显著提高，料重比显著下降，与上述研究结果基本一致。因此，可以认为益生菌可以促进肉羊的生长性能，但效果与微生物种类、羊品种有关。3.2复合益生菌对肉羊屠宰性状的影响胴体重、屠宰率及眼肌面积可以直接反映羊的屠宰性能，胴体重、屠宰率及眼肌面积与宰前活重呈正相关[10]。GR值可以反映羊胴体脂肪含量，间接反映羊体内脂质代谢情况[11]。刘俊斌等[12]研究表明，枯草芽孢杆菌对羊屠宰性能无显著影响。占今舜等[13]分别在山羊基础日粮中分别添加0.5‰和1.0‰复合益生菌制剂（由嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和粪肠球菌构成，总量约为1×109 CFU/g），饲喂70 d，发现1.0‰组山羊胴体重和后腿重显著高于对照组，而宰前活重、屠宰率、眼肌面积具有提高的趋势。王宏迪等[14]研究给苏尼特羊分别饲喂基础日粮、基础日粮+补饲2 g/d乳酸菌（1.5×109 CFU/g），饲喂90 d，发现补饲乳酸菌可以提高羊平均日增重、羊胴体重、眼肌面积、屠宰率。张常华等[15]使用活性酵母与复合酶预混剂每日对杜寒杂交羊羔羊进行补饲，补饲量分别为15、30 g/d，饲喂60 d，结果表明，30 g/d组试验羊的平均日增重、平均日采食量显著高于对照组，屠宰率、净肉率和眼肌面积显著高于对照组，认为使用活性酵母与酶复合产品可以有效提高羊生长性能和屠宰性能。本研究结果显示，1 500 mg/kg组试验肉羊胴体重显著高于对照组，其他指标尽管随着复合益生菌添加量上升而呈上升趋势，与上述研究结果不完全一致，表明益生菌对肉羊屠宰性能的作用效果与微生物菌种、羊品种有关。3.3复合益生菌对肉羊肉品质的影响羊肉pH值、肉色、滴水损失是反映肉品质的重要指标，肉色L*、a*、b*值可以有效反映肉的新鲜程度。剪切力可以作为肌肉嫩度的评价指标[16-17]。刘俊斌等[12]研究认为，日粮中添加100、200 mg/kg枯草芽孢杆菌能显著降低背最长肌失水率和亮度值。占今舜等[13]研究发现，日粮中添加复合益生菌对山羊肌肉pH值、失水率、剪切力及肉色等指标无显著影响。张常华等[15]研究发现，补饲30 g/d酵母复合产品降低肉羊蒸煮损失、剪切力、滴水损失。刘婷等[18]给苏尼特羊分别饲喂基础日粮、基础日粮+12 g/d植物乳杆菌（3×1010 CFU/g），试验期90 d，植物乳杆菌可以显著提高肉L*、b*值、pH24 h值，显著降低肉的蒸煮损失、剪切力。本研究表明，1 500 mg/kg组肉羊的肌肉pH24 h值显著低于对照组，a*值显著高于对照组，与上述研究基本一致，但由于各项研究益生菌添加量和添加方式不同，对肉品质改善的效果不完全一致。3.4复合益生菌对肉羊瘤胃发酵参数的影响瘤胃正常pH值范围为6~7，在此范围外表明羊存在酸或碱中毒的可能性[19]。氨态氮是瘤胃微生物对日粮中氮利用与代谢的产物，适宜的氨态氮含量有助菌体蛋白形成，对反刍动物发育至关重要[20]。挥发性脂肪酸是日粮中瘤胃微生物利用碳水化合物的代谢产物，也是反刍动物主要的能量来源之一[21]。刘俊斌等[22]分别在湖羊日粮中添加100、200 mg/kg枯草芽孢杆菌制剂，饲喂60 d，发现200 mg/kg组湖羊瘤胃中总挥发性脂肪酸和丙酸含量显著高于对照组。李月明等[23]比较不同来源干酵母（福邦活性干酵母、拉曼活性干酵母）对延边黄牛高精料日粮体外发酵参数的影响，结果表明，干酵母组使日粮在体外发酵过程中乳酸产量显著降低而引起pH值升高，且活性酵母对体外瘤胃发酵具有积极影响。张政[24]研究不同活性酵母制剂（BY、XR4、BC株）对奶牛瘤胃体外发酵参数的影响，结果表明，与对照组相比，日粮中添加活性酵母可显著提高发酵液菌体蛋白和挥发性脂肪酸含量。本研究发现，1 500 mg/kg复合益生菌制剂可显著提高总挥发性脂肪酸和乙酸含量，与上述研究结论类似，表明日粮中添加益生菌可以有效改善反刍动物瘤胃发酵参数。3.5复合益生菌对肉羊养殖经济效益的影响益生菌作为饲料添加剂用于畜禽养殖具有较成熟的技术。本研究中，整个试验期内，每头肉羊使用复合益生菌的成本不超过10元，但由于生长性能的提高导致试验组羊的养殖利润高于对照组。4结论本研究结果表明，日粮中添加复合益生菌制剂可显著提高杜寒杂交肉羊的生长性能，具有改善屠宰性能、肉品质、瘤胃发酵参数的趋势，增加了养殖的经济效益，认为在杜寒杂交肉羊日粮中添加1 500 mg/kg复合益生菌较为适宜。