虾青素化学名为3,3'-二羟基-4,4'-二酮基-β,β'-胡萝卜素（C40H52O4），属于萜烯类类胡萝卜素，最早在蟹、虾类生物壳中发现[1]。目前，饲用虾青素主要来源为细菌、藻类及酵母等。研究表明，虾青素具有抗氧化、抗炎、调节机体免疫等生物学功能[2]。在日粮中添加虾青素可以改善畜禽、水产动物的生产性能和健康水平[3-5]，具有较高的应用研究价值。鲈鱼肉质鲜美、营养价值丰富，在我国各地均有养殖，具有较大的消费市场。目前，虾青素在鲈鱼养殖中的研究较少。本试验研究虾青素对鲈鱼生长性能及非特异性免疫力的影响，为虾青素在鲈鱼养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料虾青素由郑州裕和食品添加剂有限公司生产，有效含量为1%。鲈鱼购自邢台佳瑜鲈鱼养殖厂，共500尾。试验于本校动物养殖试验基地进行。1.2试验设计500尾鲈鱼投喂基础饵料饲养3 d，以适应养殖环境，根据生长状态，剔除非健康个体，保留480尾鲈鱼用于试验，随机分为4组，每组6个重复，每个重复20尾鲈鱼。对照组鲈鱼投喂基础饵料，试验组分别在鲈鱼基础饵料中添加50、100、150 mg/kg虾青素。基础饵料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.011.T001表1基础饵料组成及营养水平原料组成含量营养水平合计100.00膨化大豆8.16粗蛋白43.38鱼粉38.34粗脂肪11.64酪蛋白4.32粗灰分11.05大豆浓缩蛋白3.58水分8.26褐藻酸钠5.59谷朊粉4.30羧甲基纤维素3.00玉米蛋白粉8.56面粉17.86豆油1.88鱼油4.50大豆磷脂2.96氯化胆碱0.30诱食剂0.05防霉剂0.10预混料1.00注：1.预混料为每千克饵料提供：VA 11 000 IU、VE 200 IU、VD3 3 200 IU、VK3 11.18 mg、VB1 21 mg、VB2 22 mg、VB6 15 mg、生物素0.8 mg、叶酸7.5 mg、Cu 3 mg、Fe 55 mg、Zn 53 mg、Mn 12.05 mg、I 1.5 mg、Se 0.3 mg、Co 0.25 mg。2.营养水平均为实测值。%1.3饲养管理鲈鱼饲养于淡水养殖系统的玻璃缸中（直径1 m，高1.1 m），水体体积约占玻璃缸容积80%，每个玻璃缸中饲养20尾鲈鱼。试验期间，每天投喂3次（7：00、12：00和17：00），记录投喂量，并于第2 d早上统计剩料量。使用虹吸方式处理粪便，保证水温约为（25±3）℃，溶氧量不低于4.8 mg/L，pH值处于6.8~7.4，光源为自然光。预试期7 d，正式试验期60 d。1.4测定指标及方法1.4.1样品采集试验开始与结束前对鲈鱼禁食12 h，空腹称重，记为初重和末重，计算增重率（WGR）、特定生长率（SGR）。收集整个阶段鲈鱼采食信息，计算鲈鱼饵料系数（FCR）。根据鲈鱼死亡数，计算试验阶段鲈鱼存活率（SR）。在各重复中随机选择1尾鲈鱼，采用尾静脉采血法获取血样，3 500 r/min离心10 min获得上清液，置于-20 ℃冰箱中保存。鲈鱼采血后解剖，测量鲈鱼体长，称取内脏和肝脏重量，计算肥满度（CF）、脏体比（VSI）和肝体比（HSI）。1.4.2生长性能根据公式计算鲈鱼的WGR、SGR、FCR、SR、CF、VSI、HSI指标数据。WGR=(末重-初重)/初重×100%(1)SGR=(ln末重-ln初重)/试验天数×100%(2)FCR=饲料采食量/(末重-初重)(3)SR=试验末鲈鱼数/试验初鲈鱼数×100%(4)CF=体重/体长3 (5)VSI=内脏重量/鲈鱼体重×100%(6)HSI=肝脏重量/鲈鱼体重×100%(7)1.4.3体组成每个重复中随机选择2尾鲈鱼，宰杀后粉碎，在75 ℃烘箱中干燥至恒重。分别使用灼烧法、酸水解全脂肪测定法和凯氏定氮法测定鲈鱼粗灰分、粗脂肪及粗蛋白含量。1.4.4抗氧化指标采用ABTS法测定总抗氧化能力（T-AOC），酶速率法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，黄嘌呤过氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性，TBA比色法测定丙二醛（MDA）含量。试剂盒购自西格玛奥德里奇（上海）贸易有限公司。1.4.5非特异性免疫指标分别使用比浊法、AKP法、比色法测定及酶联免疫吸附法测定溶菌酶（LZM）、碱性磷酸酶（AKP）、酸性磷酸酶（ACP）活性及补体C3和补体C4含量。试剂盒购自MERCK公司。1.5数据统计与分析数据经Excel初步整理，采用SPSS 24统计软件进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1虾青素对鲈鱼生长性能的影响（见表2）由表2可知，100 mg/kg组和150 mg/kg组鲈鱼的末重和SR显著高于对照组（P0.05）。150 mg/kg组鲈鱼WGR和SGR显著高于对照组（P0.05），各试验组鲈鱼的FCR显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.011.T002表2虾青素对鲈鱼生长性能的影响组别初重/g末重/gWGR/%SGR/(%/d)FCRSR/%CF/(g/cm3)HSI/%VSI/%对照组11.83±0.0675.16±3.84b535.33±30.37b3.08±0.15b2.15±0.08a86.00±4.01b1.48±0.071.36±0.053.28±0.2850 mg/kg组11.79±0.0379.23±4.61ab572.01±33.54b3.18±0.11ab1.95±0.06b90.00±4.92b1.52±0.091.35±0.053.30±0.13100 mg/kg组11.85±0.0786.60±3.75a630.80±38.36ab3.31±0.13ab1.82±0.05c98.00±3.00a1.53±0.101.37±0.043.27±0.17150 mg/kg组11.82±0.0491.28±5.91a672.25±43.81a3.41±0.17a1.74±0.08c99.00±2.01a1.55±0.071.39±0.063.28±0.16注：同列数据不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2虾青素对鲈鱼体组成的影响（见表3）由表3可知，各试验组鲈鱼粗脂肪含量显著低于对照组（P0.05），100 mg/kg组和150 mg/kg组鲈鱼粗蛋白含量显著高于对照组（P0.05）10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.011.T003表3虾青素对鲈鱼体组成的影响组别粗灰分粗脂肪粗蛋白对照组2.86±0.092.89±0.16a16.93±0.53b50 mg/kg组2.83±0.102.33±0.15b17.45±0.97ab100 mg/kg组2.84±0.082.17±0.12b17.89±0.61a150 mg/kg组2.79±0.092.10±0.19b18.50±0.83a%2.3虾青素对鲈鱼血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，随着饵料中虾青素添加量升高，鲈鱼血清中抗氧化酶活性呈上升趋势。所有试验组鲈鱼血清中T-AOC以及GSH-Px、SOD的活性均显著高于对照组（P0.05）。所有试验组鲈鱼血清中血清MDA含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.011.T004表4虾青素对鲈鱼血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组1.83±0.18c258.19±28.46d98.43±9.57b8.43±0.53a50 mg/kg组2.73±0.26b326.17±30.10c132.56±10.32a6.25±0.46b100 mg/kg组2.96±0.15b389.32±25.69b136.27±14.53a5.13±0.38c150 mg/kg组3.43±0.27a452.20±24.73a143.28±9.95a4.86±0.42c2.4虾青素对鲈鱼非特异性免疫指标的影响（见表5）由表5可知，150 mg/kg组鲈鱼血清中LZM活性显著高于对照组（P0.05），各虾青素组鲈鱼血清补体C3含量显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.03.011.T005表5虾青素对鲈鱼血清非特异性免疫指标的影响组别LZM/(U/L)AKP/(U/L)ACP/(U/L)补体C3/(mg/L)补体C4/(mg/L)对照组2.33±0.12b21.36±2.5727.62±3.140.28±0.10b0.08±0.0350 mg/kg组2.45±0.12ab19.87±1.9628.43±2.080.48±0.09a0.09±0.04100 mg/kg组2.52±0.11ab22.45±1.7329.69±2.570.57±0.05a0.11±0.05150 mg/kg组2.58±0.10a21.27±1.8430.17±3.260.61±0.13a0.11±0.033讨论3.1虾青素对鲈鱼生长性能的影响WGR、FCR、SR、CF等指标是衡量鲈鱼生长性能的重要指标。VSI可有效反映鲈鱼体内器官健康情况和代谢情况；HSI是反映鲈鱼肝脏健康程度的重要指标，该指标过高表明肝脏存在水肿病变或者脂肪沉积[6]。Saleh等[7]研究表明，100 mg/kg水平虾青素可以显著提高鲈鱼生长性能。Lim等[8]分别在亚洲鲈鱼基础饵料中添加0、50、100、150 mg/kg虾青素，饲喂90 d后发现，随着饵料中虾青素添加量的提升，鲈鱼SGR、末重、饵料利用效率及SR呈线性增加。本研究发现，饵料中添加大于或等于100 mg/kg的虾青素可以显著提高鲈鱼试验末重和SR，显著降低FCR，与上述研究结果一致。3.2虾青素对鲈鱼体组成的影响体组成指标与鲈鱼营养价值相关，可反映鲈鱼对饵料中营养物质的利用情况[9]。Saleh等[7]研究发现，饵料中添加100 mg/kg可以显著提高鲈鱼蛋白含量。Xie等[10]分别使用对照饵料、高脂饵料（脂肪含量为18.08%）、高脂饵料+75 mg/kg虾青素、高脂饵料+150 mg/kg虾青素对大口黑鲈进行饲喂，发现高脂饵料中补充虾青素可以显著降低黑鲈体脂。余小君等[11]在三疣梭子蟹饵料中添加30 mg/kg虾青素，对鱼体水分、粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量均无显著影响。Zhao等[12]在对白虾基础饵料中添加20、40、80、160 mg/kg虾青素，具有提高粗蛋白含量、降低粗脂肪含量的趋势。本研究发现，饵料中添加虾青素可降低鲈鱼粗脂肪含量，提高粗蛋白质含量，与上述研究结论不完全一致，表明虾青素对动物体组成的影响与动物品种和添加量有关。3.3虾青素对鲈鱼血清抗氧化能力的影响T-AOC可衡量鲈鱼机体整体抗氧化能力；GSH-Px可特异性催化还原型谷胱甘肽转变为氧化型谷胱甘肽，清除过氧化氢和脂类过氧化物，避免细胞损伤；SOD主要作用为通过歧化反应将体内超氧阴离子清除[13]。MDA是生物膜脂质过氧化产物，可反映体内过氧化反应的程度[14]。Saleh等[7]研究发现，饵料中添加虾青素会降低鲈鱼肝脏中MDA含量和GSH-Px活性。Xie等[10]研究发现，饲喂高脂饵料的鲈鱼补充虾青素后血清中MDA含量显著下降，SOD活性显著上升，氧化应激损伤具有降低趋势。姚金明等[15]在大鳞副泥鳅基础饵料中添加50、100、150、200 mg/kg虾青素，肝脏中SOD、GSH-Px、CAT活性显著高于对照组，MDA含量显著低于对照组。本研究发现，虾青素可显著提高鲈鱼血清抗氧化酶活性，降低血清MDA含量，与上述研究结果类似。3.4虾青素对鲈鱼血清非特异性免疫功能的影响LZM能够提高吞噬细胞功能，提高鲈鱼免疫能力；AKP和ACP可水解磷酸单脂，去除底物分子上磷酸基团，ACP具有免疫抑制作用，AKP可促进细胞吞噬和异物包裹能力，有助于提升鲈鱼机体免疫[16-17]。Lim等[18]在感染溶藻弧菌的鲈鱼饵料中添加50、150 mg/kg虾青素，血清中LZM活性和补体C3、C4含量显著提高。崔培等[19]研究发现，在锦鲤饵料中添加虾青素对血清中非特异性免疫指标无显著影响。Zhu等[20]在珊瑚鳟鱼饵料中添加50、100、200 mg/kg虾青素，血清和肝脏中LZM、ACP活性及补体C3和C4含量显著提高。本研究表明，虾青素仅能够显著提高鲈鱼血清LZM活性，但效果受鱼品种和添加量影响。4结论本研究结果显示，饵料中添加虾青素可有效改善鲈鱼生长性能、机体抗氧化和免疫能力，建议虾青素在鲈鱼饵料中的适宜添加水平为150 mg/kg。