蛋鸡在蛋高峰之后进入到产蛋后期其生产性能、蛋品质迅速下降是蛋鸡养殖过程中的一个重要问题。柠檬酸添加到基础日粮中可以改善日粮的适口性，加强对蛋白质的消化，抑制肠道中大肠杆菌、肠球菌生长，减少腹泻，从而提高饲料转化率，提高鸡蛋的蛋壳厚度、哈夫单位[1-2]。柠檬酸可作为配位体，与饲料中的矿物质发生螯合作用促进肠道对矿物元素的吸收，也可直接参与体内代谢，用于ATP的合成，提高机体抗应激能力，增强机体的免疫能力，提高生产性能[3]。辣木是一种多功能的木本植物，其叶、花、果实、种子均可供人类食用与利用，辣木营养丰富而全面，含有丰富的钙、磷、钾、铁等矿物元素和微量元素。辣木的维生素、必需氨基酸、蛋白质及膳食纤维含量较高，且含有类黄酮、多酚、多糖类、生物碱类等活性成分[4]。辣木作为一种新型饲料资源，富含多种功能性成分，具有抗氧化、增强免疫力等功效[5]。试验探究柠檬酸与辣木茎叶粉的使用对产蛋后期广西麻鸡的生产性能，蛋品质，血清抗氧化指标的影响。1材料与方法1.1试验材料与基础日粮随机选取52周龄生产性能及体重相近的广西麻鸡720只，购自广西南宁富凤鸡厂。柠檬酸（C6H8O7，食品级）购自上海凛恩科技发展有限公司。辣木茎叶粉购自广西荣谢生态农业科技有限公司。基础日粮为广西富凤集团提供的种蛋鸡产蛋后期饲料。辣木茎叶粉主要成分为：粗蛋白18.98%、粗纤维27.45%、酸性洗涤纤维29.66%、中性洗涤纤维49.56%、粗脂肪4.45%、钙1.28%、磷0.73%。基础日粮组成及其营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.008.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00蛋氨酸+胱氨酸/%0.70玉米63.16代谢能/（MJ/kg)11.63豆粕25.40粗蛋白/%15.50石粉8.09钙/%2.80食盐0.35有效磷/%0.36预混料3.00赖氨酸/%0.85注：1.预混料为每千克基础饲料提供：VA 8 000 IU、VD3 2 200 IU、VE 8 IU、VK3 1.5 mg、VB1 2.0 mg、VB2 4.0 mg、VB6 2.0 mg、VB12 0.2 mg、烟酸30 mg、泛酸8 mg、叶酸1.0 mg、铜6.0 mg、铁80 mg、锰45 mg、锌55 mg。2.代谢能为计算值，其余为实测值。蛋壳强度测定仪购自北京天翔飞域科技有限公司。蛋白高度测定仪购自南京铭奥仪器设备有限公司。蛋黄比色扇购自南京瑶恩仪器设备有限公司。丙二醛（MDA）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽超氧化物歧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）使用酶标仪（TECAN公司）测定，所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。1.2试验方法与饲养管理将720只试验鸡随机分为4组，每组180只鸡。对照组饲喂基础日粮。柠檬酸添加方式为直接添加，辣木茎叶粉等量替代基础日粮。处理组A组、B组、C组，添加剂量分别为0.07%柠檬酸、0.07%柠檬酸+4%辣木茎叶粉、4%辣木茎叶粉。试验期间鸡群为标准化饲养管理，采用三层阶梯式笼养，各重复均匀分布，每天光照16 h，光照强度20 lx，温度为18~27 ℃，相对湿度50%~90%，自由采食、饮水。每天8：00投料、16：00收蛋，定期对鸡群、鸡舍进行消毒防疫。1.3测定指标及方法1.3.1生产性能试验期间每天定时16：00记录各重复的产蛋总数、破损蛋数和死亡数。每周统计1次采食量、总蛋重，计算每个处理组的产蛋率、不合格蛋率、平均日采食量、平均蛋重、料蛋比。产蛋率=产蛋数/蛋鸡数量×100%(1)不合格蛋率=砂、软、破蛋数/总蛋数×100%(2)平均日采食量=(总投料重-回收料重)/蛋鸡数量(3)平均蛋重=总产蛋重/总产蛋数(4)料蛋比=周总采食量/周总蛋重(5)1.3.2蛋品质试验第8周末，每个处理选取6个蛋，称量蛋重、蛋黄重及蛋壳重。测量鸡蛋的长短经、蛋黄直径及蛋壳厚度。蛋黄粗脂肪含量测定采用索式抽提法；蛋壳强度测定使用蛋壳强度测定仪；蛋白高度及蛋黄高度测定使用蛋白高度测定仪；蛋黄颜色测定使用蛋黄比色扇。计算蛋形指数、蛋壳比率、蛋黄比率、蛋黄指数。蛋形指数=纵径/横径(6)蛋壳比率=蛋壳重/蛋重×100%(7)蛋黄比率=蛋黄重/蛋重×100%(8)蛋黄指数=蛋黄高度/蛋黄直径(9)1.3.3血清抗氧化指标于试验第8周末在各处理组中随机选取6只鸡采血检测，采血采用翅静脉采血，3 000 r/min离心10 min，取上清液保存用于抗氧化指标的检测，检测方法按试剂盒操作说明进行。1.4数据统计与分析使用Excel 2016对数据进行整理，并采用SPSS 22.0对数据进行单因素ANOVA统计分析，数据以“平均值±标准差”表示，Duncan氏法进行多重比较，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1辣木、柠檬酸对产蛋后期广西麻鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，A、B、C组试验鸡的采食量均无显著差异（P0.05），但C组试验鸡的采食量显著低于A组（P0.05）。各组试验鸡在产蛋率、料蛋比上无显著性差异（P0.05）。C组试验鸡的不合格蛋率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.008.T002表2辣木、柠檬酸对产蛋后期广西麻鸡生产性能的影响项目对照组A组B组C组产蛋率/%39.99±2.5040.19±4.0541.13±3.8240.37±5.86采食量/g91.20±5.77ab108.87±13.8a96.12±16.01ab84.68±12.38b料蛋比4.16±1.065.07±1.774.32±1.554.05±1.54不合格蛋率/%8.24±0.05a6.52±0.04a9.17±0.06a3.49±0.04b注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P＜0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P＞0.05）；下表同。2.2辣木、柠檬酸对产蛋后期广西麻鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，C组试验鸡的平均蛋重显著降低（P0.05）。A组蛋黄粗脂肪含量显著降低、B组蛋黄粗脂肪含量显著提高（P0.05）。B组蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋黄比率、蛋白高度和哈夫单位优于其余各组，但差异不显著（P0.05）。各组之间蛋形指数、蛋黄颜色、蛋黄指数、蛋黄比率和蛋壳比率差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.008.T003表3辣木、柠檬酸对产蛋后期广西麻鸡蛋品质的影响项目对照组A组B组C组平均蛋重/g51.77±1.21a49.45±3.72ab48.32±5.03ab46.55±2.51b蛋形指数1.36±0.071.35±0.071.31±0.131.32±0.04蛋壳强度/N37.73±7.7938.12±11.0345.30±7.7638.28±9.82蛋白高度/mm5.98±1.984.26±1.506.18±1.155.85±1.14哈夫单位77.59±14.0364.22±15.9881.34±8.8579.98±7.36蛋黄颜色7.83±0.757.50±1.878.00±1.108.33±0.52蛋黄指数0.44±0.010.45±0.020.40±0.080.43±0.01蛋黄比率/%36.06±7.5934.66±1.1838.09±2.9934.33±4.51蛋壳厚度/mm0.35±0.030.35±0.030.38±0.030.36±0.03蛋壳比率/%9.51±0.759.78±0.8110.48±1.2110.13±1.06蛋黄粗脂肪/%49.88±0.77b48.97±0.12c51.26±0.38a49.45±0.45bc2.3辣木、柠檬酸对产蛋后期广西麻鸡血清抗氧化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各处理组试验鸡血清总抗氧化能力和谷胱甘肽超氧化物歧化酶活性无显著差异（P0.05）。各处理组丙二醛的含量均有下降趋势但差异不显著（P＜0.05）。B组、C组血清总超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活性显著高于对照组（P＜0.05）；A组也有上升趋势，但差异不显著（P＜0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.008.T004表4辣木、柠檬酸对产蛋后期广西麻鸡血清抗氧化指标的影响项目对照组A组B组C组丙二醛/(μmol/L)4.23±3.353.33±2.272.41±0.672.57±0.54总超氧化物歧化酶/(U/mL)139.35±17.43b157.58±13.32ab174.23±8.40a170.28±15.73a总抗氧化能力/(U/mL)7.28±0.447.30±0.467.34±0.617.29±0.53谷胱甘肽超氧化物歧化酶/(U/mL)1 466.55±225.781 740.83±194.031 848.13±217.821 758.20±177.52过氧化氢酶/(U/mL)1.16±0.27b1.60±0.26ab1.85±0.29a1.58±1.41a3讨论3.1辣木、柠檬酸对产蛋后期的蛋鸡生产性能的影响酸化剂在畜禽饲粮中的应用研究很广泛，根据蛋鸡生产过程的特点，处于产蛋后期的蛋鸡产蛋率、日产蛋量下降迅速，不合格蛋率（砂壳、软壳、破蛋）明显上升。研究表明，酸化剂可以在一定程度上改善蛋鸡的生产性能。试验结果表明，柠檬酸可以增加产蛋率，但差异不显著；添加一定量的辣木有降低料蛋比的趋势，可以显著的减少不合格蛋率。柠檬酸和辣木联合使用不合格蛋率有一定增加但差异不显著。辣木叶含有一些有害物质（辣木碱、单宁、皂苷、植酸、氰苷、硫代葡萄糖苷等），当摄入过量时，可能具有神经麻痹或其他毒副作用[6-9]。推测原因可能是柠檬酸和辣木联合使用引起辣木的食入量过大导致的。3.2辣木、柠檬酸对产蛋后后期蛋品质的影响产蛋后期的蛋鸡经过长时间的生产活动，生理机能逐渐弱化，对营养物质、微量元素的吸收效率大大降低，尤其是形成蛋壳的主要成分钙的吸收效率降低，导致蛋壳薄、脆，破蛋率提高。蛋鸡在产蛋后期机体生殖器官存在不同程度的病变、退化，过大的鸡蛋会加大生殖器官的负担[10]。本试验中，C组与对照组相比显著降低鸡蛋的平均蛋重，其余处理组与对照组相比也有降低蛋重的趋势，但差异不显著。各处理组均能减少鸡蛋的重量可以减缓对生殖系统的损伤。B组在各处理组中的蛋白高度、哈夫单位、蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋黄比率上均有一定程度的提升，但与对照组之间差异不显著，与张连江等[10]的研究结果一致。Soltan[11]研究表明，有机酸可以提升蛋壳品质。此外，辣木茎叶粉中含有丰富的植物源性的钙、磷[12]，也可能是提升蛋壳厚度、蛋壳强度的因素之一。推测在柠檬酸增加动物机体对养分利用的同时加入辣木茎叶粉中的植物源性钙、磷，两者共同作用下提升产蛋后期鸡蛋的蛋品质。此外，辣木与柠檬酸联用有助于提高蛋黄粗脂肪的含量，可能与辣木较高的脂肪含量以及柠檬酸的促消化吸收作用有关。另外，辣木中可能含有某些活性成分，参与蛋鸡脂质代谢从而影响蛋黄粗脂肪的含量[13]，具体机制还有待进一步研究。3.3辣木、柠檬酸对产蛋后期蛋鸡血清抗氧化指标的影响机体氧化可加快衰老，抗氧化则可延缓衰老[14]。氧自由基是机体在衰老、疾病等过程中产生的最为活泼、危害最大的一种自由基，能使生物膜中的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化作用，形成诸如丙二醛、氢过氧基或内过氧基等脂质过氧化物，损伤机体[15]。超氧化物歧化酶和谷胱甘肽超氧化物歧化酶能够清除体内的各种过氧化物及超氧化物，如超氧阴离子自由基、过氧化氢、羟基及单线态氧等[16]。过氧化氢酶普遍存在于生物体内，为机体提供抗氧化防御和保护作用，可促使过氧化氢（H2O2）分解为分子氧和水，清除体内的H2O2，从而使细胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御体系的关键酶之一[17]。试验结果表明，添加0.07%的柠檬酸，血清总抗氧化能力有上升趋势；总超氧化物歧化酶含量有所增加、丙二醛含量下降，但均未达到显著水平，与罗玲等[18]试验结果中的变化趋势相一致；但本试验未达到显著性差异，可能是由于蛋鸡品种、试验鸡日龄和使用酸化剂种类及含量的不同导致的。辣木和柠檬酸联合使用可显著提高产蛋后期蛋鸡血清总超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量，推测可能与辣木富含的黄酮，多酚等多种具有抗氧化能力的活性成分有关[19]。4结论柠檬酸和辣木茎叶粉的联合使用有改善产蛋后期蛋白高度、哈夫单位、蛋壳厚度、蛋壳强度，减小蛋重的趋势，可以显著提高产蛋后期蛋鸡的血清抗氧化能力。