云岭红肉鸡是云南农业大学和昆明云岭广大种禽饲料有限公司合作培育的优质肉鸡配套系，是2018年云南省现代农业禽蛋产业技术体系主推肉鸡品种。该优质配套系商品肉鸡结合云南省家禽品种优势，既保留云南本地鸡味道鲜美的特点，又有生长速度快、抗病能力强等优点。由于云岭红肉鸡是新培育的肉鸡配套系，目前还没有对云岭红肉鸡营养需要量的研究。在肉仔鸡饲粮中，赖氨酸是肉鸡饲粮中的第2限制性氨基酸，也是理想氨基酸模式中的参比氨基酸。这种合成氨基酸价格便宜，在实际生产应用中容易获得[1-2]。本试验开展对云岭红肉鸡饲粮适宜赖氨酸需要的研究，旨在提高云岭红配套系商品肉鸡的生产性能，加快其在云南省各地区的推广应用，同时也为类似云岭红肉鸡的云南优质肉鸡的营养需要提供参考。1材料与方法1.1试验动物体重相近、健康的1日龄云岭红肉鸡180只。1.2试验日粮日粮组成及营养水平见表1。饲粮赖氨酸水平分别为0.85%、0.95%、1.05%、1.15%、1.25%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.009.T001表1日粮组成及营养水平项目0.85%组0.95%组1.05%组1.15%组1.25%组原料组成/%玉米58.0058.0058.0058.0058.00豆粕22.0022.0022.0022.0022.00玉米蛋白粉8.658.558.578.698.79小麦麸3.002.502.002.802.00次粉00.921.400.080.56石粉0.941.201.201.201.02磷酸氢钙2.361.881.891.882.21豆油3.683.473.383.673.63赖氨酸0.020.120.230.330.43蛋氨酸0.100.100.100.100.10食盐0.250.250.250.250.25预混料1.001.001.001.001.00合计100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/（MJ/kg）12.7612.7612.7612.7612.76粗蛋白质/%20.0020.0020.0020.0020.00钙/%0.900.900.900.900.90总磷/%0.750.670.670.670.78有效磷/%0.420.350.350.350.45赖氨酸/%0.850.951.051.151.25蛋氨酸/%0.450.450.450.450.45注：预混料为每千克日粮提供：VA 8 000 IU/kg、VB1 5 mg/kg、VB2 8 mg/kg、VB3 25 mg/kg、VB5 25 mg/kg、VB6 5 mg/kg、VB7 0.15 mg/kg、VB11 0.60 mg/kg、VB12 0.012 mg/kg、VD3 2 000 IU/kg、VE 30 IU/kg、VK3 1.8 IU/kg、锰80 mg/kg、铜8 mg/kg、铁80mg/kg、锌90mg/kg、硒0.15mg/kg、碘0.25 mg/kg。1.3试验设计试验采用单因素试验设计，将180只1日龄云岭红肉鸡分为5个处理组，分别饲喂表1中的5种饲粮，每个处理3个重复，每个重复12只鸡，28日龄试验结束。1.4饲养管理在云南农业大学试验鸡场进行，提前对鸡舍、水桶、料筒等进行消毒。试验鸡全程采用3层立体式笼养，每12只鸡一笼，保证鸡只自由采食和饮水。按照常规免疫程序对试验鸡进行防疫，定期消毒并清理粪便，每日监测肉鸡健康状况，对鸡生长情况进行记录，做好鸡舍保温、防暑、通风等措施。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能分别在试验鸡1日龄和28日龄记录下初重和末重，以重复为单位记录每日喂料量及剩料量，用于计算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。平均日采食量=采食量之和/(饲养天数×只数)(1)平均日增重=(期末体重-期初体重)/饲养天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.5.2氮代谢指标采用全收粪法，在试验鸡21日龄时收集其排泄物，早上8点准时开始收集，连续收集3 d。利用10%的盐酸固定排泄物中的氮。将收集好的排泄物烘干至恒重，粉碎后制成待测样品。通过测定饲粮和排泄物中的粗蛋白（CP）和氨基酸（AA），计算表观沉积氮（RN）、表观氮沉积率和氨基酸表观利用率。1.5.3血液生化指标第28日龄在每个重复内选取接近平均体重的一公一母2只鸡进行采血，血样3 500 r/min离心15 min，收集血清，置于-80 ℃保存待测。血清总蛋白采用考马斯亮蓝法测定；血清白蛋白采用溴甲酚绿法测定；血清总氨基酸采用茚三酮比色法测定；采用脲酶法测定血清尿素氮指标；采用赖氏法测定谷丙转氨酶和谷草转氨酶。1.5.4体成分指标每个重复选取接近平均体重的2只鸡（公、母各半），使用无血窒息法致死后，放入-20 ℃冰柜冷藏待测。取出冷冻后的试鸡，除去其消化道内容物后，将毛剪碎，使用菜刀将其屠体剁碎，充分混匀。将混匀后的样品放在烘箱中105 ℃灭菌15~20 min，再于65~70 ℃温度下干燥，经充分回潮后粉碎制备成风干样本。水分采用105 ℃烘箱干燥法测定；粗蛋白质采用凯氏定氮法测定；总能采用ZDHW-5000型微机全自动量热仪测定；粗脂肪采用乙醚浸提法测定；鸡体17种氨基酸采用柱前衍生法，采用LC-20AT高效液相色谱仪测定。1.6数据统计与分析数据采用Excel整理，使用SPSS 23.0进行单因素方差分析，Duncan氏法进行多重比较，结果以“平均值±标准差”差表示。P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1赖氨酸水平对云岭红肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，1.15%组末重显著高于0.85%组和1.25%组（P0.05）。赖氨酸水平为0.85%和1.25%组的全期增重显著低于1.15%组（P0.05）。1.15%组平均日增重与0.85%组、1.25%组差异显著（P0.05）。1.15%赖氨酸水平组料重比和1.05%组无显著差异（P0.05），但显著低于另外3组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.009.T002表2赖氨酸水平对云岭红肉鸡生长性能的影响项目0.85%组0.95%组1.05%组1.15%组1.25%组初重/g37.24±0.2337.40±0.2337.75±0.3237.54±0.7337.32±0.14末重/g666.00±33.70c706.30±30.24abc731.60±13.19ab739.21±26.74a679.40±33.36bc全期增重/g628.80±33.92c668.90±30.00abc693.80±12.99ab701.66±26.14a642.00±33.23bc平均日增重/[g/（只·d）]21.68±1.17c23.07±1.04abc23.93±0.45ab24.19±0.90a22.14±1.15bc平均日采食量/[g/（只·d）]40.32±2.0042.51±2.4640.58±0.4940.50±1.2839.67±0.95料重比1.86±0.06a1.84±0.05a1.70±0.02bc1.68±0.08c1.79±0.06ab注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P0.05），字母相同或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2赖氨酸水平对云岭红肉鸡氮平衡的影响（见表3）由表3可知，不同赖氨酸水平对云岭红肉鸡的氮摄入量、氮表观沉积量及氮表观沉积率均无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.009.T003表3赖氨酸水平对云岭红肉鸡氮平衡指标的影响项目0.85%组0.95%组1.05%组1.15%组1.25%组氮摄入量/[g/(只·d)]14.10±0.4314.71±0.9113.17±0.7313.63±0.7713.54±1.97氮表观沉积量/[g/(只·d)]9.12±0.809.70±0.618.69±0.538.83±0.579.21±1.82氮表观沉积率/%64.63±3.7765.96±1.9065.98±1.5964.79±1.8267.69±3.492.3赖氨酸水平对云岭红肉鸡氨基酸表观代谢率的影响（见表4）由表4可知，不同赖氨酸水平对丝氨酸、甘氨酸和组氨酸的表观代谢率影响显著（P0.05）。1.05%组丝氨酸表观代谢率显著低于0.85%组、0.95%组、1.25%组（P0.05），1.15%组与0.95%组差异显著（P0.05）。0.85%组甘氨酸表观代谢率显著低于1.25%组（P0.05）。1.15%组组氨酸表观代谢率显著低于0.95%和1.25%组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.009.T004表4赖氨酸水平对云岭红肉鸡氨基酸表观代谢率的影响氨基酸0.85%组0.95%组1.05%组1.15%组1.25%组天冬氨酸89.76±0.8991.04±1.3588.63±1.2789.13±0.5990.12±0.93谷氨酸94.15±0.5694.85±0.8193.44±0.8693.69±0.4194.21±0.45丝氨酸92.10±0.80ab92.74±1.00a90.21±0.05c91.23±0.56bc92.22±0.70ab甘氨酸83.59±1.68b85.06±0.66ab84.35±0.10ab85.12±0.49ab87.68±1.55a组氨酸92.92±0.65abc93.78±0.75a92.13±0.89bc92.02±0.48c93.43±0.75ab精氨酸91.12±1.2390.55±1.0990.55±1.0991.12±0.8191.14±1.06苏氨酸90.18±0.7991.33±1.2789.53±1.1289.20±0.5190.43±0.83丙氨酸93.45±0.4994.08±0.8793.30±0.7793.19±0.1294.15±0.53脯氨酸93.46±0.6293.16±1.1893.24±0.8292.49±0.2293.20±0.48酪氨酸94.56±0.5794.84±0.7393.73±0.6593.55±0.1394.17±0.47缬氨酸92.52±0.6792.84±0.9792.43±0.8592.97±0.6592.97±0.65蛋氨酸93.90±0.6693.53±1.0793.51±0.6692.61±0.3692.40±0.71半胱氨酸43.02±7.2730.47±9.6522.33±7.0125.74±8.0129.47±4.62异亮氨酸90.19±0.9790.36±1.4889.53±0.9189.52±0.2690.16±0.89苯丙氨酸94.64±0.5094.64±0.7894.84±0.5896.02±3.2794.84±0.45赖氨酸94.65±0.4994.74±0.7694.75±0.6096.02±3.2794.81±0.45%2.4赖氨酸水平对云岭红肉鸡血液生化指标的影响（见表5）由表5可知，不同赖氨酸水平对血清总氨基酸和血清尿素氮有显著影响（P0.05）。0.85%组、0.95%组血清总氨基酸显著高于1.05%组、1.15%组、1.25%组（P0.05）。0.85%组、0.95%组血清尿素氮显著低于1.15%组、1.25%组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.009.T005表5赖氨酸水平对云岭红肉鸡血液生化指标的影响项目0.85%组0.95%组1.05%组1.15%组1.25%组总蛋白/（g/L）30.42±9.8325.63±9.1124.70±2.4824.05±4.5520.69±3.44白蛋白/（g/L）20.73±5.1719.54±4.1821.66±3.0620.95±7.3125.37±0.59总氨基酸/（mmol/L）50.91±25.57a55.62±13.58a15.40±3.18b15.40±4.39b12.32±1.91b谷丙转氨酶/（IU/L）16.85±6.7920.46±9.7020.44±3.5214.88±11.6013.05±1.13谷草转氨酶/（IU/L）29.30±20.7424.58±16.0445.32±12.6546.22±29.7143.38±17.01尿素氮/（mg/L）11.63±1.54b11.64±1.97b17.74±6.55ab21.52±6.47a24.87±3.06a2.5赖氨酸水平对云岭红肉鸡体成分的影响（见表6）由表6可知，不同赖氨酸水平对云岭红肉鸡肌肉内的水分、粗脂肪、粗蛋白含量及总能无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.009.T006表6赖氨酸水平对云岭红肉鸡体成分的影响项目0.85%组0.95%组1.05%组1.15%组1.25%组水分/%62.85±2.9662.10±2.1365.28±2.6464.45±2.1164.01±0.64粗脂肪/%18.23±1.4318.06±1.3017.19±1.7417.25±0.6716.67±0.68粗蛋白/%18.42±2.3318.92±1.3916.67±0.7518.16±0.6217.50±0.82总能/(MJ/kg)9.57±0.138.87±1.119.94±0.809.34±0.799.38±0.593讨论3.1赖氨酸水平对云岭红肉鸡生长性能的影响赖氨酸对家禽的生长有重要作用，研究表明，在一定范围内适当提高饲粮赖氨酸水平，可以显著提高家禽增重和饲料转化效率[3]。试验结果表明，随着赖氨酸水平梯度的增大，云岭红肉鸡末重、全期增重及平均日增重均呈现先升高再降低的趋势，而料重比则呈现先下降再升高的趋势，与陈盼盼等[4]、陈玉芹等[5]结果一致，说明家禽饲粮赖氨酸水平不宜过低或过高。田大龙等[6]研究表明，赖氨酸水平过低导致饲粮氨基酸不平衡，肉鸡的平均日采食量、平均日增重和腹脂率也相应减少。同样，赖氨酸添加水平过高也会使各生长性能指标下降，不仅增加饲养成本，还不利于肉鸡的生长发育。郭茹静等[7]研究表明，赖氨酸缺乏可致肉鸡料重比极显著增高，赖氨酸过量则抑制肉鸡肠道蛋白质转运吸收，从而阻碍肉鸡生长发育。武书庚等[8]根据0~4周龄京红一号蛋雏鸡生长性能及胴体发育指标所拟合的二次曲线，得出其饲粮最佳赖氨酸水平为1.16%。本试验在赖氨酸水平为1.15%时末重、全期增重及平均日增重三个生长性能指标均为最佳，并在1.15%赖氨酸水平组获得最低料重比，这与武书庚得出的研究结果相近。3.2赖氨酸水平对云岭红肉鸡氮平衡的影响周桂莲等[9]研究表明，饲粮赖氨酸水平对1~21日龄黄羽肉鸡氮表观代谢率有显著影响，并在1.13%水平组氮表观代谢率最高。丁阳等[10]对31~43周龄新杨绿壳蛋鸡赖氨酸需要的研究结果表明，饲粮赖氨酸水平对沉积氮、氮的存留率都有显著影响，当赖氨酸水平为0.75%时氮的存留率最大。本试验研究表明，赖氨酸水平对云岭红肉鸡的氮摄入量、氮表观沉积量及氮表观沉积率影响均不显著，这与周桂莲、丁阳的研究结果相反，其原因可能是家禽的品种、生长阶段、研究方法等不同所致。梅凤艳等[11]7~12周龄武定鸡赖氨酸需要量的研究表明，赖氨酸水平对摄入氮、氮沉积量以及氮沉积率均无显著影响，与本试验研究结果一致。但在梅凤艳的报道中，随着赖氨酸水平上升，摄入氮、氮沉积以及氮沉积率均呈先上升后下降的趋势。本试验不呈现这样的变化规律，且在赖氨酸水平为0.95%时，各项氮代谢指标为最佳，这可能是家禽的品种、家禽生长阶段以及饲粮赖氨酸设置的梯度不同而造成的差异。3.3赖氨酸水平对云岭红肉鸡氨基酸表观代谢率的影响氨基酸是构成蛋白质的基本单位，组成蛋白质的各氨基酸只有按动物需求比例存在时，动物才能有效合成并利用蛋白质[12]。氨基酸之间存在协同、转化、替代和拮抗等关系，例如赖氨酸和精氨酸二者存在着拮抗的相互作用，过量赖氨酸可提高动物机体内精氨酸分解酶活性，影响精氨酸在尿素循环中的正常运作[13]。因此，饲粮中缺少任意一种氨基酸，会影响体蛋白的合成，还会使其他氨基酸的利用率也受到影响。根据王一冰等[14]、翟少伟等[15]研究报道，在一定范围内，肉鸡对蛋白质和氨基酸的利用率会随着饲粮赖氨酸水平升高而升高，但过高的赖氨酸水平反而会降低蛋白质和氨基酸利用率。本试验研究表明，就丝氨酸、组氨酸和甘氨酸而言，当赖氨酸水平为0.95%和1.25%时，氨基酸表观利用率显著高于其他水平组，其他氨基酸虽然不随赖氨酸水平升高而呈现显著的变化，但大多数也在0.95%和1.25%赖氨酸水平组有较高的氨基酸表观利用率，与赖氨酸水平对氮代谢的影响结果相符合。该结果与王一冰等[14]、翟少伟等[15]的报道不一致，可能是试验动物、试验阶段和研究方法以及赖氨酸设置水平不同等原因。饲粮赖氨酸水平虽然对肉鸡赖氨酸表观代谢率影响不显著，但在1.15%赖氨酸水平组获得最大值96.02%，说明在该水平下云岭红肉鸡对饲粮赖氨酸的消化吸收最好，增重达到最大。3.4赖氨酸水平对云岭红肉鸡血液生化指标的影响血清尿素氮是蛋白质代谢的主要终产物，其浓度高低反映了饲粮氨基酸平衡以及动物机体内蛋白质的分解代谢速率。瞿明仁[16]研究表明，血清尿素氮浓度与泰和乌骨鸡生长速度呈显著负相关，当生长速度达到最佳时，血清尿素氮浓度最低。血清尿素氮浓度低，说明饲粮中各氨基酸较平衡，动物对蛋白质合成利用良好，可作为确定家禽氨基酸需要量的一个衡量指标[17]。卢永红等[18]在研究蛋鸡育雏期赖氨酸需要量时，发现血清尿素氮含量会随赖氨酸水平的提升而升高，并在赖氨酸水平为1.1%时达到最高；若以体增重和料重比作为评价指标，则赖氨酸水平为0.9%时较为适宜。该结果也说明更好地平衡饲粮氨基酸，肉鸡在1.1%赖氨酸水平下可进一步提高其生长潜能。本试验在赖氨酸水平升高至1.25%时，血清尿素氮含量最高，说明高赖氨酸水平导致饲粮氨基酸平衡受到影响，使氨基酸代谢率相应降低。试验表明，饲粮赖氨酸水平为0.95%时，血清总氨基酸达到最高，说明在这一水平下肉鸡对氨基酸的代谢最佳。3.5赖氨酸对肉鸡体成分的影响赖氨酸作为生长性氨基酸，在家禽体内起到参与粗蛋白沉积和粗脂肪代谢的重要作用，是家禽生长发育中不可或缺的必需氨基酸。本试验研究表明，不同赖氨酸水平对0~4周龄云岭红肉鸡的机体水分、粗脂肪、粗蛋白、总能等体成分指标含量没有显著影响，该结果与梅凤艳[11]和马竞[19]的研究结果相一致。本研究显示，随着赖氨酸添加水平的升高，云岭红肉鸡屠体粗脂肪含量之间虽无显著差异，但却呈现下降的趋势，这与田大龙等[6]的研究结果不一致。田大龙等[6]研究表明，当赖氨酸含量为1.00%时，肉仔鸡脂肪沉积量最佳，当赖氨酸含量为0.60%和1.40%时，肝脏中负责脂肪合成代谢的相关基因表达受到影响，导致肉仔鸡脂肪沉积量降低。分析二者结果不相同的原因可能有试验对象的不同，赖氨酸水平梯度设置不同或者饲料能量、蛋白水平的不同等。4结论本试验结果表明，以生长性能、氨基酸表观代谢率为评价指标，0~4周龄云岭红肉鸡适宜赖氨酸需要量为1.15%。