以“休闲马术表演、竞技比赛和马术教学和体验”为目前的运动马产业正在我国兴起。2019年马术俱乐部比2018年增长19.87%,达到2 160家,运动马匹数为23 655匹,其中进口运动马匹占81.20%。许多学者对进口马匹与国产马匹运动性能力、疾病防治的差异进行大量的研究,同时对运动马福利高度关注对运动马抗生素使用进行严格控制。中药以无公害、无残留、绿色环保等优点,在动物的营养、疾病预防与治疗中发挥着重要作用。充分利用我国中草药资源和中医医药技术,开发既能保证运动马匹的运动能力不降低,又能达到提高运动马自身免疫力中药添加剂已成为马术产业专家重点关注和研究热点。本试验通过选择党参、黄芪、茯苓、白术、山楂等中草药,按中兽医“益气健脾”理论配制成党参复方添加剂,利用马场马术马匹作为试验动物,探讨党参复方添加剂对运动马血清生化指标的影响,旨在通过中药添加剂提高运动马的运动能力和免疫水平。1材料与方法1.1试验添加剂试验中药添加剂均购自北京同仁堂,由黄芪、党参、白术、茯苓、山楂组成,经过60~65 ℃烘干,粉碎,过0.42 mm筛,按等比例混合。1.2仪器和试剂BS-400全自动生化仪,由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。1.3试验动物和试验条件60匹运动马由日发牧马堂马术有限公司提供。运动马干草由通辽市科尔沁区信达草业种植专业合作社提供。1.4试验日粮运动马基础日粮由北京红朗姆科技有限公司提供。基础日粮营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.011.T001表1基础日粮营养水平成分粗蛋白质粗灰分水分钙总磷赖氨酸氯化钠含量≥9.0≤10.0≤14.00.5~1.5≥0.4≥0.30.5~3.0%1.5试验方法根据俱乐部马匹实际情况,在饲养的71匹健康马场马术运动马中选择安达卢西亚24匹、Pony马8匹、阿拉伯马8匹、纯血马8匹、温血马4匹、半血马8匹,分别随机分为4组,再分别随机合并组成空白对照组(基础精料)、低剂量组(基础精料+0.5%党参复方添加剂)、中剂量组(基础精料+1.0%党参复方添加剂)、高剂量组(基础精料+1.5%党参复方添加剂)。饲养管理:每天每匹马12.5 kg干草,分4次饲喂;基础精料3 kg,分3次饲喂。饲喂时间为5:30、11:00、18:00、21:30,其中21:30只饲喂干草。每次饲喂按照先干草后精料进行,马匹自由饮水。试验采血:分别在第0、60 d的5:30饲喂前静脉采血各10 mL,制备运动马血清,测定其血清生化指标。1.6检测指标测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、葡萄糖(GLU)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLOB)、尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、肌酐(CREA)等生化指标,并计算血清白蛋白/球蛋白(A/G)。1.7数据统计与分析试验结果采用SPSS 13.0软件进行单因素方差(ANOVA)分析,并进行LSD法组间比较,以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1党参复方添加剂对运动马血清酶指标的影响(见表2)由表2可知,试验中对照组、低剂量组、中剂量组运动马血清的谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量之间差异不显著(P0.05),但高剂量组与其他相比显著提高(P0.05);低剂量组和中剂量组运动马血清的碱性磷酸酶含量显著低于对照组和高剂量组(P0.05),但低剂量组和中剂量组、对照组和高剂量组之间差异不显著(P0.05);对照组、低剂量组、中剂量组运动马血清的乳酸脱氢酶含量随剂量增加有所降低,但差异不显著(P0.05),高剂量组的乳酸脱氢酶含量显著低于对照、低、中剂量各组(P0.05);运动马血清的肌酸激酶含量随着剂量增加而下降,但对照组与低剂量组之间差异不显著(P0.05),高剂量组显著低于中剂量组、对照组和低剂量组(P0.05),中剂量组显著低于对照组和低剂量组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.011.T002表2党参复方添加剂对运动马血清酶指标的影响 (n=10)组别谷丙转氨酶谷草转氨酶碱性磷酸酶乳酸脱氢酶肌酸激酶对照组8.40±0.24a273.65±1.66a105.97±3.98b228.21±24.32b151.65±19.95c低剂量组8.15±0.32a275.03±1.12a103.60±3.42a226.24±23.14b150.34±25.84c中剂量组8.26±0.57a276.26±2.35a101.10±5.20a225.54±20.40b147.60±20.56b高剂量组8.59±1.54b278.16±3.53b106.58±9.95b204.02±35.62a141.13±10.08a注:同列数据肩标字母不同表示差异不显著(P>0.05),字母相同或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。U/L2.2党参复方添加剂对运动马物质代谢指标影响(见表3)由表3可知,低剂量、中剂量和高剂量组运动马血清葡萄糖含量显著高于对照组(P0.05),但3组之间差异不显著(P0.05)。中剂量组和高剂量组运动马血清的总蛋白均显著高于对照组和低剂量组(P0.05),且中剂量组显著低于高剂量(P0.05)。运动马血清甘油三酯随剂量增加有所下降,但差异不显著(P0.05)。运动马血清胆固醇含量随剂量增加有所下降,与高剂量相比,对照组、低剂量组和中剂量组均显著低于高剂量组(P0.05),但3组之间无显著差异(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.011.T003表3党参复方添加剂对运动马物质代谢指标的影响 (n=10)组别葡萄糖/(mmol/L)总蛋白/(g/L)尿素氮/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)胆固醇/(mmol/L)对照组4.61±0.43a60.34±0.25a5.07±0.43a0.43±0.09a2.39±0.48a低剂量组5.24±0.63b60.95±0.70a5.10±0.52a0.41±0.09a2.38±0.32a中剂量组5.11±0.44b63.08±0.59b5.32±0.60b0.37±0.08a2.33±0.31a高剂量组5.15±0.48b65.23±3.42c5.43±0.92b0.36±0.13a2.09±0.41b2.3党参复方添加剂对运动马血清免疫生化指标的影响(见表4)由表4可知,中、高剂量的党参复方添加剂能够提高运动马血清白蛋白和球蛋白的含量,降低白蛋白/球蛋白值;添加党参复方添加剂对白蛋白含量的影响作用较小,主要提高球蛋白含量,与对照组相比较,低、中、高剂量组血清白蛋白分别增加0.23%、2.34%、3.90%,而血清球蛋白则分别增加1.84%、6.1%、11.37%,且中、高剂量组与对照组、低剂量组之间存在显著差异(P0.05);白蛋白/球蛋白值变化与球蛋白含量变化相似,显示其主要作用是通过提高血清中的球蛋白含量,降低运动马血清的白蛋白/球蛋白值,提高运动马免疫力。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.03.011.T004表4党参复方添加剂对运动马血清免疫生化指标及变化率的影响(n=10)组别白蛋白球蛋白白蛋白/球蛋白含量/(g/L)变化率/%含量/(g/L)变化率/%比值变化率/%对照组30.43±0.44a—29.59±0.34a—1.03±1.03a—低剂量组30.50±0.19a0.23±0.03a30.14±0.70a1.84±0.05a1.01±0.03a-1.96±0.05a中剂量组31.15±0.18b2.34±0.01b32.35±0.52b6.12±0.03b0.96±0.02b-7.04±0.03b高剂量组31.64±3.05b3.90±0.02b34.10±1.59c11.37±0.08c0.93±0.10c-10.20±0.01c3讨论谷丙转氨酶是肝功能是否正常的检测指标之一。谷草转氨酶在骨骼肌、肝细胞和心肌中活性较高,其活性反映蛋白质代谢状况。肌酸激酶在骨骼肌和平滑肌等含量较高,间接反映肌细胞对运动的适应。乳酸脱氢酶在动物体内分布广泛,是糖无氧酵解的关键酶之一,也是糖由无氧分解转到有氧分解的限速酶,能够将丙酮酸生成乳酸,其变化主要反应糖酵解代谢供能能力。碱性磷酸酶是动物消化代谢关键性酶之一。试验结果表明,低、中剂量组的碱性磷酸酶含量显著低于对照组、高剂量组,血清肌酸激酶含量由随着剂量增加而下降,说明该添加剂有对肌细胞有一定的保护作用。血糖是反映运动马糖代谢的重要指标。血清中总蛋白包括白蛋白和球蛋白。白蛋白是既是营养物质的载体,又是维持血浆渗透压重要物质;而球蛋白主要由浆细胞和淋巴细胞合成,是重要的免疫指标之一[1]。尿素氮则反映蛋白质的利用率,其含量与蛋白质的利用率呈显著的负相关。血清中的甘油三酯、胆固醇是机体脂类代谢的产物。试验结果表明,在运动马日粮中添加1.0%和1.5%的党参复方添加剂能够显著提高运动马体内血清葡萄糖含量和总蛋白含量,促进体内蛋白质的利用能力;对脂类代谢的影响程度相对较低,甘油三酯和胆固醇含量有下降趋势,在添加1.5%的党参复方添加剂时,血清胆固醇含量出现显著降低。刘正中等[2]采用添加8%党参复方添加剂的日粮饲喂小鼠28 d时,发现小鼠血浆中球蛋白、白蛋白和总蛋白分别增加37.54%、4.44%和24.17%。陈丽雄等[3]认为,黄芪多糖显著提高繁殖猕猴血浆血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量。王延伟等[4]认为,血清球蛋白水平升高的主要原因是血清免疫球蛋白水平的升高。本试验中,与对照组相比,低、中、高组的白蛋白增加分别为0.23%、2.34%、3.90%;而球蛋白增加分别为1.84%、6.12%、11.37%,说明运动马血清球蛋白增加是其血清蛋白增高的主要原因,与王延伟等[4]结果一致。舒迎霜等[5]认为,黄芪多糖能显著提高犬血清中IgG、IgM和IFN-γ水平,促进犬小肠IgA mRNA和SIgA蛋白表达,提高机体免疫力。郭建来等[6]认为,添加复方党参到1.0%,显著提高仔猪的血清IgA含量、血清IgG含量有所增加。陈丽玲等[7]选用白术茯苓多糖复方添加剂,可使仔猪血清IgG含量提高30%以上。刘国林[8]采用黄芪和山楂等比例配合饲喂围产期奶牛21 d,其血清球蛋白提高49.71%,白蛋白/球蛋白值下降15.22%。本试验所用的党参复方添加剂对运动马的血清球蛋白分类的研究还有待进一步深入。4结论本试验结果表明,在运动马日粮中添加1.0%的党参复方添加剂能够提高运动马血清葡萄糖、总蛋白和球蛋白含量,提高运动马机体免疫力。
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