保育猪肠道发育不健全，易受断奶、饲料更换或环境变化等应激影响，导致机体免疫力低下，进而引起腹泻、水肿等肠道疾病发生，重者导致死亡，从而影响养殖的经济效益[1]。饲料可以通过发酵工艺降低饲料中的抗营养因子，提升营养成分含量，起到调节动物肠道微生态平衡、促进动物生长、提高机体免疫力等功效，在健康养殖中具有重要作用[2]。随着我国畜牧业的迅速发展，饲料资源紧缺的问题日益突出，粮食加工副产物的不合理利用造成了资源浪费。因此，使用农业副产物代替常规饲料、实现资源的高值化利用成为饲料行业健康发展的趋势[3]。玉米作为我国的主要粮食作物之一，在加工业中的消耗量占比逐年上升，也带来了大量的加工副产物，包括玉米皮、玉米蛋白粉、玉米胚芽粕、玉米浆等。玉米加工副产物含有丰富的营养物质，通过微生物发酵可提升玉米副产物的饲用价值。研究表明，日粮中添加发酵玉米副产物对畜禽生产具有改善作用。Liu等[4]研究发现，日粮中添加发酵玉米皮对育肥猪的生长性能不产生影响。明雷等[5]研究发现，玉米皮发酵饲料能够促进生猪生长，增强机体免疫力，改善猪肉品质。Wang等[6]和魏炳栋等[7]研究发现，发酵玉米蛋白粉能够改善肉仔鸡的生产性能。日粮中添加5%的发酵玉米蛋白粉能够改善犊牛生长性能，对瘤胃发育具有促进作用[8-9]。周贤文等[10]研究发现，日粮中添加发酵玉米胚芽粕可提高生长猪生长性能，促进肠道发育。因此，发酵玉米副产物对缓解我国饲料资源短缺、促进仔猪养殖业的健康发展具有重要意义。本试验采用植物乳杆菌、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌混合发酵玉米及其深加工副产物，研究发酵饲料对保育猪生长性能、粪便微生物数量及血浆生化和抗氧化指标的影响，为玉米副产品型发酵饲料在仔猪健康养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计及日粮选择192头健康、初重（22.45±0.47）kg的商品保育猪，随机分为6组，即为对照组（基础日粮）、试验Ⅰ组（90%基础日粮+10%发酵饲料A）、试验Ⅱ组（90%基础日粮+10%发酵饲料B）、试验Ⅲ组（90%基础日粮+10%发酵饲料C）、试验Ⅳ组（90%基础日粮+10%发酵饲料D）和试验Ⅴ组（85%基础日粮+15%发酵饲料D），每组16个重复，每个重复2头猪。发酵饲料A、B、C、D由黑龙江金象生化有限责任公司配制，发酵饲料组成见表1。基础日粮参照NRC（2012）仔猪营养需要标准配制，基础日粮组成及营养水平见表2。预试期3 d，正式试验期28 d。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T001表1发酵饲料组成项目发酵饲料A发酵饲料B发酵饲料C发酵饲料D合计1 013.51 014.21 013.51 014.2玉米360360360360豆粕252252268268玉米胚芽粕120120100100喷浆玉米皮404000水188188240240糖蜜40403232石粉10101010添加剂2.32.32.32.3复合菌0.71.40.71.4酶制剂0.50.50.50.5注：添加剂主要成分为碳酸氢钠1 kg、硅藻土0.8 kg、氯化钙0.5 kg。kg10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T002表2基础日粮组成及营养水平（风干水平）原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米61.55消化能/(MJ/kg)13.57豆粕22.15粗蛋白质/%18.80鱼粉3.00钙/%0.86全脂大豆5.00总磷/%0.65大豆油4.00赖氨酸/%1.28石粉0.90蛋氨酸/%0.37磷酸氢钙1.45食盐0.35预混料1.00L-赖氨酸0.50DL-蛋氨酸0.10注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 11 023 IU、VD3 2 756 IU、VE 66 IU、VK 4.4 mg、VB1 1.1 mg、VB2 9.9 mg、VB6 2.2 mg、VB12 0.1 mg、烟酸55 mg、VB5 55 mg、叶酸1.7 mg、生物素0.4 mg、Fe 105 mg、Cu 6 mg、Mn 28.62 mg、Zn 110.06 mg、Se 0.3 mg、I 0.14 mg。2.营养水平均为计算值。1.2饲养管理饲养试验于在牡丹江宁安市嘉润农牧科技有限公司进行。试验猪自由采食及饮水，每天饲喂2次，环境控制保持一致。发酵饲料当天混拌入全价料中，避免饲料过夜引起全价饲料酸败变质，具体饲喂量根据保育猪实际采食情况进行混拌。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能于试验开始和结束时对每组保育猪空腹称重，试验期间每日记录每个重复猪的喂料量和剩料量，试验结束后统计数据，计算平均日增重、平均日采食量和料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总耗料量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2粪便评分每天早晨清扫粪便前观察仔猪排便情况并记录打分，评分标准见表3。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T003表3保育猪粪便评分标准评分评分标准0没有粪便1干燥圆筒状粪便2介于干燥和正常粪便之间3正常粪便，外观柔软且坚韧有型4外观有型但不坚实5稀粪，无固定形状且有液体1.3.3粪便微生物数量采用平板计数法检测粪便微生物数量[11]。于试验第28 d每组随机选取10头猪采集新鲜粪样，-20 ℃保存。解冻粪样后，称取1.0 g样品用生理盐水进行梯度稀释，选取适宜梯度的稀释液于选择培养基中进行菌落计数。大肠杆菌采用麦康凯培养基37 ℃培养24 h，乳酸菌采用MRS培养基37 ℃培养36 h，微生物数量以lgCFU/g表示。1.3.4血浆生化及抗氧化指标每组随机选择10头仔猪，于试验第28 d采集血液样品，于前腔静脉采血10 mL于肝素钠抗凝管中，3 000 r/min离心15 min分离血浆，-20 ℃保存。采用迈瑞BS-420型全自动生化分析仪测定血浆生化及抗氧化指标，血浆中总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、葡萄糖（GLU）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）。采用中生北控生物科技股份有限公司提供的试剂盒进行检测。总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性采用北京华英生物技术研究所提供的试剂盒进行检测，样品处理方法按照相关试剂盒说明书进行。1.4数据统计与分析数据采用Excel 2019软件进行初步整理，SPSS 25.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同类型发酵饲料对保育猪生长性能的影响（见表4）由表4可知，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组仔猪的末重和平均日采食量显著高于试验Ⅳ组（P0.05），试验Ⅳ组仔猪的末重、平均日采食量显著高于试验Ⅴ组和对照组（P0.05）。各试验组仔猪的平均日增重显著高于对照组（P0.05），料重比显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T004表4不同类型发酵饲料对保育猪生长性能的影响组别初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量/[g/(头·d)]料重比对照组22.22±0.3733.00±1.45c385.00±4.37f797.99±7.30c2.07±0.02a试验Ⅰ组22.00±0.2237.30±2.14a546.43±3.69a860.49±9.21a1.57±0.04e试验Ⅱ组22.72±0.7237.10±3.12a513.57±4.45b853.79±7.24a1.66±0.02d试验Ⅲ组23.28±0.1637.10±1.78a493.57±5.71c859.38±8.19a1.74±0.05c试验Ⅳ组22.16±0.4335.70±1.03b483.57±3.20d831.47±6.10b1.72±0.03c试验Ⅴ组22.34±0.2134.30±2.17c427.14±4.29e803.57±7.57c1.88±0.02b注：同列数据肩标不同字母不同表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。2.2不同类型发酵饲料对保育猪粪便评分的影响（见图1）由图1可知，试验各组仔猪的粪便评分均低于对照组，其中试验Ⅰ组仔猪的粪便评分最低，显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.F001图1不同类型发酵饲料对保育猪粪便评分的影响2.3不同类型发酵饲料对保育猪粪便微生物数量的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，各试验组仔猪粪便中乳酸菌的数量均显著提高（P0.05）。试验Ⅰ组仔猪粪便中大肠杆菌数量最少，显著低于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T005表5不同类型发酵饲料对保育猪粪便微生物数量的影响组别乳酸菌大肠杆菌对照组5.99±0.16c7.99±0.11a试验Ⅰ组6.55±0.07b6.58±0.08d试验Ⅱ组7.13±0.07a6.98±0.35c试验Ⅲ组6.03±0.02b7.01±0.20c试验Ⅳ组7.10±0.41a7.56±0.06b试验Ⅴ组7.39±0.13a7.86±0.31algCFU/g2.4不同类型发酵饲料对保育猪血浆生化指标的影响（见表6）由表6可知，试验Ⅰ组仔猪血浆TP含量、ALT活性、ALP活性显著高于对照组（P0.05），血浆GLU含量显著高于其他组（P0.05）。各试验组仔猪血浆BUN含量显著低于对照组（P0.05）。各组仔猪血浆ALB、TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量及AST活性差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T006表6不同类型发酵饲料对保育猪血浆生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)BUN/(mmol/L)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)GLU/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)LDL-C/(mmol/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)ALP/(U/L)对照组46.62±4.18c23.93±2.016.77±0.66a2.61±0.140.88±0.054.97±0.40b0.67±0.041.52±0.0537.57±6.5755.49±2.00b137.30±16.64c试验Ⅰ组65.16±3.33a26.72±1.523.43±0.48b2.66±0.190.86±0.067.94±0.60a0.70±0.081.64±0.1442.16±5.1592.73±12.43a282.83±24.50a试验Ⅱ组60.56±1.55ab26.44±0.833.48±0.24b2.80±0.330.97±0.225.14±0.67b0.73±0.111.75±0.1853.66±5.9165.41±7.88ab242.50±52.31ab试验Ⅲ组60.12±0.92ab26.39±1.984.11±0.26b2.88±0.141.14±0.135.16±0.66b0.70±0.072.05±0.1645.25±9.1967.91±7.50ab198.15±20.07abc试验Ⅳ组53.94±5.84abc26.37±0.424.16±0.53b2.58±0.080.78±0.055.39±0.78b0.67±0.101.74±0.2445.64±7.8177.79±5.20ab168.79±29.45bc试验Ⅴ组47.63±5.99bc25.15±1.804.95±0.61b2.40±0.140.76±0.065.98±0.13b0.68±0.081.67±0.1237.61±5.7575.83±12.24ab165.30±18.42bc2.5不同类型发酵饲料对保育猪血浆抗氧化指标的影响（见表7）由表7可知，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组、试验Ⅳ组仔猪血浆中T-AOC、SOD均显著高于对照组（P0.05），试验Ⅰ组、试验Ⅴ组仔猪血浆GSH-Px活性显著高于对照组（P0.05），试验Ⅰ组仔猪血浆MDA含量显著低于对照组（P0.05）。各组仔猪血浆CAT活性差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.005.T007表7不同类型发酵饲料对保育猪血浆抗氧化指标的影响组别T-AOC/(mmol/L)MDA/(μmol/L)SOD/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)CAT/(U/mL)对照组9.02±0.30e4.32±0.25a79.53±2.02b379.56±8.27c35.61±3.40试验Ⅰ组12.06±0.22a3.24±0.10b103.50±4.08a420.62±8.02a42.00±4.28试验Ⅱ组11.59±0.36ab3.99±0.34ab83.09±1.55b388.35±12.46bc36.15±1.28试验Ⅲ组10.97±0.23bc3.78±0.20ab85.00±10.60b398.99±8.66abc38.60±2.61试验Ⅳ组10.58±0.45c3.49±0.61ab86.22±6.17b402.63±8.95abc39.61±0.65试验Ⅴ组9.53±0.08de3.31±0.21ab93.39±2.90ab413.05±7.80ab41.01±4.173讨论3.1不同类型发酵饲料对保育猪生长性能和粪便评分的影响仔猪的早期断奶腹泻会严重影响仔猪生长性能，造成养殖业经济损失。仔猪腹泻的发病机制复杂，可由大肠杆菌感染所致，也可由断奶后日粮更换、环境变化等非传染性应激因素导致仔猪肠道功能紊乱，进而引发腹泻[12-13]。发酵饲料是一种利用单一或复合益生菌（乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌等）在适当条件下对饲料原料或全价料进行发酵得到的饲料，发酵饲料能够降低饲料抗营养因子，促进饲料中营养物质的消化吸收，有效调节动物肠道菌群平衡[14]。何谦等[15]和钟启平[16]给仔猪饲喂微生物发酵全价饲料，李泳宁等[17]在仔猪日粮中添加1%发酵饲料，胡新旭等[18]在仔猪日粮中替代20%发酵饲料，结果均发现，发酵饲料可显著提高仔猪平均日增重，降低料重比和腹泻率。本研究虽未对仔猪进行腹泻率的评价，但采用了粪便评分直接反映仔猪的腹泻情况。本研究采用的评分标准中，评分值越接近3，表明越接近正常粪便；越接近5，表明腹泻越严重。本试验结果表明，各试验组仔猪的平均日增重均高于对照组，料重比和粪便评分均低于对照组，与上述研究结果一致。本试验中，试验Ⅰ组仔猪的平均日增重最高，料重比和粪便评分最低，粪便评分值最接近3，表明基础日粮中替代10%的发酵饲料A更利于提高仔猪的生长性能，改善肠道健康。3.2不同类型发酵饲料对保育猪粪便微生物数量的影响正常情况下，动物肠道内的微生物区系处于动态平衡状态，新生仔猪因其肠道菌群发育不完全，易受母体或外界环境等应激因素的影响而导致肠道微生物菌群失调，致使致病菌大量繁殖，进而导致动物机体功能紊乱，出现腹泻、炎症等现象。有研究表明，仔猪肠道有益菌群的建立对其健康生长具有关键作用[19]。微生态制剂在仔猪日粮中的应用对于纠正仔猪肠道微生态的失衡具有良好效果，用于发酵饲料的益生菌在发酵过程中产生大量有机酸，通过消化道定植于肠道，为动物肠道创造厌氧和酸性环境，降低病原菌在肠道内的生长，增强其在肠道内的定植能力，从而改善仔猪肠道菌群结构及多样性[20]。粪便微生物中益生菌和致病菌数量可以从侧面反映仔猪肠道的菌群健康程度。张铮等[21]在仔猪日粮中替代20%的发酵饲料，结果发现，发酵饲料可显著提高仔猪粪便中乳酸菌的数量，降低大肠杆菌的数量，康丽慧等[22]和林标声等[23]的研究结果也与之相同。本试验结果表明，各试验组仔猪粪便中的乳酸菌数量均较对照组提高，大肠杆菌数量均较对照组降低，与上述研究结果一致。其中，试验Ⅱ组、试验Ⅳ组和试验Ⅴ组乳酸菌数量显著高于其他组，可能与发酵饲料中的复合菌剂含量不同有关；试验Ⅰ组的大肠杆菌数量最少，且显著低于其他各组，结合粪便评分数据可知，基础日粮中替代10%的发酵饲料A更有利于调节仔猪肠道菌群平衡，促进仔猪健康生长。3.3不同类型发酵饲料对保育猪血浆生化指标的影响血液生化指标可以反映动物机体的代谢情况，TP、ALB、BUN、ALT和AST等是反映机体氮代谢的重要指标。TP和ALB反映机体对蛋白质的吸收和合成情况，TP含量越高，动物机体蛋白质合成能力越强；BUN是蛋白质和氨基酸的代谢终产物，BUN含量与动物机体蛋白质合成代谢呈显著负相关[24]；ALT是在非必需氨基酸合成中起重要作用的转氨酶。谭占坤等[25]和黄杏秀等[26]研究发现，发酵饲料能够显著增加仔猪血液中TP含量，显著降低BUN含量。本研究结果表明，饲喂发酵饲料可显著提高仔猪血浆TP含量和ALT活性，降低BUN含量，表明饲喂发酵饲料能够提升仔猪对蛋白质的消化吸收，促进非必需氨基酸合成。GLU是反映机体糖代谢的重要指标，本研究发现，饲喂发酵饲料可以显著增加仔猪血浆中GLU含量，表明饲喂发酵饲料可提升仔猪对GLU的利用和转化。ALP可以反映动物机体生长和代谢强弱，其活性高低与平均日增重呈正相关[27]。魏金涛等[28]研究发现，饲喂发酵饲料仔猪血液中ALP活性显著升高。本研究表明，仔猪饲喂发酵饲料可显著升高血浆ALP活性，且血浆中ALP活性与平均日增重呈正相关，表明饲喂发酵饲料对提高仔猪的生长性能具有促进作用。3.4不同类型发酵饲料对保育猪血浆抗氧化指标的影响断奶应激是仔猪保育阶段的常见问题，会导致仔猪抗氧化能力下降、生长缓慢、肠道损伤及菌群紊乱，进一步加剧肠道疾病的发生[29-30]。T-AOC、SOD、MDA和GSH-Px等是反映机体抗氧化能力的常见指标。T-AOC可以反映机体的总抗氧化能力；SOD和GSH-Px作为动物体内的一类抗氧化酶，可有效反映机体清除自由基的能力；MDA作为脂质过氧化反应的最终产物可有效反映动物体的细胞受损程度[31]。发酵饲料中的益生菌能够有效抑制病原菌在动物肠道中定植，调节肠道菌群平衡，进而抑制炎症发生，提升机体的抗氧化能力。王娟娟等[32]研究发现，发酵饲料能够显著增加仔猪血液T-AOC、SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量。王俊等[33]研究表明，仔猪饲喂发酵饲料后血液中T-AOC和SOD活性显著升高。本研究结果表明，饲喂发酵饲料的仔猪血浆中T-AOC、SOD和GSH-Px活性高于对照组，MDA含量低于对照组，表明发酵饲料有利于提升仔猪的抗氧化能力。4结论本研究结果表明，饲喂发酵饲料可以提高保育猪的生长性能，调节肠道生态环境，改善部分血浆生化参数，提高抗氧化能力。本试验条件下，发酵饲料A替代10%的基础日粮对仔猪的饲喂效果较好。