随着我国肉鸡养殖业集约化程度不断提高，饲料资源短缺和排泄物对环境的污染成为制约我国肉鸡养殖业健康发展的两大重要问题。我国蛋白质原料资源匮乏，主要蛋白质饲料依靠进口，导致饲养成本居高不下[1]，低蛋白日粮逐渐引起养殖者的重视[2]。随着饲料禁抗政策的逐步实施，开发高效、绿色、安全的饲料添加剂已成为未来研究的重要目标[3]。低蛋白日粮能够有效节约蛋白资源，提高蛋白利用率，减少饲料成本和环境污染[4]。但直接减少日粮中的蛋白质含量会在一定程度上降低肉鸡的生长性能[5-7]。日粮所含有的抗营养因子会限制肉鸡对营养物质的高效利用[8]，因此需要添加氨基酸和酶制剂弥补蛋白水平降低导致的生长性能的下降[9-11]。研究表明，饲料中添加酶制剂可提高畜禽的饲料转化率，有效消除饲料抗营养因子的负面作用，降低饲养成本，减少环境污染[12]。日粮中添加枯草芽孢杆菌可以提高肉仔鸡饲料转化率和平均日增重，改善肉质[13]。计伟等[14]研究发现，日粮中添加植物乳杆菌能够有效提高仔猪机体的免疫功能。在低蛋白日粮中添加3%酶解蛋白肽可使猪达到正常蛋白水平的生产效果，提高了日粮氨基酸的消化吸收[15]。酶制剂、益生菌、抗菌肽是三类常用的饲料添加剂，关于三者在肉鸡低蛋白日粮中复配应用效果的研究较少。因此，本试验旨在研究低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡生长性能、屠宰性能和排泄物中臭味物质的影响，为酶菌肽复合制剂在肉鸡饲料生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料哈伯德肉仔鸡购自河北玖兴农牧有限公司。试验采用的酶菌肽复合制剂由中科康源（唐山）生物技术有限公司提供，包括植物乳杆菌（活菌数≥1.0×108 CFU/g）、枯草芽孢杆菌（活菌数≥1.0×108 CFU/g）、酵母菌（活菌数≥1.0×108 CFU/g）、纤维素酶（酶活≥2 000 IU/g）、胰蛋白酶（酶活性≥2 500 IU/g）、植酸酶（酶活性≥1 600 IU/g）、抗菌肽（主要成分为天蚕素抗菌肽，含量≥25万IU/g）。1.2试验设计选取390只1日龄健康、体重相近的哈伯德肉仔鸡，随机分为5组，每组6个重复，每个重复13只鸡。在限制性氨基酸（赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸）水平一致、能量一致情况下，正常蛋白组（NP组）肉仔鸡饲喂基础日粮（前期、中期、后期粗蛋白水平分别为22%、20%、19%），低蛋白组（LP组）肉仔鸡饲喂低蛋白氨基酸平衡日粮（前期、中期、后期粗蛋白水平分别为19%、17%、16%），试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.2%、0.4%、0.6%的酶菌肽复合制剂。试验期42 d。1.3试验日粮试验采用三阶段饲养（1~14、15~35、36~42 d），根据鸡饲养标准（NY/T 33—2004）和生产实践配制肉鸡基础日粮，试验日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.007.T001表1试验日粮组成及营养水平（风干基础）项目1~14日龄15~35日龄36~42日龄NP组LP组NP组LP组NP组LP组原料组成/%玉米56.8563.1658.9168.0161.3969.96豆粕28.0026.6026.8021.0024.0019.00棉粕3.001.403.001.503.001.50蛋白粉2.8001.6001.600羽毛粉1.0000000豆油3.203.104.803.905.504.60石粉0.900.900.800.800.730.73磷酸氢钙2.202.202.102.101.851.85预混料0.230.230.230.230.230.23地克珠利0.050.050.050.0500植酸酶0.040.040.040.040.040.04氯化胆碱0.070.070.070.070.070.07食盐0.250.250.250.250.250.25赖氨酸0.540.630.470.660.440.58蛋氨酸0.190.240.210.260.190.24苏氨酸0.240.330.190.290.180.24色氨酸0.020.040.010.050.040.04半胱氨酸0.290.350.250.300.270.27异亮氨酸0.060.190.090.220.110.20缬氨酸0.070.220.130.270.110.20合计100.00100.00100.00100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.5112.5112.9012.9013.1813.18粗蛋白质/%22.0019.0020.0317.0318.9916.00钙/%0.900.900.840.840.750.75总磷/%0.710.710.680.680.660.66有效磷/%0.460.460.430.430.390.39赖氨酸/%1.301.301.201.201.111.11蛋氨酸＋半胱氨酸/%0.490.490.480.480.450.45半胱氨酸/%0.970.970.910.910.860.86苏氨酸/%0.880.880.780.780.740.74色氨酸/%0.210.210.200.200.180.18异亮氨酸/%0.820.820.770.770.750.75缬氨酸/%0.940.940.920.920.850.85注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 12 500 IU、VD3 2 500 IU、VE 15 IU、VK3 2.65 mg、VB1 2 mg、VB2 6 mg、VB12 0.025 mg、吡哆醇8 mg、生物素0.35 mg、叶酸1.25 mg、泛酸钙12 mg、烟酸50 mg、Cu 8 mg、Zn 75 mg、Fe 80 mg、Mn 100 mg、Se 0.15 mg、I 0.35 mg。2.营养水平中粗蛋白、钙、总磷为实测值，其余均为计算值。1.4饲养管理试验采用全封闭式鸡舍笼养方式，肉鸡自由采食和饮水，各组间重复采用随机排列。按商品代肉鸡饲养管理手册进行日常管理和免疫，粉料采用食槽投喂，每日记录饲料消耗量和鸡死亡及淘汰数，记录试验鸡疫苗接种、疾病发生及治疗情况。1.5测定指标及方法1.5.1生长性能试验第42 d，肉鸡空腹称重，分别计算每个重复肉鸡的平均日增重、平均日采食量、料重比和成活率。根据市场原料和肉鸡价格估算增重成本和利润，计算欧洲效益指数。平均日增重＝(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量＝(投料量-结料量)/(试验天数×试验鸡总数)(2)料重比＝试验期总耗料量/试验期总增重(3)成活率=成活的数量/总数量×100%(4)欧洲效益指数=(体重×成活率)/(料重比×出栏日龄)×10 000(5)1.5.2屠宰性能于试验42 d，每重复各取1只鸡，颈静脉放血处死，禁食12 h，测定宰前活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、屠宰率、半净膛率和全净膛率。屠宰率=屠体重/活体重×100％(6)半净膛率=半净膛重/活体重×100％(7)全净膛率=全净膛重/活体重×100％(8)1.5.3粪中氨气含量分别在试验第14、35、42 d，按重复收集新鲜粪样，剔除毛屑杂物，充分混匀。准确称取100 g新鲜鸡粪，装入500 mL磨口玻璃瓶中，使用胶塞密封，室温放置3 d，任其发酵。氨气采用纳氏试剂比色法进行测定，大气采样器抽取100 mL气体，速度小于0.1 L/min，0.005 mol/L硫酸溶液进行吸收，使用721型可见分光光度计进行比色。1.5.4吲哚及粪臭素试验第42 d，收集每个重复肉鸡的新鲜粪样，剔除毛屑杂物，充分混匀，采用二甲氨基苯甲醛比色法测定吲哚及粪臭素含量。1.5.5经济效益根据成活率、鸡总重量、总耗料量、饲料单价等计算经济效益。活鸡收购价格按照8.2元/kg计算，NP组基础日粮价格按照4元/kg计算，LP组日粮价格按照3.8元/kg计算。利润=(鸡总重量×活鸡价格)-(总耗料量×饲料单价)(9)1.6数据统计与分析试验数据采用Excel 2019软件进行整理，SPSS 19.0统计软件进行分析。为检验低蛋白日粮对肉鸡的影响，对LP组与NP组进行独立样本t检验分析；LP组、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组之间采用单因素方差分析，差异显著时采用Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，各试验组肉鸡1、14、35、42 d体重差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.007.T002表2低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡生长性能的影响项目NP组LP组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组P值t检验方差分析1~14 d初重/(g/只)58.19±8.1556.46±7.9558.70±5.6957.84±5.4556.52±5.640.720.91末重/(g/只)337.76±17.28322.70±18.95329.78±9.94333.92±15.37335.76±13.490.180.45平均日采食量/[g/(只·d)]29.14±0.2928.66±0.5129.27±0.5229.07±0.4329.00±0.410.070.19平均日增重/[g/(只·d)]20.92±1.2919.85±0.4420.32±0.7720.67±1.3420.67±0.810.080.36料重比1.41±0.041.45±0.011.44±0.041.41±0.081.41±0.060.100.5115~35 d末重/(g/只)1 602.96±62.761 547.40±55.061 560.27±48.751 563.38±32.161 587.85±52.430.130.54平均日采食量/[g/(只·d)]99.11±1.0898.90±0.7597.51±1.5497.60±1.3798.28±1.330.710.24平均日增重/[g/(只·d)]61.90±2.8459.28±3.9160.94±1.5061.02±0.4961.66±1.220.210.31料重比1.60±0.061.67±0.111.60±0.051.60±0.021.59±0.040.200.1336~42 d末重/(g/只)2 248.43±99.882 151.03±66.552 173.90±128.132 181.23±86.782 247.13±49.690.130.36平均日采食量/[g/(只·d)]170.92±13.75172.42±1.48170.41±28.07166.58±18.68174.67±18.840.840.92平均日增重/[g/(只·d)]93.94±8.4285.00±9.4787.66±12.6288.27±8.9096.56±4.990.160.19料重比1.82±0.112.05±0.211.95±0.191.90±0.191.80±0.140.060.251~42 d平均日采食量/[g/(只·d)]87.75±2.2787.65±0.0086.91±4.4086.25±3.0987.91±2.610.930.81平均日增重/[g/(只·d)]53.58±2.9350.93±2.0151.85±2.2852.11±1.3653.81±0.860.160.08料重比1.64±0.071.72±0.071.68±0.031.66±0.051.63±0.040.100.06与NP组相比，LP组肉鸡1~14、15~35、36~42 d平均日采食量、平均日增重和料重比差异均不显著（P0.05）；1~14 d的平均日采食量和平均日增重均具有一定程度降低趋势（P0.05）；36~42 d料重比具有一定的升高趋势（P0.05）。LP组、Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组肉鸡1~14、15~35、36~42 d的平均日采食量、平均日增重和料重比差异不显著（P0.05）。LP组、Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组肉鸡1~42 d平均日增重随酶菌肽复合制剂添加量升高呈升高趋势（P0.05），料重比呈降低趋势（P0.05）。2.2低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，各组肉鸡宰前活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、屠宰率、半净膛率和全净膛率差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.007.T003表3低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡屠宰性能的影响项目宰前活重/kg屠体重/kg半净膛重/kg全净膛重/kg屠宰率/%半净膛率/%全净膛率/%NP组2.21±0.132.01±0.131.88±0.131.55±0.1391.30±1.2985.01±1.7970.34±3.89LP组2.16±0.111.94±0.111.82±0.101.53±0.0989.82±0.7884.55±0.4370.95±0.26Ⅰ组2.02±0.111.86±0.101.73±0.071.45±0.0592.00±1.0585.75±0.8871.74±1.27Ⅱ组2.16±0.101.98±0.101.86±0.101.60±0.1091.34±0.6786.00±0.7074.21±1.96Ⅲ组2.17±0.122.00±0.091.87±0.101.59±0.0491.86±1.1485.92±0.5273.17±2.41P值t检验0.660.500.620.830.170.680.80方差分析0.360.420.340.110.070.080.162.3低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡排泄物中氨气、吲哚及粪臭素的影响（见表4）由表4可知，与NP组相比，LP组肉鸡14、35、42 d排泄物中氨气及42 d吲哚、粪臭素含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.007.T004表4低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡排泄物中氨气、吲哚及粪臭素的影响项目14 d氨气含量/(mg/m3)35 d氨气含量/(mg/m3)42 d氨气含量/(mg/m3)42 d吲哚含量/(ng/g)42 d粪臭素含量/(ng/g)NP组16.63±1.07a159.28±9.42a184.22±1.03a188.41±10.05a99.22±5.29aLP组12.52±0.59bx115.81±14.80b138.66±17.73b92.81±3.74b48.87±1.97bⅠ组8.10±0.60y142.36±18.08145.44±7.3892.46±4.6948.69±2.47Ⅱ组7.41±0.14y137.44±19.15150.94±3.0395.95±1.9250.53±1.01Ⅲ组2.66±0.50z136.86±16.47146.54±5.1093.16±3.2549.06±1.71P值t检验0.010.010.010.010.01方差分析0.010.310.540.630.63注：同列数据肩标a、b表示NP组和LP组差异显著（P0.05），肩标x、y、z表示LP组、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组间差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。与LP组相比，Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组14 d肉鸡排泄物中氨气含量显著降低（P0.05）。2.4低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡经济效益的影响（见表5）由表5可知，综合欧洲效益指数和利润分析，试验Ⅲ组肉鸡的养殖经济效益最好，利润比LP组提高3.09%，比NP组提高8.98%；欧洲效益指数比LP组提高15.47%，比NP组提高5.63%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.05.007.T005表5低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡经济效益的影响组别鸡总数/只成活率/%鸡总重量/kg总耗料量/kg饲料单价/（元/kg）利润/（元/只）欧洲效益指数NP组7898.72176.50311.874.00199.80328.51LP组7896.15169.34309.833.80211.21300.52Ⅰ组7896.15169.85288.014.00240.74308.61Ⅱ组7896.15172.55283.584.20223.87317.29Ⅲ组7898.72185.30295.844.40217.76347.013讨论3.1低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡生长性能的影响关于日粮中单独添加酶制剂、益生菌、抗菌肽对肉鸡生产性能的影响已有较多的报道[12-15]。有研究表明，酶制剂可通过增强肉鸡消化能力，提高饲料利用率，进而提高肉仔鸡生长性能，降低料重比[16]。段俊辉[17]比较了不同配比组成的复合酶制剂在肉鸡中的应用效果，发现肉鸡的平均体重和日增重显著增高，料重比下降。游金明等[18]研究发现，日粮中添加复合蛋白酶可显著提高肉鸡平均日增重。单春桥等[19]发现，酶菌混合制剂能够显著提高蛋鸡产蛋率，增加蛋重，降低料蛋比。单独饲喂0.8%大豆肽和100 mg/kg枯草芽孢杆菌均可提高肉鸡的平均日增重，提高生长性能[20-21]。日粮蛋白水平降低0.58%后，添加蛋白酶可将肉鸡生长性能恢复至正常日粮水平[22]。本研究与上述结果相似，与低蛋白组相比，低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂具有降低肉鸡料重比的趋势。由此表明，在低蛋白日粮添加酶菌肽复合制剂可在一定程度上改善肉鸡的生长性能。但也有研究发现，在降低2%蛋白的日粮中添加压缩蛋白酶可使肉鸡的采食量和饲料转化率显著降低[23]。造成差异原因可能是日粮组成不同，独立添加蛋白酶对其活性的影响与利用程度有关。3.2低蛋白日粮添加酶菌肽复合制剂对肉鸡屠宰性能的影响屠宰性能常用于衡量不同饲料添加剂对肉鸡产肉性能的影响，能够直观且有效地评价禽肉产量。研究发现，蛋白酶、益生菌和抗菌肽单独应用于饲料均能够发挥很好的效果，日粮中添加蛋白酶可以补充内源消化酶的不足，并与内源蛋白酶协同作用提高饲料利用率，增加蛋白沉积。肉鸡生长后期日粮中添加蛋白酶可显著降低腹脂率[24]。益生菌通过调节肉鸡的免疫反应和肠道消化功能，进而改善鸡屠体品质。饲喂100 g/t丁酸梭菌可显著降低肉鸡腹脂率，提高屠宰性能[25]。抗菌肽能够影响脂质代谢，调节营养物质在肌肉沉积，进而提高产肉性能。苗旭等[26]研究表明，饲喂抗菌肽能够提高AA肉鸡的屠宰性能。郭忠欣等[27]发现，日粮中添加0.05%、0.10%抗菌肽均可显著提高肉鸡的屠宰率、半净膛率、腿肌率。宋琼莉等[28]发现，与对照组相比，饲料中添加抗菌肽及益生菌复合添加剂可在一定程度上提高青脚麻鸡全净膛率、胸肌率和腿肌率，但未到显著水平。也有试验表明，当蛋白酶制剂单独应用于常规日粮时，对肉鸡屠宰性能无显著影响[29-30]。许程等[31]将蛋白酶应用于樱桃谷肉鸭日粮也得到相似结论。王秀梅等[32]研究发现，饲料中添加蛋白酶并降低蛋白水平对肉鸡屠宰性能无显著影响。日粮添加丁酸梭菌对仔鹅屠宰性能改善作用不明显[33]。复合益生菌对北京油鸡的屠宰性能无显著影响[34]。本试验发现，在低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡屠宰率、半净膛率和全净膛率无显著影响，与上述结果一致。不同饲料添加剂对动物屠宰性能的作用效果不同，可能是由于试验动物种类、品种、试验条件、日粮组成、添加剂种类及剂量等方面存在差异。3.3低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂对肉鸡排泄物中臭味物质的影响日粮中的蛋白质被畜禽摄入后，一部分被吸收利用，多余的蛋白质被分解为氨基酸，进而降解为粪臭素、吲哚、氨气等臭味物质，会造成环境污染。而酶菌肽制剂在一定程度上能够降低蛋白质的分解代谢速度，提高含氮物质利用率，减少排出量。林厦菁等[1]发现，在添加除苯丙氨酸外的7种必需氨基酸的情况下，日粮蛋白水平降低1%~3%能够显著降低试验鸡粪便氮含量。仔猪日粮中添加寡糖可减少粪臭素产生，并且增加代谢以减少粪臭素的沉积和排放[35]。吕毅等[36]研究表明，日粮中添加蛋白酶能够降低肉仔鸡尿酸含量，表明蛋白质合成代谢增强，蛋白质利用率提高，氮排放减少。在肉鸡日粮中添加复合酶制剂，可以显著降低肉仔鸡粪便氨气的产生[37]。杨桂芹等[38]研究发现，氨基酸平衡日粮降低蛋白含量可显著减少粪便中臭味物质的排放。在不影响肉仔鸡生长性能的前提下，补充氨基酸的低蛋白日粮能够有效减少粪便氮含量[39-40]。Hemandez等[41]发现，氨基酸平衡日粮减少了36~78日龄肉鸡19%粪氮含量排放。Laura等[42]研究发现，低蛋白日粮在保证生长性能的前提下有助于降低氮排泄。本试验发现，低蛋白日粮中添加酶菌肽复合制剂能够在一定程度上减少肉鸡排泄物中臭味物质含量，与上述结果一致。酶制剂能够增加肉鸡消化道内酶的活性，促进机体的肠道健康，刺激肠道绒毛的生长和有益菌的增殖，增强肉鸡对营养物质消化吸收能力；而益生菌能够改善肠道的消化功能，增强肠道代谢，提高肉鸡对营养物质的消化率；肽制剂能够提高蛋白沉积和饲料转化率，三者协同可使肉鸡摄入的蛋白得到有效利用，减少了排泄物中的臭味物质。4结论本试验条件下，肉鸡低蛋白日粮中添加适量酶菌肽复合制剂可在一定程度上降低料重比，提高经济效益，降低排泄物中氨气的排泄量，减少环境污染。综合考虑，低蛋白日粮中酶菌肽复合制剂的适宜添加剂量为0.6%。