随着奶山羊养殖规模扩大,人们对奶山羊乳品质的关注度也日益提升。饲养环境、管理水平、饲料营养、乳房炎、兽药残留等因素均会影响乳品质,给养殖户造成经济损失,同时市场也存在很大的安全隐患。无抗养殖使中草药在动物养殖中的应用成为研究热点[1]。中草药含有多种生物活性物质,在动物精料补充料中添加单一或复合中草药能够提高饲料利用率和产奶量,提高动物产品质量,从而提高养殖业的经济效益[2-3];但在改善奶山羊乳品质、血清生化指标方面的应用研究很少。本试验以补中益气汤为基础方,去升麻、柴胡,加上山药配制为新的复方制剂。选择以补气健脾为主、养血强肾为辅的中药进行合理配制。产后奶山羊体虚、气血不足,应使用补气活血药物,不宜使用具有辛散作用的药物。柴胡、升麻为辛凉解表药,具有辛散的作用。因此本方法将这两种药物去除,加上具有补气作用的山药,饲喂产后的奶山羊,测定分析山羊乳品质、血清生化指标,探究复方中药的安全性与有效性,为复方中草药制剂在奶山羊养殖生产中的研究和推广应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料及试验动物选取黄芪30 g、党参30 g、白术15 g、生甘草20 g、当归30 g、陈皮5 g、山药20 g等中药饮片,按比例混合粉碎,过120目筛,密封保存。试验动物由云南省昆明市某奶羊场提供。1.2试验设计与饲养管理选取健康、年龄、胎次相近的圭山羊18只,随机分为2组,每组3个重复,每个重复3只羊。对照组为精料补充料,试验组在精料补充料中添加3%的复方中药制剂(经过前期体外细胞试验,筛选出最佳添加量为3%)。精料补充料组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.002.T001表1精料补充料组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米55.00干物质/%89.00麦麸10.00粗蛋白质/%17.50混合糠7.00粗纤维/%7.00浓缩料28.00粗灰分/%10.00钙/%1.07总磷/%0.70代谢能/(MJ/kg)4.00注:1.浓缩饲料原料组成:大豆粕、棉籽粕、小麦及其副产品、玉米副产品、维生素、矿物元素及其络(螯)合物、氨基酸、酶制剂、抗氧化剂等,购自昆明田园饲料有限公司。2.营养水平均为计算值。试验羊为舍饲饲养,母羊产仔当天开始饲喂含有复方中药制剂的日粮,8:00和15:00各饲喂1次,每日6:00、18:00挤奶。试验期8 d。1.3主要仪器兽用全自动血液细胞分析仪(迈瑞医疗国际股份有限公司)、兽用全自动血液生化分析仪(天亮医疗器械有限公司)、自动乳品分析仪MIA-LW(辅光精密仪器(上海)有限公司)。1.4测定指标及方法1.4.1临床症状监测试验期间,每天观察记录动物的采食量、精神状况、体温、粪便情况;乳房外观是否有红、肿、发热的现象;羔羊的健康状况。1.4.2产乳量每天准确记录每只羊的产乳量,计算平均日产乳量。平均日产乳量=产奶总量/试验天数(1)1.4.3乳品质投药前后,采用自动乳品分析仪分别测定乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、乳干物质率、非乳干物质率。测定乳汁体细胞数,计算体细胞减少率。体细胞减少率=(投药前体细胞数-投药后体细胞数)/投药前体细胞数×100%(2)1.4.4血液理化指标投药前后,分别采集母羊颈静脉血,每头羊采集3 mL不抗凝血,2 mL抗凝血。抗凝血采用全自动血液细胞分析仪进行临床生理指标检测。不抗凝血采用离心机4 000 r/min离心10 min分离血清,所得血清采用全自动血液生化分析仪进行血液清生化指标的检测。1.5数据统计与分析数据采用Excel软件处理,参照生物统计教材[4],SPSS 23.0软件对数据进行方差分析,进行独立样本t检验。结果以“平均值±标准差”表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊临床监测结果的影响试验组母羊恶露产后在3 d排净,体温在38.6~39.1 ℃之间,采食量正常,精神状态良好,羔羊在试验期间无腹泻现象。对照组母羊恶露在产后10 d排净,有1只母羊出现乳房红肿,判定患临床型乳房炎,体温为41.1 ℃,其余体温在38.6~40.1 ℃之间,母羊采食量下降,有20%的羔羊出现腹泻症状。2.2补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊产乳量的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,试验组奶山羊饲喂补中益气汤加减复方中药制剂后,平均日产乳量显著提高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.002.T002表2补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊产乳量的影响项目投药前投药第7 d后试验组对照组试验组对照组平均日产乳量1.32±0.161.33±0.121.61±0.20*1.32±0.14注:同行数据肩标“*”表示与对照组相比差异显著(P0.05),无肩标表示差异不显著(P0.05);下表同。kg/(头·d)2.3补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊乳品质的影响2.3.1补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊体细胞数的影响(见表3)由表3可知,投药7 d后,试验组体细胞数极显著低于对照组(P0.01),试验组体细胞转阴率100%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.002.T003表3补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊体细胞数的影响项目投药前投药第7 d后试验组对照组试验组对照组体细胞数550.63±45.76505.67±32.5242.00±5.40**494.23±29.54注:“**”表示差异极显著(P0.01)。万个/mL2.3.2补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊乳品质的影响(见表4)由表4可知,试验组乳脂率极显著高于对照组(P0.01),乳蛋白率显著高于对照组(P0.05)。试验组乳蛋白率、乳脂率、非乳脂固体均高于国家生乳标准。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.002.T004表4补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊乳品质的影响项目试验组对照组国家生乳标准[5]乳脂率/%5.28±0.30**3.68±0.213.1乳蛋白率/%5.05±0.08*3.82±0.472.8乳糖/%4.80±1.535.29±0.11—固体总物质/%13.99±1.7913.98±1.58—非乳脂固体/%11.28±0.1710.17±1.248.1尿素氮/(mg/L)394.00±80.30488.30±52.80—注:“—”表示无参考值;下表同。2.3.3补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊血常规指标的影响(见表5)由表5可知,试验组白细胞含量接近正常水平,中性粒细胞数在正常范围内,且均显著低于对照组(P0.05);其他血常规指标均在正常范围内。对照组白细胞、中性粒细胞数超出参考范围。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.002.T005表5补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊血常规指标的影响项目试验组对照组参考值[6]白细胞/(109/L)20.23±4.55*32.00±7.558.44~18.86淋巴细胞/(109/L)9.17±2.7512.90±2.943.71~13.31单核细胞/(109/L)1.10±0.361.30±0.360~5.00中性粒细胞/(109/L)9.97±1.81*17.40±2.299.50~13.80淋巴细胞百分比/%45.93±3.2340.30±1.3547.01~71.40单核细胞百分比/%5.33±2.313.90±0.200~5.00中性粒细胞百分比/%49.73±2.20*54.37±3.1739.60~51.00血红蛋白/(g/L)99.00±6.6098.00±2.6087.40~97.60血细胞比容/%29.90±2.9731.47±1.8030.00~38.00红细胞/(1012/L)16.12±0.8016.72±1.659.18~17.702.3.4补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊血清生化指标的影响(见表6)由表6可知,试验组与对照组奶山羊的各项血清生化指标差异均不显著(P0.05),但数值均在参考范围内。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.002.T006表6补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊血清生化指标的影响项目试验组对照组参考值[7]总蛋白/(g/L)69.00±2.0067.00±3.6064.00~70.00白蛋白/(g/L)35.70±3.1036.00±2.6027.00~39.00球蛋白/(g/L)34.70±2.3031.00±6.3027.00~41.00尿素氮/(mmol/L)5.97±0.585.63±1.493.55~7.10血糖/(mmol/L)3.20±0.082.70±0.142.77~4.17淀粉酶/(U/L)44.00±2.6558.00±29.81—肌酐/(mg/L)7.20±0.307.00±0.606.80~15.30碱性磷酸酶/(U/L)41.00±0.0047.00±11.2721.00~283.00谷丙转氨酶/(U/L)19.67±0.5820.67±1.1515.30~52.30谷草转氨酶/(U/L)72.67±3.5169.00±1.0066.00~230.00总胆红素/(mg/L)4.00±0.004.00±0.000~17.003讨论3.1补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊临床监测结果的影响奶山羊正常体温范围是38.0~40.5 ℃[7]。研究发现,患有隐性乳房炎的奶牛体温会有所偏高,但在奶山羊隐性乳房炎中未见体温升高的研究[8]。本试验中,患有隐性乳房炎的奶山羊体温并未升高,仅对照组1头患临床型乳房炎奶山羊体温高达41.1 ℃,其余体温在38.6~40.1 ℃之间;试验组奶山羊体温在38.6~39.1 ℃之间,与奶牛隐性乳房炎研究结果不同,原因需要进一步深入探究。母羊分娩后胎盘中的血液、坏死黏膜等组织经产道排出称为恶露。山羊恶露排出时间约为2周[9]。肖毅等[10]研究表明,恶露排出时间缩短有利于促进子宫黏膜的修复,降低子宫内膜炎的发生概率,提高动物机体的生理功能。本试验中,试验组产后3 d恶露排净,而对照组产后10 d左右才将恶露排尽。原因是该复方中药制剂具有补气活血的作用,促进体内污浊物排出,增强机体抵抗力。可促进机体修复受损组织,缩短恶露排出时间,提高动物机体的抵抗力。3.2补中益气汤加减复方中药制剂奶山羊产乳量的影响产乳量能够直接反映奶山羊产奶性能。本试验结果表明,在圭山山羊日粮中添加复方中药制剂可以显著提高奶山羊产乳量。刘爱霞[11]采用黄芪、王不留行、当归、白术、枸杞子、党参等中药组成的复方中药添加剂,试验组奶山羊日产乳量较用药前增加0.38 kg,并存在后续效应。刘观忠等[12]在基础日粮中添加党参、白术、黄芪、王不留行、茯苓等中药复方制剂,发现可有效缓解奶牛泌乳中期产乳量的下降,作用时间随着剂量浓度的增加而延长,且停药后仍具有明显的后续效应。魏彤等[13]研究发现,在基础日粮中添加黄芪多糖可以提高奶山羊产乳量,但是差异并不显著。上述研究与本试验研究结果一致,均表明中草药添加剂可以提高泌乳量,且可能存在后续效应,后续可对后效应作用时长做进一步探究。3.3补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊体细胞数的影响隐性乳房炎无明显的外观特征,需要借助实验室检查,其主要方法有体细胞数计数法、细菌计数法[14]。李卫娟等[15]对云南奶山羊体细胞数进行测定,其判定该羊是否患有隐性乳房炎的标准为:乳汁中体细胞数在50万个/mL以下为阴性,50~100万个/mL为可疑,100万个/mL以上为阳性。本试验中,对照组投药前山羊乳汁中体细胞数为505.67万个/mL,用药第7 d后,乳汁中体细胞数494.23万个/mL,依旧处于隐性乳房炎的范围。试验组投药前乳汁中体细胞数为550.63万个/mL,用药第7 d后,体细胞数下降到42万个/mL,在健康范围内。梁涛等[16]、霍萍丽等[17]、李静辉等[2]研究发现,中草药添加剂可显著降低隐性乳房炎和慢性乳房炎奶牛乳汁中体细胞的数量。本试验采用的复方中药中黄芪具有类肾上腺皮质素作用,可以促进淋巴细胞转化以及增强巨噬细胞吞噬功能;党参中的生物活性物质能够有效抑制丙酮酸脱氢酶(PDH)的活性,削弱PDH对腺苷-3',5'-环化一磷酸(cAMP)和环磷酸鸟苷酸(cGMP)的降解,从而提高机体免疫力,增强抗病能力,有效降低乳汁中体细胞数。3.4补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊乳品质的影响已有研究表明,中草药富含蛋白质、氨基酸、脂肪、维生素、微量元素等多种营养物质,能够补充机体营养、提高动物食欲,促进动物消化吸收,增强机体代谢[12]。中草药含有多种生物活性物质,能够促进乳腺上皮细胞增殖、加强乳腺代谢活动、提高产乳量和乳脂率[18]。乳脂率、乳蛋白率是衡量反刍动物生产性能的重要指标之一,平均乳脂肪率为3.1%,乳蛋白率为2.8%[19]。本试验中,试验组乳脂率为5.28%、乳蛋白率高达5.05%,显著高于对照组乳脂率为2.35%、乳蛋白率为3.82%。同时也明显高于其他关于奶山羊乳品质的一些研究结果。凌浩等[20]采用青贮桑叶替代青贮玉米饲喂奶山羊,对其乳品质进行分析,发现乳蛋白率为3.92%。王云冲等[21]对云南地区奶山羊乳品质研究结果显示,努比奶山羊乳蛋白率为4.19%。研究结果存在一定差异,可能与中草药添加剂药物组方、添加剂量、应用阶段和使用目的等多种因素有关。本试验在精料补充料中添加3%复方中药饲喂奶山羊,显著提高了鲜羊奶中乳蛋白率、乳脂率。3.5补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊血常规指标的影响补气活血的复方中药可提高动物机体的免疫力,具有抗炎的作用[22]。当奶山羊乳腺组织受到物理、化学、微生物等刺激时,会引起炎性反应[23]。同时,炎症阶段,损伤乳区血管进一步扩张,通透性增强,血液组胺、白三烯和凝固因子等炎性介质增多,加剧炎症反应,造成血液中性粒细胞发生显著改变[24]。白细胞能够依赖自身的游走性、趋化性和吞噬作用实现对机体的保护作用。中性粒细胞具有很强的吞噬作用,能够杀灭局部入侵的微生物,阻止其扩散[25]。本试验对照组白细胞、中性粒细胞数量均高于正常值;试验组白细胞含量接近正常水平,中性粒细胞含量在正常范围内,均显著低于对照组,表明乳房炎是一个全身性的病理过程,不仅乳腺组织遭到破坏,血液成分也发生了变化,该复方中药不仅可促进奶山羊乳腺损伤修复,同时改善了血液参数指标。3.6补中益气汤加减复方中药制剂对奶山羊血清生化的影响血清生化指标的水平能够反映动物机体营养物质代谢状况,能够间接了解动物的机体健康状况,可以在一定程度上反映动物的生产性能[25]。机体营养物质需要借助血液的运输,首先经过门静脉进入肝脏,再经肝脏代谢转化和重分配后从肝静脉流到乳腺参与乳汁的合成,肝脏功能对乳汁的合成具有巨大的影响。碱性磷酸酶存在于肝脏、骨骼、小肠等器官中,能够调控钙磷代谢及肠道功能,在碱性条件下能够将磷酸酯水解为磷酸的酶类[26]。谷丙转氨酶主要分布在肝脏中,参与机体内转氨基作用,当发生肝炎、胆管疾病或其他原因引起的肝损伤时,其活性增高。本试验中,对照组和试验组的总胆红素含量及碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性均处于正常水平,且两组间差异不显著。以上结果表明,圭山羊能够适应精料补充料中添加该复方中药制剂的饲喂模式,该复方中药制剂不会对羊产生营养应激等不良反应[27],对肝脏无毒副作用,可作为饲料添加剂使用。4结论本试验结果表明,在精料补充料中添加3%的补中益气汤加减复方中药制剂可有效预防奶山羊隐性乳房炎,增强奶山羊产后自体修复能力,在一定程度上改善奶山羊的乳品质。

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