壳寡糖是目前唯一含正电荷的碱性氨基寡糖，由β-1,4-糖苷键聚合而成的低聚糖[1]。壳寡糖可通过几丁质分解获得，几丁质在植物中的含量仅次于纤维，因而壳寡糖资源极为丰富[2]。在动物饲料中补充壳寡糖可有效提高动物生产性能，改善肠道微生物结构[3-4]，促进动物免疫器官发育[5]，壳聚糖在饲料生产中具有较高的应用研究价值。仔猪断奶后，由于环境和日粮的变化极易导致消化不良、腹泻[6]，从而引起生长性能下降，甚至死亡[7]。本研究在断奶仔猪日粮中补充不同水平壳寡糖，研究其对仔猪生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响，为壳寡糖在仔猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料壳寡糖购自青岛博智汇力生物科技有限公司，有效含量为85%。1.2试验设计与饲养管理试验场地由河南鑫兴养猪专业合作社提供。选择26日龄、健康且体重接近的“杜×长×大”三元断奶仔猪240头，随机分为4组，每组3个重复，每个重复20头猪。对照组为基础日粮，试验组分别在基础日粮中添加15、30、45 mg/kg壳寡糖。预试期7 d，正式试验期30 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.005.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米62.11消化能/(MJ/kg)13.86豆粕16.50粗蛋白/%18.46鱼粉7.25赖氨酸/%1.39棕榈油粉2.82蛋氨酸/%0.44大豆油1.76钙/%0.87麸皮5.20磷/%0.57膳食纤维0.65食盐0.36L-赖氨酸0.39DL-蛋氨酸0.29石粉0.54磷酸氢钙1.13预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 2 150 IU、VD3 205 IU、VE 25 IU、VK3 3.28 mg、VB2 3.46 mg、VB6 1.57 mg、生物素0.39 mg、Cu 5.82 mg、Fe 77.36 mg、Zn 54.12 mg、Mn 6.84 mg、I 0.25 mg、Se 0.30 mg。2.营养水平中消化能为计算值，其余均为实测值。试验前，对试验场地进行熏蒸消毒，7 d后将试验猪转入猪舍。试验期间保证猪自由采食和饮水，日常保健和免疫程序按照养殖场规定正常进行。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验第1、30 d对仔猪进行空腹称重，每天7：00统计各重复的饲喂量与饲料剩余量，及时记录试验猪腹泻情况和死亡情况，计算试验期间仔猪的平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率和成活率。平均日采食量=全期采食量/(试验天数×仔猪数量)(1)平均日增重=全期增重/(试验天数×仔猪数量)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=(腹泻仔猪头数×腹泻天数)/(仔猪头数×试验天数)]×100%(4)成活率=(试验初仔猪数-死亡数)/试验初仔猪数量(5)1.3.2营养物质表观消化率试验结束前3 d，各重复随机选择2头仔猪，8：00、14：00、18：00收集粪样，3个时间点粪样混合保存于-20 ℃冰箱。粪样在65 ℃烘箱中烘干至恒重，粉碎，过40目筛片冷藏保存。饲料样品按照同样的方法进行处理后冷藏。检测干物质、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、钙和磷的表观消化率。营养物质表观消化率=(饲料养分量-粪中养分量)/饲料养分量×100%(6)1.3.3血清生化指标各重复随机选择2头仔猪，通过前腔静脉采血法收集血样约5 mL，3 000 r/min离心10 min，取上清液于-20 ℃冰箱中保存。测定血清中免疫指标和抗氧化指标。试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。免疫指标：IgG、IgA、IgM、IFN-γ、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-2（IL-2）及白细胞介素-6（IL-6）。抗氧化指标：谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 2019软件进行单因素方差分析，LSD法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同水平壳寡糖对仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，30 mg/kg组、45 mg/kg组仔猪末重和平均日增重显著升高（P0.05），料重比显著降低（P0.05）；各试验组仔猪腹泻率显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.005.T002表2不同水平壳寡糖对仔猪生长性能的影响项目对照组15 mg/kg组30 mg/kg组45 mg/kg组初重/kg7.70±0.137.69±0.087.68±0.077.71±0.12末重/kg16.26±0.28c16.49±0.21bc16.87±0.19ab17.25±0.24a平均日增重/[(g/(头·d)]285.46±12.49b293.17±10.37ab306.49±11.54a317.84±9.65a平均日采食量/[(g/(头·d)]468.15±11.73469.07±14.89478.12±15.43492.65±16.35料重比1.64±0.03a1.60±0.03a1.56±0.01b1.55±0.01b腹泻率/%15.48±3.48a8.45±2.67b7.58±1.91b6.28±1.47b成活率/%100.00100.00100.00100.00注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4与此同。2.2不同水平壳寡糖对仔猪营养物质表观消化率的影响（见表3）由表3可知，30 mg/kg组、45 mg/kg组仔猪的干物质表观消化率显著高于对照组（P0.05）；各试验组的钙和磷表观消化率均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.005.T003表3不同水平壳寡糖对仔猪营养物质表观消化率的影响组别干物质粗蛋白粗纤维粗脂肪钙磷对照组78.15±0.87c71.48±2.7674.82±1.3433.45±2.4364.57±1.72c33.96±0.89b15 mg/kg组79.64±1.04bc71.83±2.4375.09±1.6734.51±2.7966.10±1.43b37.83±1.04a30 mg/kg组80.43±1.12ab72.30±2.0575.63±1.2435.68±2.3167.43±1.65ab38.41±1.57a45 mg/kg组81.95±0.98a73.54±3.5076.29±1.6236.20±2.9268.92±1.28a39.27±1.36a注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表5与此同。%2.3不同水平壳寡糖对仔猪血清免疫指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各试验组仔猪血清IgG和IFN-γ含量均显著提高（P0.05），30 mg/kg组、45 mg/kg组血清IgM含量显著上升（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.005.T004表4不同水平壳寡糖对仔猪血清免疫指标的影响项目对照组5 mg/kg组30 mg/kg组45 mg/kg组IgG/(g/L)4.45±0.57c6.25±0.64b7.62±0.50a8.14±0.82aIgA/(g/L)2.84±0.352.73±0.382.83±0.292.69±0.35IgM/(g/L)1.24±0.19b1.29±0.25b1.50±0.35a1.57±0.43aIFN-γ/(ng/L)1 765.27±25.46d1 836.93±30.17c1 898.15±31.58b1 986.47±45.72aTNF-α/(ng/L)193.57±15.69182.33±16.47198.92±17.24189.56±14.93IL-1β/(ng/L)134.58±8.97139.57±7.11135.29±12.24130.57±9.42IL-2/(ng/L)113.25±11.46118.46±16.77119.23±14.97123.06±16.40IL-6/(ng/L)58.76±5.4852.60±6.1359.67±8.9157.25±7.462.4不同水平壳寡糖对仔猪血清抗氧化指标的影响（见表5）由表5可知，随着日粮中壳寡糖含量上升，各试验组仔猪血清T-AOC和SOD活性呈升高趋势，均显著高于对照组（P0.05）；各试验组仔猪血清MDA含量显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.06.005.T005表5不同水平壳寡糖对仔猪血清抗氧化指标的影响组别T-AOC/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)SOD/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组2.14±0.23c283.46±35.4280.35±8.30c5.82±0.24a15 mg/kg组2.68±0.32b265.27±26.87100.97±10.73b4.96±0.31b30 mg/kg组3.05±0.45ab296.12±29.65119.47±14.26ab4.57±0.19bc45 mg/kg组3.44±0.42a286.60±30.28135.13±20.71a4.23±0.20c3讨论3.1不同水平壳寡糖对仔猪生长性能的影响Hu等[8]在断奶仔猪日粮中添加50 mg/kg的壳寡糖，与对照组相比，试验组仔猪平均日采食量显著上升，主要原因是壳寡糖通过促进肠道ZO-1基因的表达增强肠道功能。张淑萍等[9]在断奶仔猪基础日粮中分别添加0、30、60、90 mg/kg壳寡糖，仔猪试验末重、平均日增重、平均日采食量均显著上升，料重比显著下降。杜蕊等[10]研究发现，日粮中分别添加100、150 mg/kg壳寡糖可显著提高仔猪平均日增重、平均日采食量和末重，料重比和腹泻率显著下降，与本研究结果基本一致。有研究认为，壳寡糖可促进动物肠道内益生菌增殖，抑制大肠杆菌的数量[11]，且对肠道形态与功能具有较强的改善作用[12]，表明壳寡糖可能是通过改善肠道形态和微生物结构提升仔猪生长性能。3.2不同水平壳寡糖对仔猪营养物质表观消化率的影响营养物质消化利用效率越高表明仔猪用于维持需要和生长需要的物质越丰富[13]。Liu等[14]在断奶仔猪日粮中分别添加0、100、200、400 mg/kg壳寡糖和80 mg/kg金霉素，与对照组相比，200 mg/kg壳寡糖组和金霉素组仔猪干物质、粗蛋白、粗脂肪、钙和磷的表观消化率显著上升。魏亚浩等[15]在仔猪饮水中添加50 mL壳寡糖复合物溶剂，仔猪干物质、粗蛋白、粗脂肪表观消化率显著上升，血液中钙含量显著上升。张鑫海等[16]发现，日粮添加400~1 600 mg/kg壳寡糖可显著提高仔猪对干物质、有机物和氮的表观消化率，壳寡糖添加量超过800 mg/kg时，灰分表观消化率显著提升。壳寡糖改善肠道形态和微生物结构是仔猪对营养物质利用率增强的重要原因。3.3不同水平壳寡糖对仔猪免疫机能的影响血清免疫球蛋白反映了仔猪机体的健康状况，IgG是体内二次体液免疫的主要参与者，IgA参与黏膜免疫反应，IgM是黏附抗体。TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6是炎症反应中的重要细胞因子[17]。IFN-γ是可溶性二聚体细胞因子，同样参与体内炎症反应[18]。部分研究认为，壳寡糖提高动物免疫功能主要作用机制是促进免疫器官发育和增强免疫细胞分泌[19-20]。张淑萍等[9]研究发现，壳寡糖添加量为60 mg/kg时，仔猪血清中IgG和IgA含量显著上升。苏维发等[21]研究发现，在日粮中添加30 mg/kg壳寡糖可显著提高育肥猪血清IgG、IgM含量。本试验中，日粮中添加壳寡糖可有效提高血清中IgG、IgM和IFN-γ含量，表明壳寡糖对提高猪群健康水平具有重要影响。3.4不同水平壳寡糖对仔猪血清抗氧化功能的影响抗氧化指标能够反映动物的健康水平。苏维发等[21]研究表明，壳寡糖可提高生长育肥猪血清T-AOC，并降低MDA含量，认为壳寡糖可能是通过增强GSH-Px1、GSH-Px4等抗氧化有关基因的表达，进而促进猪整体抗氧化能力。刘媛媛等[22]联合添加壳寡糖和干酪乳杆菌饲喂断奶仔猪的研究表明，与对照组相比，试验组仔猪血清GSH-Px活性显著上升，MDA含量显著下降，与本研究的结果基本一致。目前，关于壳寡糖提高断奶仔猪机体抗氧化能力的研究较少，其影响作用机制仍需要进一步深入研究。4结论本试验表明，日粮中添加壳寡糖可有效提高断奶仔猪生长性能和营养物质表观消化利用率，可以通过提升机体免疫能力和抗氧化能力维持机体健康，壳寡糖添加量为45 mg/kg时效果较好。