蛋白质是生命的物质基础，也是动物机体的重要组成部分。蛋白质的最终分解产物是小肽和氨基酸，且小肽与游离氨基酸具有相互独立的吸收机制。小肽能够以完整形式被肠道吸收，进入血液循环，用于动物机体蛋白质的合成，具有促进氨基酸和矿物质吸收、提高动物生产性能、改善动物抗氧化性能和非特异性免疫力、提高动物抗病力的作用[1]。营养小肽是以豆科植物为原料，经生物发酵和物理处理等工艺生产的产品，具有丰富的小肽、不饱和脂肪酸、有机酸、氨基酸和维生素等营养物质。异育银鲫（Carassius auratus gibelio）是采用雌核发育技术培育的养殖品种，是池塘养殖的优质品种之一。本试验在异育银鲫基础饵料中添加2.0%营养小肽，分析营养小肽对异育银鲫生长性能、血清生化指标和抗氧化性能力的影响，为营养小肽作为饵料添加剂在水产养殖中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1基础饵料基础饵料为混养鱼配合饵料（盐城海大生物饲料有限公司），营养水平为粗蛋白≥28.0%、粗脂肪≥2.5%、赖氨酸≥1.35%、水分≤12.2%、粗纤维≤11.5%、粗灰分≤15.0%、总磷≥0.7%。1.1.2营养小肽营养小肽由江苏福润德科技有限公司提供，是以豆科植物为原料，选用四联菌分阶段式密闭深层发酵，通过生物发酵和物理处理等工艺消除抗营养因子，充分释放不同肽段，保留丰富的不饱和脂肪酸、有机酸、氨基酸和维生素等营养元素。营养小肽中含有粗纤维0.9%、粗脂肪1.5%、粗蛋白4.3%、酸溶蛋白（占总蛋白）33.5%，均未检出水苏糖和棉籽糖，其中乳杆菌的活菌数为22.6×107 CFU/g，酵母1.02×107 CFU/g，芽孢杆菌105 CFU/g，pH值3.5。1.2试验设计与饲养管理试验在江苏省东台市弶港镇养殖区进行，异育银鲫鱼平均体重为50 g/尾，放养量为400尾/667 m2，试验组和对照组池塘面积分别为52 360、51 362 m2。鱼种放养7 d后开始投喂饵料。对照组异育银鲫投喂基础饵料，试验组在基础饵料中添加2%营养小肽。投饵前使用已静置24 h的水将营养小肽溶解，充分混合，在基础饵料中均匀喷涂，待表面干燥后投喂。投饵量为鱼体重的2.0%~3.0%。每天投饵4次（7：00、10：00、13：30、16：30）。养殖期间水温26~33 ℃，溶氧3.5~8.3 mg/L，pH值8.5~8.8。试验期128 d。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验第52、128 d，每组随机选取10尾鱼，测定试验鱼的体重、体长、体高、内脏重、肝脏重，计算脏体比、肝体指数和肥满度。脏体比=内脏总重/体重×100%(1)肝体指数=肝脏重/体重×100%(2)肥满度=体重/体长3×100%(3)1.3.2样品采集在试验第52、128 d，每组随机选取5尾鱼，一次性注射器尾静脉取血（无抗凝剂），4 ℃静置24 h，-5 ℃、2 500 r/min离心5 min，取上层血清，-20 ℃保存。1.3.3血清生化指标试验第128 d，使用罗氏cobas C311全自动生化分析仪（德国）检测血清生化指标，包括总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、葡萄糖（GLU）含量以及碱性磷酸酶（ALP）、脂肪酶（LIP）活性。1.3.4血清抗氧化指标试验第52、128 d，使用南京建成生物工程研究所试剂盒检测试验鱼血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、总抗氧化能力（T-AOC）以及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量。1.4数据统计与分析试验数据采用Excel整理，GraphPad prism 8.0软件进行单因素方差分析，t检验进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.01表示差异极显著，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1营养小肽对异育银鲫生长性能的影响（见表1）由表1可知，试验52 d，试验组异育银鲫体重、体长、体高、内脏重和肝脏重均极显著高于对照组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.07.012.T001表1营养小肽对异育银鲫生长性能的影响试验天数/d项目体重/g体长/cm体高/cm内脏重/g肝脏重/g脏体比/%肝体指数/%肥满度/%52试验组159.10±2.4020.66±0.236.63±0.0319.71±0.813.87±0.2012.44±0.612.44±0.131.82±0.07对照组118.25±3.4618.94±0.325.98±0.1015.71±0.572.82±0.0413.35±0.532.40±0.071.77±0.11P值0.0000.0000.0000.0010.0000.2760.8030.725128试验组305.34±5.9924.02±0.158.21±0.0944.22±1.8712.53±0.5714.51±0.624.11±0.172.21±0.06对照组268.80±2.8623.02±0.317.90±0.1339.01±2.9710.89±0.7514.50±0.994.03±0.212.23±0.11P值0.0040.0100.0640.1580.0980.9890.7950.896试验128 d，试验组异育银鲫体重极显著高于对照组（P0.01），体长显著高于对照组（P0.05）。2.2营养小肽对异育银鲫血清生化指标的影响（见表2）由表2可知，试验组异育银鲫血清TP、ALB含量极显著高于对照组（P0.01），ALP含量显著高于对照组（P0.05），GLU含量极显著降低对照组（P0.01）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.07.012.T002表2营养小肽对异育银鲫血清生化指标的影响项目TP/(g/L)ALB/(g/L)ALP/(U/L)LIP/(U/L)GLU/(nmol/L)P值0.0040.0010.0110.0810.008试验组37.86±0.6516.20±0.2334.00±1.706.56±0.142.60±0.60对照组29.54±1.5512.08±0.6124.20±2.416.14±0.167.46±1.232.3营养小肽对异育银鲫血清抗氧化指标的影响（见表3）由表3可知，试验52 d时，试验组异育银鲫血清SOD、CAT、T-AOC和MDA数值均高于对照组，试验组异育银鲫血清GSH-Px活性和NO含量低于对照组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.07.012.T003表3营养小肽对异育银鲫血清抗氧化指标能的影响试验天数/d项目SOD/(U/mL)CAT/(U/mL)GSH-Px/(U/mL)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)NO/(μmol/L)52试验组181.31±32.7610.55±3.54138.06±6.690.34±0.0816.53±1.7111.51±2.81对照组163.24±13.679.89±1.58165.28±20.950.32±0.029.39±2.0412.90±1.35P值0.6240.0590.2510.7650.6490.668128试验组197.20±21.717.33±1.25184.44±26.360.41±0.0511.40±0.6553.32±3.09对照组188.20±26.257.60±0.74148.2±22.060.29±0.0411.16±1.2439.77±12.34P值0.7980.8540.3230.1120.0280.341试验128 d时，试验组异育银鲫血清SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA和NO数值均高于对照组，CAT活性低于对照组；其中MDA含量显著高于对照组（P0.05）。3讨论3.1营养小肽对异育银鲫生长性能的影响小肽与游离氨基酸具有相互独立的吸收机制，小肽能够以完整的形式被肠道吸收进入血液循环，用于机体蛋白质合成[2-3]。在吸收的氨基酸总量相同时，由于小肽在体内的渗透压远小于氨基酸，可增加体内摄入蛋白质的数量，进而影响鱼体的物质代谢，促进鱼体增重[4]。本研究中，试验组异育银鲫体重、体长、体高、内脏重、肝脏重和肝体指数均高于对照组，试验52 d时，试验组异育银鲫的脏体比小于对照组；试验128 d时，试验组的肥满度小于对照组，表明在基础饵料中添加2.0%的营养小肽能够有效提高养殖异育银鲫的生长性能。3.2营养小肽对异育银鲫血清生化指标的影响血清总蛋白可以反映动物的营养状态、机体对蛋白质的消化程度以及鱼类的健康状况。当营养状况良好时，血清蛋白会维持在较高水平。本研究发现，试验组异育银鲫的血清TP（37.86 g/L）和ALB（16.20 g/L）含量均高于对照组，硬骨鱼类血清总蛋白含量在30~50 g/L范围内[5]，表明添加营养小肽可以在一定程度上促进异育银鲫血清蛋白的合成，鱼体表现出良好的营养状况。血清碱性磷酸酶是动物生长和生存的重要调控酶，其活性在一定程度上反映了动物的生长速度。本研究中，试验组异育银鲫血清碱性磷酸酶活性高于对照组，与罗莉等[6]发现碱性磷酸酶活性与动物的生长呈正相关相符合。鱼类的肝胰腺是生成脂肪酶的主要器官，LIP活性与饵料中的脂肪含量呈正相关[7]。脂肪含量高的食物会增加LIP活性，而摄食脂肪含量低的食物，LIP活性也随之降低。本研究中，试验组异育银鲫血清LIP活性略高于与对照组，可以反映养殖异育银鲫的脂质代谢状况和健康水平。葡萄糖是反映糖代谢和机体组织细胞功能状态的重要指标[8]。本研究发现，试验组异育银鲫血清葡萄糖含量低于对照组，与张余霞等[9]发现小肽能够提高血液内血糖含量的研究结果不同，与姜文灏等[10]研究结果相同。原因可能是低蛋白的饵料中碳水化合物的比例相对较高，养殖动物为摄食足量的蛋白质而加大摄食量，间接增加了碳水化合物的摄入量，导致葡萄糖水平升高。3.3营养小肽对异育银鲫血清抗氧化性能的影响营养小肽对动物机体的抗氧化能力和免疫力具有一定影响。研究表明，在饵料中添加一定量的小肽有助于提高养殖水生动物机体的抗氧化能力和非特异性免疫功能[11-12]。血清T-SOD、CAT和GSH-Px是主要的内源性抗氧化酶，对机体的氧化与抗氧化平衡具有重要作用。T-SOD可以催化氢离子（H＋）和超氧阴离子（O2-）形成过氧化氢（H2O2）和氧气（O2），H2O2被CAT和GSH-Px转化成水（H2O）。CAT和GSH-Px经常与T-SOD共同作用保护机体免受氧化应激产生的损伤，GSH-Px抗氧化能力可以通过提高CAT基因表达水平进行补偿[13-14]。本研究发现，试验组异育银鲫血清SOD活性比对照组提高了，与何吉祥等[15]添加2%小肽对异育银鲫血清SOD的影响结果一致。T-AOC是衡量机体抗氧化系统功能状况的综合性指标，其含量与细胞抗氧化能力呈正相关，与机体脂质过氧化呈负相关[16]。MDA是脂质过氧化反应的最终产物，其含量间接反映了机体细胞受自由基损伤的程度。本研究中，随着投喂时间增加，试验组异育银鲫血清T-AOC明显增加，MDA含量明显降低，与王际英等[17]和吴远彩等[18]的研究结果一致。NO是一种极不稳定的生物自由基，在免疫调节等方面具有重要的生物学作用。本研究发现，随着投喂时间的增加，试验组NO含量显著提高。原因是营养小肽中富含乳酸杆菌和芽孢杆菌，也是NO对脂质过氧化和对组织器官保护作用的表现。NO可以增强水产动物自身抗病能力，减少抗菌药物的使用，但是过高的NO含量也可能影响肝细胞蛋白质合成和能量代谢[19]。因此，NO对水产动物生理生化及代谢特征的影响具有重要的理论研究价值。不同的小肽制品其生产工艺和营养成分不同，添加量的作用效果与养殖动物对小肽的最适量有关。许合金等[20]和李日美等[21]认为，在凡纳滨对虾饵料中添加0.5%~1.0%小肽效果最佳。吴远彩等[18]发现，饵料添加0.1%小肽，凡纳滨对虾血清SOD、GSH-Px和T-AOC显著升高，MDA含量显著降低。王际英等[17]在星斑川鲽幼鱼饵料中添加1.0%~1.5%小肽发现，星斑川鲽幼鱼血清SOD、GSH-Px和T-AOC显著升高，MDA含量显著降低。本研究发现，在饵料中添加2.0%营养小肽，能够有效提高养殖异育银鲫的增重率、特定生长率、肥满度，促进了血清蛋白的合成；随着投喂时间的增加，异育银鲫血清SOD、GSH-Px活性、T-AOC和NO含量明显升高，CAT活性和MDA含量明显降低。因此，如何充分利用营养小肽的抗氧化性功能，促进脂质代谢，还需要进一步探讨营养小肽的添加剂量、周期和方式等。4结论本研究认为，在基础饵料中添加2%的营养小肽能够提高异育银鲫的生长性能，改善机体健康水平。