仔猪在断奶早期易发生断奶应激综合征,导致仔猪出现肠道功能紊乱、腹泻及生长受阻的现象,严重影响仔猪的后期生长发育及养殖效益[1]。仔猪断奶阶段,胃肠道发育尚未完全,肠道内的微生物区系尚未完全建立。此阶段额外补充益生菌可帮助仔猪快速建立肠道微生物区系,有利于机体对饲料中养分的消化吸收[2]。目前在畜禽养殖生产中有关复合益生菌的研究越来越多,其养殖效果优于单一菌种[3-4]。研究发现,添加0.3%的复合益生菌可有效提高仔猪的免疫功能、抗氧化功能,改善部分血清生化指标,降低腹泻率,提高仔猪的生长性能[5]。刘逸群[6]研究发现,在母猪预产期产床表面喷洒复合益生菌,通过环境中的益生菌可有效影响仔猪的肠道菌群结构,帮助仔猪建立健康的肠道微生物区系,提高仔猪的健康状态及生长性能。师丽刚[7]研究表明,在日粮中添加1.5 g/kg复合益生菌可使仔猪粪便中的大肠杆菌降低约20%,改善仔猪的免疫力,提高生长性能。益生菌对仔猪生长性能影响的研究主要集中在肠道菌群方面,关于仔猪对饲料中养分消化率的研究鲜有报道。本试验研究不同剂量的复合益生菌对断奶仔猪生长性能、腹泻率、肠道微生物数量及养分利用率的影响,为复合益生菌在断奶仔猪生产中高效利用与推广提供参考。1材料与方法1.1试验材料复合益生菌由枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌及酵母菌组成,有效活菌数为1.0×1010 CFU/g。试验动物为21日龄断奶体重约7.0 kg的“杜×长×大”三元断奶仔猪,体况良好、无病、健康。1.2试验设计选择断奶仔猪150头,随机分成5组,每组3个重复,每个重复10头仔猪。各组猪分别饲喂含有0(对照组)、0.1%(0.1%复合益生菌组)、0.2%(0.2%复合益生菌组)、0.4%(0.4%复合益生菌组)、0.8%(0.8%复合益生菌组)复合益生菌的试验日粮。试验期4周。基础日粮配方参考《猪饲养标准》(NY/T 65—2004)进行配制。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.006.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米60.00消化能/(MJ/kg)13.85豆粕19.50粗蛋白/%18.28麸皮8.00钙/%0.77胚芽粕6.00总磷/%0.69鱼粉2.00有效磷/%0.40豆油1.00食盐0.30DL-蛋氨酸0.20L-赖氨酸(98%)0.35磷酸氢钙1.33石粉0.32预混料1.00注:1.预混料为每千克日粮提供:VA 12 500 IU、VD 2 300 IU、VE 32 mg、VK 4.5 mg、VB1 2.5 mg、VB2 8 mg、VB6 6 mg、VB12 35 μg、泛酸20 mg、叶酸1.5 mg、生物素0.1 mg、Fe 100 mg、Zn 100 mg、Cu 18 mg、Mn 85 mg、I 0.5 mg、Se 0.32 mg。2.营养水平中消化能和有效磷为计算值,粗蛋白、总磷、钙为实测值。1.3饲养管理养殖试验开始前对养殖场地进行消毒处理。所有试验猪均在同一栋养殖舍内饲养,养殖环境保持一致。试验期间,断奶仔猪自由采食、自由饮水。仔猪的驱虫、免疫程序按照猪场日常管理规定进行。养殖期间,饲养员每日仔细观察各组断奶仔猪的健康状况,记录发生腹泻率的仔猪头数及腹泻天数。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能及腹泻率试验开始前1 d和试验第28 d,断奶仔猪禁食12 h后称重,试验期间统计各组仔猪的采食量、腹泻头数和腹泻天数,计算平均日增重、料重比及腹泻率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×仔猪头数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.4.2肠道微生物数量试验结束,每组选择3头仔猪屠宰,解剖取盲肠及空肠中的食糜,-80 ℃冰箱保存。空肠和盲肠食糜中的大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌数量采用平板计数法测定,具体参考Bami等[8]的试验方法。1.4.3营养物质表观消化率试验结束前3 d进行消化试验,每天收集约100 g的粪便,加入10%硫酸固氮,65 ℃烘干,粉碎。断奶仔猪对饲料养分的消化率采用内源指示剂酸不溶性灰分法测定[9],根据张丽英[10]的方法检测饲料中的干物质、粗蛋白、粗脂肪的含量,计算营养物质表观消化率。某营养物质表观消化率=100%-(粪中该营养物质含量×日粮中盐酸不溶灰分含量)/(日粮中该营养物质含量×粪中盐酸不溶灰分含量)×100%(3)1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS 28软件进行单因素方差分析,LSD法多重比较。结果以平均值和标准差表示,P0.05表示差异显著,P0.01表示差异极显著。2结果与分析2.1复合益生菌对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,0.2%、0.4%复合益生菌可有效提高断奶仔猪末重(P0.05),降低料重比(P0.05);添加复合益生菌可极显著降低仔猪的腹泻率(P0.01)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.006.T002表2复合益生菌对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响项目初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量/[g/(头·d)]料重比腹泻率/%对照组7.1013.56b230.71480.502.08a5.50C0.1%复合益生菌组7.0513.65ab235.71482.422.05a3.85B0.2%复合益生菌组7.1214.10a249.29483.801.94b2.60A0.4%复合益生菌组7.1514.15a250.00483.501.93b2.33A0.8%复合益生菌组7.0813.90ab243.57481.601.98ab3.50BSEM0.420.948.6613.070.120.27P值0.8260.0390.7300.9410.0400.008注:同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P0.05),不同大写字母表示差异极显著(P0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.2复合益生菌对断奶仔猪肠道微生物数量的影响(见表3、表4)由表3可知,与对照组相比,添加0.2%、0.4%、0.8%复合益生菌可显著提高断奶仔猪空肠乳酸菌数量(P0.05),添加复合益生菌可显著降低大肠杆菌数量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.006.T003表3复合益生菌对断奶仔猪空肠微生物数量的影响项目双歧杆菌乳酸菌大肠杆菌沙门氏菌对照组8.336.20b7.62a4.310.1%复合益生菌组8.906.75ab6.77b4.160.2%复合益生菌组9.637.28a6.02b4.030.4%复合益生菌组9.857.53a5.68c3.960.8%复合益生菌组9.127.80a5.70c3.80SEM0.370.330.420.17P值0.0830.0360.0270.316lgCFU/g由表4可知,与对照组相比,添加0.2%、0.4%复合益生菌可显著提高断奶仔猪盲肠中双歧杆菌和乳酸菌数量(P0.05),添加复合益生菌可显著降低断奶仔猪盲肠大肠杆菌数量(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.006.T004表4复合益生菌对断奶仔猪盲肠微生物数量的影响项目双歧杆菌乳酸菌大肠杆菌沙门氏菌对照组8.69b6.80b8.73a4.520.1%复合益生菌组9.03ab7.27ab8.26b4.300.2%复合益生菌组9.74a7.88a7.39c4.070.4%复合益生菌组9.95a8.19a7.15c3.930.8%复合益生菌组9.32ab7.94a7.02c3.80SEM0.460.400.630.21P值0.0470.0310.0150.610lgCFU/g2.3复合益生菌对断奶仔猪营养物质表观消化率的影响(见表5)由表5可知,与对照组相比,添加复合益生菌可显著提高断奶仔猪对日粮中总能、干物质、粗蛋白、粗脂肪的表观消化率(P0.05),添加0.4%复合益生菌可显著提高断奶仔猪的粗纤维消化率(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.006.T005表5复合益生菌对断奶仔猪营养物质表观消化率的影响项目总能干物质粗蛋白粗脂肪粗纤维粗灰分钙磷对照组73.67c80.65b77.64c63.77c32.06b48.0848.9735.060.1%复合益生菌组78.06b86.07a83.53b68.32b34.53b49.4249.5235.620.2%复合益生菌组82.75ab87.16a85.06b69.59b36.99ab49.8549.8336.260.4%复合益生菌组88.41a88.31a89.47a74.08a41.06a50.7450.7436.740.8%复合益生菌组83.05ab86.32a89.38a73.85a37.28ab50.3350.8836.93SEM4.825.316.075.313.182.963.171.96P值0.0380.0410.0310.0240.0370.3180.4160.106%3讨论3.1复合益生菌对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响仔猪断奶后,由于日粮、养殖环境等外界因素的改变会引起断奶应激,此阶段仔猪的肠道功能尚未完全建立,影响仔猪对日粮中养分的消化吸收[11]。本试验使用复合益生菌可改善仔猪的腹泻率问题,0.2%和0.4%的复合益生菌可有效提高断奶仔猪末重,降低料重比;添加复合益生菌后,断奶仔猪的腹泻率均极显著降低,并且0.2%和0.4%的复合益生菌效果优于0.1%和0.8%。尹珺伊等[12]在饲料或饮水中添加1×108 CFU/g的复合益生菌,可提高仔猪的平均日增重、降低腹泻率及料重比。李琛等[13]给仔猪灌服3 mL的双歧杆菌复合制剂可有效治疗腹泻问题。陈宝剑等[14]研究表明,在每1 000 kg饲料中添加1 mL的复合益生菌可以有效提高仔猪体重,降低腹泻率及料重比,提高仔猪免疫功能。上述研究结果与本研究结果类似,表明复合益生菌可有效改善仔猪的生长性能,并能够通过改善肠道健康降低腹泻率。复合益生菌被仔猪采食后可以在肠道内定植,形成利于机体健康的有益微生物菌群,改善肠道健康,进而降低腹泻率,促进机体消化吸收饲料中的养分,提高生长性能[15]。3.2复合益生菌对断奶仔猪肠道微生物数量的影响本研究中,复合益生菌添加量为0.2%、0.4%时,断奶仔猪空肠中乳酸菌数量显著高于对照组,盲肠中双歧杆菌和乳酸菌数量显著高于对照组;各复合益生菌组的断奶仔猪的空肠及盲肠中大肠杆菌均显著降低,表明由酵母菌、植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成的复合益生菌改变了仔猪肠道中菌群结构,提高有益微生物数量,降低了有害微生物含量。陈国福等[16]研究发现,与对照组比,由植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母和扣囊复膜孢酵母组成的复合益生菌可使仔猪粪便中的乳酸杆菌数量提高9.68%,大肠杆菌数量减少10.78%。何佳等[17]研究发现,在仔猪养殖中添加复合益生菌可有效提高仔猪粪便中的双歧杆菌及乳酸菌的含量,改善仔猪肠道健康。本试验中使用的复合益生菌中含有的植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌在肠道中代谢,产生了乳酸,降低了肠道内pH值,抑制了大肠杆菌及沙门氏菌有害微生物的生长与繁殖,并为乳酸菌和双歧杆菌的繁殖生长提供了有利条件,提高仔猪肠道的乳酸菌和双歧杆菌数量,降低大肠杆菌和沙门氏菌含量[18]。3.3复合益生菌对断奶仔猪营养物质表观消化率的影响动物机体对日粮中养分的消化、吸收、利用情况可反映机体的健康状态及生长性能。本试验中,添加复合益生菌组断奶仔猪对日粮中总能、干物质、粗蛋白、粗脂肪的表观消化率均高于对照组,0.4%复合益生菌组断奶仔猪的粗纤维消化率显著高于对照组。本研究使用复合益生菌中含有植物乳杆菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌互相作用,使仔猪肠道建立一种复杂且健康的微生物区系。酵母菌具有发酵功能,可刺激有益菌的生长繁殖,也可为动物机体提供蛋白质[19]。枯草芽孢杆菌可促进仔猪肠道发育,还可通过降低肠道pH值,刺激多种消化酶的分泌,分解饲料中养分,为乳酸菌的繁殖提供基质[20]。植物乳杆菌可降解碳水化合物产生乳酸,乳酸可降低肠道pH值,进而激活消化酶,促进机体消化吸收饲料中营养物质。这种微生物区系能够产生优势互补叠加的作用,提高日粮养分的消化率[21]。王本会等[22]研究发现,0.2%的复合益生菌制剂可以提高仔猪对饲料中干物质、粗蛋白、粗脂肪及钙的消化吸收利用率,与本研究结果类似。复合益生菌可通过帮助仔猪建立健康的肠道稳态,促进肠道对日粮中养分的消化、吸收及利用,进而降低腹泻率、促进生长发育。4结论本研究表明,日粮中添加复合益生菌可有效提高仔猪的生长性能,降低腹泻率,增加有益菌数量,降低有害菌数量,提高对饲料养分的消化率。复合益生菌的最适添加剂量为0.4%。
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