犊牛的健康对养殖场的经济效益尤为重要。0~6月龄的犊牛的消化和免疫系统尚未完全建立,发育尚不完善,导致此阶段的犊牛经常发生腹泻、免疫力低下,阻碍生长发育,对后期的生长发育产生影响,进而导致经济损失[1-2]。益生菌取代抗生素在改善犊牛健康、促进生长方面具有比较理想的效果[3]。益生菌具有安全、高效、绿色、无耐药性、无毒副作用等特点,在畜禽养殖业中具有广阔的应用前景[4-5]。目前在犊牛养殖中应用的益生菌主要有乳酸菌、丁酸梭菌等,可以有效控制犊牛腹泻,促进生长[6]。布拉迪酵母具有抗氧化功能、耐酸、耐高温、耐胆盐等优点,在预防治疗腹泻、改善肠道免疫屏障、提高免疫力、促进畜禽生长方面具有显著效果[7],正逐渐被推广应用于畜禽养殖生产中。布拉迪酵母在单胃动物生产中应用研究结果较多[8-9],但在反刍动物生产中的研究应用较少。本试验研究添加不同水平的包被布拉迪酵母对断奶犊牛生长性能、免疫力及养分表观消化率的影响,为包被布拉迪酵母在犊牛生产的高效推广应用提供参考。1材料与方法1.1包被布拉迪酵母本研究使用的包被布拉迪酵母由北京某生物科技有限公司提供,布拉迪酵母采用脂肪酸微胶囊包被技术进行包被,活性为2×1010 CFU/g。1.2试验设计选择40头安格斯犊牛随机分为4组,每组10个重复,每个重复1头牛。各组犊牛饲喂含有0(对照组)、50(试验1组)、100(试验2组)、200 mg/kg(试验3组)包被布拉迪酵母的基础日粮。预试期1周,正式试验期8周。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.08.003.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米42.4综合净能/(MJ/kg)5.85豆粕18.0粗蛋白/%20.03DDGS8.0粗脂肪/%3.63玉米胚芽粕12.0中性洗涤纤维/%20.38玉米蛋白粉6.0酸性洗涤纤维/%10.18米糠8.0钙/%0.92糖蜜2.0磷/%0.66食盐0.3石粉1.3预混料2.0注:1.预混料购自富佑饲料有限公司。2.营养水平中净能为计算值,其余均为实测值。1.3饲养管理试验开始前,对试验场地进行消毒处理,犊牛打耳号,统一驱虫。试验期间犊牛自由采食和饮水,保证牛舍的卫生、温度、湿度、通风等环境条件一致。每日观察犊牛健康状态,尤其是腹泻情况。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验第1 d和最后1 d,犊牛禁食12 h,称量体重,统计养殖期间的采食量及各组腹泻头数,计算平均日采食量、平均日增重、料重比及腹泻率。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/(试验天数×每组犊牛数)(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=(腹泻数量×腹泻天数)/(试验时间×犊牛数量)(4)1.4.2血清免疫指标试验结束当天,犊牛称重后,采集血液,3 500 r/min离心5 min收集血清,用于检测免疫指标,检测方法参考试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书进行。检测指标包括:免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、补体C3、补体C4、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)。1.4.3养分表观消化率养分表观消化率检测方法采用酸不溶灰分(AIA)作为内源指示剂,饲料与粪便样品中干物质、粗蛋白、粗脂肪、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维等养分的含量测定参考张丽英[10]的方法,计算养分表观消化率。养分表观消化率=[1-(日粮中AIA含量×粪样中某营养物质含量)/(粪样中AIA含量×日粮中某营养物质含量)]×100%(5)2结果与分析2.1不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛生长性能的影响(见表2)由表2可知,与对照组相比,试验2组和试验3组犊牛的平均日增重提高了16.85%、21.35%(P0.05),料重比降低了13.53%、16.44%(P0.05);各试验组犊牛的腹泻率降低了22.22%、44.44%、55.56%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.08.003.T002表2不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛生长性能的影响项目初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[kg/[头·d)]平均日采食量/[kg/[头·d)]料重比腹泻率/%P值0.8320.0560.0360.6350.0390.011对照组90.31±2.93140.39±5.310.89±0.08b5.20±0.315.84±0.20a4.50±0.26a试验1组90.50±2.17144.32±5.640.96±0.09ab5.22±0.405.43±0.25ab3.50±0.20b试验2组91.02±2.48149.05±6.051.04±0.16a5.25±0.345.05±0.30b2.50±0.16c试验3组91.14±2.04151.74±6.511.08±0.15a5.27±0.424.88±0.19b2.00±0.18c注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表4与此同。2.2不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛血清免疫指标的影响(见表3)由表3可知,与对照组相比,试验2组和试验3组犊牛血清IgG、IL-10含量显著提高(P0.05),IL-6和TNF-α含量显著降低(P0.05);各试验组犊牛血清IgM含量提高了24.56%、50.00%、61.84%(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.08.003.T003表3不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛血清免疫指标的影响组别对照组试验1组试验2组试验3组P值IgA/(g/L)0.63±0.090.68±0.100.75±0.120.80±0.140.218IgG/(g/L)4.36±0.22b5.03±0.30ab6.21±0.35a6.64±0.41a0.023IgM/(g/L)2.28±0.12b2.84±0.17a3.42±0.26a3.69±0.31a0.015C3/(g/L)0.83±0.140.86±0.140.90±0.170.94±0.180.627C4/(g/L)1.76±0.101.85±0.141.96±0.202.13±0.250.316IL-6/(ng/L)135.06±5.11a125.06±4.93a102.95±4.63b96.59±4.33b0.026IL-10/(ng/L)68.52±3.04b71.72±3.53ab76.28±4.06a80.44±4.31a0.037TNF-α/(ng/L)184.50±6.41a163.06±5.94ab134.10±5.05b130.55±5.13b0.019IL-4/(ng/L)42.10±2.0343.41±2.1843.85±3.0544.37±3.180.739注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.3不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛养分表观消化率的影响(见表4)由表4可知,与对照组相比,各试验组犊牛对干物质和粗蛋白的消化率显著提高(P0.05),试验2组和试验3组犊牛粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率显著提高(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.08.003.T004表4不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛养分表观消化率的影响项目干物质粗脂肪粗蛋白中性洗涤纤维酸性洗涤纤维P值0.0390.0280.0320.0270.036对照组73.29±3.71b65.06±3.05b58.95±2.58b68.44±3.83b53.06±2.11b试验1组78.43±3.48a68.48±3.42ab63.19±2.77a72.08±3.49ab57.53±2.63ab试验2组80.42±4.04a71.06±3.31a66.38±3.06a75.49±4.05a59.47±3.02a试验3组82.18±4.50a72.84±4.41a68.50±3.63a76.55±5.10a61.27±3.17a%3讨论3.1不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛生长性能的影响犊牛阶段的生长发育情况及健康状态对后期的生长发育至关重要。布拉迪酵母是一种真菌益生菌,可通过提高动物机体免疫力促进机体生长[11-12]。研究发现,在犊牛生产中使用1.0×109 CFU/g的布拉迪酵母可以有效降低腹泻率的发生概率[6]。在犊牛生产中使用布拉迪酵母可以促进其采食量提高,且生长阶段前期影响效果显著[13]。也有试验结果显示,布拉迪酵母可促进山羊机体对钙的消化吸收,但对其他生产性能数据无显著影响[14]。本研究中,试验2组和试验3组犊牛的平均日增重比对照组提高了16.85%、21.35%,料重比比对照组降低了13.53%、16.44%;各试验组犊牛的腹泻率比对照组降低了22.22%、44.44%、55.56%,表明包被布拉迪酵母显著改善了犊牛的生长性能及肠道健康。原因是犊牛采食布拉迪酵母后,改变了瘤胃中菌群结构,帮助犊牛建立了健康的瘤胃内环境[15],通过促进机体对饲料中养分的消化吸收,进而提高生长性能,而本研究中也得出布拉迪酵母有效改善了机体对养分表观消化率的结论。3.2不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛血清免疫指标的影响由于断奶应激及犊牛自身免疫系统尚未完全建立,断奶犊牛机体免疫力较低,患病概率较高。机体内的免疫球蛋白和补体的含量可以反映机体免疫功能的强弱,球蛋白可以与病原体结合,起抗炎的作用[16]。本试验中,与对照组相比,试验2组和试验3组犊牛血清IgG、IL-10含量显著提高,IL-6和TNF-α含量显著降低;各试验组犊牛血清IgM含量提高了24.56%、50.00%、61.84%。结果表明,包被布拉迪酵母可以提高犊牛机体的体液免疫功能。薛帅帅等[15]研究表明,在犊牛养殖中使用100 mg/kg布拉迪酵母可降低犊牛血清中促炎因子(IL-6、TNF-α)的含量。在哺乳期犊牛生产中使用3、5 g/(头·d)的布拉迪酵母可以显著提高犊牛血清中免疫球蛋白和白细胞介素-2(IL-2)、IL-4含量,降低白细胞介素-1β(IL-1β)和TNF-α含量[17]。因此,适量的布拉迪酵母可以降低机体炎症的发生概率,改善肠道健康,进而增强犊牛机体的体液免疫和细胞免疫功能。3.3不同水平的包被布拉迪酵母对犊牛养分表观消化率的影响本试验中,与对照组相比,各试验组犊牛对干物质和粗蛋白的消化率显著提高,试验2组和试验3组犊牛粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率显著提高,表明适量的包被布拉迪酵母可以促进犊牛机体对饲料中养分的消化与利用率。卢奇成等[17]研究发现,在犊牛日粮中添加3、5 g/(头·d)的布拉迪酵母可以有效提高犊牛对日粮中干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维等营养物质的消化率。陈亮等[18]发现,在黑牛生产中添加适量的酿酒酵母可以显著提高机体对日粮中粗蛋白的表观消化率。也有研究发现,酵母可以提高纤维及干物质的消化率[19]。布拉迪酵母提高动物机体对饲料中养分的消化率主要是因为布拉迪酵母可以提高瘤胃及肠道中有益菌的含量,刺激动物肠道分泌一定量的消化酶。因此,酿酒酵母可显著提高羔羊瘤胃中纤维分解酶的活性,提高瘤胃中纤毛虫原生动物含量,进而促进动物对日粮的消化[20]。4结论本试验表明,在犊牛养殖中使用适量的包被布拉迪酵母可提高机体免疫力,促进养分消化吸收,提高生长性能,且适宜添加量为100 mg/kg。
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