精氨酸在动物体内参与蛋白质、尿素、肌酸、一氧化氮、谷氨酰胺等物质的合成，还能够促进动物体内氮的沉积，以此提高动物机体免疫力。Wakabayashi等[1]试验表明，大鼠缺乏精氨酸会出现体内氮负平衡问题，并且出现失重表现。Michael等[2]发现，在仔猪日粮中加入精氨酸，其血浆和肌肉中精氨酸浓度均明显升高。谷氨酰胺是动物体内含量较丰富的游离氨基酸，能够促进动物的健康发育并具有抗应激的作用[3]。谷氨酰胺具有免疫调节的功能，能够为淋巴细胞的增殖提供必要能量，对免疫球蛋白的分泌和肠道免疫机能起到调控作用。刘玉洁等[4]在饲喂奶山羊高精料日粮情况下添加过瘤胃谷氨酰胺可降低瘤胃上皮的炎症反应，改善上皮紧密连接，从而维护瘤胃上皮屏障的正常功能。周玉香等[5]研究发现，在断奶犊牛颈静脉灌注谷氨酰胺可有效提高骨骼肌蛋白质水平。维生素对反刍动物免疫功能也具有重要作用，维生素A具有抗应激和提高免疫力的功能[6]；维生素D3的代谢产物能够增强免疫系统（先天免疫）的早期应答反应[7]；维生素E可增强机体的体液免疫反应，还能够提高细胞免疫功能[8]。本试验探讨饲喂谷草日粮添加复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清生化及免疫球蛋白的影响，为提高育肥肉牛生理功能和免疫力提供参考。1材料与方法1.1试验材料谷草、玉米秸秆和精饲料等饲料均来自河北张家口谷润天养牛专业合作社深井肉牛养殖基地；复合氨基酸维生素添加剂产品由河北科恒生物科技有限公司定制，添加剂产品分为3种，第一种添加5 g/kg精氨酸+15 g/kg谷氨酰胺；第二种添加5 g/kg精氨酸+70 mg/kg复合维生素A、D、E；第三种添加15 g/kg谷氨酰胺+70 mg/kg复合维生素A、D、E。复合维生素成分含量为：VA 23 000 IU/kg、VD 3 000 IU/kg、VE 300 IU/kg。1.2试验设计与饲养管理试验动物为谷润天肉牛养殖合作社肉牛场的健康无病育肥公牛，试验共选取体重（485.82 kg±12.50 kg）日龄相近的西门塔尔杂交公牛12头。采用完全随机设计分为4组，每组3个重复，每个重复1头牛。各组饲喂统一精饲料，粗饲料由30%谷草+70%玉米秸秆组成。对照组饲牛喂基础日粮；试验A组、试验B组、试验C组分别在基础日粮中添加3种复合添加剂。预试期15 d，正式试验期45 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.004.T001表１基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.0玉米42.0综合净能/(MJ/kg)6.08豆粕6.0粗蛋白/%10.70亚麻仁饼4.2酸性洗涤纤维/%19.25麦麸4.2中性洗涤纤维/%34.67食盐0.3钙/%0.59碳酸氢钠0.3磷/%0.225%预混料3.0谷草12.0玉米秸秆28.0注：1.预混料为每千克日粮提供VA 10 000 IU、VD3 3 000 IU、VE 60 IU、Cu 50 mg、Fe 50 mg、Mn 50 mg、Zn 90 mg、I 1.0 mg、Se 0.2 mg、Co 1.0 mg。2.营养水平中综合净能为计算值，其余均为实测值。日粮参照《肉牛饲养标准》（NY/T 815—2004）配制，按照体重475 kg，日增重0.9 kg设计。每日饲喂两次（7：00和17：00），肉牛自由采食、饮水。添加剂组饲喂方式：首先取2 kg全混合日粮与添加剂均匀混合饲喂，完全采食完后，再饲喂剩余日粮，上午、下午各一次。各试验组与对照组牛舍环境条件控制相对一致，日常管理相同。1.3测定指标及方法在试验正式试验期第45 d晨饲前，用一次性注射器于每头试验牛颈静脉采血15 mL，置于不含抗凝剂的真空采血管中，-4 ℃静置 30 min，1 500 r/min离心 10 min分离血清，-20 ℃保存。1.3.1血清生化指标血清生化指标中总蛋白、白蛋白和球蛋白使用双缩脲法测定；谷丙转氨酶、谷草转氨酶、γ-谷氨酰基转氨酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶、淀粉酶的活性采用比色法测定；葡萄糖、甘油三酯和胆固醇使用酶联法测定，尿素氮使用尿素酶法测定。上述各项指标均采用Celercare V5全自动生化仪测定（微纳芯MNCHIP公司）。1.3.2免疫球蛋白指标血清中免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）指标均采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定，测定试剂盒购自北京华悦昌生物科技有限公司，操作方法及步骤严格按照产品说明书进行。1.4数据统计与分析数据采用Excel 2016软件进行初步处理，SPSS 26.0统计软件进行单因素方差分析，Duncan's法多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清生化指标的影响（见表2）由表2可知，试验A组肉牛血清总蛋白、球蛋白、总胆红素、总胆汁酸、甘油三酯、肌酐、尿素氮、镁含量及谷草转氨酶、γ-谷氨酰基转氨酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶活性均显著高于对照组（P0.05）；试验B组肉牛血清总蛋白、球蛋白、甘油三酯、尿素氮、无机磷含量及谷草转氨酶、γ-谷氨酰基转氨酶、碱性磷酸酶、总胆汁酸、肌酸激酶、淀粉酶活性显著高于对照组（P0.05）；试验C组肉牛血清总蛋白、球蛋白、总胆红素、尿素氮、镁含量及γ-谷氨酰基转氨酶、碱性磷酸酶、总胆汁酸、肌酸激酶、淀粉酶活性显著高于对照组（P0.05）；各试验组肉牛血清谷丙转氨酶活性及胆固醇、葡萄糖含量均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.004.T002表2复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清生化指标的影响项目对照组试验A组试验B组试验C组总蛋白/(g/L)73.97±0.40c78.50±0.46a76.87±0.90b76.07±0.46b白蛋白/(g/L)37.30±1.0637.13±0.7837.43±0.9238.00±1.08球蛋白/(g/L)36.67±0.72c41.37±1.06a39.43±0.42b38.07±1.27b总胆红素/(μmol/L)4.33±0.20b5.60±0.20a4.61±0.15b5.81±0.12a谷丙转氨酶/(U/L)26.43±0.51a23.67±0.58b23.33±1.53b24.00±1.00b谷草转氨酶/(U/L)63.67±0.58d85.33±1.15a82.33±0.58b66.33±1.15cγ-谷氨酰基转氨酶/(U/L)14.17±0.93b19.37±0.93a20.50±0.50a18.10±1.21a碱性磷酸酶/(U/L)92.17±0.76d138.33±2.08c215.00±1.00a168.33±0.58b总胆汁酸/(μmol/L)13.21±0.94d22.70±0.46b29.03±1.46a19.45±0.50c肌酸激酶/(U/L)127.23±0.80c174.67±1.53a144.33±1.53b146.67±1.15b淀粉酶/(U/L)12.43±0.75b12.67±1.15b17.00±1.00a17.33±0.58a甘油三酯/(mmol/L)0.36±0.03c0.48±0.08b0.73±0.06a0.27±0.03c胆固醇/(mmol/L)4.40±0.34a2.64±0.21b2.66±1.12b2.48±0.10b葡萄糖/(mmol/L)5.67±0.11a4.61±0.13b4.77±0.26b4.95±0.14b肌酐/(μmol/L)133.33±1.00b145.67±1.15a131.67±1.53b135.67±1.15b尿素氮/(mmol/L)3.10±0.09d5.39±0.17a4.63±0.03b3.93±0.12c总二氧化碳/(mmol/L)22.00±1.0022.67±1.1523.00±1.0023.00±1.00钙/(mmol/L)2.33±0.362.32±0.212.12±0.462.49±0.41无机磷/(mmol/L)2.65±0.06b2.62±0.06b2.74±0.07a2.50±0.05b镁/(mmol/L)0.76±0.04b0.87±0.07a0.73±0.06b0.86±0.04a注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），无字母或者含有相同字母表示差异不显著（P0.05）。2.2复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清免疫指标的影响（见表3）由表3可知，试验A组肉牛血清IgM和IgA含量显著高于其他组（P0.05），其他组间各项指标差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.004.T003表3复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清免疫指标的影响组别IgMIgAIgG对照组34.93±1.19b17.68±0.52b4.96±0.20试验A组39.04±1.53a20.09±0.92a4.96±0.14试验B组34.84±0.47b17.13±0.79b4.90±0.04试验C组34.44±0.92b17.45±0.19b4.96±0.12注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），无字母或者含有相同字母表示差异不显著（P0.05）。mg/L3讨论3.1复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清生化指标的影响血液生化指标能够反映动物机体的生理代谢和身体健康状况。本试验结果表明，与对照组相比，复合氨基酸维生素添加剂对血液生化指标均具有不同程度的影响，血清总蛋白、球蛋白含量显著提高，表明动物体内蛋白质的吸收和代谢情况有所提高[9]；同时谷草转氨酶、γ-谷氨酰基转氨酶等参与机体内转氨基作用，其活性升高也能够反映机体蛋白质合成和分解代谢的情况改善。这些指标显著提高能够表明氨基酸维生素复合添加剂对动物机体蛋白质合成代谢具有正向作用，以此发挥其免疫调节的作用。各试验组肉牛血清碱性磷酸酶的活性与胆汁酸含量显著高于对照组，说明复合氨基酸维生素添加剂能够改善动物肝脏代谢功能。碱性磷酸酶在机体代谢过程中起到非常重要的作用，能够催化水解磷酸单酯、磷酸核苷以及6-磷酸糖等类似化合物[10]，其活性较高也能够表明日粮中磷酸酯类物质利用程度加强。甘油三酯和总胆固醇含量能够反映脂类物质在动物体内的吸收和代谢情况。本研究发现，试验A组、试验B组肉牛血清甘油三酯含量显著高于对照组、试验C组；各试验组血清胆固醇含量显著低于对照组。胆固醇转化为胆汁酸经肠道排出体外是体内胆固醇代谢的主要途径[11]，本试验结果与上述结论相同，说明复合氨基酸维生素添加剂能够使血液中的胆固醇向胆汁酸转化的速度加快。甘油三酯含量的变化情况与胆固醇表现不同，可能与添加精氨酸和谷氨酰胺对血液产生和分泌NO的功能机制影响有关[12]。Si等[13]指出，添加精氨酸可以提高血液中甘油三酯的含量，与本试验结果基本一致。试验各组及对照组血清钙、磷、镁的含量均正常，表明日粮能够满足动物生长发育对钙、磷的需要；试验A组和试验C组中镁含量显著升高，表明谷氨酰胺能够提高血液中镁的含量。综上所述，在日粮中添加复合氨基酸维生素添加剂可起到改善血液生化指标的作用，不同组合的添加剂种类得到的试验结果也存在差异性。3.2复合氨基酸维生素添加剂对育肥肉牛血清免疫指标的影响免疫球蛋白可从机体免疫学方面评估动物自身的免疫力状况，其浓度变化也可体现动物对疫病抵抗能力的高低。IgM是在机体免疫力中产生最早的抗体，具有强大的杀菌作用；IgA主要参加黏膜免疫过程，在局部的抗感染过程中起到关键作用；而IgG则为机体体液免疫过程中最主要的抗体，具有抵抗细菌病毒并中和毒素的免疫功能[14]。本试验结果表明，精氨酸与谷氨酰胺的组合添加剂显著提高肉牛血清IgM和IgA的含量，与李成贤等[15]、麻名文[16]的研究结果一致。精氨酸与谷氨酰胺组合添加剂在免疫方面表现出了组合正向效应，而其他两组免疫指标未发生显著变化，分析原因可能因为氨基酸与维生素组合未能在免疫球蛋白指标上产生显著影响，可能对其他免疫指标产生影响，也可能与添加剂的量有关，具体原因有待进一步探究。4结论本研究结果表明，复合氨基酸维生素添加剂能够对育肥肉牛血清生化指标及代谢产生影响，其中精氨酸+谷氨酰胺组合能够提高育肥牛血清IgM和IgA的含量。