日龄增长、器官衰老病变、外界环境以及高强度产蛋引起的各类应激等因素均会对产蛋后期蛋鸡的生产性能以及健康状况造成不利影响[1-2]。据统计，实际生产中有近30%蛋鸡在产蛋后期会因骨钙流失过多而出现骨折等症状，因而被淘汰，给蛋鸡养殖带来巨大经济损失[3]。因此，有效缓解产蛋后期蛋鸡的应激状况、提高产蛋性能、延长产蛋周期是现阶段提高蛋鸡养殖效益的关键一步。酸化剂可降低畜禽胃肠道内pH值，刺激胃壁分泌胃酸，提高消化酶活性，从而提高畜禽对养分的吸收利用率；此外，酸化剂还能够抑制肠道有害菌增殖，改善畜禽肠道健康，减少粪便中氨氮的排放，改善圈舍空气环境[4]。目前，酸化剂主要为固态饲料型酸化剂，应用领域则集中在猪和肉鸡，探究饮水中添加适宜浓度酸化剂在产蛋后期蛋鸡中的应用研究较少。本试验探索产蛋后期蛋鸡饮水中添加酸化剂，验证其能否改善产蛋后期蛋鸡产蛋性能和蛋壳质量，并对其作用机制进行初步探讨。1材料与方法1.1试验材料酸化剂由播恩集团股份有限公司提供（主要成分：45%甲酸，10%丙酸），受试动物为77周龄罗曼灰蛋鸡。1.2试验设计将500只77周龄的产蛋相近健康罗曼灰蛋鸡随机分为4组，每组5个重复，每个重复25只蛋鸡。各组饲喂相同日粮，对照组饮用自来水，试验组分别在饮水中添加0.10%、0.15%、0.20%的酸化剂，试验期28 d。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.010.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米54.60代谢能/(MJ/kg)10.92小麦10.00粗蛋白/%15.85豆粕22.30钙/%4.04豆油1.00总磷/%0.60石粉9.84有效磷/%0.29磷酸氢钙1.00L-赖氨酸盐酸盐0.15DL-蛋氨酸0.20食盐0.25碳酸氢钠0.10硫酸钠0.10氯化胆碱0.10预混料0.36注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 7 000 IU、VD3 2 500 IU、VE 30 mg、VK 1 mg、VB1 1.5 mg、VB2 4 mg、VB6 1.5 mg、VB12 0.02 mg、烟酸30 mg、泛酸10 mg、叶酸0.55 mg、生物素0.16 mg、Fe 120 mg、Cu 12 mg、Mn 110 mg、Zn 100 mg、I 2 mg、Se 0.4 mg、Co 1 mg。2.营养水平为计算值。1.3饲养管理试验在上林县漓柳农牧有限公司蛋鸡场进行，采用阶梯笼进行饲养。每天8：00、15：00喂料，自由饮水，每天光照16 h，饲养管理均参照罗曼灰饲养手册进行。试验开始后每日监测对照组和试验组饮用水的pH值，并对鸡舍内氨气浓度进行监测。1.4测定指标及方法1.4.1产蛋性能记录各组蛋鸡每天的产蛋情况（包括正常蛋、沙壳蛋、破蛋等），蛋样称重。试验结束后，计算全阶段平均日采食量、产蛋率、平均蛋重、料蛋比、破蛋率等。料蛋比=总耗料量/总产蛋重(1)产蛋率=总产蛋数/存栏鸡数×100%(2)破蛋率=破蛋数/总产蛋数×100%(3)合格蛋率=正常蛋数/总产蛋数×100%(4)1.4.2蛋品质试验第2周及第4周结束时，每个重复收集4枚蛋样，用于蛋品质测定。采用SF-50-L蛋壳强度测定仪（南京瑶恩仪器设备有限公司）测定蛋壳强度，YN-125蛋壳厚度测定仪（南京瑶恩仪器设备有限公司）测定蛋壳厚度。采用YN-125多功能蛋品分析仪（南京瑶恩仪器设备有限公司）和比色扇测定其他蛋品质指标。哈夫单位计算公式为：哈夫单位=100×lg(H－1.7 W0.37＋7.6)(5)式中：H为蛋白高度（cm）；W为蛋重（g）。1.4.3血清生化指标试验结束时，各重复选2只蛋鸡采血，3 500 r/min离心15 min，取上清液于-20 ℃保存，用于血清生化指标、抗氧化指标测定。采用日立7020全自动生化分析仪测定血清总蛋白（TP）、球蛋白（GLB）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、钙（Ca）、磷（P）的含量及谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）的活性。1.4.4抗氧化指标蛋鸡采血后屠宰，取肝脏储存于干冰中，用于肝脏抗氧化指标测定。血清和肝脏中丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）活性采用南京建成生物试剂公司试剂盒测定，具体操作步骤参考试剂盒说明书。1.5数据统计与分析试验数据采用Excel 2019软件进行整理，SPSS 22.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行组间多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，饮水中添加0.10%和0.15%的酸化剂能够显著提高产蛋后期蛋鸡的平均蛋重、合格蛋率（P0.05），降低破蛋率（P0.05）。与对照组相比，饮水中加入0.10%和0.15%浓度的酸化剂能够有效降低试验阶段产蛋后期蛋鸡的死亡率。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.010.T002表2不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响组别产蛋率/%采食量/g平均蛋重/(g/枚)合格蛋率/%破蛋率/%料蛋比死亡率/%对照组86.48±0.24138.30±0.3765.39±0.27b95.98±0.24b3.03±0.03a2.12±0.012.400.10%酸化剂组87.15±0.28138.70±0.2966.78±0.25a96.85±0.28a2.12±0.02b2.08±0.010.800.15%酸化剂组86.98±0.34138.80±0.2766.35±0.15a96.78±0.34a2.33±0.04b2.09±0.0100.20%酸化剂组86.35±0.22138.72±0.2565.95±0.11ab95.95±0.22b2.62±0.03ab2.10±0.012.40注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，连续饲喂28 d，0.1%、0.15%的酸化剂预处理水可显著提高产蛋后期蛋壳厚度和蛋壳强度（P0.05）；0.2%酸化剂预处理水也有提高的趋势，但差异不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.010.T003表3不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响组别14 d28 d蛋清高度/mm哈夫单位蛋黄颜色蛋壳厚度/mm蛋壳强度/(kg/cm2)蛋清高度/mm哈夫单位蛋黄颜色蛋壳厚度/mm蛋壳强度/(kg/cm2)对照组5.60±0.1368.37±2.5710.44±0.490.38±0.014.81±0.265.19±0.1565.23±1.4010.78±0.400.38±0.01b4.82±0.16b0.10%酸化剂组5.84±0.1770.87±1.6910.89±0.300.38±0.014.85±0.315.15±0.1665.43±1.7110.89±0.300.40±0.01a5.05±0.11a0.15%酸化剂组5.77±0.1569.38±1.9810.89±0.450.39±0.014.94±0.215.36±0.1266.38±1.6211.11±0.450.40±0.01a4.97±0.09a0.20%酸化剂组5.44±0.1567.38±1.2610.67±0.600.38±0.014.88±0.265.32±0.1467.38±1.4510.89±0.540.39±0.01ab4.89±0.08ab2.3不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，饮水添加0.10%和0.15%酸化剂能够显著提升产蛋后期蛋鸡血清TP、ALB、Ca含量（P0.05），显著降低血清TG、BUN的含量和ALT、AST、ALP的活性（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.010.T004表4不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)GLB/(g/L)BUN/(mmol/L)TG/(mmol/L)ALT/(U/L)AST/(U/L)ALP/(U/L)P/(mmol/L)Ca/(mmol/L)对照组63.59±2.84b17.58±0.84b46.01±2.392.74±0.02a5.63±0.04a26.12±1.31a39.33±2.33a247.88±43.79a1.99±0.244.54±0.13b0.10%酸化剂组65.11±2.22a19.01±0.72a46.10±2.282.30±0.01b4.48±0.07b20.29±1.91b33.19±2.21b170.75±36.58b2.01±0.345.19±0.08a0.15%酸化剂组64.56±2.85a18.36±0.85a46.20±2.152.29±0.02b4.26±0.09b21.32±1.33b34.54±2.33b189.75±33.38b2.03±0.255.09±0.09a0.20%酸化剂组63.12±2.62b17.22±0.62b45.90±2.142.47±0.01ab4.77±0.09b21.19±1.28ab36.19±2.28ab200.75±31.58ab2.02±0.245.06±0.28ab2.4不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡血清抗氧化能力的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，饮水添加酸化剂能够显著增强产蛋后期蛋鸡血清T-AOC（P0.05），0.10%和0.15%酸化剂组血清MDA含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.010.T005表5不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡血清抗氧化能力的影响组别T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)SOD/(U/mL)对照组22.58±0.84b2.64±0.02a327.28±33.220.10%酸化剂组26.01±0.72a2.40±0.01b320.75±36.580.15%酸化剂组25.96±0.85a2.39±0.02b339.75±36.580.20%酸化剂组25.22±0.62a2.47±0.04ab310.75±36.582.5饮水添加不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡肝脏抗氧化能力的影响（见表6）由表6可知，与对照组相比，饮水添加酸化剂能够提高蛋鸡肝脏T-AOC（P0.05），0.10%和0.15%酸化剂组肝脏MDA含量显著降低（P0.05）。0.10%酸化剂组蛋鸡肝脏T-AOC显著高于0.15%、0.20%酸化剂组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.010.T006表6不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡肝脏抗氧化能力的影响组别T-AOC/(U/mg prot)MDA/(μmol/g prot)SOD/(U/mg prot)对照组12.58±0.44c1.09±0.02a339.28±33.220.10%酸化剂组16.31±0.42a0.87±0.01b353.75±37.580.15%酸化剂组15.26±0.55b0.89±0.02b369.75±33.280.20%酸化剂组15.48±0.42b0.97±0.01ab332.75±32.553讨论3.1饮水添加不同浓度酸化剂对产蛋后期蛋鸡产蛋性能的影响随着蛋鸡日龄增长，其体内各个器官逐渐衰老、发生病变，包括产蛋性能在内的各项身体功能均会下降，加之前期高强度产蛋积累的慢性应激以及高密度饲养带来的环境应激，这些不利影响会缩短蛋鸡产蛋周期，严重降低产蛋后期蛋鸡的产蛋性能[5]。研究表明，饮水中添加酸化剂可降低蛋鸡饮水pH值，抑制水体中有害菌增殖，改善水体质量，还可降低维持蛋鸡消化道pH值，调节肠道菌群提高消化酶活性，改善蛋鸡肠道健康[6]。此外，饮水中加入酸化剂能够增强蛋鸡抗氧化能力和免疫力，缓解产蛋后期蛋鸡的长期氧化应激反应[7]。Gong等[8]研究发现，在蛋鸡日粮中添加1 000 mg/kg的苯甲酸能够显著降低破蛋率，提升45~61周龄罗曼粉蛋鸡的平均蛋重。赵晓楠等[9]研究发现，饮水中添加0.1%短链脂肪酸复合酸化剂能够显著降低破蛋率，提升蛋均重。本研究发现，在饮水中加入0.10%和0.15%酸化剂可有效增加产蛋后期蛋鸡所产鸡蛋的平均蛋重，提高合格蛋率，降低破蛋率。可能是酸化剂提高产蛋后期蛋鸡对营养物质的吸收利用率，增强机体抗氧化能力，提高产蛋性能。3.2饮水添加酸化剂对产蛋后期蛋鸡蛋品质的影响蛋壳形成于蛋鸡输卵管子宫部，随着蛋鸡日龄增长，长期高强度产蛋造成的输卵管子宫部病变会导致蛋壳质量逐步下降。蛋壳的主要成分是CaCO3，因此Ca的代谢水平对蛋壳质量的高低起到至关重要的作用[10]。研究表明，酸化剂的加入能够降低蛋鸡消化道pH值，提高其对饲料中Ca、P等元素的吸收利用率，当更多的Ca2+被吸收入血液代谢途径内，表示蛋鸡具有能力动员更多的Ca进行沉积形成蛋壳，从而改善蛋壳质量[11]。Wang等[12]研究发现，在日粮中添加0.1%、0.2%、0.3%的苯丙乳酸能够增强产蛋后期鸡蛋的蛋壳强度。魏艳红等[13]研究表明，日粮中加入250、500 mg/kg的包膜复合酸化剂可提高鸡蛋的蛋壳厚度和蛋壳强度。王光富等[14]研究发现，在21~35周龄的蛋鸡日粮中添加一定量的有机酸和植物精油复合物对蛋壳质量无显著提升效果。本研究中，饮水添加0.10%、0.15%的复合有机酸能有效改善77周龄蛋鸡的蛋壳品质，与上述研究结果不同的原因可能是21~35周龄处于产蛋高峰，蛋鸡各方面功能正处于巅峰状态，因此酸化剂对蛋壳质量的提升效果并不显著。3.3饮水添加酸化剂对产蛋后期蛋鸡血清生化指标的影响血清生化指标反映机体内合成和代谢某项物质的能力，也可直观反映动物体对日粮中营养物质的合成、利用与自身健康状况[15]。血清BUN含量可反映蛋鸡对蛋白质分解代谢能力的强弱，当机体蛋白质与氨基酸分解正常时，血清BUN含量较低[16]。因此，饮水中添加酸化剂能够提升产蛋后期蛋鸡对蛋白质的分解代谢水平，减轻其肾脏负担。Ca是蛋壳形成的重要元素，血清Ca含量反应蛋鸡对日粮中Ca的利用状况[17]。本研究结果表明，饮水中加入0.10%、0.15%浓度的酸化剂能够有效提升产蛋后期蛋鸡对日粮中Ca元素的吸收利用率。综合蛋壳质量的检测结果，初步验证了饮水中添加酸化剂可通过增强产蛋后期蛋鸡对Ca的利用率改善蛋壳品质。ALP活性可以反映蛋鸡体内骨钙的代谢情况[18]，当Ca的流出大于摄入时，蛋鸡会动员髓质骨以供应产蛋所需的Ca。髓质骨被消耗过多导致蛋鸡出现骨质疏松、骨折病理症状时，血清ALP活性就会提高，以促进成骨细胞合成髓质骨以缓解蛋鸡骨折等症状[19]。本研究中，饮水添加0.10%、0.15%酸化剂组蛋鸡血清ALP活性显著低于对照组，Ca含量显著高于对照组，说明饮水添加酸化剂提高了产蛋后期蛋鸡对日粮中Ca的吸收率，维持蛋鸡骨骼代谢平衡。产蛋后期因饲养密度过高、脂代谢失衡、长期氧化应激损伤等因素导致蛋鸡易患脂肪肝，进而导致生产性能急剧下降，症状严重甚至会引起死亡，血清TC、TG含量过高是脂肪肝的确诊指标[20]。AST、ALT的活性与肝脏炎症、变性和坏死等症状密切相关，是反映肝脏损伤情况的重要指标[21]。本研究表明，饮水添加酸化剂可增强蛋鸡对脂类物质的代谢能力，降低血清AST、ALT的活性，添加0.10%、0.15%酸化剂能够减轻产蛋后期蛋鸡肝脏损伤症状，降低其患脂肪肝的风险。3.4饮水添加酸化剂对产蛋后期蛋鸡抗氧化能力的影响蛋鸡由于长期高强度排卵会产生大量活性氧，大量氧自由基会使蛋鸡处于氧化应激状态。氧化应激可引起线粒体损坏、颗粒细胞凋亡、卵泡衰竭、繁殖性能下降，进而导致蛋鸡产蛋性能下降[5]。处于氧化应激状态下的动物主要通过酶促和非酶促两种方式完成机体内氧自由基的清除，T-AOC可反映畜禽酶促和非酶促两个渠道的总体抗氧化能力的强弱[22]。SOD是畜禽通过酶促体系清除氧自由基这一环节中的重要指标，当畜禽处于氧化应激状态时，该酶活性增强，从而达到清除氧自由基的目的[23]。MDA是畜禽脂质过氧化的产物，有研究表明，高强度的产蛋会持续激活蛋鸡肝脏脂肪酸合成途径，脂肪酸的合成过程中则会产生氧自由基，大量氧自由基附着在蛋鸡肝脏生物质膜上会发生脂质过氧化作用，致使其肝脏氧化损伤，因此，畜禽体内MDA含量是判断其氧化应激状态的一个指标[24]。陈继发等[25]研究表明，在日粮中添加一定比例的甲酸、丙酸、丁酸复合物能够显著增强蛋鸡血清SOD的活性。本研究结果表明，饮水中添加0.10%、0.15%、0.20%的酸化剂能够增强产蛋后期蛋鸡血清T-AOC，降低血清MDA的含量，表明酸化剂能够提升产蛋后期蛋鸡的抗氧化能力。有研究表明，过量氨气吸入会加速细胞线粒体衰亡，导致畜禽极易处于氧化应激状态[26]。研究表明，在畜禽日粮或饮水中加入酸化剂可提高畜禽对营养物质的吸收率，降低肝脏代谢负担和粪便中氨氮的含量，从而降低圈舍内的氨气浓度，改善空气质量[27]。本研究中，产蛋后期蛋鸡抗氧化能力的提升可能与蛋鸡肝脏代谢负担减轻以及圈舍氨气浓度的降低有关。4结论在本试验条件下，饮水中添加0.10%、0.15%酸化剂可以提高产蛋后期蛋鸡对营养物质的代谢水平，增强机体抗氧化能力，并提高产蛋后期蛋鸡的生产性能和蛋壳质量。