乳酸菌素是以鲜牛奶为原料经乳酸菌发酵后制备成的微生态制剂。乳酸菌在增殖过程中会合成一些用于抑菌和杀菌的蛋白质或多肽类物质，与抗生素有类似的作用机制，可有效抑制病原菌生长，提高饲料转化率，保持畜禽健康生长[1-3]。乳酸菌素可在畜禽肠胃道黏膜上定植，形成一层有效的防御屏障[4-5]，增强乳酸菌与病原微生物的竞争能力，减少病原微生物[6-7]，增强机体免疫力[8]。日粮中添加重金属耐受的乳酸菌可降低动物体内重金属沉积。Wang等[9]研究表明，嗜酸乳杆菌可降低蛋鸡酮体和脂肪的含量，减少肝脏和蛋黄胆固醇含量，增加高密度脂蛋白胆固醇含量。乳酸菌的微生物制剂可降低育成鸡的料重比，提高生产性能[10-11]。孔令武等[12]研究表明，在鸡饲粮中添加耐镉乳杆菌能够改善镉引起的蛋白高度下降的状况，提高鸡蛋分级，改善蛋品质。吉米斯等[13]研究表明，乳酸菌可改善禽类腹泻症状，显著提高脾脏指数。张彩凤等[7]研究表明，乳酸菌可有效调节禽类的血清免疫功能指标，缓解由致病菌所引起的氧化损伤。同时，乳酸菌对改善禽类畜舍环境也具有积极作用[14]。此外还有其他关于乳酸菌素饲喂肉鸡的报道[15-16]，但尚无乳酸菌素在浙东白鹅母鹅生产上应用的报道。农业农村部194号公告[17]公布后，使用微生态制剂调节畜禽肠道健康受到越来越多的关注。本试验旨在探讨日粮中添加不同水平的乳酸菌素对浙东白鹅母鹅繁殖性能、蛋品质及血清生化免疫指标的影响，为乳酸菌素作为饲料添加剂在浙东白鹅母鹅饲喂过程中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验设计试验在象山文杰大白鹅养殖有限公司进行。选择体形匀称且身体健康的浙东白鹅种母鹅（约19~20月龄）共2 000只，按照体重相近的原则随机分为对照组、试验组1、试验组2和试验组3，每组5个重复，每个重复100只鹅。试验从2022年2月14日开始，预试期15 d，正式试验期150 d，分2个产蛋周期，第1产蛋周期从2022年3月1日至2022年5月14日，第2产蛋周期从2022年5月15日到2022年7月28日。对照组鹅饲喂基础日粮，试验组1、试验组2、试验组3分别在基础日粮中添加0.01%、0.02%、0.04%乳酸菌素（益华河北生物有限公司），乳酸菌素的活力值为1 500 AU/mL。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.012.T001表1基础日粮组成及营养水平（风干基础）原料组成含量/%营养水平合计100.00稻谷13.00代谢能/(MJ/kg)11.98大麦12.00粗蛋白质/%15.54小麦14.00钙/%0.26米糠5.00磷/%0.40麸皮5.00苜蓿草粉12.00玉米30.00豆粕8.00预混料1.00注：1.每千克预混料为日粮提供：Cu 2 g、Fe 4 g、Se 0.25 g、Zn 5 g、VE 12 g、VC 60 g、VA 5 g。2.营养水平中代谢能为计算值，其余均为实测值。1.2饲养管理试验种鹅的饲养方式为地面平养。鹅舍为封闭式建筑，设置取食槽、饮水槽和产蛋窝。试验种鹅每天投喂两次，每只每次125 g。按照《浙东白鹅规模饲养技术规程》中的规定进行常规的免疫、捡蛋以及日常管理。1.3测定指标及方法1.3.1繁殖性能试验期间记录已编号的种鹅每天产蛋数和蛋重，计算平均产蛋数和平均蛋重。采用“泄殖腔托蛋”方法[18]测定鹅产蛋枚数。种蛋进入孵化箱后第6 d，用头照的方法挑出无精蛋和死精蛋；种蛋进入孵化箱后第12 d，用二照的方法挑出死胎蛋。记录无精蛋、死精蛋的数量和死胎蛋的数量，计算受精率和孵化率。受精率=受精蛋数/入孵化箱的蛋数×100%(1)孵化率=出雏鹅数量/受精蛋数×100%(2)1.3.2蛋品质第2产蛋周期结束当天，每个重复随机选取10枚鹅蛋，5个重复共50枚鹅蛋。游标卡尺测量鹅蛋长径、短径，计算蛋形指数；分别在鹅蛋壳的大头、小头和中间部位用游标卡尺测量蛋壳厚度，统计平均值。鹅蛋称重，取出鹅蛋内完整蛋黄并称重，蛋白尽量倒出，蛋壳破碎后擦干蛋壳内容物，将全部的蛋壳碎片称重，得出蛋壳重量蛋重减去蛋壳重和蛋黄重，即为蛋白重量。根据蛋黄重和完整蛋重计算蛋黄比例。蛋黄比例=完整蛋黄重/全蛋重×100%(3)1.3.3血清生化、免疫指标每个试验组随机选取5只浙东白鹅母鹅，在第2个产蛋周期内选择产蛋期的第2枚、第4枚和第6枚，选择就巢期的第1、10、20 d及恢复期的第8 d为采血时间。每只母鹅从翅静脉采血5 mL，加入带有0.2 mL 0.02 mol/L EDTA抗凝剂的采血管内，3 000 r/min离心10 min，收集上清液保存于-20 ℃冰箱。胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）采用东芝120FR型全自动生化分析仪测定；总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）用放射免疫分析方法测定。使用试剂盒测定白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）含量。生化指标与免疫指标按照试剂盒（南京建成生物工程研究所）说明书进行测定。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 22.0软件进行单因素方差分析，Duncan's进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.01表示差异极显著，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1乳酸菌素对浙东白鹅母鹅繁殖性能的影响（见表2）由表2可知，与对照组相比，试验组2、试验组3白鹅母鹅两个产蛋周期内的产蛋数、受精率显著提高（P0.05），第2产蛋周期的孵化率显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.012.T002表2乳酸菌素对浙东白鹅母鹅繁殖性能的影响项目组别母鹅数/只平均产蛋数/(枚/只)受精率/%孵化率/%第1产蛋周期对照组403.50±0.2472.50±5.32—试验组1403.60±0.1373.30±6.73—试验组2404.60±0.17*79.10±4.28*—试验组3404.80±0.56*78.90±4.59*—第2产蛋周期对照组403.40±0.3175.60±3.2492.70±5.12试验组1403.60±0.4676.20±7.2693.00±4.58试验组2404.90±0.28*80.20±5.34*96.10±5.24*试验组3404.70±0.25*81.00±4.67*96.50±3.15*注：1.与对照组相比，“*”表示显著差异（P0.05），“#”表示差异极显著（P0.01）；下表同。2.“—”表示无此数据。2.2乳酸菌素对浙东白鹅母鹅产蛋品质的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，试验组2、试验组3鹅蛋的蛋形指数显著提高（P0.05），试验组1、试验组2、试验组3的蛋黄比例显著提高（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.012.T003表3乳酸菌素对浙东白鹅母鹅产蛋品质的影响组别蛋重/(g/枚)蛋形指数蛋壳强度/(kg/cm2)蛋白重量/g蛋黄比例/%对照组98.52±11.201.30±0.035.63±1.2548.32±4.1922.16±2.87试验组198.48±12.901.35±0.035.61±1.1948.34±6.2624.20±2.19*试验组298.55±14.001.36±0.035.61±1.3648.28±7.0124.14±2.76*试验组398.58±12.301.38±0.035.62±0.6148.64±6.5724.18±2.13*2.3乳酸菌素对浙东白鹅母鹅血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，试验组1、试验组2、试验组3白鹅血清TG含量极显著降低（P0.01），HDL-C含量极显著提高（P0.01）；各组白鹅血清LDL-C含量有下降趋势（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.012.T004表4乳酸菌素对浙东白鹅母鹅血清生化指标的影响组别TCTGHDL-CLDL-C对照组4.11±0.210.47±0.061.32±0.111.43±0.31试验组14.35±0.270.38±0.03#1.89±0.33#1.42±0.28试验组24.30±0.280.19±0.03#2.21±0.23#1.42±0.16试验组34.26±0.220.18±0.01#2.24±0.19#1.40±0.23mmol/L2.4乳酸菌素对浙东白鹅母鹅血清免疫指标的影响（见表5）由表5可知，与对照组相比，日粮中添加乳酸菌素对浙东白鹅血清TP、ALB、GLB、IgA、IgG、IgM、IL-1、IL-2、IL-6免疫指标均无显著影响（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.09.012.T005表5乳酸菌素对浙东白鹅母鹅血清免疫指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)GLB/(g/L)IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)IL-1/(ng/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)对照组51.30±1.0713.50±0.2338.50±0.782.26±0.564.19±0.661.65±0.3766.62±4.5823.52±2.6195.11±6.05试验组152.20±1.2414.20±0.3738.40±0.892.24±0.394.22±0.591.67±0.3367.12±5.6423.07±3.2396.68±5.39试验组252.00±1.2114.10±0.2938.60±0.652.25±0.434.17±0.431.66±0.2767.36±8.7522.69±2.9596.35±4.87试验组351.90±1.8313.70±0.7538.20±1.012.25±0.314.15±0.481.64±0.3166.94±6.9024.01±3.4996.05±6.353讨论乳酸菌素是一些乳酸菌在生长与代谢过程中合成并分泌到环境中的活性物质，包括细菌素、活性多肽、核苷酸、多酚、寡糖、有机酸等，可以抑制一些广谱的革兰氏阳性菌，自然改善和维护消化道内的微生态平衡和代谢平衡[19-20]。近年来，乳酸菌素等替抗饲料添加剂在肉禽中的研究较多。张亚雄等[15]研究表明，乳酸菌素对肉鸡日增重和饲料转化率具有明显的改善作用。王全溪等[16]发现，日粮中添加乳酸菌素可以提高肉鸡的生长性能，可以改善机体抗氧化功能。但目前尚无关于浙东白鹅母鹅的报道。3.1乳酸菌素对浙东白鹅母鹅繁殖性能的影响乳酸菌素在动物肠道中定植，可分解肠黏膜上皮细胞上的多糖物质，产生促消化酶增强对碳水化合物的降解，产生蛋白酶促进饲料中蛋白质的利用和吸收，从而提升动物的生产性能。马晓婷等[21]研究发现，蛋鸡产蛋后期饲粮中添喂乳酸菌能够明显提高蛋鸡的生产性能，改善蛋品质。孙汝江等[22]研究发现，日粮中添加0.2%的乳酸菌素均能够提高蛋鸡的生产性能和蛋品质。但乳酸菌素对母鹅生产性能的影响的相关报道较少。本研究中，与对照组相比，添加乳酸菌素可以提高浙东白鹅母鹅的产蛋数、受精率与孵化率，改善蛋品质。3.2乳酸菌素对浙东白鹅母鹅血清生化指标的影响微生态制剂会在很大程度上影响动物体内糖类、脂类与蛋白质的代谢，这些影响均可通过血清生化指标反映。胡兰等[23]研究表明，添加微生物添加剂可提高大骨鸡血清TP含量，降低血清TC含量。本研究发现，饲喂乳酸菌素后，浙东白鹅母鹅血清TG含量极显著下降，HDL-C含量极显著升高，表明乳酸菌素对浙东白鹅母鹅体内的脂质代谢具有明显的正向调控作用。3.3乳酸菌素对浙东白鹅母鹅血清免疫指标的影响TP、ALB、GLB、免疫球蛋白抗体和细胞因子等指标均能够反映机体的免疫情状。孙汝江等[22]研究发现，日粮中添加乳酸菌素对血浆TP、ALB、GLB含量无显著影响。本研究发现，各组浙东白鹅血清TP、ALB、GLB及3种免疫球蛋白、3种细胞因子的含量均无显著差异，可能与使用剂量有关，具体原因还有待进一步研究。4结论本研究结果表明，日粮中添加乳酸菌素可明显提高浙东白鹅母鹅的产蛋数、受精率和孵化率，对鹅蛋品质与血清生化代谢指标，尤其是脂质代谢具有积极的影响。综合试验效果与成本的考虑，乳酸菌素的适宜使用量为0.02%。