“粮改饲”政策的出台，加快了草牧业的发展，其中油菜的利用开发成为重要的研究方向[1]。饲用油菜又名双低油菜，其在我国的种植面积约占世界的25%，推动油菜的饲用性能研究有利于解决冬季青贮饲料缺乏的问题。油菜中蛋白、脂肪含量高，纤维含量低且生长迅速[2]，可鲜用或青贮。利用青贮技术更利于保持油菜营养价值，提高适口性，油菜青贮的气味酸香，可促进家畜肠道蠕动和养分消化吸收，利于长期保存[3]。研究表明，新鲜饲用油菜水分含量较高，单独青贮效果不好[4]。目前，已有饲料油菜与玉米秸秆混合青贮的相关报道[5-6]。油菜青贮可用于肉羊、肉牛的育肥试验中[7-8]。酒糟是在酿酒蒸馏过程中产生的加工副产物[9]，粗蛋白、微量元素、维生素等含量较高，可作为牛、羊等对粗纤维饲料要求不高的家畜，但酒糟的吸收效果差，极易腐败并滋生细菌，较高的酒精度也易引起家畜酒精中毒。因此酒糟可通过发酵、青贮等生产方式提高其利用率[10]。张照喜等[11]通过酒糟和玉米秸秆青贮，改善了玉米秸秆的适口性，提升了哺乳期山羊的产奶量。陈冬梅等[12]发现，利用巨菌草与无糠壳白酒糟青贮可以提高水溶性碳水化合物和乳酸含量，降低了蛋白质的分解。本研究探讨饲用油菜中添加不同比例的浓香型酒糟进行混合固态发酵，通过特性互补提高青贮饲料品质，为冬闲田和白酒糟综合利用奠定基础，为调制品质优良的饲用油菜青贮饲料提供参考。1材料与方法1.1试验材料饲用油菜采自四川省宜宾市翠屏区宜宾学院农场基地，3月中下旬在盛花末期进行刈割。酒糟粉取自宜宾五粮液浓香型白酒核心产区。青贮原料营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T001表1青贮原料营养水平（干物质基础）原料干物质粗蛋白质中性洗涤纤维酸性洗涤纤维粗灰分可溶性碳水化合物饲用油菜10.3618.7141.6032.8312.909.19浓香型酒糟39.2117.2445.5315.574.3512.60%青贮发酵菌剂包括乳酸菌、酵母菌等益生菌，活菌总数≥200亿/g，购自郑州乐贝丰生物科技有限公司。1.2试验设计将刈割的油菜用锤片式揉搓机破碎，长度约2~3 cm，分别按油菜干物质量添加浓香型酒糟。设置R组（对照组，不添加浓香型酒糟）、RS-10组（添加10%酒糟）RS-20组（添加20%浓香型酒糟）、RS-30组（添加30%浓香型酒糟），同时按总重量的0.1%添加青贮发酵菌剂，混合均匀，每组3个重复，每袋样品1 kg。装入聚乙烯袋（24 cm × 40 cm），抽真空密封，无氧避光贮藏60 d。1.3测定指标及方法1.3.1样品采集采用标准取样法随机取青贮样品80 g，混匀。取20 g待测样品，加180 mL蒸馏水搅拌均匀，4 ℃冰箱静置24 h，4层纱布过滤后取滤液测定pH值、有机酸、氨态氮（NH3/N）含量，剩余样品65 ℃烘干，粉碎，进行其他指标分析。1.3.2感官评定感官评定参照德国农业协会（DLG）青贮感官评分标准[13]，从气味、色泽和结构进行评分。总分共划分为4个等级：一级优良（16~20分）、二级尚好（10~15分）、三级中等（5~9分）、四级腐败（0~4分）。1.3.3营养成分参照GB/T 6435—1986测定干物质（DM）含量，参照GB/T 6432—2018测定粗蛋白（CP）含量，利用3,5-二硝基水杨酸比色法测定水溶性碳水化合物（WSC）[14]，参照GB/T 6438—2007测定粗灰分（Ash）含量，按照Van Soest[15]的方法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）含量。1.3.4相对饲喂价值、粗饲料分级指数粗饲料分级标准见表2[16-18]。可消化干物质(DDM)=88.9-0.779ADF(1)粗饲料干物质随意采食量(DMI)=120/NDF(2)饲喂价值(RFV)=(DMI×DDM)/1.29(3)粗饲料分级指数(GI2001)=VDMI×NEL×CP/NDF(4)粗饲料产乳净能(NEL)=9.29×(1.085-0.015×ADF)(5)总可消化养分(TDN)=4.898+(NEL×0.897 96)(6)相对饲草质量(RFQ)=DMI×TDN/1.23(7)粗饲料随意采食量(VDMI)=BW×(120/NDF)(8)式中：BW为肉牛体重600 kg。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T002表2粗饲料分级标准项目特级12345RFV151125~150103~12487~10275~8675GI200153.833.50~53.6819.20~29.2911.10~16.446.28~10.676.281.3.5矿物质含量参照GB/T 13885—2017测定钙（Ca）、铜（Cu）、铁（Fe）、镁（Mg）、锰（Mn）、钾（K）、钠（Na）和锌（Zn）的含量，参照GB/T 6437—2002测定磷（P）含量。1.3.6发酵品质使用pH计在滤液过滤后立即测定pH值[19]，采用苯酚-次氯酸钠比色法测定NH3-N含量[20]，采用对羟基联苯法测定乳酸（LA）含量[21]。乙酸（AA）、丁酸（BA）使用Agilent-7890A气相色谱仪测定[22]。1.4数据统计与分析数据采用Excel和SPSS 17.0进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较，结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1酒糟对饲用油菜青贮饲料感官评价的影响（见表3）由表3可知，发酵60 d后，4组青贮饲料感官评价均为二级及以上。RS-10组的青贮饲料结构保持良好，但略带酒精味，等级优良。RS-30组的青贮带浓郁酒精味，颜色呈现黑褐色，品质下降，等级尚好。RS-20组的青贮茎叶结构保持良好，伴有浓郁复合酸香味，等级达到优良。综合评价分析，添加20%酒糟青贮感官品质较好。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T003表3酒糟对饲用油菜青贮饲料感官评价的影响组别气味色泽结构综合评分等级R组芳香味弱（10）黄褐色（1）茎叶结构保持良好，柔软松散（4）15二级尚好RS-10组酸香味带淡酒精味（13）黄褐色偏黄（1）茎叶结构良好，柔软松散（4）18一级优良RS-20组浓郁的复合酸香味（14）黄褐色偏黄（1）茎叶结构良好，柔软松散（4）19一级优良RS-30组浓郁酒精味并带淡酸香味（10）黑褐色（0）茎叶结构保持较差（2）12二级尚好2.2酒糟对饲用油菜青贮饲料营养成分的影响（见表4）由表4可知，随着酒糟添加比例的提高，青贮饲料中DM、CP、WSC含量呈上升趋势，而ADF含量逐渐下降。其中酒糟添加组CP和WSC含量显著高于R组（P0.05），RS-30组Ash含量显著高于其他组（P0.05），RS-20组和RS-30组ADF含量显著低于R组和RS-10组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T004表4酒糟对饲用油菜青贮饲料营养成分的影响组别DMCPWSCAshNDFADFR组21.73±1.3113.21±0.26c9.72±0.38b9.55±0.15b44.30±3.5037.83±1.96aRS-10组22.34±0.8513.87±0.19b10.35±0.19a9.71±0.07b45.65±3.6334.95±2.07aRS-20组23.45±0.4114.48±0.22ab10.39±0.17a9.53±0.09b40.05±2.1328.33±2.49bRS-30组23.40±0.8715.31±0.81a10.63±0.37a10.56±0.11a42.01±1.9426.67±2.73b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同%2.3酒糟对饲用油菜青贮饲用价值的影响（见表5）由表5可知，RS-20组和RS-30组混合青贮DDM、NEL、RFV、GI2001及RFQ数值均显著高于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T005表5酒糟对饲用油菜青贮饲料饲用价值的影响组别DDM/%DMDMI/%DMNEL/(MJ/kg)RFVGI2001RFQ计算值等级排序计算值/(MJ/kg)等级排序计算值排序R组59.43±1.53b2.72±0.204.81±0.27b125.18±7.46b1423.51±3.14b2420.36±1.20b4RS-10组61.67±1.61b2.64±0.205.21±0.29b126.11±8.70b1325.16±3.10b2320.53±1.42b3RS-20组66.83±1.94a3.00±0.166.13±0.35a155.48±8.22a特级140.88±2.96a1125.38±1.35a1RS-30组68.12±2.13a2.86±0.136.36±0.38a150.91±3.32a1237.16±1.23a1224.65±0.53a22.4酒糟对饲用油菜青贮饲料矿物质含量的影响（见表6）由表6可知，随着酒糟添加比例的增加，Ca、K和Na元素含量呈缓慢下降趋势，Mn含量逐渐升高。其中，RS-30组K含量显著低于其他组（P0.05），但Mn含量显著高于其他试验组（P0.05）。RS-20组的Fe、Zn和Cu元素含量最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T006表6酒糟对饲用油菜青贮饲料矿物质含量的影响组别Ca/%P/%Mg/%K/%Na/%Fe/(mg/kg)Zn/(mg/kg)Mn/(mg/kg)Cu/(mg/kg)R组0.94±0.03a0.52±0.02a0.26±0.033.76±0.02a0.18±0.01a381.30±8.14c31.42±0.91ab29.18±1.53d5.38±0.13cRS-10组0.91±0.04ab0.50±0.02ab0.24±0.013.31±0.07b0.17±0.02a432.12±4.68b30.38±1.04b36.26±1.04c6.00±0.38bRS-20组0.86±0.03bc0.52±0.01a0.26±0.023.08±0.03c0.16±0.01ab567.85±10.50a33.01±1.02a44.14±1.97b7.12±0.17aRS-30组0.84±0.02c0.48±0.03b0.24±0.022.83±0.02d0.14±0.01b556.57±15.53a31.02±0.50b50.27±2.10a7.11±0.35a2.5酒糟对饲用油菜青贮饲料发酵指标的影响（见表7）由表7可知，各试验组青贮饲料发酵后pH值均低于4.2，符合优质青贮饲料标准。酒糟添加组青贮饲料的pH值显著低于R组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.021.T007表7酒糟对饲用油菜青贮饲料发酵指标的影响组别pH值NH3-N/%LA/%AA/%BA/%R组4.10±0.02a0.54±0.02a9.51±1.064.64±0.27a—RS-10组3.93±0.02b0.52±0.03a11.06±0.823.54±0.43b—RS-20组3.96±0.03b0.24±0.03c10.35±0.212.86±0.12c—RS-30组3.97±0.04b0.29±0.02b10.18±0.444.17±0.14a—注：“-”表示低于检出限，未检出。RS-20组青贮饲料NH3-N和AA含量均显著低于其他组（P0.05）。各组青贮饲料LA含量随着酒糟添加量的增多呈现先升高后降低趋势，其中RS-10组最高。各试验组未检测到BA。3讨论3.1酒糟对饲用油菜青贮饲料感官品质的影响青贮饲料感官品质与饲粮成分、处理方式、添加剂种类和含量等因素密切相关[23]。优质青贮的色泽应接近新鲜原料颜色或表现为黄绿色，有适宜的酸香味，且茎叶结构清晰可见、质地松散不粘手[24]。本研究中，RS-10组和RS-20组青贮饲料色泽黄褐，质地较好且不粘手，气味酸香味适宜，均为一级优良，但酒糟添加量为30%时，气味、色泽和结构均表现出不良趋势，且酒精味浓郁。因此添加适宜比例的酒糟混贮可以提高饲用油菜青贮的感官品质，以20%添加比例最佳。3.2酒糟对饲用油菜青贮饲料营养成分的影响DM、CP和WSC是青贮饲料发酵的营养成分基础，其中DM是影响发酵品质的关键指标之一[25]；CP包含饲料中所有含氮物质，主要评价饲料的饲用品质，即CP含量越高，表明营养价值越高[26]。本研究显示，添加酒糟组青贮饲料的DM和CP含量均比对照组高，且随着酒糟添加含量的提高，各试验组DM、CP和WSC含量也逐渐升高，与李茂雅等[27]、陈冬梅等[12]结果一致。DM含量增加可能因为酒糟自身的DM含量较高引起，CP增高可能与添加组pH值和乳酸含量有关，酒糟中残留的乙醇可促进乳酸发酵，使pH值下降，抑制蛋白酶的活性，降低蛋白质分解[28]。WSC升高与李茂雅等[27]、陈冬梅等[12]、Burken等[29]研究结果一致，表明在巨菌草、皇竹草和香草中添加不同产地和品种的酒糟均能增加WSC含量，可能是酒糟中乙醇抑制了好氧微生物对饲料中营养物质的利用[30]。本试验中，各试验组Ash含量呈现无规律性变化，可能与饲料油菜与酒糟混合均匀度有关。NDF和ADF也是评价饲料品质优良的重要指标，ADF含量越低，饲料的饲用价值越高[31]。本研究中，随着酒糟添加量比例的提高，各处理组青贮饲料NDF和ADF含量呈下降趋势，其中RS-20组ADF含量下降最多，与孙安琪[25]和任海伟等[32]结果一致。有研究表明，若NDF和ADF较高可适当添加纤维素酶[33]。当酒糟添加比例为30%时，NDF和ADF含量逐渐升高，表明酒糟添加比例不易过高。RFV是NDF和ADF的综合体现，同时在品质评定中，还应评价动物饲料采食性[34]。本试验中，RS-20组和RS-30组品质均优于R组、RS-10组，以RFV、GI及粗饲料分级作为参考标准，认为添20%和30%的浓香型酒糟可提升青贮饲料品质，改善动物采食性，与张玉雯等[35]添加植物乳杆菌对辣木茎叶青贮结果相似。3.3酒糟对饲用油菜青贮饲料矿物质含量的影响Ca和P是构成牙齿和骨骼的主要成分，Na和K可维持体液渗透压和酸碱的平衡；Mg和Na等可维持肌肉和神经的正常电信号传递等。如果机体缺少矿物质元素，动物会出现一些病变[36]。本研究中，随着酒糟添加比例的提高，Ca、K和Na含量呈下降趋势，而Fe、Mn和Cu含量逐渐增加，其他微量元素变化趋势无规律。目前关于青贮饲料发酵后微量元素变化的研究相对较少，具体机制需进行深入研究。Ca和Mg元素含量与乳熟后期燕麦青贮中的含量接近[37]。3.4酒糟对饲用油菜青贮发酵指标的影响pH值是评价饲料发酵品质的重要指标，pH值越低代表青贮饲料越易保存且品质越好，通常pH值在3.8~4.2间的青贮品质归为优等，4.2~4.5为良好，4.6~5.0为一般，pH值大于5.0为劣等[5]。有报道显示，青贮原料干物质含量较高时，pH值未低于4.2，也能具有优等的品质[38]。本研究中，各试验组pH值均低于4.2，且酒糟组pH值显著性低于对照组，与陈冬梅等[12]研究报告一致，表明酒糟的添加为乳酸菌发酵提供了足够的底物，也可能是酒糟中乙醇抑制了好氧微生物对碳水化合物的分解[38]。本研究RS-10组乳酸含量最高，且pH值最低，利于长期贮存。青贮饲料中NH3-N值是体现蛋白质和氨基酸降解程度的指标，比值越高，表明发酵过程中微生物活动分解的蛋白质和氨基酸量越多，动物可吸收利用的蛋白质越少，青贮品质越差。一般该比值低于10%为优质饲料。本研究中各组NH3-N随着酒糟添加的增加而降低，乳酸菌的繁殖降低了蛋白质和氨基酸的消耗，减少NH3的生产[39]。乳酸菌可利用原料中WSC为底物发酵生成LA，LA具有促进发酵的作用，通常与青贮品质呈正相关。研究显示，优良的青贮饲料LA含量通常占干物质3%以上[40]。本研究中，LA含量均在3%以上。饲料中的AA能够抑制酵母菌和霉菌的活性，提高饲料储存期。研究表明，LA分为同型LA和异型LA，前者主要产生LA，后者能够将葡萄糖转化为LA和AA，其中的LA又会再次转化为AA[41]。研究发现，添加酒糟降低了混合青贮中AA含量，RS-20组最低，可能因为增加了同型LA发酵有关，其他组以异型LA发酵为主。梭酸菌发酵过程中会产生BA，与青贮品质呈负相关[42]，但本研究中各试验组未检测到BA，可能因乳酸菌的大量生长繁殖或残留的乙醇限制了梭酸菌的增长[43]，与李茂雅等[27]结果相同，表明酒糟与饲用油菜的青贮有利于饲料营养成分的保存。4结论饲用油菜青贮过程中添加20%、30%的浓香型酒糟可以改善青贮饲料品质，当添加量为20%时青贮饲料品质最佳。