2020年7月1日起，我国禁止在饲料中使用抗生素[1-3]，替抗添加剂成为新的研究方向[4-5]。益生菌制剂可促进动物生长，具有抗菌、调节免疫、维持肠道菌群平衡等作用，广泛应用于鸡、猪、牛、羊、驴等养殖中[6-7]。饼粕类饲料中含有大量的胰蛋白酶抑制因子、霉菌、游离棉酚等抗营养因子，影响营养成分利用[8]。微生物发酵技术将豆粕、麸皮、玉米等多种原料进行益生菌发酵，可以有效消除饲料中抗营养因子，改善适口性，提高饲料利用率[9-10]。本试验以小麦麸皮、豆粕、玉米为底物，选用乳酸杆菌、双歧杆菌、酵母菌进行发酵制成益生菌发酵饲料，探究不同水平益生菌发酵饲料对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、免疫指标的影响，为益生菌发酵饲料在仔猪生产中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料益生菌发酵饲料以小麦麸皮、豆粕、玉米（按质量比1∶1∶1.5混合）为发酵底物，乳酸杆菌、双歧杆菌、酵母菌的接菌量为发酵底物的10%，32 ℃发酵3 d。总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、谷丙转氨酶（AST）、谷草转氨酶（ALT）、总胆固醇（TG）、甘油三酯（TC）、血尿素氮（BUN）血清生化指标试剂盒购自南京建成生物工程研究所。免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素4（IL-4）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）免疫指标试剂盒均购自上海谷研试剂有限公司。1.2试验设计试验在眉山市某养殖合作社进行。选择80头、（22.0±2.2）kg“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪，随机分成4组，每组20个重复，每个重复1头猪。1组（对照组）仔猪饲喂基础日粮，2组、3组、4组分别在基础日粮中添加3%、5%、7%的益生菌发酵饲料。预试期7 d，正式试验期56 d。按照合作社饲养管理制度饲养仔猪。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.004.T001表1基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100.00玉米58.30消化能/(MJ/kg)14.28豆粕21.80粗蛋白质/%17.89膨化大豆10.00钙/%0.85鱼粉5.00总磷/%0.61豆油1.00赖氨酸/%0.98石粉0.50蛋氨酸/%0.56磷酸氢钙1.30食盐0.23赖氨酸0.36蛋氨酸0.51预混料1.00注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 8 000 IU、VD3 3 000 IU、VB1 14 mg、VB2 3.6 mg、VE 20 IU、胆碱0.5 g、叶酸0.5 mg、泛酸10 mg、Cu 10 mg、Fe 80 mg、Zn 80 mg、Mn 30 mg、I 0.3 mg、Se 0.3 mg。2.营养水平为实测值。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能记录试验断奶仔猪初重、末重、采食量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=试验期内采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2血清生化指标、免疫指标试验结束后断料12 h，采集前腔静脉血，6 000 r/min离心5 min，分离血清，按血清生化指标试剂盒说明书测定TP、ALB、GLB、AST、ALT、TG、TC、BUN；按体液免疫试剂盒说明书测定IgM、IgG、IgA；按细胞免疫试剂盒说明书测定IL-2、IL-6、IL-4、TNF-α。1.4数据统计与分析试验数据采用SPSS 18.0软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1益生菌发酵饲料对断奶仔猪生长性能的影响（见表2）由表2可知，3组、4组仔猪平均日增重显著高于对照组（P0.05），料重比显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.004.T002表2益生菌发酵饲料对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/(kg/头)末重/(kg/头)平均日增重/[kg/(头·d)]平均日采食量/[kg/(头·d)]料重比1组（对照组）22.34±2.1261.54±2.120.70±0.22b2.21±0.223.16±0.16a2组22.31±2.1862.07±3.120.71±0.24ab2.22±0.323.12±0.32ab3组22.39±2.2164.39±3.420.75±0.45a2.24±0.282.98±0.56b4组22.32±2.2363.20±2.130.73±0.22a2.25±0.253.08±0.18b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同。2.2益生菌发酵饲料对断奶仔猪血清生化指标的影响（见表3）由表3可知，与对照组相比，3组、4组仔猪血清TP、GLB含量显著升高（P0.05），血清AST、ALT活性及BUN含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.004.T003表3益生菌发酵饲料对断奶仔猪血清生化指标的影响组别TP/(g/L)ALB/(g/L)GLB/(g/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)TG/(mmol/L)TC/(mmol/L)BUN/(mmol/L)1组（对照组）50.37±1.37b35.22±2.4215.15±1.22b30.46±0.22a64.26±0.24a0.35±0.322.27±0.2810.85±0.25a2组52.28±1.52ab36.12±2.2316.16±2.22ab27.36±0.28ab58.53±0.32ab0.32±0.132.23±0.149.93±0.95ab3组58.28±2.12a36.81±2.4221.47±2.21a23.22±0.32b53.22±0.33b0.29±0.122.17±0.129.21±0.25b4组56.28±2.42a36.72±2.4219.56±3.27a23.46±0.14b54.25±0.21b0.27±0.222.15±0.129.82±0.35b2.3益生菌发酵饲料对断奶仔猪免疫指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，3组、4组仔猪血清IgA、IgG、IL-2含量显著升高（P0.05），TNF-α含量显著降低（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.18.004.T004表4益生菌发酵饲料对断奶仔猪免疫指标的影响组别IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)IL-2/(ng/L)IL-6/(ng/L)IL-4/(ng/L)TNF-α/(ng/L)1组（对照组）1.17±0.17b1.21±0.22b1.15±0.1214.16±0.12b116.16±2.245.65±0.1286.17±2.28a2组1.19±0.22ab1.24±0.13ab1.16±0.1415.26±0.18ab118.23±3.325.82±0.2378.13±2.14ab3组1.26±0.23a1.38±0.22a1.18±0.2118.82±0.22a120.22±4.136.09±0.1264.47±5.32b4组1.25±0.22a1.37±0.12a1.19±0.1717.26±0.24a121.15±4.415.92±0.3265.35±5.22b3讨论3.1益生菌发酵饲料对断奶仔猪生长性能的影响益生菌发酵饲料是以多种饲料为原料，按照一定比例添加益生菌进行发酵的饲料。饲料经益生菌发酵后可有效降解粗纤维，增加活性益生菌菌体含量、益生菌代谢产物，提高饲料营养物质利用率[11-12]。张杏艳等[13]发现，在日粮中添加非常规发酵饲料可有效提高猪的生长性能。胡文平等[14]发现，在日粮中添加0.2%微生态制剂可提高莱芜黑猪的生长性能。刘闰等[8]发现，在日粮中添加25%发酵豆粕可有效提高蛋鸡的生长性能。本试验发现，与对照组相比，3组、4组仔猪平均日增重显著升高，料重比均显著降低，表明益生菌发酵饲料可提高断奶仔猪生长性能，可能是益生菌发酵饲料产生了有机酸、代谢产物、可溶性多肽等活性小分子物质，有效提高了断奶仔猪机体抵抗力和生长性能。3.2益生菌发酵饲料对断奶仔猪血清生化指标的影响血清生化指标反映动物机体的代谢水平及生理健康状况[13]。动物血清TP包括ALB和GLB，ALB和GLB含量与动物免疫功能和物质代谢水平呈正相关；AST和ALT反映动物肝脏功能及损伤情况；血清TC、TG参与体内脂肪代谢，可反映脂质代谢状况；BUN与肾脏的代谢与损伤有关[14-16]。本试验中，与对照组相比，3组、4组仔猪血清TP、GLB含量显著升高，血清AST、ALT活性及BUN含量显著降低，有效改善肝肾的代谢水平，可能是益生菌发酵饲料中有机酸、代谢产物、可溶性多肽等活性小分子物质促进了营养物质在体内的代谢，提高了肝脏、肾脏代谢水平，改善了血清生化指标。3.3益生菌发酵饲料对断奶仔猪免疫指标的影响枯草芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌等多种益生菌及其代谢产物可激活动物机体免疫系统，促进抗体形成，提高动物体内巨噬细胞活性，增强动物免疫功能、抗病能力，成为临床中常用的免疫激活剂[9-10]。免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）介导机体的体液免疫[16]。IL-2、IL-4、IL-6是动物体内的细胞因子，可激活单核巨噬细胞、淋巴B细胞，介导细胞免疫。TNF-α是参与分泌、调节免疫活性的炎性细胞因子[17]。本试验中，与对照组相比，3组、4组仔猪血清IgA、IgG、IL-2含量显著升高，TNF-α含量均显著降低，表明益生菌发酵饲料可提高断奶仔猪免疫功能，可能是益生菌发酵饲料中有机酸、代谢产物、可溶性多肽等活性小分子物质提高了免疫球蛋白、细胞因子含量，增强机体免疫功能。4结论本研究结果显示，益生菌发酵饲料可提高“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪生长性能，改善血清生化指标，增强免疫功能，以5%添加量效果较好。