目前,抗生素替代品的研究成为畜禽养殖领域的重点方向。植物精油(PEO)是一种新型天然中草药饲料添加剂,具有抑菌、抗炎、抗氧化、抗病毒、改善生产性能、提高机体免疫力等功能。此外,植物精油还具有成本低廉、效果持久、毒副作用小、无耐药性等优点,在替代抗生素使用方面具有广阔的应用前景[1]。目前,牛至精油、肉桂醛、桉叶精油单独应用于畜禽养殖的研究已有报道。有研究发现,不同成分的精油间具有协同促进作用,复合精油的整体作用可能优于单一植物精油[2]。金陵花鸡是国家审定的广西品牌优质鸡,属于快大型黄羽肉鸡,公鸡56 d、母鸡65 d出栏。因此,本试验以金陵花鸡为试验动物,探究在饲粮中添加不同水平的复合植物精油(牛至精油、肉桂醛、桉叶精油)对金陵花鸡生长性能、免疫功能及抗氧化能力的影响,为复合植物精油在地方肉鸡生产中的高效应用提供参考。1材料与方法1.1试验动物及试验设计选取120只、1日龄健康、体重接近的金陵花鸡,按单因素随机设计分为4组,每组3个重复,每个重复10只鸡。对照组仔鸡饲喂基础日粮,低剂量组仔鸡饲喂基础日粮+100 mg/kg复合植物精油,中剂量组仔鸡饲喂基础日粮+200 mg/kg复合植物精油,高剂量组仔鸡饲喂基础日粮+300 mg/kg复合植物精油。预试期7 d,饲喂至60日龄屠宰。1.2饲粮组成及营养水平试验基础日粮配制参照NY/T 33—2004、《中国饲料成分及营养价值表(2019年第30版)》、Q/JLNM 03—2018。肉鸡育雏期、生长期、育肥期基础日粮组成及营养水平见表1。复合植物精油由广州天朝生物科技公司提供,主要成分为20%牛至精油、15%肉桂醛、15%桉叶油。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.011.T001表1基础日粮组成及营养水平(风干物质基础)项目育雏期(1~21 d)生长期(22~42 d)育肥期(43~60 d)原料组成/%玉米51.3054.6258.16豆粕29.7228.3027.66磷酸氢钙1.431.431.43大豆油4.274.274.27石粉1.061.161.26氯化胆碱0.100.100.10DL-蛋氨酸0.120.120.12次粉11.009.006.00预混料1.001.001.00合计100.00100.00100.00营养水平代谢能/(MJ/kg)12.7312.9213.15粗蛋白/%19.8818.5417.47钙/%0.950.900.90总磷/%0.690.650.60赖氨酸/%0.900.880.85蛋氨酸/%0.380.370.36蛋氨酸+半胱氨酸/%0.660.610.55注:1.预混料由南宁漓源粮油饲料有限公司提供。2.营养水平均为实测值。1.3饲养管理试验鸡饲养环境均一致,每日定时(8:00、16:00)加料,肉鸡自由采食和饮水,饲养管理、免疫、卫生消毒等程序按鸡场标准制度执行,每日观察并记录鸡群健康情况。1.4测定指标及方法1.4.1生长性能试验从1日龄开始,第21、42、60日时禁食12 h,以重复为单位进行空腹称量,以重复为单位统计每日采食量,计算各阶段肉鸡平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)。平均日增重=(阶段末重-阶段初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=饲料总消耗量/增重总量(3)1.4.2屠宰性能试验结束时,从每个重复随机选取2只肉鸡进行屠宰,称重,参照NY/T 823—2004方法计算屠宰率、全净膛率、半净膛率、腿肌率、胸肌率、腹脂等屠宰性能指标。1.4.3免疫器官指数试验结束时,从每个重复随机选取2只肉鸡称重,颈部放血致死,快速剥离脾脏、法氏囊、胸腺,擦干后称重,分别计算脾脏、法氏囊、胸腺指数。免疫器官指数(g/kg)=免疫器官鲜重(g)/宰前体重(kg)(4)1.4.4血清免疫指标和抗氧化指标试验结束后,从每个重复随机选取2只肉鸡,采用翅静脉采血5 mL,3 000 r/min离心15 min,取上清液,获得血清,使用血凝-血凝抑制(HA-HI)试验测定血清新城疫抗体效价。使用南京建成生物工程研究所试剂盒检测血清免疫球蛋白A(lgA)、免疫球蛋白M(lgM)、免疫球蛋白G(lgG)、总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)指标。1.5数据统计与分析利用Excel软件对试验数据进行统计,采用SPSS软件进行单因素方差分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1复合植物精油对肉鸡生长性能的影响(见表2)由表2可知,低、中、高剂量组肉鸡21、42、60 d体重显著高于对照组(P0.05)。中、高剂量组肉鸡1~21、22~42、1~42 d平均日增重显著高于对照组和低剂量组(P0.05),43~60、1~60 d各组间平均日增重无显著差异(P0.05)。低、中、高剂量组43~60 d肉鸡平均日采食量显著高于对照组(P0.05);1~60 d肉鸡平均日采食量略高于对照组(P0.05)。中、高剂量组肉鸡1~21、22~42、1~42 d料重比显著低于对照组(P0.05)。22~42 d,中、高剂量组肉鸡料重比呈现下降趋势。研究表明,日粮中添加复合植物精油改善1~21、1~42 d肉鸡的平均日增重和料重比,促进肉仔鸡生长。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.011.T002表2复合植物精油对肉鸡生长性能的影响项目对照组低剂量组中剂量组高剂量组初重/(g/只)30.43±0.3230.39±0.3930.31±0.3530.48±0.2721 d体重/(g/只)368.32±8.34c378.41±8.97b384.65±7.84a388.11±8.06a42 d体重/(g/只)1 131.64±20.52c1 154.38±21.03b1 187.25±21.05a1 192.07±20.98a60 d末重/(g/只)1 956.05±42.63c1 983.29±39.04b2 013.61±32.98a2 015.42±22.87a平均日增重/[g/(只·d)]1~21 d16.88±0.24c17.38±0.19b18.98±0.32a17.87±0.26b22~42 d36.35±0.54c36.95±0.47c38.28±0.45a38.27±0.39a43~60 d45.63±0.6546.06±0.5945.98±0.5745.97±0.461~42 d26.84±0.31c27.40±0.40b28.22±0.38a28.33±0.34a1~60 d32.63±0.4533.10±0.6433.63±0.5833.63±0.47平均日采食量/[g/(只·d)]1~21 d26.34±0.2426.16±0.3126.24±0.2627.39±0.2322~42 d75.23±1.0376.08±1.0676.25±1.0275.74±0.9843~60 d112.31±1.23c114.3±1.24b115.56±1.23a115.94±1.14a1~42 d51.43±0.8551.70±0.7951.85±0.8352.04±0.861~60 d70.15±0.9670.83±0.8971.29±0.9271.63±0.95料重比1~21 d1.56±0.05a1.51±0.07b1.40±0.04c1.52±0.05b22~42 d2.06±0.05a2.05±0.09a1.99±0.07c1.98±0.06c43~60 d2.47±0.062.48±0.052.50±0.072.51±0.081~42 d1.92±0.04a1.88±0.03b1.82±0.04c1.83±0.04c1~60 d2.15±0.052.14±0.072.12±0.062.13±0.08注:同行数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05)。2.2复合植物精油对肉鸡屠宰性能的影响(见表3)由表3可知,日粮中添加不同水平的复合植物精油均可以显著降低肉鸡的腹脂率(P0.05),肉鸡的屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌率、腿肌率随复合植物精油的增加呈现一定的上升趋势,但无显著差异(P0.05)。研究表明,日粮中添加复合植物精油能够影响肉鸡的腹部脂肪沉积,对屠宰性能起到一定的改善作用。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.011.T003表3复合植物精油对肉鸡屠宰性能的影响组别屠宰率/%全净膛率/%半净膛率/%胸肌率/%腿肌率/%腹脂率/%对照组91.56±1.1567.31±0.7877.43±0.7823.22±0.3120.53±0.204.63±0.14a低剂量组91.72±1.0967.24±0.8677.82±0.8523.43±0.2920.63±0.214.21±0.16b中剂量组92.03±1.0867.58±0.7978.25±0.9123.76±0.2821.14±0.194.05±0.13c高剂量组92.15±1.1267.51±0.8578.27±0.9223.94±0.3021.22±0.213.97±0.15c注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);下表同。2.3复合植物精油对肉鸡免疫功能的影响(见表4、表5)由表4可知,添加不同水平的复合植物精油均对肉鸡脾脏指数、法氏囊指数和胸腺指数无显著影响(P0.05),但中剂量组肉鸡的免疫器官指数略高于其他组。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.011.T004表4复合植物精油对肉鸡免疫器官指数的影响 单位:g/kg组别脾脏指数法氏囊指数胸腺指数对照组1.17±0.011.10±0.022.37±0.05低剂量组1.16±0.031.09±0.012.35±0.06中剂量组1.18±0.021.13±0.012.39±0.06高剂量组1.17±0.021.10±0.012.37±0.05由表5可知,中、高剂量复合植物精油组肉鸡血清中新城疫抗体效价、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M含量均显著高于对照组、低剂量组(P0.05),以中剂量组最优。研究表明,复合植物精油能够提升肉鸡血清中各项免疫性能指标,调节肉鸡的免疫功能。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.011.T005表5复合植物精油对肉鸡血清抗体水平和免疫球蛋白含量的影响组别新城疫抗体效价/lg2免疫球蛋白G/(g/L)免疫球蛋白A/(g/L)免疫球蛋白M/(g/L)对照组6.15±0.25c4.32±0.19c2.43±0.14c1.34±0.09c低剂量组6.33±0.16b4.54±0.21b2.47±0.19c1.45±0.12b中剂量组7.18±0.38a4.98±0.22a2.68±0.18a1.67±0.13a高剂量组7.17±0.32a4.92±0.17a2.66±0.15a1.71±0.18a2.4复合植物精油对肉鸡血清抗氧化指标的影响(见表6)由表6可知,与对照组比,日粮中添加复合植物精油均可以显著提高肉鸡血清中总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶活性(P0.05)。低、中、高剂量组肉鸡血清中丙二醛含量均显著降低(P0.05);中剂量组肉鸡血清中MDA含量变化最为显著。研究表明,复合植物精油可以改善肉鸡的抗氧化能力。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.10.011.T006表6复合植物精油对肉鸡血清抗氧化指标的影响组别总抗氧化能力/(U/mL)总超氧化物歧化酶/(U/mL)谷胱甘肽过氧化物酶/(U/mL)丙二醛/(μmol/L)对照组7.54±1.78c187.53±18.57c846.34±58.434.43±0.35a低剂量组8.32±2.01b195.69±20.13b848.51±70.373.72±0.46b中剂量组9.03±1.78a209.31±32.14a853.26±87.322.86±0.27c高剂量组8.89±2.05a205.78±29.78a851.07±94.792.89±0.39c3讨论3.1复合植物精油对肉鸡生长性能和屠宰性能的影响植物精油具有特殊的芳香气味,可以刺激大脑神经诱发食欲提高家禽采食量。植物精油还能够刺激唾液和淀粉酶的分泌,抑制肠道有害菌群数量,提高肠绒毛高度,增大食糜与消化道接触面积,从而促进营养物质消化和吸收,促进动物生长[3]。在日粮中添加单一植物精油能够对肉鸡生长性能起到促进作用。单独添加牛至精油、肉桂醛、桉树精油能够提高肉鸡平均日增重、降低料重比[4-8]。但有研究发现,添加复合植物精油对平均日增重、平均日采食量、料重比均无显著影响,不能改善机体生长性能[9]。本试验中,添加复合植物精油可显著提高肉鸡各阶段的末重和育肥阶段肉鸡的平均日采食量;中、高剂量能够显著提升肉仔鸡阶段的平均日增重,显著降低料重比,但对育肥阶段和全阶段平均日增重、料重比无显著影响,与上述的研究结果不一致。原因可能是日粮配比、饲养管理、饲养阶段、精油组分等方面存在差异,导致生长性能指标略有差别,但整体上使用复合植物精油能够改善肉鸡仔鸡的生长性能。屠宰指标能够直接反映动物的产肉性能,并决定肉鸡养殖效益。牛至精油可以提高AA肉鸡、罗斯308商品肉仔鸡的屠体重、全膛重、胸肌率和腿肌率,并显著降低腹脂率[4-5,10-11]。但有研究发现,在麻黄肉鸡饲粮添加肉桂醛或肉桂醛、香芹酚、百里香酚构成的复合植物精油均对肉鸡屠宰性能无显著影响[7],可能受精油种类、配比及肉鸡品种等因素影响,具体原因还需要进一步深入研究。本试验中,添加复合植物精油可以显著降低肉鸡腹脂率,轻微提升其他屠宰性能指标,说明复合植物精油能够降低肉鸡腹部脂肪沉积,改善肉鸡屠宰性能。3.2复合植物精油对肉鸡免疫功能的影响植物精油中含有多糖、黄酮等活性物质,可以增强动物机体免疫性能,维持机体内环境稳态,提升机体的免疫活力,促进动物健康发育。植物精油能够促进禽类免疫器官(脾脏、法氏囊、胸腺)发育,免疫器官的重量和指数可以衡量机体免疫功能,免疫器官的指数越高,说明机体免疫功能越强[12-13]。添加肉桂醛、百里香酚和香芹酚能够显著提高肉鸡胸腺指数和脾脏指数,但对法氏囊指数无显著影响[14]。添加百里香酚、丁香酚、香芹酚可显著促进肉鸡脾脏和法氏囊发育[15]。也有研究发现,添加香芹酚、百里香酚对法氏囊指数和脾脏指数均无显著影响[9]。添加桉树油能够提高白羽肉鸡脾脏指数和法氏囊指数,但各组间无显著差异[8]。本试验中,添加不同水平的复合植物精油对肉鸡胸腺、脾脏和法氏囊指数的促进作用小,各组间无显著差异,与以上研究结果不一致,未来需要加强对植物精油免疫调节机制的研究。植物精油具有良好免疫调节的作用,能够显著影响疫苗免疫后血清抗体效价和IgG、IgA和IgM含量。生产中用血清中抗体效价和免疫球蛋白含量衡量机体的免疫水平,含量越高,说明机体免疫力和抗病力越强。使用肉桂醛、香芹酚、百里香酚组成的复合植物精油能够显著提高血清新城疫抗体效价[16-17]。单独添加肉桂醛或含肉桂醛的复合植物精油均能够显著提高lgA、lgG、lgM含量[6,18]。本试验中,使用复合植物精油可以显著提高血清新城疫抗体水平和血清中免疫球蛋白含量,以添加200 mg/kg复合植物精油的效果较优,与上述研究结果相似,说明复合植物精油整体上改善了肉鸡免疫功能,提高了肉鸡抗病能力。3.3复合植物精油对肉鸡抗氧化能力的影响抗氧化能力是衡量动物机体健康状况的指标之一。动物机体通过体内多种酶系统,利用SOD抗氧化酶、GSH-Px过氧化物分解酶协同作用清除体内氧自由基(SOD),抑制脂质过氧化产物MDA的生产。因此,提高SOD、GSH-Px活性可增强动物机体清除SOD能力;SOD、GSH-Px活性与抗氧化能力成正比,MDA含量与抗氧化能力成反比[19-20]。日粮中添加百里香酚、香芹酚与肉桂醛可以增加血清SOD、GSH-Px活性,抑制MDA的生成[21-22]。使用桉树精油能够显著提高肉仔鸡血清中GSH-Px、SOD活性,显著降低MDA含量[8]。本试验结果与上述研究一致,使用复合植物精油显著增加血清T-AOC、T-SOD活性,GSH-Px活性有轻微增高趋势,但MDA含量显著降低,以添加200 mg/kg复合植物精油时各指标的变化最为显著。因此,复合精油具有良好的抗氧化活性,可以使机体氧化酶活性增加,促进机体抗氧化能力的提升,维持机体保持健康状态。4结论在肉鸡日粮中添加牛至精油、肉桂醛、桉叶油组成的复合植物精油可以改善肉鸡的生长性能,增强肉鸡的免疫功能,提高肉鸡的抗氧化能力,以复合植物精油添加量为200 mg/kg较为适宜。
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