枯草芽孢杆菌具有耐高温、耐挤压、耐酸碱、活性高、作用广、绿色无污染、低毒等特点[1-2]。枯草芽孢杆菌作为饲料添加剂能够改善动物肠道微生物菌落平衡，维护肠道黏膜屏障完整性，调节营养代谢，提高动物养分利用率和饲料转化率，抑制氧化应激、提高动物免疫力和抗病力，促进生长发育等[3-5]。将枯草芽孢杆菌作为肉鸡饲料添加剂，符合当前肉鸡绿色健康养殖模式及肉鸡源食品绿色安全的发展方向。目前，枯草芽孢杆菌在家禽鸡养殖生产中的研究和应用主要集中在提高蛋鸡的产蛋性能和蛋品质方面[6-7]，提高鸡养分利用率、生长性能、屠宰性能、改善肉品质等方面的报道较少[8-10]。本试验探究不同添加剂量枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能、屠宰性能、肉品质、免疫功能及肠道形态的影响，旨为枯草芽孢杆菌在肉鸡养殖中的进一步推广与应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1日龄健康AA白羽肉鸡购自盐山信康养殖有限公司；枯草芽孢杆菌（活菌数为1.0×109 CFU/g）购自保定瑞谷生物科技有限公司。1.2试验设计将120只白羽肉鸡随机分成4组，每组3个重复，每个重复10只鸡。对照组肉鸡饲喂基础日粮，各试验组分别在基础日粮中添加100、200、400 mg/kg枯草芽孢杆菌。试验期42 d。试验期间肉鸡自由采食饮水，定期清理鸡舍与日常消毒。基础日粮组成及营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T001表1基础日粮组成及营养水平项目1~21日龄22~42日龄原料组成/%玉米57.558.5豆粕28.024.0鱼粉5.03.0菜粕4.07.0大豆油2.04.0磷酸氢钙1.01.0石粉1.01.0食盐0.50.5预混料1.01.0合计100.0100.0营养水平代谢能/(MJ/kg)12.4112.56粗蛋白/%19.9119.23钙/%0.900.87磷/%0.640.61注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 10 000 IU、VD3 2 000 IU、VE 30 IU、VB12 1.2 mg、烟酸30 mg、泛酸12 mg、叶酸0.5 mg、Fe 100 mg、Mn 80 mg、Zn 50 mg、Cu 10 mg、I 0.35 mg、Se 0.2 mg、Co 0.1 mg。2.营养水平均为计算值。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验期间每日记录肉鸡饲料消耗量，分别在试验第1、21、42 d对肉鸡进行称重，计算平均日采食量、平均日增重、料重比。平均日采食量=饲料消耗总量/试验天数(1)平均日增重=(末重-初重)/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)1.3.2屠宰性能试验结束后，各组肉鸡全部屠宰，依次称量活体、胴体、半净膛、全净膛、胸肌、腿肌的重量，计算屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率。屠宰率=胴体重/活体重×100%(4)半净膛率=半净膛重/活体重×100%(5)全净膛率=全净膛重/活体重×100%(6)胸肌率=胸肌重/全净膛重×100%(7)腿肌率=腿肌重/全净膛重×100%(8)1.3.3肉品质取肉鸡右侧胸肌，利用肉质分析仪测定红度（a*值）、黄度（b*值）、亮度（L*值），利用pH计（型号GYP001，深圳市冠亚技术科技有限公司）测定pH值，按照周广驰等[11]方法测定滴水损失和烹煮损失。1.3.4血清免疫、生化、抗氧化指标试验结束后，采集各组肉鸡血液，利用一次性注射器在鸡翅静脉采血，析出血清，5 000 r/min离心10 min。采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定肉鸡血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）指标；采用试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定肉鸡血清中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）指标。操作方法按照试剂盒说明书。1.3.5免疫器官指数分别摘取屠宰后的肉鸡脾脏、胸腺、法氏囊，依次称重，计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重/活体重(9)1.3.6肠道形态采集屠宰后的肉鸡的十二指肠和空肠，参照武丽达等[12]方法测绒毛高度、隐窝深度，计算绒隐比。绒隐比=绒毛高度/隐窝深度(10)1.4数据统计与分析采用SPSS 17.0软件对试验数据进行单因素方差分析，LSD法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响（见表2）由表2可知，各试验组肉鸡22~42日龄、1~42日龄时的平均日增重均显著高于对照组（P0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡22~42日龄、1~42日龄时的末重均显著高于对照组（P0.05）。Ⅱ组肉鸡22~42日龄、1~42日龄时的料重比均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T002表2枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响项目对照组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组1~21日龄1日龄体重/(g/只)35.47±0.4535.34±0.4135.38±0.4235.41±0.5121日龄体重/(g/只)901.25±10.12a908.21±11.98a928.25±12.87b923.87±11.91c平均日增重/[g/(只·d)]41.23±0.85a41.57±0.91ab42.52±0.98b42.31±0.93b平均日采食量/[g/(只·d)]58.42±1.2558.73±1.3559.12±1.8458.98±1.76料重比1.42±0.031.41±0.021.39±0.021.39±0.0322~42日龄22日龄体重/(g/只)2.11±0.10a2.19±0.12ab2.31±0.15b2.26±0.13b平均日增重/[g/(只·d)]57.56±1.25a61.04±1.36b65.80±1.87c63.63±1.74c平均日采食量/[g/(只·d)]114.10±3.65116.21±4.57120.58±4.85119.10±4.71料重比1.98±0.07b1.90±0.08ab1.83±0.08a1.87±0.06a1~42日龄平均日增重/[g/(只·d)]49.39±1.14a51.30±1.17b54.16±1.54c52.97±1.23c平均日采食量/[g/(只·d)]86.26±2.9887.47±3.1189.85±3.2489.04±3.15料重比1.75±0.04b1.71±0.06ab1.66±0.06a1.68±0.06ab注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表9与此同。2.2枯草芽孢杆菌对肉鸡屠宰性能的影响（见表3）由表3可知，Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡半净膛率均显著高于对照组（P0.05）。Ⅱ组肉鸡屠宰率、胸肌率均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T003表3枯草芽孢杆菌对肉鸡屠宰性能的影响组别屠宰率半净膛率全净膛率胸肌率腿肌率对照组88.77±0.86a84.54±0.72a70.21±0.6821.37±0.52a15.24±0.43Ⅰ组89.21±0.91ab84.87±0.74ab70.41±0.6421.71±0.54ab15.32±0.42Ⅱ组90.87±0.96b85.64±0.78b70.49±0.6722.08±0.55b15.48±0.45Ⅲ组90.56±0.92ab85.51±0.75b70.42±0.6421.87±0.52ab15.41±0.41注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4~表8与此同。%2.3枯草芽孢杆菌对肉鸡肉品质的影响（见表4）由表4可知，Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡滴水损失、烹煮损失均显著高于对照组（P0.05）。Ⅱ组肉鸡pH值显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T004表4枯草芽孢杆菌对肉鸡肉品质的影响组别a*值b*值L*值pH值滴水损失/%烹煮损失/%对照组4.42±0.216.12±0.2844.47±1.215.74±0.05a3.62±0.14b16.32±1.25bⅠ组4.48±0.196.24±0.3244.51±1.125.76±0.04ab3.48±0.16ab15.84±1.54abⅡ组4.52±0.176.25±0.3444.74±1.315.82±0.05b3.31±0.19a14.11±1.38aⅢ组4.48±0.146.21±0.2744.61±1.145.77±0.05ab3.41±0.14a14.37±1.47a2.4枯草芽孢杆菌对肉鸡免疫指标的影响（见表5、表6）由表5、表6可知，Ⅱ组肉鸡脾脏指数显著高于对照组（P0.05）。各试验组肉鸡血清IgG含量均显著高于对照组（P0.05），Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡血清IgA含量显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T005表5枯草芽孢杆菌对肉鸡免疫器官指数的影响组别脾脏指数胸腺指数法氏囊指数对照组0.93±0.05a2.11±0.141.68±0.11Ⅰ组0.97±0.05ab2.15±0.161.69±0.11Ⅱ组1.09±0.07b2.21±0.151.75±0.10Ⅲ组1.04±0.07ab2.20±0.141.69±0.11g/kg10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T006表6枯草芽孢杆菌对肉鸡血清免疫球蛋白含量的影响组别IgAIgGIgM对照组1.11±0.08a1.95±0.14a0.86±0.05Ⅰ组1.17±0.10ab2.14±0.13b0.87±0.06Ⅱ组1.28±0.09b2.35±0.16c0.91±0.06Ⅲ组1.27±0.09b2.29±0.14bc0.91±0.06g/L2.5枯草芽孢杆菌对肉鸡血清抗氧化指标的影响（见表7）由表7可知，Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡血清MDA含量均显著低于对照组（P0.05）。Ⅱ组肉鸡血清T-SOD活性均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T007表7枯草芽孢杆菌对肉鸡血清抗氧化指标的影响组别T-SOD/(U/mL)T-AOC/(U/mL)MDA/(μmol/L)对照组211.47±12.14a17.87±1.142.54±0.14bⅠ组219.65±13.24ab18.17±1.212.43±0.16abⅡ组231.57±13.65b18.54±1.152.28±0.19aⅢ组224.47±13.47ab18.51±1.282.30±0.21a2.6枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道形态的影响（见表8）由表8可知，试验组肉鸡十二指肠、空肠绒毛高度均显著高于对照组（P0.05）。Ⅱ组肉鸡十二指肠、空肠绒隐比均显著高于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T008表8枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道形态的影响组别十二指肠空肠绒毛高度/µm隐窝深度/µm绒隐比绒毛高度/µm隐窝深度/µm绒隐比对照组1 452.36±80.21a251.14±21.145.78±0.84a1 256.32±75.98a236.54±21.075.31±0.81aⅠ组1 587.54±82.14b249.96±20.546.35±0.91ab1 354.25±74.81b235.41±21.565.75±0.87abⅡ组1 614.87±85.62b234.51±22.546.89±0.89b1 433.25±78.94b214.98±20.516.67±0.84bⅢ组1 605.82±83.14b239.87±21.876.69±0.87ab1 429.58±77.54b221.51±21.876.45±0.82ab2.7枯草芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响（见表9）由表9可知，各试验组肉鸡血清BUN含量显著低于对照组（P0.05）。Ⅱ组、Ⅲ组肉鸡血清TP含量显著高于对照组（P0.05）。Ⅱ组肉鸡血清ALT活性均显著高于对照组（P0.05）。各组肉鸡血清TC、TG、ALB含量差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.11.011.T009表9枯草芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响项目对照组Ⅰ组Ⅱ组Ⅲ组TP/(g/L)20.58±1.54a21.78±1.65ab23.87±1.74c23.44±1.84bcALB/(g/L)11.24±1.2111.75±1.3112.27±1.2412.14±1.54TC/(mmol/L)3.25±0.983.51±0.913.74±0.893.73±0.88TG/(mmol/L)0.91±0.120.94±0.110.97±0.120.96±0.14BUN/(mmol/L)0.87±0.11c0.74±0.10b0.58±0.14a0.61±0.11aAST/(U/L)165.24±10.21162.85±11.24156.47±11.21157.47±11.87ALT/(U/L)23.21±2.14b22.14±1.98ab20.68±2.10a21.25±1.94ab3讨论3.1枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响枯草芽孢杆菌进入动物肠道后能够减少肠道中的有害微生物数量，提高肠道对营养物质的消化吸收，提高饲料转化利用率，促进动物生长。张安荣等[8]研究表明，基础日粮中添加1.5×1010 CFU/g枯草芽孢杆菌能够显著提高肉鸡的干物质、蛋白质表观代谢率。王海波等[10]研究表明，基础日粮中添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌和富硒酵母复合制剂能够显著提高瑶鸡的平均日采食量，降低料重比。陈锁等[13]研究表明，基础日粮中添加200、400 g/t枯草芽孢杆菌制剂能够显著改善感染产气荚膜梭菌的肉鸡生长性能。本试验结果显示，日粮中添加100、200、400 mg/kg枯草芽孢杆菌均能够显著提高肉鸡的平均日增重，添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌能够显著降低肉鸡的料重比，与张安荣等[8]、王海波等[10]、陈锁等[13]研究结果一致。本研究结果表明，肉鸡日粮中枯草芽孢杆菌的最适添加剂量为200 mg/kg。3.2枯草芽孢杆菌对肉鸡屠宰性能和肉品质的影响屠宰性能能够直接体现肉鸡的产肉量和产肉性能。肉品质能够直接体现肉鸡肌肉的质量。王海波等[10]研究表明，基础日粮中添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌和富硒酵母复合制剂能够显著提高瑶鸡的屠宰率和半净膛率。本试验结果显示，肉鸡日粮中添加200、400 mg/kg枯草芽孢杆菌均能够显著提高肉鸡的半净膛率，显著降低肉鸡胸肌的滴水损失率和烹煮损失率；添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌能够显著提高肉鸡的屠宰率和胸肌率，与王海波等[10]研究结果一致。结果表明，枯草芽孢杆菌能够提高肉鸡的屠宰性能和肉品质，增加肉鸡养殖经济效益。3.3枯草芽孢杆菌对肉鸡免疫功能的影响免疫器官是免疫细胞增殖发育的场所，一般认为免疫器官指数越高，动物机体的免疫功能越强[14]。韩鹏敏等[15]研究表明，基础日粮中添加枯草芽孢杆菌和屎肠球菌复合制剂能够显著提高乳鸽的胸腺指数、法氏囊指数等免疫器官指数。李玲茜等[16]研究表明，基础日粮中添加枯草芽孢杆菌和海洋红酵母菌复合制剂能够显著提高海兰褐蛋雏鸡的IgA、IgG含量。本试验结果显示，日粮中添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌能够显著改善肉鸡的脾脏指数，显著改善肉鸡血清IgG、BUN、ALT等指标，与李玲茜等[16]研究结果一致。本研究表明，枯草芽孢杆菌具有改善肉鸡免疫器官指数和血清免疫指标，提高肉鸡免疫功能的功效。3.4枯草芽孢杆菌对肉鸡抗氧化功能的影响氧化应激反应将引起动物机体衰老与疫病。动物体内T-AOC、T-SOD活性决定了动物机体的抗氧化能力。MDA是动物机体发生氧化反应后的终产物，含量越低表明动物机体的抗氧化能力越强。韩鹏敏等[15]研究表明，基础日粮中添加枯草芽孢杆菌和屎肠球菌复合制剂能够显著提高乳鸽血清T-SOD活性。张灿等[17]研究表明，基础日粮中添加枯草芽孢杆菌和壳聚糖联合制剂能够显著提高海兰褐蛋鸡血清T-AOC及T-SOD活性，显著降低MDA含量。本试验中，日粮中添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌能够显著改善肉鸡血清T-SOD、MDA指标，表明枯草芽孢杆菌能够显著提高肉鸡的抗氧化功能。3.5枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道形态的影响小肠是动物机体最重要的消化器官，具有消化吸收营养物质抵御外界病原微生物之功效，是保护动物机体健康的重要屏障。绒毛高度、隐窝深度反映动物肠道中黏膜上皮成熟细胞的数量，直接关系到动物机体对营养物质的吸收作用。绒毛高度和隐窝深度的比值（绒隐比）越高，表明肠道的消化吸收功能越强，动物机体的生长发育越好，生长性能和健康状况越好[18]。李玲茜等[16]研究表明，基础日粮中添加枯草芽孢杆菌和海洋红酵母菌复合制剂能够显著提高海兰褐蛋雏鸡十二指肠和空肠的绒毛高度及绒腺比。马文锋等[19]研究表明，基础日粮中添加0.03%枯草芽孢杆菌能够显著提高海兰褐蛋鸡空肠的绒毛高度。本研究结果显示，日粮中添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌能够显著提高肉鸡十二指肠、空肠的绒毛高度和绒隐比，表明枯草芽孢杆菌能够有效改善肉鸡的肠道形态，提高肉鸡生长性能和免疫功能。4结论在本试验条件下，白羽肉鸡基础日粮添加枯草芽孢杆菌能够改善肉鸡的生长性能、屠宰性能、肉品质、免疫功能、抗氧化功能和肠道形态，以200 mg/kg添加剂量的作用效果最好。