硒（Se）是生物体必不可少的重要营养元素[1-2]，在生物体内主要以有机硒和无机硒存在[3]。硒代蛋氨酸（Se-Met）是一种对环境污染小、毒副作用小、生物利用率高的有机硒化合物[4-5]。Se-Met具有提高动物生长性能、抗氧化能力、免疫功能的作用[4,6]。李雷等[7]研究发现，鲫鱼对有机硒（Se-Met）的生物利用度高于无机硒。李小霞等[8]研究表明，蛋氨酸硒对凡纳滨对虾的促生长和抗氧化能力优于酵母硒和亚硒酸钠。2013年欧盟批准Se-Met在动物生产养殖中作为饲料添加剂使用[9]。黄鳝属合鳃目，合鳃科[10-11]，具有高蛋白、低脂肪、含肉率高、无肌间刺等特点[12-14]，是我国分布最广的淡水养殖鱼类之一。黄鳝为杂食偏肉食性鱼类，对蛋白质、氨基酸组成等要求较高[10]。目前，Se-Met对水产动物的研究仅见于鲫鱼[7]、条纹锯鮨[5]、军曹鱼[15]、罗非鱼[16]、石斑鱼[17]、虹鳟[18]、白鲟[19]、黑鲷鱼[20]、金鱼[21]等，其在黄鳝养殖中的应用研究未见报道。因此，本试验研究Se-Met对黄鳝生长性能、肌肉组织硒含量和血清生化指标的影响，为Se-Met在黄鳝饵料中的应用提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1黄鳝选取江苏省宿迁市沭阳县水产养殖验基地人工繁育的同批次健康、无伤、活力较好的黄鳝300尾，平均体重（27.55±0.85）g/尾。1.1.2饵料配制DL-硒代蛋氨酸购自上海生工生物工程股份有限公司。基础饵料由安徽省海宁和心饲料有限公司生产，基础饵料营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.013.T001表1基础饵料营养水平营养水平粗蛋白粗脂肪粗纤维粗灰分水分赖氨酸磷钙其他含量48.03.01.216.09.02.03.05.012.0%在基础饵料中分别添加0.3、0.6、0.9、1.5 mg/kg Se-Met配制为试验饵料，具体步骤为：称取100 mg DL-硒代蛋氨酸溶解在100 mL超纯水中配成1∶1溶液，分别取300、600、900、1 500 μL溶液加入容量瓶中，用超纯水稀释定容至500 mL。取1 000 g粉状基础饵料，加入定容好的500 mL溶液，加入食用油3~5滴，充分搅拌，饲料颗粒机制成2~3 mm的颗粒饲料。1.2试验设计及饲养管理试验在安徽科技学院基础生物实验室进行。300尾黄鳝随机分为5组，每组3个重复，每个重复20尾黄鳝。对照组黄鳝饲喂基础饵料，SM1组、SM2组、SM3组、SM4组分别在基础饵料中添加0.3、0.6、0.9、1.5 mg/kg Se-Met。试验开始前将养殖水箱（75 cm × 50 cm × 55 cm）中放入KMnO4溶液（20 mg/L）浸浴20 min。养殖用水为提前曝气的自来水，水深15~20 cm，在水面放置水葫芦约为水面面积的2/3。每天18：00定时投喂一次，固定位置投饵料，投饵量为黄鳝体重的2%~5%，及时清除残饵。试验期21 d。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验最后1 d，统计各组黄鳝数、长度和重量，计算增重率（WGR）、特定生长率（SGR）、成活率（SR）和饵料系数（FCR）。WGR=(Wt-W0)/W0×100%(1)SGR=[ln(Wt/Nt)-ln(W0/N0)]/t×100% (2)SR=Nt/N0×100%(3)FCR=F/(Wt-W0)(4)式中:W0为试验开始时鱼体重（g）；Wt为试验结束时鱼体质量（g）；t为饲养时间（d）；N0为初始尾数；Nt为终末尾数；F为饲料摄入量（g）。1.3.2肌肉组织硒含量取黄鳝背部肌肉放入10 mL于冻存管中，在-20 ℃冰箱中保存，采用氢化物原子荧光光谱法测定（GB/T 13883—2008）硒含量。1.3.3血清生化指标每组随机选取12尾黄鳝，断尾取血液，参考文献[5]制备血清，置于-80 ℃冰箱中保存。血清生化指标包括：总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰基转移酶（GGT）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、免疫球蛋白M（IgM），具体操作步骤按照试剂盒（山东博科生物产业有限公司）说明书进行。1.4数据统计与分析数据采用SPSS 26.0进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1硒代蛋氨酸对黄鳝生长性能的影响（见表2）由表2可知，各Se-Met组黄鳝的末重、增重率均显著高于对照组（P0.05），其中SM2组黄鳝的末重、增重率最高。SM2组、SM3组、SM4组黄鳝的饵料系数均显著低于对照组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.013.T002表2硒代蛋氨酸对黄鳝生长性能的影响组别初重/g末重/g初始体长/cm终末体长/cm存活率/%增重率/%特定生长率/(%/d)饵料系数对照组27.57±0.6537.26±0.38a30.78±0.9833.44±0.970.98±0.040.41±0.05a1.62±0.60a1.96±0.09cSM1组27.18±0.8339.21±0.27b30.00±1.7433.08±1.630.96±0.040.44±0.04b1.75±0.04b1.94±0.11bcSM2组27.55±0.8542.47±0.29c30.25±1.6933.27±1.850.98±0.020.54±0.02c2.06±0.14c1.81±0.05aSM3组27.47±0.4841.26±0.39bc30.67±1.3433.67±1.470.98±0.020.49±0.03bc1.94±0.06c1.88±0.05abSM4组27.67±0.4939.47±0.23b30.32±0.8833.53±1.100.96±0.040.45±0.02b1.69±0.08a1.92±0.08b注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；表4与此同。2.2硒代蛋氨酸对黄鳝肌肉组织硒含量的影响（见表3）由表3可知，随着Se-Met添加量增加，黄鳝肌肉组织硒含量呈上升趋势，其中SM4组硒含量最高。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.013.T003表3硒代蛋氨酸对黄鳝生肌肉组织含硒量的影响项目对照组SM1组SM2组SM3组SM4组肌肉组织硒含量0.33±0.06a0.46±0.05b0.52±0.06b0.72±0.07c1.06±0.08d注：同行数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）。mg/kg2.3硒代蛋氨酸对黄鳝血清生化指标的影响（见表4）由表4可知，与对照组相比，各Se-Met组黄鳝血清TC含量均显著升高（P0.05），SM4组黄鳝血清LDL-C含量显著高于其他各组（P0.05），各Se-Met组黄鳝血清中GGT、ALP、AST、ALT活性均高于对照组，随Se-Met添加量的增加均呈升高的趋势，SM4组黄鳝血清GGT、ALT活性显著高于其他各添加组（P0.05）。SM3组黄鳝血清IgM含量显著高于其他组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.013.T004表4硒代蛋氨酸对黄鳝血清生化指标影响组别TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)LDL-C/(mmol/L)ALP/(U/L)GGT/(U/L)AST/(U/L)ALT/(U/L)TP/(g/L)ALB/(g/L)IgM/(g/L)对照组4.64±0.24a0.59±0.082.66±0.23a1.97±0.04a5.33±0.38a7.20±0.28a104.37±6.96a4.33±0.32a51.73±1.2920.12±0.531.07±0.03aSM1组5.66±0.36b0.58±0.082.71±0.29ab1.96±0.06a6.87±0.38b7.33±0.26a109.60±4.92a4.43±0.32a52.27±1.6321.67±0.081.31±0.06bSM2组6.32±0.46c0.59±0.143.43±0.23c1.99±0.02a6.93±0.31b8.17±0.68b181.03±15.26b4.52±0.22a52.17±1.5621.67±0311.32±0.05bSM3组6.20±0.17c0.61±0.223.07±0.12bc1.99±0.06a7.33±0.33ac8.22±0.82b270.13±25.96c5.97±0.36b52.19±2.1620.19±0.121.42±0.04cSM4组5.84±0.13b0.58±0.072.83±0.17b2.13±0.06b7.87±0.23c9.73±0.55c422.63±59.71d6.13±0.25b52.67±1.1520.23±0.361.17±0.06ab3讨论3.1硒代蛋氨酸对黄鳝生长性能的影响硒是维持鱼类正常生理活动的必需微量元素，在饵料中添加适宜水平的Se-Met可以促进鱼类生长[5,7]，降低饵料系数[5,7,21]。李雷等[7]研究表明，Se-Met可以提高鲫鱼生长性能以及组织中的含硒量，效果优于无机硒（亚硒酸钠）。杨原志等[15]研究表明，Se-Met在提高军曹鱼生长性能、抗氧化能力、血清生化指标、免疫功能等的效果均优于无机硒，与李雷等[7]的结果一致。张清雯等[5]研究发现，0.58 mg/kg Se-Met可显著提高条纹锯鮨生长性能、免疫能力和抗氧化能力。Jahanbakhshi等[21]研究表明，0.6 mg/kg Se-Met可明显提高鱼的增重、特定生长率和饲料转化率。本试验表明，随着饵料中Se-Met水平增加，黄鳝的增重提高，饵料系数降低，其中0.6 mg/kg Se-Met效果较好，与上述研究结果一致。3.2硒代蛋氨酸对黄鳝肌肉组织硒含量的影响硒具有抗氧化、保护和修复细胞、提高免疫等功能[22]。近年来，富硒鱼的产品层出不穷，安徽地区有富硒甲鱼的养殖[23]；陕西安康地区把富硒鱼[24]做成“名片”。鱼肌肉组织的硒含量与饵料中的含硒量密切相关[25]。刘广霞等[26]研究发现，随着饵料硒含量的增加，团头鲂全鱼、肌肉及肝脏的硒沉积量呈线性上升趋势。Han等[27]研究发现，长丰鲫肝脏和全鱼硒含量随饵料硒添加量的增加逐渐升高，与本试验研究结论类似。研究发现，Se-Met在机体内能够特异性结合到软组织的蛋白质，从而提高软组织硒含量[28]。3.3硒代蛋氨酸对黄鳝血清生化指标的影响TC是体内所有脂蛋白所含胆固醇的总和[29]，TC、TG、HDL-C和LDL-C含量可作为脂代谢的重要指标[30]。本试验发现，随着饵料中Se-Met水平的增加，黄鳝血清中TC和HDL-C含量呈先升高后降低趋势，SM2组、SM3组胆固醇含量高于其他各组。TG是鱼类脂肪转运主要成分[30]，LDL-C过高会在一定程度上妨碍机体对脂肪的吸收利用。本试验中，SM4组黄鳝血清中LDL-C含量要高于其他组，推测可能是饵料中Se-Met含量超过了黄鳝的生理需求量。血清中ALP、GGT、AST、ALT活性与肝功能相关，当肝细胞受损伤时大量AST和ALT进入血液[31]。本试验中，SM3组、SM4组黄鳝血清中ALT活性高于其他各组，随着添加量增加呈上升趋势。结合SM3组、SM4组黄鳝血清中AST活性检测结果，发现SM3组、SM4组黄鳝肝脏可能有一定的损伤。血清中ALP和GGT活性可以更进一步反映肝脏损伤，SM3组、SM4组黄鳝血清中ALP活性显著高于其他各组，SM1组、SM2组黄鳝血清中ALP高于对照组，SM4组黄鳝血清中GGT活性高于其他组，与Jahanbakhshi等[21]在基础饵料中添加0.9 mg/kg Se-Met引起金鱼的肝损伤、核分裂、脂质沉积和充血的研究结果相似。IgM是反映鱼体免疫功能和抵抗力的重要指标。本试验中，SM3组黄鳝血清IgM含量高于其他各组，表明添加0.9 mg/kg Se-Met时，黄鳝的免疫能力最强，与张清雯等[5]的研究结果类似。本试验中，当Se-Met添加量为1.5 mg/kg时，黄鳝血清IgM含量出现下降，可能与肝脏损伤合成IgM的能力下降有关[32]。4结论本试验中，在饵料中添加0.6~0.9 mg/kg Se-Met能够显著提高黄鳝的生长性能，增强机体免疫功能，添加0.9~1.5 mg/kg Se-Met对黄鳝肝脏功能具有一定的负面影响，Se-Met的适宜添加量为0.6 mg/kg。