我国苹果占世界总产量的55%[1-2]。苹果渣是加工苹果产品后的副产品,其中含有矿物质、氨基酸等成分,有利于微生物的直接利用,但苹果渣蛋白质含量较低,常被作为废弃物处理[3-5]。使用微生物发酵技术可以提高苹果渣中蛋白质含量,同时发酵能够产生酶、活性肽及游离氨基酸等活性成分,提高苹果渣的营养价值[6-8]。研究表明,发酵代谢产物能够提高畜禽生长性能[9-11],改善畜禽肠道健康[12-15]。因此,本试验探究发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、腹泻率及粪便菌群的影响,为发酵苹果渣在饲料中的应用开发提供参考。1材料与方法1.1试验材料180头健康状况较好的断奶仔猪由平凉市泰丰良种发育猪场提供。发酵苹果渣为本课题组制备[16],其营养成分送至谱尼测试集团上海有限公司进行检测。苹果渣营养成分见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T001表1苹果渣营养水平及氨基酸含量氨基酸含量营养水平含量氨基酸合计7.94天门冬氨酸0.73粗蛋白33.10苏氨酸0.31粗纤维11.40丝氨酸0.35粗脂肪4.10谷氨酸1.32灰分7.40脯氨酸0.59钙0.16甘氨酸0.42磷0.57丙氨酸0.47赖氨酸0.34缬氨酸0.33蛋氨酸0.19异亮氨酸0.27亮氨酸0.48酪氨酸0.22苯丙氨酸0.35组氨酸1.18精氨酸0.39%1.2试验设计及饲养管理选取38日龄、体况良好的断奶仔猪180头,随机分为6组,每组3个重复,每个重复10头猪。对照组断奶仔猪饲喂基础日粮,试验1组~5组在基础日粮中分别添加2%、4%、6%、8%、10%发酵苹果渣。基础日粮组成及营养水平及氨基酸含量见表2。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T002表2基础日粮组成及营养水平原料组成含量/%营养水平合计100玉米50消化能/(MJ/kg)10.71麦麸10粗蛋白/%14.52豆粕20钙/%0.81米糠10磷/%0.60鱼粉5氯化钠1预混料2磷酸二氢钙2注:1.预混料由郑州正虹饲料有限公司提供。2.营养水平均为计算值。每天保持猪舍干净,通风良好,定期进行消毒。仔猪自由采食和饮水。试验期35 d。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验开始和结束,对仔猪空腹称重。每天饲喂时保证仔猪食槽内有剩余日粮,记录每天各组添料量,计算仔猪平均日增重、平均日采食量及料重比。平均日增重=(末重-初重)/试验天数(1)平均日采食量=总采食量/试验天数(2)料重比=平均日采食量/平均日增重(3)腹泻率=试验期间腹泻头数×腹泻天数/(各重复总头数×试验天数)×100%(4)1.3.2血清生化指标试验最后1 d,每个试验组随机选取5头仔猪采血,将采集的血液室温静置30 min,3 000 r/min离心15 min,收集血清。使用试剂盒(南京建成生物工程研究所)检测葡萄糖、尿素氮、白蛋白、甘油三酯、胆固醇含量,严格按照试剂盒说明书进行操作。1.3.3血清免疫指标使用试剂盒(南京建成生物工程研究所)检测免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素-6(IL-6)、胰岛素含量,严格按照试剂盒说明书进行操作。1.3.4粪便菌群试验第7、35 d,采集1 g仔猪粪便置于灭菌离心管,加入无菌生理盐水,按照梯度稀释,吸取100 μL稀释液。分别使用MRS培养基、麦康凯培养基对乳酸杆菌、大肠杆菌涂布,37 ℃温箱培养18 h,每个样品4个重复,计算菌落数。1.4数据统计与分析采用SPSS 17.0软件对试验数据进行统计分析,Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示,P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能的影响(见表3)由表3可知,试验4组断奶仔猪平均日增重显著高于对照组(P0.05),料重比显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T003表3发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能的影响组别初重/kg末重/kg平均日增重/[g/(头·d)]平均日采食量/[g/(头·d)]料重比对照组12.33±0.4029.51±0.86490.81±22.06b993.62±69.402.02±0.22a试验1组12.57±0.9930.42±3.48510.05±71.73b1 029.82±197.492.02±0.11a试验2组12.63±1.7230.78±3.02518.57±37.36b981.88±110.851.89±0.10a试验3组12.61±1.1730.14±0.75500.75±41.92b980.06±71.371.96±0.10a试验4组12.58±1.6534.11±3.56615.12±67.60a1 089.16±137.721.77±0.08b试验5组12.41±1.1631.76±1.66552.81±15.52b1 111.16±33.702.01±0.02a注:同列数据肩标不同字母表示差异显著(P0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P0.05);表5~表7与此同。2.2发酵苹果渣对断奶仔猪腹泻率的影响(见表4)由表4可知,试验0~23 d,各试验组断奶仔猪腹泻率较对照组分别下降53.11%、41.39%、35.53%、65.57%、41.03%。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T004表4发酵苹果渣对断奶仔猪腹泻率的影响项目对照组试验1组试验2组试验3组试验4组试验5组0~23 d5.46±3.582.56±1.203.20±1.363.52±2.471.88±1.483.22±2.0124~35 d4.58±2.432.58±1.502.49±1.862.10±1.201.26±0.852.20±1.10%试验0~23、24~35 d,各试验组断奶仔猪腹泻率均低于对照组,试验4组断奶仔猪腹泻率最低。2.3发酵苹果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响(见表5)由表5可知,试验4组断奶仔猪血清中总蛋白含量显著高于对照组(P0.05)。试验4组断奶仔猪血清中总胆固醇含量低于对照组,但是差异不显著(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T005表5发酵苹果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响组别总蛋白/(g/L)白蛋白/(g/L)尿素氮/(mmol/L)葡萄糖/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)总胆固醇/(mmol/L)对照组53.13±5.22b29.00±1.164.15±0.325.86±0.890.20±0.252.14±0.20试验1组54.27±3.26b28.67±2.103.88±0.596.54±1.121.12±0.102.33±0.20试验2组54.20±4.20b27.52±1.293.47±0.525.96±1.021.23±0.222.26±0.15试验3组55.26±5.16b27.48±2.033.89±1.025.26±0.881.20±0.182.23±0.14试验4组56.27±3.50a27.00±0.893.47±0.186.45±1.201.26±0.211.98±0.22试验5组54.80±4.10b28.33±1.023.71±0.265.62±0.851.22±0.362.03±0.112.4发酵苹果渣对断奶仔猪血清免疫指标的影响(见表6)由表6可知,试验4组断奶仔猪血清中IgA、IgG、IgM、IL-6、胰岛素含量均显著高于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T006表6发酵苹果渣对断奶仔猪血清免疫指标的影响组别IgA/(g/L)IgG/(g/L)IgM/(g/L)胰岛素/(mU/L)IL-6/(μg/L)对照组0.22±0.08b0.79±0.09b0.28±0.06b32.83±3.66b714.57±56.26b试验1组0.24±0.08b0.65±0.12b0.43±0.05a35.36±4.05ab964.82±89.25a试验2组0.25±0.06b0.77±0.20b0.52±0.02a36.15±4.62a865.15±78.25a试验3组0.28±0.05b0.86±0.18b0.56±0.10a38.15±5.15a899.15±84.65a试验4组0.30±0.05a1.12±0.12a0.61±0.10a39.25±3.16a984.07±80.26a试验5组0.24±0.07b1.82±0.11a0.54±0.08a32.62±3.23b739.96±68.16b2.5发酵苹果渣对断奶仔猪粪便菌群的影响(见表7)由表7可知,试验第7 d,试验3组、试验4组断奶仔猪大肠杆菌数量显著低于对照组(P0.05)。试验第35 d,除试验5组外,其他试验组断奶仔猪大肠杆菌数量均显著低于对照组(P0.05)。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.12.006.T007表7发酵苹果渣对断奶仔猪粪便菌群的影响组别7 d35 d菌群总数大肠杆菌菌群总数大肠杆菌对照组6.94±0.12b5.67±0.22a6.99±0.204.81±0.20a试验1组7.03±0.52a5.39±0.11a7.01±0.094.23±0.20b试验2组7.03±0.26a5.29±0.21a7.01±0.104.13±0.21b试验3组7.03±0.36a4.48±0.22b7.05±0.114.08±0.18b试验4组7.21±0.45a4.54±0.23b7.09±0.204.06±0.12b试验5组7.35±0.26a5.80±0.14a7.11±0.204.69±0.15algCFU/g3讨论3.1发酵苹果渣对断奶仔猪生长性能的影响发酵饲料中含有的有益菌进入动物机体,能够有效降解体内多种蛋白质,促进肠胃消化吸收,改善仔猪的生长性能。张君胜等[17]研究发现,在日粮中添加益生菌能够有效提高仔猪的生长性能。杨福有等[18]研究发现,苹果渣能够降低鸡蛋重量。康永刚等[19]研究发现,苹果渣可以促进肉鸭生长发育。李龙等[20]研究表明,蛋鸡日粮中添加发酵苹果渣能够提高养殖效益。本试验中,在基础日粮中添加8%发酵苹果渣,提高了断奶仔猪的生产性能,与上述研究结果一致。3.2发酵苹果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响血清生化指标可以反映机体的代谢变化。血清中的TP和BUN含量能够反映动物对蛋白质的代谢吸收及氨基酸平衡状况[21-22]。高印等[23]研究发现,发酵苹果渣可以明显提高断奶仔猪血清中的总蛋白和白蛋白含量。本试验中,在基础日粮中添加8%发酵苹果渣,提高了断奶仔猪自身免疫力,促进了断奶仔猪生长发育,提高了断奶仔猪的生长性能,与卢昱屹等[22]的研究结果一致。3.3发酵苹果渣对断奶仔猪血清免疫指标的影响IgA、IgG和IgM可以反映机体的体液免疫。发酵饲料中含有大量活性益生菌及代谢产物,可以改善肠道的微生态环境,在肠道表面形成微生物屏障[24],提升机体的免疫功能。Zhou等[25]研究发现,发酵生物饲料提高血清中IgA、IgG、IgM的含量,与本试验研究结果一致。本试验中,在基础日粮中添加8%发酵苹果渣,可以增强断奶仔猪的自身免疫力。3.4发酵苹果渣对断奶仔猪粪便菌群的影响益生菌能够参与宿主的碳水化合物的代谢、氨基酸代谢及短链脂肪酸生成,维持机体和维持肠道健康[23]。粪便中大肠杆菌的数量可以反映机体肠道健康[26]。此外,酵母菌是好氧菌,在其生长过程中利用了氧气,将肠道环境变为厌氧状态,为乳酸菌繁殖提供有利条件,从而抑制了致病性大肠杆菌的生长[27-29],提高动物免疫力,降低机体发病率和腹泻率。本试验中,在基础日粮中添加8%发酵苹果渣,可以降低仔猪粪便中大肠杆菌数量,抑制病原菌繁殖,降低仔猪腹泻率,与Dong等[30]研究结果一致。4结论本研究表明,在日粮中添加发酵苹果渣可降低断奶仔猪腹泻率,促进断奶仔猪生长发育,提高断奶仔猪免疫功能,且添加8%发酵苹果渣的效果较好。

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