锦鲤属于观赏性鱼类，其体色艳丽，花纹多样，观赏价值极高。蛋白质是锦鲤生长和维持生命活动必需的营养素，是构成鱼体各组织的重要组成成分，能够促进机体组织细胞的更新。但如果饲料中的蛋白质含量超过需要量，鱼体蛋白质的积蓄量几乎不变，未被吸收的蛋白质将被排泄到水中，造成水体氮含量增加，降低蛋白质的利用效率。因此，适宜蛋白质含量的饲料对锦鲤生长具有重要意义。李四平等[1]发现，粗蛋白含量高的饲料能够提高短须裂腹鱼体增重率。孙学亮等[2]选择不同粗蛋白饲料投喂低盐度环境的革胡子鲶，发现高蛋白含量饲料能够提高鱼体对环境的适应能力。韩红艳[3]选择4种不同蛋白饲料投喂锦鲤60 d，发现粗蛋白含量为31%时，锦鲤的生长性能最佳。刘康等[4]研究发现，饲料粗蛋白含量为34%能够提高金边鲤肌肉品质。龙志海等[5]发现，饲料粗蛋白含量为40.10%能够改善鲈鲤幼鱼的生长性能。本试验研究3种粗蛋白水平的饲料对锦鲤生长性能、肠道消化酶活性及抗氧化功能的影响，筛选出最佳蛋白质含量的锦鲤饲料，为锦鲤养殖提供一定的参考。1材料与方法1.1试验材料及地点锦鲤由天津精武镇观赏鱼基地提供。试验在天津农学院进行。1.2试验设计及饲养管理选取270尾初始均重为（92.36±3.32）g、初始体长为（14.84±0.32）cm的锦鲤，随机分为3组，每组3个重复，每个重复30尾锦鲤。试验分为3种不同蛋白水平的饲料，分别为饲料1（F1组）、饲料2（F2组）、饲料3（F3组）。F1组饲料由鱼粉、面粉、大豆粕、大豆浓缩蛋白、小麦胚芽、啤酒酵母、螺旋藻、多种维生素和矿物质营养素组成。F2组饲料由进口鱼粉、磷虾粉、豆粕、大豆磷脂油、小麦胚、酵母粉、螺旋藻、虾青素、益生菌、小肽、鱼油、多种维生素和矿物质营养素组成。F3组饲料由鱼粉、磷虾粉、小麦胚芽、膨化大豆、谷朊粉、啤酒酵母、小麦粉、螺旋藻粉、海藻粉、虾青素、鱼油、多种维生素和矿物质营养素组成。饲料粒径均为1.0 mm。各组饲料营养水平见表1。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.011.T001表1饲料营养水平组别粗蛋白粗脂肪粗灰分水分F1组43.127.267.966.42F2组41.967.037.836.54F3组38.216.947.786.79注：营养水平均为实测值。%锦鲤放入水温为24~26 ℃的500 L养殖水桶中，24 h连续增氧，每隔2 d换1/3除氧的自来水。每天8：00、16：00投喂。试验期60 d。1.3测定指标及方法1.3.1生长性能试验第1 d和最后1 d，统计锦鲤体重、体长及剩余尾数，计算肥满度、脏体比、肝体比、增重率、特定生长率、存活率、饲料系数。肥满度=体重/体长3×100(1)脏体比=内脏重/体重×100%(2)肝体比=肝脏重/体重×100%(3)增重率=(末重-初重)/初重×100%(4)特定生长率=(ln末重-ln初重)/试验天数×100%(5)存活率=终末鱼尾数/初始鱼尾数×100%(6)饲料系数=总投饵量/(末重-初重)(7)1.3.2抗氧化指标与肠道脂肪酶活性试验最后1 d，每个重复随机选取9尾锦鲤麻醉，测量体型、体色、体重；每尾锦鲤抽取2 mL血浆，4 ℃静置12 h，4 000 r/min离心15 min，取上清液，测定超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。解剖锦鲤，取出内脏、肝脏，称重，记录；取出锦鲤前肠、中肠、后肠放入离心管中，-80 ℃保藏；将锦鲤肠道组织放入生理盐管中，低温研磨为10%的匀浆，4 ℃、2 500 r/min离心10 min取上清液，测定肠道的脂肪酶（LPS）、α-淀粉酶（AMS）、胰蛋白酶。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.3.3色度值使用色差仪测定锦鲤的背部、尾部的L*值和a*值。当L*值为正时，表示锦鲤颜色偏白，反之偏黑。当a*值为正时，表示锦鲤颜色偏红，反之偏绿。1.3.4体型体型数据均采用游标卡尺进行测量。1.4数据统计与分析采用Excel软件对试验数据进行统计，SPSS 23.0进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示，P0.05表示差异显著。2结果与分析2.1不同蛋白水平饲料对锦鲤生长性能的影响（见表2）由表2可知，F1组、F2组锦鲤增重率、特定增长率显著高于F3组（P0.05）。F3组锦鲤肝体比、肥满度显著高于F1组、F2组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.011.T002表2不同蛋白水平饲料对锦鲤生长性能的影响组别初重/g末重/g增重率/%特定增长率/(%/d)存活率/%肝体比/%脏体比/%肥满度/(g/cm3)饲料系数F1组83.11±5.33174.89±5.15114.37±8.03a1.26±0.06a1002.73±0.30b9.75±0.702.68±0.02b1.16±0.00F2组78.37±6.60156.44±6.14102.60±5.74a1.17±0.05a1002.85±0.09b9.51±0.372.53±0.10b1.30±0.00F3组115.60±7.03180.61±6.9057.74±4.28b0.76±0.04b1003.62±0.26a10.83±0.523.24±0.08a1.45±0.00注：同列数据肩标不同字母表示差异显著（P0.05），相同字母或无字母表示差异不显著（P0.05）；下表同2.2不同蛋白水平饲料对锦鲤肠道消化酶活力的影响（见表3）由表3可知，F2组锦鲤前肠和后肠淀粉酶活力、中肠胰蛋白酶活力显著高于F1组、F3组（P0.05）；F1组锦鲤中肠淀粉酶活力显著高于F2组、F3组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.011.T003表3不同蛋白水平饲料对锦鲤肠道消化酶活力的影响组别脂肪酶/(U/g)淀粉酶/(U/g)胰蛋白酶/(U/mg)前肠中肠后肠前肠中肠后肠前肠中肠后肠F1组1.93±0.121.77±0.051.56±0.240.19±0.00b0.18±0.00a0.15±0.00b3 052.80±319.813 620.29±43.27b4 891.68±157.80F2组1.88±0.121.56±0.081.54±0.190.21±0.00a0.17±0.00b0.16±0.00a3 146.96±104.904 575.37±26.76a5 063.41±215.08F3组1.52±0.071.55±0.101.20±0.120.16±0.00c0.12±0.00c0.11±0.00c2 839.43±35.053 533.49±85.59b4 821.44±258.622.3不同蛋白水平饲料对锦鲤体型的影响（见表4）由表4可知，F1组、F3组锦鲤全长增量均显著高于F2组（P0.05）。F1组锦鲤体高增量显著高于F3组（P0.05）。F3组锦鲤头长增量显著高于F1组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.011.T004表4不同蛋白水平饲料对锦鲤体型的影响组别全长增量体长增量尾柄长增量尾柄宽增量体高增量体宽增量眼间距增量头长增量F1组22.96±0.12a18.70±0.103.51±0.062.67±0.076.27±0.11a3.31±0.05a2.32±0.045.01±0.12bF2组22.31±0.26b18.41±0.293.59±0.082.54±0.065.99±0.12ab3.31±0.05a2.30±0.045.26±0.10abF3组23.03±0.55a17.76±0.103.40±0.092.49±0.085.72±0.17b3.16±0.06a2.40±0.035.43±0.10acm2.4不同蛋白水平饲料对锦鲤体色的影响（见表5）由表5可知，F3组锦鲤背部L*值显著高于F1组、F2组（P0.05），各组锦鲤背部a*值、尾部L*值、尾部a*值差异均不显著（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.011.T005表5不同蛋白水平饲料对锦鲤体色的影响组别背部L*值背部a*值尾部L*值尾部a*值F1组53.44±0.96b32.83±3.4174.84±2.0323.96±1.45F2组55.28±1.28b36.73±2.8270.51±3.2625.71±2.50F3组60.11±1.68a31.43±2.8072.39±2.9927.06±5.102.5不同蛋白水平饲料对锦鲤抗氧化指标的影响（见表6）由表6可知，F1组锦鲤血清SOD、CAT、GSH-Px活性均显著高于F2组、F3组（P0.05）。10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2023.13.011.T006表6不同蛋白水平饲料对锦鲤抗氧化指标的影响组别SODCATT-AOCGSH-PxF1组13.16±0.23a34.52±1.56a26.15±2.35400.65±0.56aF2组7.59±0.24b25.12±0.86b23.93±1.50332.71±0.41bF3组8.84±0.93b26.98±0.92 b24.17±1.30340.97±0.32bU/mL3讨论3.1不同蛋白水平饲料对锦鲤生长性能的影响饲料中蛋白质含量影响锦鲤生长性能及饲料成本[6]。本试验中，F1组和F2组锦鲤增重率与特定增长率均高于F3组。研究表明，饲料中蛋白质含量能够改善锦鲤生长性能[7]。内脏脂肪沉积过剩会导致鱼摄食率降低，饲料系数升高。本试验中，F1组与F2组锦鲤特定生长率高于F3组，与涂永芹等[8]研究相似。形体指标在一定程度上体现出鱼类的营养状况。本试验中，F3组锦鲤肝体比和肥满度与F1和F2有明显差异。徐革锋等[9]研究表明，饲料中添加过高或过低的蛋白质都可能导致细鳞鲑（Brrachymystax lenok）的肥满度及肝体比显著降低，与本实验结果类似。原因可能与饲料组成、蛋白质来源以及养殖环境等有关。3.2不同蛋白水平饲料对锦鲤肠道消化酶活力的影响肠道中的消化酶活性评价鱼类对饲料的消化吸收能力[10]。淀粉酶活力反映鱼类对营养物质吸收及利用情况[11]。鱼类前肠与营养物质消化吸收有关，中肠和后肠与免疫相关[12-13]。研究表明，饲料中蛋白含量越高，肠道的淀粉酶活力越高。本试验中，锦鲤前肠脂肪酶活力明显高于中、后肠，与张小立[14]研究结果一致。鱼体内的脂肪含量增加可能是饲料中加入蛋白质过多所致；脂肪被鱼体内氧化的供能减少，大量蛋白质就会转化为脂肪，在鱼体内沉积，导致鱼体脂肪含量上升[15-17]。胰蛋白酶活力可以作为鱼消化能力的指标[18-20]。本试验中，胰蛋白酶活力从前肠到后肠呈现升高的趋势，与倪寿文等[21]研究一致。高春生等[22-23]对淇河鲫鱼的研究中也得到类似结果。在一定范围内，随着饲料中蛋白质添加，胰蛋白酶活力也相应增高；但超过一定范围，胰蛋白酶的活力下降[24]。赵东海[25]研究发现，鳜鱼肠道胰蛋白酶活力随着蛋白水平增高呈现下降趋势。3.3不同蛋白水平饲料对锦鲤体型的影响本试验中，饲料影响锦鲤的体长、体高、头长。当饲料蛋白质供给不足时，鱼供能减少，导致鱼生长缓慢，甚至出现负增长[26]。蛋白质是肌肉和骨骼基质的重要构成部分，充足的蛋白质促进肌肉生长与骨骼发育[27-28]。但蛋白质含量过高，鱼体将过量的蛋白质排出，影响水质[29]；当水质变差后，鱼摄食量受到影响，进而影响鱼增长。本试验中，F1组锦鲤体型优于其他组。但锦鲤体型的研究较少，对锦鲤体型变化需要更深一步的研究。3.4不同蛋白水平饲料对锦鲤体色的影响L*值越大，说明鱼体的亮度越高，颜色更加越鲜亮[30]。类胡萝卜素是决定鱼体色的重要因素，但鱼体自身不能合成类胡萝卜素，需要从摄食中获取[31]。水产动物一般是在藻类中获取虾青素，虾青素也是一种类胡萝卜素。赵子续等[32]发现，在饲料中添加1.2%的雨生红球藻，可以显著提高锦鲤的体色。崔培等[33]发现，在饲料中添加1.0 g/kg红曲米，可以显著提高锦鲤体色。窦乾明等[34]在饲料中添加螺旋藻能够显著提升鱼体内虾青素含量，从而提高锦鲤体色。卢正义等[35]在饲料中添加200 mg/kg的叶黄素可以提高黄金锦鲤着色效果。侯鹏飞等[36]在螺旋藻饲料中添加纤维素酶可以使锦鲤体色显著提升。本试验发现，饲料含有虾青素的F2组和F3组对锦鲤的改善效果较好。3.5不同蛋白水平饲料对锦鲤抗氧化能力的影响机体内存在的自由基和活性氧影响机体健康。抗氧化酶含量反映机体健康[37-39]。超氧化物歧化酶将鱼体内的多余超氧阴离子转换为过氧化氢，过氧化氢酶将过氧化氢转换成为氧气和水，这2种酶相互作用提高鱼抗氧化能力[40]。当鱼体内超氧化物歧化酶与过氧化氢酶活力越高，说明细胞损伤越低，机体越健康。总抗氧化能力是评价体内酶促与非酶促系统的指标[41]，谷胱甘肽过氧化物酶参与非酶促反应，保护细胞功能正常运行[42]。本试验中，F1组锦鲤超氧化物歧化酶、总抗氧化能力、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力均高于F2组、F3组。4结论本试验结果表明，综合各项指标发现，蛋白水平为43.12%时对锦鲤养殖效果较好。